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Chemical constituents from roots of Incarvillea mairei

鸡肉参的化学成分研究



全 文 :鸡肉参的化学成分研究
黄正胜1,2,张卫东2,林生2,柳春梅2,黄大森1,2,宋太发2,卢龙海2,裴月湖1
(1.沈阳药科大学 中药学院,辽宁 沈阳 110016;
2.第二军医大学 药学院 天然药物化学教研室,上海 200433)
[摘要] 目的:研究鸡肉参的化学成分。方法:采用硅胶、SephadexLH20柱色谱和制备薄层色谱进行分离,应用 NMR
和MS等谱学方法鉴定化合物结构。结果:从鸡肉参三氯甲烷部位分离得到7个化合物,分别鉴定为:1Omethylguaiacylglyc
erol(1),1Oferuloyl3O26″hydroxyhexacosoylglycerol(2),角蒿酯碱(incarvineD,3),piceid(4),6′8″E,11″Eoctadecadienoyl
clionasterol3glucoside(5),β谷甾醇(βsitosterol,6),β胡萝卜苷(βdaucosterol,7)。结论:化合物1,2为新化合物,化合物3~7
为首次从该植物中分离得到,其中化合物4,5系首次从该属植物中分离得到。
[关键词] 鸡肉参;化学成分;甘油衍生物
[收稿日期] 20090216
[通信作者] 裴月湖,Tel/Fax:(024)23986485
  鸡肉参Incarvileamairei(Lévl.)Grierson,又名滇
川角蒿,为紫葳科蒿属植物,分布在我国四川、云南、西
藏,生于高山草坡。作为传统中药,具有滋补强壮功
效,用于治疗产后少乳,久病虚弱,头晕,贫血等证[12]。
在前期的工作中,作者从该属植物中分离出了
单萜生物碱、大环精胺类生物碱、环烯醚萜苷类、黄
酮类、神经酰胺类、甾醇类和三萜类等类型化学成
分[37]。作为对该属植物化学成分的继续研究,作者
从鸡肉参的乙醇提取物中共分离鉴定了7个化合
物,其中化合物1,2为新化合物,化合物4,5为首次
从该属植物中分离得到,化合物3~7首次从该植物
中分离得到。
1 材料
BrukerAV600型核磁共振仪,AgilentMSDTrap
XCT型质谱仪。中压液相色谱仪(BUCHIC605,RP
C18,43~60μm,Pharmacia公司)。SephadexLH20
为Pharmacia公司产品。柱色谱硅胶(200~300目)
为青岛海洋化工厂生产,所用试剂均为分析纯。鸡肉
参药材于2007年8月采自云南省大理,由大理学院
段宝忠教授鉴定为鸡肉参I.mairei的根,标本现存于
第二军医大学药学院天然药物化学教研室植物标本
室,标本号为No.07061008。
2 提取分离
将鸡肉参的干燥根(25kg)粉碎,用5倍量80%
乙醇连续回流提取3次,每次3h,合并提取液,减压
浓缩得浸膏350g。浸膏用水溶解并稀释后依次用石
油醚、三氯甲烷、醋酸乙酯和正丁醇萃取,三氯甲烷萃
取物675g上硅胶(200~300目)色谱柱,三氯甲烷
甲醇系统(100∶0,50∶1,20∶1,10∶1,5∶1,1∶1,0∶100)梯
度洗脱,收集各部分洗脱液,每份1000mL,共得到
A~J9个洗脱部分。流分 D(30~43)析出针状晶
体,过滤,用石油醚 ~醋酸乙酯溶解后进行重结晶,
得到化合物6(46mg),滤液经硅胶(200~300目)
色谱柱进一步分离,得到6个亚组分(D1~D6)。D4
经SephadexLH20柱色谱(石油醚三氯甲烷甲醇
5∶5∶1)和制备薄层色谱(石油醚三氯甲烷丙酮 4∶
3∶3)反复纯化,得到化合物 2(126mg)。D6经
SephadexLH20柱色谱(石油醚三氯甲烷甲醇 5∶
5∶1)和制备薄层色谱(二氯甲烷甲醇 10∶1)反复纯
化,得到化合物1(72mg)。流分 E(44~49)析出
白色粉末,过滤得到化合物7(100mg),母液上硅胶
(200~300目)色谱柱,三氯甲烷甲醇系统(50∶1~
30∶1~20∶1~8∶1~1∶1)梯度洗脱,每份100mL,得
到8个亚组分(E1~E8)。E8经 SephadexLH20柱
色谱(石油醚三氯甲烷甲醇 5∶5∶1)和制备薄层色
谱(二氯甲烷异丙醇30∶1)反复纯化,得到化合物5
(213mg)。流分G(61~71)用反相中压液相色谱
分离,40%~100%甲醇梯度洗脱,一共得到 G1~G5
5个亚组分。G1经SephadexLH20柱色谱(石油醚
三氯甲烷甲醇 5∶5∶1)和制备薄层色谱(三氯甲烷
丙酮 1∶1)反复纯化,得到化合物4(25mg)。G5经
SephadexLH20柱色谱(石油醚三氯甲烷甲醇 5∶
5∶1),得到化合物3(347mg)。
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  July,2009
3 结构鉴定
化合物1 白色固体;HRESIMS给出准分子
离子 峰 m/z2510886[M +Na]+ (计 算 值
C11H16O5Na,2510891),相对分子质量2280998,
推断其分子式为C11H16O5,不饱和度4。从
1HNMR
(CDCl3,600MHz)谱可见,有2个甲氧基质子信号
δH389(3H,s),325(3H,s);1个典型的1,3,4三
取代芳香环的质子信号 δ689(1H,d,J=18Hz,
H2′),679(1H,d,J=78Hz,H5′),680(1H,dd,
J=78,18Hz,H6′);1个甘油片段特征峰δH409
(1H,d,J=84Hz,H1),370(1H,ddd,J=66,
66,36Hz,H2),334(1H,dd,J=114,66Hz,
Ha3),352(1H,dd,J=114,36Hz,Hb3)。
  从13CNMR(CDCl3,150MHz)谱可见,有6个
芳香碳信号,5个连氧的 sp3杂化碳(2个甲氧基,
1个连氧亚甲基,2个连氧次甲基)。参考文献
[8],除了多 1个甲氧基外,其1HNMR,13CNMR
数据与guaiacylglycerol数据相近,则可推测该化合
物为苯丙素类化合物。对其13CNMR数据进一步
分析,发现 C1′,C1和 C2的化学位移有显著的
变化,这表明 OCH3可能连在 C1位上。从 HMBC
谱可见,H1(δH409)与 OCH3(δC558)有远程
相关,进一步确证了以上结论。化合物 1的1H
NMR,13CNMR数据见表1,结构及 HMBC相关见
图1。综上所述,确定该化合物为1Omethylgua
iacylglycerol。
表1 化合物1,2的NMR数据
No.

δH δC
No.

δH δC
1 409(d,J=84Hz) 842 1a 425(dd,J=126,60Hz) 645
2 370(ddd,J=66,66,36Hz) 754 1b 374(dd,J=120,42Hz)  
3a 334(dd,J=114,66Hz) 624 2 423(m) 696
3b 352(dd,J=114,36Hz)   3a 418(dd,J=120,66Hz) 639
OCH3 325(s) 558 3b 365(dd,J=114,54Hz)  
1′   1294 α   1667
2′ 689(d,J=18Hz) 1091 β 633(d,J=162Hz) 1140
3′   1467 γ 765(d,J=156Hz) 1439
4′   1457 1′   1264
5′ 679(d,J=78Hz) 1142 2′ 708(d,J=18Hz) 1086
6′ 680(dd,J=78,18Hz) 1208 3′   1472
OCH3 389(s) 565 4′   1461
      5′ 696(d,J=84Hz) 1150
      6′ 712(dd,J=78,18Hz) 1264
      7′ 398(s) 553
      1″   1736
      2″ 239(m) 335
      3″ 172(m) 242
      4″23″ 125~135(m) 285~295
      24″ 130(m) 253
      25″ 143(m) 307
      26″ 397(m) 627
  化合物2 白色稠状物;HRESIMS给出准分
子离子峰 m/z6854642[M +Na]+,计算值
C39H66O8Na,6854649),相对分子质量6624744,
推断分子式 C39H66O8,不饱和度为7。该化合物的
1HNMR(CDCl3,600MHz)可见,1组甘油片段特征
性质子信号δ425(1H,dd,J=126,60Hz,Ha1),
423(1H,m,H2),418(1H,dd,J=120,66Hz,
Ha3),374(1H,dd,J=120,42Hz,Hb1),365
(1H,dd,J=114,54Hz,Hb3),由此可判断,该化
合物为二取代的甘油衍生物[9]。同时,从其1H
NMR(CDCl3,600MHz)还可见,1组典型的阿魏酰
基片段特征性质子信号 δH:765(1H,d,J=
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图1 化合物1和2的结构式及其HMBC相关
156Hz,Hγ),633(1H,d,J=162Hz,Hβ),712
(1H,dd,J=78,18Hz,H6′),708(1H,d,J=18
Hz,H2′),696(1H,d,J=84Hz,H5′),398(3H,
s,7′OMe)[9]。
从13CNMR谱可见,有6个芳香碳信号、2个烯
碳信号、4个连氧碳信号(其中 3个连氧亚甲基,1
个连氧次甲基),以及1组长链脂肪酸碳信号。参
考文献[9],除了多1个末端羟基化的长链脂肪酰
基外,其NMR数据与1Oferuoylglycerol数据相近。
通过ESIMS数据推测出化合物2含有末端带有羟
基的正二十六烷酰基片段。从 HMBC可见,Ha1(δ
425),Hb1(δ374)与 Cα(δ1667),Ha3(δ
418),Hb3(δ365)与C1″(δ1736)有远程相关,
进一步证实了上述推断。化合物2的1HNMR,13C
NMR数据见表1,结构及 HMBC相关见图1。综上
所述,确定该化合物为1Oferuloyl3O26″hydroxyl
hexacosoylglycerol。
  化合物 3 白色粉末;ESIMSm/z374[M+
Na]+,352[M+H]+。1HNMR[(CD3)2CO,300
MHz]δ:084(3H,d,J=72Hz,Me),094(3H,d,
J=72Hz,8Me),142~166(2H,m,Ha1,Ha6),
174(1H,t,J=116Hz,Ha3),188~214(4H,m,
H4,H6,H8,H9),215(3H,s,NMe),222(1H,
m,H5),242(1H,m,Hb3),260(1H,m,Hb1),
526(1H,m,H7),092(3H,d,J=60Hz,7′Me),
130(1H,m,Ha6′),141(1H,m,Hb6′),149(1H,
m,Ha9′),142~166(2H,m,H8′,Hb9′),183
(3H,s,2′Me),188~214(2H,m,H25′),358
(2H,m,H210′),676(1H,t,J=73Hz,H′4);
13C
NMR[(CD3)2CO,75MHz]δ:575(C1),577(C
3),306(C4),379(C5),299(C6),759(C7),
409(C8),458(C9),464(NCH3),150(4,8
CH3),1670(C1′),121(C2′),1277(C3′),
1419(C4′),259(C5′),358(C6′),190(C
7′),287(C8′),398(C9′),596(C10′)。经与
文献[10]对照,确认其结构为incarvineD。
化合物4 无定形粉末;ESIMSm/z413[M+
Na]+,389[M-H]-。1HNMR[(CD3)2CO,300
MHz]δ:681(1H,brs,H2),647(1H,t,J=21
Hz,H4),667(1H,brs,H6),691(1H,d,J=162
Hz,H7),710(1H,d,J=162Hz,H8),742(1H,
d,J=84Hz,H2′),683(1H,d,J=60Hz,H3′),
683(1H,d,J=60Hz,H5′),742(1H,d,J=84
Hz,H6′),494(1H,d,J=72Hz,H1″),341~
356(4H,m,H2″,H3″,H4″,H5″),392(1H,dd,
J=120,54Hz,Ha6″),372(1H,dd,J=116,63
Hz,Hb6″);
13CNMR[(CD3)2CO,75MHz]δ:1405
(C1),1061(C2),1599(C3),1035(C4),
1591(C5),1078(C6),1261(C7),1293(C
8),295(C1′),1285(C2′),1161(C3′),1579
(C4′),1161(C5′),1285(C6′),1017(C1″),
744(C2″),775(C3″),711(C4″),777(C5″),
624(C6″)。经与文献[11]对照,确认其结构为
piceid。
化合物5 黄色油状物;ESIMSm/z861[M+
Na]+,837[M-H]-。1HNMR(CDCl3,600MHz)δ:
069(3H,s,H18),082(3H,d,J=72Hz,H26),
084(3H,d,J=66Hz,H27),087(3H,t,J=66,
60Hz,H29),091(3H,d,J=66Hz,H21),101
(3H,s,H19),356(1H,m,H3),537(1H,brs,H
6);13CNMR(CDCl3,150MHz)δ:373(C1),319
(C2),796(C3),398(C4),1407(C5),1222
(C6),316(C7),319(C8),502(C9),373(C
10),231(C11),398(C12),423(C13),568
(C14),243(C15),282(C16),561(C17),
119(C18),193(C19),361(C20),188(C
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21),340(C22),261(C23),458(C24),292
(C25),193(C26),198(C27);1012(C1′),
740(C2′),760(C3′),701(C4′),736(C5′),
632(C6′);1731(C1″),342(C2″),256(C
3″),226360(14×CH2),141(末端甲基碳),
1279,1281,1300,1302(4个烯碳)。经与文献
[12]对照,确认其结构为6′8″E,11″Eoctadecadien
oylclionasterol3glucoside。
化合物6,7 分别为白色针晶(石油醚醋酸乙
酯)和白色粉末;与对照品作TLC分析,分别鉴定为
β谷 甾 醇 (βsitosterol)和 β胡 萝 卜 苷 (β
daucosterol)。
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ChemicalconstituentsfromrootsofIncarvileamairei
HUANGZhengsheng1,2,ZHANGWeidong2,LINSheng2,LIUChunmei2,HUANGDasen1,2,SONGTaifa2,
LULonghai2,PEIYuehu1
(1.SchoolofTraditionalChineseMateriaMedica,ShenyangPharmaceuticalUniversity,Shenyang110016,China;
2.DepartmentofPhytochemistry,SchoolofPharmacy,SecondMilitaryMedicalUniversity,Shanghai200433,China)
[Abstract] Objective:TostudythechemicalconstituentsoftherootsofIncarvileamairei.Method:Thechemicalconstitu
entswereisolatedandpurifiedbychromatographictechniqueswithsilicagel,SephadexLH20column,andpreparativeTLC.Struc
turesofthecompoundswereidentifiedbyspectroscopicmethods.Result:Sevencompoundswereobtainedandelucidatedas1Ometh
ylguaiacylglycerol(1),1Oferuloyl3O(26″hydroxylhexacosoyl)glycerol(2),incarvineD(3),piceid(4),6′8″E,11″Eocta
decadienoylclionasterol3glucoside(5),βsitosterol(6),andβdaucosterol(7).Conclusion:Compounds17wereisolatedfrom
I.mairei,andamongthem1and2werenewcompounds,4,5wereisolatedfromthegenusIncarvileaforthefirsttime.
[Keywords] Incarvileamairei;chemicalconstituents;glycerolderivative
[责任编辑 王亚君]
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