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Chemical constituents of Periploca forrestii

黑骨藤中极性部位化学成分研究



全 文 :黑骨藤中极性部位化学成分研究
甘秀海1,3,周欣1,2,陈华国1,2,龚小见1,2,赵超1,2
(1贵州师范大学 天然药物质量控制研究中心,贵州 贵阳 550001;
2贵州师范大学 贵州省山地环境信息系统与生态环境保护重点实验室,贵州 贵阳 550001;
3贵州大学 精细化工研究开发中心,贵州 贵阳 550025)
[摘要] 目的:对黑骨藤Periplocaforesti的化学成分进行研究。方法:利用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、重结晶及高效液相
制备色谱进行分离纯化,采用波谱学技术进行结构鉴定。结果:从黑骨藤中分离鉴定了9个化合物,分别是:3O乙酰基齐墩
果酸(1),乌苏14烯3醇1酮(2),蒲公英甾醇(3),jacoumaricacid(4),杠柳苷元(5),2α,3β二羟基熊果酸(6),反式对羟基
肉桂酸(7),咖啡酸(8),proanthocyanidinA2(9)。结论:除化合物6外,其余化合物均为首次从该植物中分离得到,化合物4,9
为首次从杠柳属中分离得到。
[关键词] 黑骨藤;神经酰胺;化学成分
[收稿日期] 20090618
[基金项目] 贵州省中药现代化科技产业研究开发专项项目(黔科
合社字[2009]5012号);贵州省发展和改革委员会[黔发改高技
(2008)1600号]
[通信作者] 周欣,教授,主要从事中药化学及中药质量控制,
Tel:(0851)6690018;Email:alice9800@sinacom
  黑骨藤为萝雐科Asclepiadaceae杠柳属Periplo
ca植物黑龙骨 PeriplocaforestiSchltr的干燥根或
全株。黑骨藤全株入药,具有通经、活血、解毒、祛风
的功效,主治风湿关节痛、跌打损伤、月经不调等症,
是民间广泛应用于治疗闭合性软组织损伤、风湿与
类风湿等疾病的民族药[12]。其化学成分主要有强
心苷、三萜[35]。作者对黑骨藤的化学成分进行了系
统的研究,本研究报道从乙醇提取物中分离得到的
9个化合物,除化合物6外均为首次从该植物中分
离得到,其中化合物 4,9为首次在杠柳属植物中
发现。
1 材料
X4型双目镜显微熔点测定仪(未校正,北京泰
克仪器有限公司);ZF7三用紫外分析仪(巩义市予
华仪器有限责任公司生产);核磁共振波谱仪 INO
VO400MHz型(美国 Varian公司),JEOLECX500
MHz型(日本电子株式会社),以 TMS为内标;质谱
仪HPMS5973(美国惠普公司);Waters2545制备
高效液相色谱仪(美国Waters公司生产);大孔树脂
D101(沧州宝恩);MCICHP20(日本三菱公司);柱
色谱硅胶(200~300目)和薄层用硅胶GF254(青岛
海洋化工厂);SephadexLH20(PharmaciaBiotech);
溶剂均为分析纯。
药材于2006年11月采自贵州省贵阳市花溪区
黔陶镇,原植物经贵阳中医学院靳凤云教授鉴定为
黑骨藤Pforesti,标本保存于贵州师范大学天然药
物质量控制研究中心。
2 提取分离
黑骨藤干燥茎14kg粉碎后,用80%工业乙醇
回流提取 3次,合并提取液,减压浓缩得浸膏,以
800mL水分配,依次用氯仿、正丁醇萃取,得到相应
萃取物。氯仿萃取物(172g)经硅胶柱色谱分离,以
氯仿甲醇梯度洗脱,分为7个部分。第2部分(20
g)经反复硅胶柱色谱(用石油醚醋酸乙酯洗脱)、
SephadexLH20和重结晶纯化,得到化合物 1(35
mg),2(23mg),3(12mg)。第4部分(71g)经反复
硅胶柱色谱(用石油醚丙酮洗脱)、SephadexLH20
和重结晶纯化,得到化合物4(76mg)。正丁醇萃取
物(382g)经大孔树脂、MCI脱色,再经硅胶柱色谱
分离,以氯仿甲醇梯度洗脱,分为AE5个部分。B
部分(25g)经反复柱色谱、SephadexLH20和重结
晶纯化,得到化合物5(38mg)和6(115mg)。C部
分(30g)经反复柱色谱(用氯仿甲醇梯度洗脱)、
SephadexLH20和重结晶纯化,得到化合物 7(14
mg),8(112mg)。E部分(40g)经反复硅胶柱色
谱,用氯仿甲醇和石油醚丙酮洗脱,再经 Sephadex
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LH20,HPLC纯化得到化合物9(24mg)。
3 结构鉴定
化合物1 针状晶体,mp259~260℃。EIMS
m/z(%)498[M]+。1HNMR(CDCl3,400MHz)δ:
549(1H,t,J=35Hz,H12),449(1H,J=80
Hz,H3),205(3H,s,OCOCH3),112,094,093,
090,086,085,074(each3H,s);13CNMR
(CDCl3,100MHz)δ:377(C1),276(C2),809
(C3),392(C4),552(C5),181(C6),330(C
7),380(C8),475(C9),369(C10),228(C
11),1225(C12),1436(C13),415(C14),259
(C15),235(C16),465(C17),408(C18),
458(C19),306(C20),337(C21),324(C
22),280(C23),166(C24),154(C25),171
(C26),235(C27),1711(C28),324(C29),
233(C30),1842(COCH3),213(CH3CO)。对照
文献[6],鉴定该化合物为3O乙酰基齐墩果酸。
化合物2 无色针状结晶(石油醚丙酮),mp
237~238℃,EIMSm/z(%)440[M]+。1HNMR
(CDCl3,500MHz)δ:555(1H,m,15H),312
(1H,t,J=52Hz,3H),281(2H,d,J=52Hz,2
H),108,107,100,099,097,089,086,083
(each3H,s);13CNMR(CDCl3,125MHz)δ:2175
(C1),404(C2),791(C3),387(C4),537(C
5),269(C6),366(C7),375(C8),546(C9),
390(C10),190(C11),353(C12),288(C
13),1572(C14),1190(C15),383(C16),355
(C17),584(C18),481(C19),521(C20),
332(C21),383(C22),271(C23),280(C
24),171(C25),303(C26),337(C27),300
(C28),155(C29),196(C30)。其碳谱数据与
文献[7]基本一致,故鉴定该化合物为乌苏14烯3
醇1酮。
化合物3 无色针状晶体,mp231~233℃,EI
MSm/z(%)426[M]+。1HNMR(CDCl3500MHz)
δ:474(1H,s,H30a),468(1H,s,H30b),321
(1H,m,H3),103(3H,s,H23),097(1H,s,H
28),097(1H,s,H29),089(3H,s,H25),087
(3H,s,H24),085(3H,s,H26),077(3H,s,H
27);13CNMR(CDCl3,125MHz)δ:388(C1),
275(C2),791(C3),390(C4),559(C5),
184(C6),341(C7),407(C8),507(C9),
372(C10),216(C11),261(C12),391(C
13),423(C14),275(C15),387(C16),341
(C17),496(C18),395(C19),1565(C20),
254(C21),391(C22),281(C23),156(C
24),165(C25),163(C26),154(C27),196
(C28),256(C29),1062(C30)。以上理化数据
与文献[8]基本一致,故鉴定该化合物为蒲公英
甾醇。
化合物 4 白色粉末,mp236~238℃。ESI
MSm/z617[MH],641[M +Na]+。1HNMR
(DMSOd6,500MHz)δ:1199,1000,985(each
1H,brs,3×OH),755(2H,d,J=88Hz,H2’,
6′),753(1H,d,J=160Hz,H3′),679(2H,d,
J=88Hz,H3′,5′),639(1H,d,J=160Hz,H
2′),515(1H,brs,H12),454(1H,d,J=86Hz,
H3),369(1H,m,H2),108,098,093,086,
083,080,076(each×3H,s);13CNMR(DMSO
d6,125MHz)δ:482(C1),653(C2),842(C
3),393(C4),549(C5),184(C6),330(C7),
396(C8),475(C9),380(C10),238(C11),
1249(C12),1388(C13),399(C14),290(C
15),243(C16),425(C17),529(C18),395
(C19),394(C20),312(C21),368(C22),
290(C23),184(C24),174(C25),176(C
26),243(C27),1789(C28),216(C29),169
(C30),1672(C1′),1156(C2′),1446(C3′),
1258(C4′),1307(C5′),1163(C6′),1602(C
7′),1163(C8′),1307(C9′)。以上碳谱数据与
文献[9]基本一致,故该化合物鉴定为 jacoumaric
acid。
化合物5 无色棱晶(氯仿甲醇),mp237~
238℃,5

硫酸乙醇溶液TLC显蓝色,Liebermann
Burchard和 Kedde反应呈阳性。EIMSm/z(%):
390[M]+,336(100)。1HNMR(CDCl3,400MHz)
δ:589(1H,s,H22),499和 483(each1H,dd,
J=184Hz,H21),418(1H,brs,H3),279(1H,
m,17(H),094(H19),088(H18);13CNMR
(CDCl3,100MHz)δ:248(C1),278(C2),679
(C3),368(C4),746(C5),351(C6),237(C
7),406(C8),389(C9),407(C10),215(C
11),399(C12),495(C13),854(C14),329
(C15),268(C16),506(C17),157(C18),
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167(C19),1746(C20),735(C21),1177(C
22),1746(C23)。以上数据与文献[4]报道的基
本一致,故该化合物鉴定为杠柳苷元。
化合物 6 白色粉末,EIMSm/z(%):472
[M]+。1HNMR(DMSOd6,500MHz)δ:514(1H,
brs,H12),440(1H,brs,H2),430(1H,brs,H
3α),274(1H,d,J=97Hz,H18),211(1H,d,
J=115Hz,H9),105~071(12H,s,H23,24,
25,26),092(3H,d,J=78Hz,H30),082(3H,
d,J=63Hz,H29);13CNMR (DMSOd6,125
MHz)δ:476(C1),677(C2),828(C3),390
(C4),553(C5),186(C6),332(C7),381(C
8),474(C9),382(C10),235(C11),1250(C
12),1388(C13),422(C14),280(C15),243
(C16),476(C17),529(C18),390(C19),
389(C20),307(C21),368(C22),294(C
23),177(C24),174(C25),175(C26),238
(C27),1788(C28),170(C29),216(C30)。
以上碳谱数据与文献[11]报道的基本一致,故该化
合物鉴定为2α,3β二羟基熊果酸。
化合物 7 白色针状结晶(氯仿甲醇),mp
211~213℃,三氯化铁铁氰化钾反应阳性。EIMS
m/z(%)164[M]+。1HNMR(DMSOd6,400MHz)
δ:1218(1H,brs,COOH),997(1H,s,OH4),
751(2H,d,J=86Hz,H2,6),748(1H,d,J=
160Hz,H7),678(2H,d,J=86Hz,H3,5),
627(1H,d,J=160Hz,H8)。以上理化数据与文
献[12]对照基本一致,故该化合物鉴定为反式对羟
基肉桂酸。
化合物8 淡黄色粉末,mp207~209℃,EIMS
m/z(%)180[M]+。1HNMR(DMSOd6,400MHz)
δ:1215(1H,brs,COOH),954(1H,s,OH4),
915(1H,s,OH3),740(1H,d,J=16Hz,H7),
701(1H,s,H2),695(1H,d,J=80Hz,H6),
674(1H,d,J=80Hz,H5),615(1H,d,J=16
Hz,H8)。以上数据与文献[13]中报道的咖啡酸数
据一致,另与咖啡酸对照品的薄层色谱 Rf值一致,
且混合熔点不降低,故该化合物鉴定为咖啡酸。
化合物9 浅棕色无定形粉末,mp:273~274
℃,ESIMSm/z5752[MH]-,5990[M+Na]+。
1HNMR(DMSOd6,400MHz)δ:945,912,898,
897,893,893,781(each1H,s),699(1H,d,
J=24Hz,H10′),686(1H,dd,J=88,24Hz,H
14),684(1H,d,J=24Hz,H10),676(1H,dd,
J=88,24Hz,H14′),674(1H,d,J=88Hz,H
13′),673(1H,d,J=85Hz,H13),599(1H,s,H
6′),585(1H,d,J=24Hz,H8),584(1H,d,J=
24Hz,H6),528(1H,d,J=36Hz,3OH),502
(1H,d,J=42Hz,3′OH),459(1H,J=80Hz,H
2′),418(1H,J=42Hz,H4),392(1H,m,H
3′),385(1H,m,H3),278(1H,dd,J=164,56
Hz,H4′β),240(1H,dd,J=164,56Hz,H4′
α);13CNMR(DMSOd6,100MHz)δ:988(C2),
661(C3),277(C4),1027(C4a),1558(C5),
964(C6),1566(C7),947(C8),1527(C8a),
1306(C9),1152(C10),1451(C11),1443(C
12),1147(C13),817(C2′),657(C3′),284
(C4′),1014(C4′a),1554(C5′),946(C6′),
1506(C7′),1051(C8′),1501(C8′a),1302
(C9′),1147(C10′),1455(C11′),1449(C
12′),1147(C13′)。以上碳谱数据与文献[14]报
道的基本一致,故该化合物鉴定为 proanthocyanidin
A2。
[致谢] 贵州省 中国科学院天然产物化学重点实验室
张建新老师、王道平老师对化合物数据进行测定。
[参考文献]
[1] 江苏新医学院中药大辞典[M]上海:上海科学技术出版
社,1986:2388
[2] 贵州省药品监督管理局贵州省中药材、民族药材质量标准
[S]贵阳:贵州科技出版社,2003:151
[3] 胡英杰,木全章,郑启泰,等滇杠柳中的新强心甾内酯成分
[J]化学学报,1990,48(3):714
[4] 胡英杰,木全章滇杠柳的化学成分[J]云南植物研究,
1989,11(4):465
[5] 甘秀海,周欣,赵超,等黑骨藤化学成分的研究[J]中草
药,2009,40(5):708
[6] AlvesHM,ArndtVH,OlisWD,etal.Triterpenoidsisolated
fromMachaeriumincoruptibile[J].Phytochemistry,1966,5
(6):1327.
[7] 龚小见,周欣,蔡宗苇,等黔产吴茱萸化学成分研究[J]中
国中药杂志,2009,34(2):177
[8] 陈国良,李新莉,石凌刚,等烟管蓟地上部分化学成分研究
[J]中药材,2007,30(3):291
[9] NumataA,YangP,TakahashiC,etalCytotoxictriterpenes
fromaChinesemedicine,Goreishi[J]ChemPharmBul,
1989,37(3):648
[10] ZhanZJ,SunHD,WuHM,etalChemicalcomponentsfrom
theflmgusEngleromycesgoetzei[J]ActaBotanicaSinica,
·7223·
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Vol.34,Issue 24
 December,2009
2003,45:248
[11] MahatoSB,KunduAP13CNMRspectraofpentacyclictriter
penoidsacompilationandsomesalientfeatures[J]Phytochem
istry,1994,37(6):1517
[12] 许利锋,王素贤,朱延儒狭香蒲雌花序的化学成分[J]植
物学报,1986,28(5):523
[13] 李永梅,王天志,王志霄,等细毡毛忍冬花蕾化学成分研究
[J]中国中药杂志,2001,26(1):45
[14] LouHX,YamazakiY,SasakiT,etalAtypeproanthocyani
dinsfrompeanutskins[J]Phytochemistry,1999,51(2):
297
ChemicalconstituentsofPeriplocaforresti
GANXiuhai1,3,ZHOUXin1,2(,CHENHuaguo1,2,GONGXiaojian1,2,ZHAOChao1,2
(1TheResearchCenterforQualityControlofNaturalMedicine,GuizhouNormalUniversity,Guiyang550001,China;
2KeyLaboratoryforInformationSystemofMountainousAreasandProtectionofEcologicalEnvironment,GuizhouNormal
University,Guiyang550001,China;3ResearchandDevelopmentCenterofFineChemicalsofGuizhou
University,Guiyang550025,China)
[Abstract] Objective: TostudytheconstituentsofthestemsofPeriplocaforestiMethod:Thecompoundswereseparated
andpurifiedbysilicagelcolumnchromatography,recrystalisationandhighperformanceliquidchromatographyThestructureswere
identifiedbyvariousspectroscopicmethodsResult:Ninecompoundswereisolatedandidentifiedas3Oacetyloleanolicacid(1),14
ursen3ol1one(2),taraxasterol(3),jacoumaricacid(4),periplogenin(5),2α,3βdihydroxyursolicacid(6),Ephydroxycin
namicacid(7),cafeicacid(8),proanthocyanidinA2(9)Conclusion:Alcompoundsexcept6wereisolatedfromthisplantforthe
firsttime,compound4,9wereobtainedfromthePeriplocaforthefirsttime
[Keywords] Periplocaforesti;chemicalconstituents
[责任编辑 王亚君]
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