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Ligans from branch of Hypericum petiolulatum

短柄小连翘中的木脂素类化学成分研究


目的:对短柄小连翘Hypericum petiolulatum的化学成分进行系统的研究。方法:采用硅胶、大孔吸附树脂、Sephadex LH-20柱色谱和制备型高效液相色谱方法进行分离;应用NMR和MS等波谱学方法鉴定化合物的结构。结果:从短柄小连翘乙醇提取物中分离得到9个木脂素类成分,分别鉴定为(-)-(2R,3R)-1-O-feruloyl-8,8′-bisdihydrosiringenin(1),(-)-secoisolariciresinol 4-O-β-D-glucopyranoside(2),isolaricire-sinol-β-4′-O-β-D-glucopy-ranoside(3),5-methoxy-9β-xylopyranosyl-(+)-isolariciresinol(4),(+)-lyoniresinol-2α-O-β-D-xylopyranoside(5),5-methoxy-9-β-xylopyranosyl-(-)-isolariciresinol(6),isolariciresinol 6a-O-β-D-glucoside(7),(+)-lyoniresinol 3α-O-β-D-xylopyranoside(8)和7-methoxy-5-benzofuranpropanol 4′-O-β-D-glucopyranoside(9)。结论:化合物1为一新化合物,其余化合物均为首次从该属植物中分离得到。

Objective: To investigate the chemical constituents of Hypericum petiolulatum.  Method: The chemical constituents were isolated and purified by column chromatography on silica gel, macroporous adsorbent resin, Sephadex LH-20, and preparative HPLC. Structures of the compounds were identified by NMR and MS spectroscopic methods.  Result: Nine lignans were obtained and their structures were elucidated as (-)-(2R,3R)-1-O-feruloyl-8,8′-bisdihydrosiringenin (1), (-)-secoisolariciresinol 4-O-β-D-glucopyrano-side (2), isolariciresinol-β-4′-O-β-D-glucopyranoside (3), 5-methoxy-9β-xylopyra-nosyl-(+)-isolariciresinol (4), (+)-lyoniresinol 2α-O-β-D-xylopyranoside (5), 5-methoxy-9-β-xylopyranosyl-(-)-isolariciresinol (6), isolariciresinol 6a-O-β-D-gluco-side (7), (+)-lyoniresinol 3α-O-β-D-xylopyranoside (8) and 7-methoxy-5-benzofuranpropanol 4′-O-β-D-glucopyranoside (9).  Conclusion: Coupound 1 was new and compounds 2-9 were obtained from the genus Hypericum for the first time.


全 文 :短柄小连翘中的木脂素类化学成分研究
赵琪1,刘娟2,王福男3,刘桂范1,王桂芝1,张琨1
(1.大庆市人民医院 药剂科,黑龙江 大庆 163316;
2.佳木斯大学 化学与药学院 生药室,黑龙江 佳木斯 154003;
3.中国医学科学院 国家人口和计划生育委员会 科学技术研究所,北京 100081)
[摘要] 目的:对短柄小连翘Hypericumpetiolulatum的化学成分进行系统的研究。方法:采用硅胶、大孔吸附树脂、Sepha
dexLH20柱色谱和制备型高效液相色谱方法进行分离;应用NMR和MS等波谱学方法鉴定化合物的结构。结果:从短柄小
连翘乙醇提取物中分离得到9个木脂素类成分,分别鉴定为(-)(2R,3R)1Oferuloyl8,8′bisdihydrosiringenin(1),(-)
secoisolariciresinol4OβDglucopyranoside(2),isolariciresinolβ4′OβDglucopyranoside(3),5methoxy9βxylopyranosyl(+)
isolariciresinol(4),(+)lyoniresinol2αOβDxylopyranoside(5),5methoxy9βxylopyranosyl(-)isolariciresinol(6),isolaricir
esinol6aOβDglucoside(7),(+)lyoniresinol3αOβDxylopyranoside(8)和7methoxy5benzofuranpropanol4′OβDglucopyr
anoside(9)。结论:化合物1为一新化合物,其余化合物均为首次从该属植物中分离得到。
[关键词] 短柄小连翘;化学成分;木脂素
[收稿日期] 20090227
[通信作者] 刘娟,Tel:(0454)8610828,Email:liujuan1949@
163com
  短柄小连翘 HypericumpetiolulatumHook.f.et
Thoms.exDyer为金丝桃亚科 Hypericaceae金丝桃
属植物,在我国分布极为广泛,其中分布最为集中的
是滇中地区和滇西北地区[1]。文献报道短柄小连
翘具有清热解毒、收敛止血、利湿的功效,民间用于
消炎消肿[2],因此,作者对其乙醇提取物的化学成
分进行了系统的研究,从中分离得到了9个木脂素
类成分,经波谱学方法分别鉴定结构,其中化合物1
为一新化合物,其余化合物均为首次从该属植物中
分离得到。
化合物 1 白色无定形粉末,[α]20D -186(c
034,甲醇);正离子模式 ESIMS给出准分子离子
峰m/z6212[M+Na]+;由高分辨质谱HRESIMS
m/z6212309确定分子式为 C21H28O4(理论值
C21H28NaO4,6212306)。红外光谱显示酯羰基
(1715cm-1)、芳环(1589,1519,1465cm-1)和羟
基(3477cm-1,3383cm-1)功能团振动吸收峰。1H
NMR谱中,低场区显示 1组反式烯键质子信号 δ
757(1H,d,J=160Hz,H3″)和636(1H,d,J=
160Hz,H2″),2组对称芳香质子信号δ631(2H,
s,H5,9)和δ627(2H,s,H5′,9′),以及1组芳香
环上的 ABX系统质子信号 δ719(1H,d,J=16
Hz,H5″),707(1H,dd,J=16,84Hz,H9″)和
681(1H,d,J=84Hz,H8″)。高场区显示4个亚
甲基质子信号(其中包括2个连氧的亚甲基信号)δ
435(1H,dd,J=60,112Hz,Ha1),413(1H,dd,
J=64,112Hz,Hb1),253(1H,dd,J=70,140
Hz,Ha3),269(1H,dd,J=70,140Hz,Hb3),
354(1H,dd,J=68,112Hz,H′a1),362(1H,
dd,J=60,112Hz,H′b1),257(2H,d,J=67
Hz,H23′)和2个次甲基质子信号δ227(1H,m,H
2),199(1H,m,H2′),以及5个甲氧基质子信号 δ
370(6H,s,OCH36,8),372(6H,s,OCH36′,8′)
和380(3H,s,OCH33)。
13CNMR谱显示出32个
碳信号,由 DEPT谱确定为 CH3×5,CH2×4,CH×
11和 C×12。以上数据与文献中报道的已知化合
物(-)(2R,3R)1Oferuloylsecoisolariciresinol[9]
的1H和13CNMR数据非常相似,主要差别只是在化
合物1的NMR谱中多出2个甲氧基的信号。同时,
归属于(-)(2R,3R)1Oferuloylsecoisolaricires
inol苯环部分的邻/间位 ABX偶合系统被化合物1
的对称取代的间位质子单峰代替。因此,推断化合
物1为(-)(2R,3R)1Oferuloylsecoisolaricires
inol的双甲氧基取代衍生物(图1)。上述推断也与
化合物1质谱给出的分子式完全相符。最后,通过
HMBC实验(图2)确定两个甲氧基分别取代于 C8
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和C8′位上。将化合物1进行甲醇钠水解得到化合
物1a[10](图3),根据化合物 1a的旋光值[α]20D -
289(c080,CHCl3)与文献报道的(+)(2S,3S)
8,8′bisdihydrosiringenin旋光值[α]20D +307(c
082,CHCl3)相反,表明化合物 1a为(+)(2S,
3S)8,8′bisdihydrosiringenin的对映体,即其立体构
型为2R,3R[1013]。因此,化合物 1的结构确定为
(-)(2R,3R)1Oferuloyl8,8′bisdihydrosiringe
nin。并通过二维1H1HCOSY,HMQC和 HMBC实
验准确归属了其1H和13CNMR波谱数据(表1)。
图1 化合物1的结构式
图2 化合物1的主要1H1HCOSY(粗线)和
HMBC(箭头)相关
1 材料
Inova400Mz和500Mz核磁共振仪,Micromass
AutospecUltimaETOF质谱仪。Waters600高效液
相色谱(HPLC)仪,配备 Waters2478型检测器(Al
tech公司);EconosphereC18制备柱(250mm×22
mm,10μm)。中压液相色谱仪(BúchiGradientFor
merB687),RpC18色谱柱(4360μ,Pharmacia公
司)。SephadexLH20(Pharmacia公司)。RA型大
图3 化合物1的碱水解图
孔吸附树脂(北京化工七厂)。柱色谱硅胶(200~
300目)和薄层色谱硅胶 GF254(60型)均为青岛海
洋化工厂生产。
短柄小连翘药材于2006年8月采自广西,由佳
木斯大学刘娟教授鉴定为短柄小连翘 H.petiolula
tum,标本现存于佳木斯大学植物标本室,标本号为
No.ZH06872。
2 提取分离
短柄小连翘茎枝(15kg),粉碎后用95%乙醇
浸泡48h,超声提取3次,每次2h。提取液减压浓
缩成浸膏后将其混悬于水中,用醋酸乙酯萃取6次,
每次1000mL;减压回收溶剂后得到水相部位(284
g)和醋酸乙酯部位(108g)。水相部位进行大孔吸
附树脂(1000g)柱色谱分离,用蒸馏水、30%乙醇、
50%乙醇和95%乙醇进行梯度洗脱,减压回收溶剂
后得到相应的洗脱部分。水洗脱部分放置析出大量
沉淀,沉淀用乙醇反复重结晶得到化合物 2(102
mg)。滤去沉淀后的母液用反相中压液相色谱分
离,0~50%甲醇梯度洗脱,共得到A~E5个洗脱部
分。C部分经正相硅胶柱色谱分离,三氯甲烷甲醇
(90∶10,0∶100)梯度洗脱,得到 5个亚组分(C1
C5)。C3亚组分经SephadexLH20柱色谱(甲醇∶水
70∶30)和反相 HPLC制备(甲醇水 60∶40)反复纯
化,得到化合物 1(103mg),3(162mg),4(61
mg),5(112mg)和6(153g)。D部分经 Sephadex
LH20柱色谱纯化(甲醇水70∶30)和反相HPLC制
备(甲醇水 65∶35)得到化合物 7(9861mg),8
(179mg),9(342mg)。
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表1 化合物1的1H(400MHz)和13CNMR(100MHz)数据(CD3OD)
No.

δH δC
1a
δH δC
1a 435(1H,dd,J=60,112Hz) 663(t) 360(2H,m) 618(t)
1b 413(1H,dd,J=64,112Hz)      
2 227(1H,m) 412(d) 192(1H,m) 437(d)
3a 253(1H,dd,J=70,140Hz) 364(t) 254(1H,dd,J=70,140Hz) 363(t)
3b 269(1H,dd,J=70,140Hz)   268(1H,dd,J=70,140Hz)  
4   1341(s)   1327(s)
5,9 631(2H,s) 1071(d) 628(2H,s) 1068(d)
6,8   1487(s)   1486(s)
7   1328(s)   1339(s)
1′a 354(1H,dd,J=68,112Hz) 629(t) 360(2H,m) 618(t)
1′b 362(1H,dd,J=60,112Hz)      
2′ 199(1H,m) 450(d) 192(1H,m) 437(d)
3′a 257(2H,d,J=67Hz) 364(t) 254(1H,dd,J=70,140Hz) 363(t)
3′b     268(1H,dd,J=70,140Hz)  
4′   1341(s)   1327(s)
5′,9′ 627(2H,s) 1070(d) 628(2H,s) 1068(d)
6′,8′   1487(s)   1486(s)
7′   1330(s)   1339(s)
1″   1696(t)    
2″   1161(d)    
3″   1469(d)    
4″   1245(s)    
5″ 719(1H,d,J=16Hz) 1167(d)    
6″   1494(s)    
7″   1511(s)    
8″ 681(1H,d,J=84Hz) 1120(d)    
9″ 707(1H,dd,J=84,16Hz) 1279(d)    
CH3O6,8 370(6H,s) 565(q) 373(6H,s) 566(q)
CH3O6′,8′ 372(6H,s) 566(q) 373(6H,s) 566(q)
CH3O6″ 380(3H,s) 569(q)    
3 化合物1的碱水解
取80mg化合物1溶于20mL无水甲醇溶液
中,加入15%的甲醇钠甲醇溶液10mL后在室温
下反应4h。反应液上 SephadexLH20柱色谱,用
甲醇∶水(80∶20)进行洗脱,共收集55个流分(56×
2mL)。TLC检测后合并第48~51流分,减压浓缩
得到黄色油状物,经制备薄层 TLC制备(三氯甲烷
甲醇15∶1,Rf042)得到化合物1a(43mg)。
4 已知化合物鉴定
化合物2~9经理化鉴定波谱分析,并与文献比
较分别鉴定为(-)secoisolariciresinol4OβDgluco
pyranoside[4],isolariciresinolβ4′OβDglucopyrano
side[5],5methoxy9βxylopyranosyl(+)isolaricires
inol[6],(+)lyoniresinol2αOβDxylopyranoside[6],
5methoxy9βxylopyranosyl( -)isolariciresinol[7],
isolariciresinol6aOβDGlucoside[8],(+)lyonires
inol3αOβDxylopyranoside[6],7methoxy5benzo
furanpropanol4′OβDglucopyranoside[9]。
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LigansfrombranchofHypericumpetiolulatum
ZHAOQi1,LIUJuan2,WANGFunan3,LIUGuifan1,WANGGuizhi1,ZHANGKun1
(1.DepartmentofPharmacy,People'sHospitalofDaqingCity,Daqing163316,China;
2.SchoolofChemistryandPharmacy,JiamusiUniversity,Jiamusi154003,China;
3.NationalResearchInstituteforFamilyPlanning,ChineseAcademyofMedicalSciencesandPekingUnionMedicalColege,
Beijing100081,China)
[Abstract] Objective:ToinvestigatethechemicalconstituentsofHypericumpetiolulatum.Method:Thechemicalconstituents
wereisolatedandpurifiedbycolumnchromatographyonsilicagel,macroporousadsorbentresin,SephadexLH20,andpreparative
HPLC.StructuresofthecompoundswereidentifiedbyNMRandMSspectroscopicmethods.Result:Ninelignanswereobtainedand
theirstructureswereelucidatedas(-)(2R,3R)1Oferuloyl8,8′bisdihydrosiringenin(1),(-)secoisolariciresinol4OβD
glucopyranoside(2),isolariciresinolβ4′OβDglucopyranoside(3),5methoxy9βxylopyranosyl(+)isolariciresinol(4),
(+)lyoniresinol2αOβDxylopyranoside(5),5methoxy9βxylopyranosyl(-)isolariciresinol(6),isolariciresinol6aOβD
glucoside(7),(+)lyoniresinol3αOβDxylopyranoside(8)and7methoxy5benzofuranpropanol4′OβDglucopyranoside
(9).Conclusion:Coupound1wasnewandcompounds29wereobtainedfromthegenusHypericumforthefirsttime.
[Keywords] Hypericumpetiolulatum;chemicalconstituents;lignans
[责任编辑 王亚君]
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