全 文 :黄皮叶的化学成分研究
赵青,李创军,杨敬芝,张东明
(中国医学科学院 北京协和医学院 药物研究所 中草药物质基础与资源利用
教育部重点实验室,北京 100050)
[摘要] 目的:对黄皮Clausenalansium叶的化学成分进行分离和鉴定。方法:采用正相(硅胶)、反相(ODS)、凝胶柱色
谱和高效液相制备方法进行分离纯化,利用波谱数据和理化常数鉴定化合物的结构。结果:从乙醇提取物中分离鉴定了7个
化合物,分别为corchoionosideC(1),1′OβDglucopyranosyl(2R,3S)3hydroxynodakenetin(2),槲皮素3O刺槐双糖 (3),芦
丁 (4),槲皮素3OβD吡喃葡萄糖(1→4)αL吡喃鼠李糖苷 (5),山柰酚3OαL吡喃鼠李糖(1→2)[αL吡喃鼠李糖
(1→6)]βD吡喃葡萄糖苷 (6),山柰酚3OαL吡喃鼠李糖(1→2)[αL吡喃鼠李糖(1→6)]βD吡喃半乳糖苷 (7)。
结论:化合物1~7均为首次从该属植物中分离得到。
[关键词] 黄皮叶;化学成分;黄酮苷
[收稿日期] 20090723
[基金项目] 国家自然科学基金广东省人民政府自然科学联合基
金项目(U0832008)
[通信作者] 张东明,Tel:(010)63165227,Fax:(010)
63165227,Email:Zhangdm@immaccn
黄皮 Clausenalansium(lour)skeels是芸香科
Rutaceae黄皮属 Clausena植物,民间常与所用部位
合称,如黄皮果,黄皮核,黄皮子,黄皮叶等。黄皮叶
性味属辛凉《陆川本草》,在《本草求原》中记载黄皮
叶有“解秽除垢,退黄肿”之功用。民间用其叶煮水
洗浴治疗疥癞,消风肿等。产于我国南部,如福建、
广东、台湾、广西、云南等地。近年来有报道称黄皮
叶具有保肝和促智等生物活性。已报道的黄皮化学
成分有:香豆素类、卡巴唑和酰胺生物碱类、挥发油
及萜类[1]。为了进一步研究黄皮的有效化学成分,
本文对黄皮叶的化学成分进行研究,利用柱色谱和
高效液相色谱法从黄皮叶中分离了7个化合物,均
为首次从该属植物中分离得到。
1 材料
质谱测定用Agilent1100seriesLCMSDTrapSL
型质谱仪。核磁共振谱测定用 Mercuryplus400和
Inova500型核磁共振仪。旋光测定用 PekinEl
mer341型旋光仪。薄层色谱用硅胶 GF254和柱色
谱硅胶(100~200目,200~300目)均为青岛海洋
化工厂产品。C18反相硅胶为日本 YMC公司产品。
SephadexLH20为瑞士Pharmaciabiotect公司产品。
制备液相色谱仪为日本 ShimadazuLC6AD(YMC
ParkODSAC18制备柱,20mm ×250mm,5μm)。
黄皮叶采自广西柳州,经柳州林业局龙光日高
级工程师鉴定为黄皮的干燥叶 C.lansium。标本保
存于中国医学科学院药物研究所。
2 提取分离
黄皮叶08kg,粉碎后用70%乙醇回流提取3
次,每次2h,合并提取液,减压浓缩至无醇味,加水
稀释至2L,分别用等体积石油醚、氯仿、乙酸乙酯、
正丁醇萃取,每部分萃取4次,减压浓缩。正丁醇部
分 505g,经硅胶柱色谱,以乙酸乙酯甲醇
(50∶1)~乙酸乙酯甲醇(1∶1)为洗脱剂梯度洗脱,
得32个流分。第9~13流分,经常压反相硅胶柱色
谱(甲醇水梯度洗脱)和凝胶 LH20纯化,最后经
制备液相纯化(乙腈水为流动相)得到化合物1(28
mg)。第14~19流分经正相硅胶柱色谱,以氯仿甲
醇水(8∶25∶03)为洗脱剂,切干柱得 Fr1~Fr8
8个部分。其中Fr1(704mg)经常压反相硅胶柱色
谱(甲醇水梯度洗脱),再经制备液相纯化(乙腈水
为流动相)得到化合物2(50mg)。第20~27流分
经反相中压柱色谱,以甲醇水梯度洗脱,收集
Fr1~Fr2020个部分,Fr11(11g)经正相硅胶柱
色谱,以氯仿甲醇水(8∶25∶03)为洗脱剂,切干
柱,合并6~8部分(502mg),再经过反相中压柱色
谱(甲醇水梯度洗脱)分成 A和 B2个部分,A部分
经凝胶 LH20纯化后,再用制备液相纯化(乙腈水
和005%三氟乙酸为流动相)得到化合物 3(17
·799·
第35卷第8期
2010年4月
Vol35,Issue 8
April,2010
mg),4(15mg)。B部分经凝胶LH20纯化后,再用
制备液相纯化(甲醇水和005%三氟乙酸为流动
相)得到化合物5(20mg)。Fr9(541mg)经正相硅
胶柱色谱,以氯仿甲醇水(8∶25∶03)为洗脱剂,
切干柱,合并7~10部分(287mg),经凝胶 LH20
纯化后,再用制备液相纯化(乙腈水和005%三氟
乙酸为流动相)得到化合物6(13mg),7(12mg)。
3 结构鉴定
化合物1 白色粉末。ESIMSm/z409[M+
Na]+。1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:594(1H,d,
J=156Hz,7H),581(1H,s,4H),569(1H,dd,
J=156,72Hz,8H),449(1H,m,9H),422
(1H,d,J=76Hz,Glc1′H),381(1H,dd,J=
120,20Hz,Glc6′βH),359(1H,dd,J=120,
60Hz,Glc6′αH),306~326(4H,m,Glc2′,3′,
4′,5′H),258(1H,d,J=168Hz,2βH),213
(1H,d,J=168Hz,2αH),188(3H,s,11H),
123(3H,d,J=64Hz,10H),098(3H,s,12H),
096(3H,s,13H)。13CNMR(CD3OD,125MHz)δ:
2012(C3),1671(C5),1337(C7),1336(C
8),1271(C4),800(C6),746(C9),507(C
2),424(C1),247(C13),235(C12),222(C
10),195(C11),1012(C1′),783(C5′),781
(C3′),749(C2′),716(C4′),628(C6′)。根
据文献[2]确定化合物1为corchoionosideC。
化合物 2 白色粉末。[α]20D +44(c01,
DMSO)。ESIMSm/z447[M +Na]+。1HNMR
(DMSOd6,400MHz)δ:803(1H,d,J=96Hz,5
H),768(1H,s,4H),692(1H,s,9H),627
(1H,d,J=96Hz,6H),524(1H,d,J=64Hz,3
H),454(1H,d,J=64Hz,2H),146(6H,s,
CH3×2),453(1H,d,J=80Hz,1″H),284~
340(6H,m,2″,3″,4″,5″,6″H)。13 CNMR
(DMSOd6,125MHz)δ:1623(C9a),1604(C7),
1560(C8a),1449(C5),1286(C3a),1257(C
4),1128(C4a),1118(C6),973(C9),919(C
2),775(C3),698(C1′),246,228(C2′CH3×
2),977(C1″),769(C3″),767(C5″),734(C
2″),700(C4″),608(C6″)。根据文献[3]确定化
合物 2为 1′OβDglucopyranosyl(2R,3S)3
hydroxynodakenetin。
化合物 3 黄色粉末。ESIMSm/z633[M+
Na]+。1HNMR(DMSOd6,400MHz)δ:1258(1H,
s,5OH),1086(1H,s,7OH),972(1H,s,4′OH),
913(1H,s,3′OH),765(1H,dd,J=84,20Hz,
6′H),751(1H,d,J=20Hz,2′H),682(1H,d,
J=84Hz,5′H),639(1H,d,J=12Hz,8H),
619(1H,d,J=12Hz,6H),532(1H,d,J=76
Hz,Gal1″H),440(1H,brs,Rha1H),106(3H,
d,J=64Hz,Rha6H)。13CNMR(DMSOd6,125
MHz)δ:1776(C4),1644(C7),1615(C5),
1567(C9),1566(C2),1487(C4′),1450(C
3′),1337(C3),1222(C6′),1213(C1′),1162
(C5′),1154(C2′),1041(C10),989(C6),
938(C8),1022(C1″),1002(C1),738(C
5″),733(C3″),721(C4),713(C2″),709(C
3),707(C2),685(C4″),683(C5),653
(C6″),182(C6)。参考文献[4],糖链的数据基
本一致,又对照化合物4,5的图谱数据,因此可以确
定化合物3为槲皮素3O刺槐双糖。
化合物 4 黄色粉末。ESIMSm/z633[M+
Na]+。NMR数据与文献[5]一致,与芦丁共薄层
Rf值及显色均一致确定化合物4为芦丁。
化合物 5 黄色粉末。ESIMSm/z633[M+
Na]+。1HNMR(DMSOd6,400MHz)δ:1261(1H,
s,5OH),1090(1H,s,7OH),974(1H,s,4′OH),
937(1H,s,3′OH),729(1H,s,2′H),725(1H,
d,J=80Hz,6′H),688(1H,d,J=80Hz,5′H),
638(1H,s,8H),620(1H,s,6H),513(1H,brs,
Rha1″H),430(1H,d,J=76Hz,Glc1H),092
(3H,d,J=40Hz,Rha6″H)。13CNMR(DMSOd6,
125MHz)δ:1776(C4),1642(C7),1612(C5),
1572(C9),1564(C2),1484(C4′),1451(C
3′),1342(C3),1209(C6′),1206(C1′),1156
(C5′),1154(C2′),1047(C10),986(C6),
936(C8),1039(C1),1018(C1″),820(C
4″),769(C5),765(C3),744(C2),702
(C2″),697(C3″),696(C4),689(C5″),609
(C6),173(C6″)。根据文献[6],数据基本一
致,并结合化合物3,4分析,因此可以确定化合物5
为槲皮素3OβD吡喃葡萄糖(1→4)αL吡喃鼠
李糖苷。
化合物 6 黄色粉末。ESIMSm/z763[M+
Na]+。1HNMR(DMSOd6,400MHz)δ:1263(1H,
·899·
第35卷第8期
2010年4月
Vol35,Issue 8
April,2010
s,5OH),1086(1H,s,7OH),1012(1H,s,4′
OH),794(2H,d,J=88Hz,2′H,6′H),687
(2H,d,J=88Hz,3′H,5′H),639(1H,d,J=20
Hz,8H),618(1H,d,J=20Hz,6H),548(1H,
d,J=72Hz,Glc1″H),504(1H,brs,Rha1H),
430(1H,brs,Rha1″″H),095(3H,d,J=60Hz,
Rha6″″H),080(3H,d,J=60Hz,Rha6H)。
13CNMR(DMSOd6,125MHz)δ:1773(C4),1641
(C7),1613(C5),1599(C4′),1570(C9),
1565(C2),1327(C3),1308(C2′),1308(C
6′),1210(C1′),1152(C3′),1152(C5′),
1041(C10),987(C6),938(C8),1008(C
1″″),1006(C1),988(C1″),774(C2″),772
(C3″),757(C5″),719(C4),719(C4″″),
718(C3),718(C3″″),706(C2),706(C
5),706(C2″″),706(C5″″),683(C4″),669
(C6″),178(C6),174(C6″″)。参照文献[7,9
10],数据基本一致,并与化合物7对比,可以确定
化合物 6为山柰酚3OαL吡喃鼠李糖(1→2)
[αL吡喃鼠李糖(1→6)]βD吡喃葡萄糖苷。
化合 物 7 黄 色 粉 末。ESIMSm/z739
[M-H]-。1HNMR(DMSOd6,500MHz)δ:1266
(1H,s,5OH),1083(1H,s,7OH),1015(1H,s,
4′OH),804(2H,d,J=85Hz,2′H,6′H),685
(2H,d,J=85Hz,3′H,5′H),640(1H,s,8H),
618(1H,s,6H),555(1H,d,J=75Hz,Gal1″
H),503(1H,brs,Rha1H),434(1H,brs,Rha
1″″H),104(3H,d,J=60Hz,Rha6″″H),077
(3H,d,J=60Hz,Rha6H)。13CNMR(DMSOd6,
125MHz)δ:1780(C4),1647(C7),1619(C5),
1606(C4′),1583(C9),1570(C2),1334(C
3),1315(C2′),1315(C6′),1216(C1′),1158
(C3′),1158(C5′),1047(C10),994(C6),
944(C8),1013(C1″″),1008(C1),996(C
1″),755(C2″),745(C5″),740(C3″),726(C
4),726(C4″″),714(C2),713(C2″″),711
(C3),692(C4″),692(C3″″),689(C5),
688(C5″″),658(C6″),186(C6),180(C
6″″)。参照文献[810],数据基本一致,并对比化合
物6,可以确定化合物7为山柰酚3OαL吡喃鼠
李糖(1→2)[αL吡喃鼠李糖(1→6)]βD吡喃
半乳糖苷。
[参考文献]
[1] 宋振玉.中草药现代研究.第2卷[M].北京:北京医科大
学中国协和医科大学联合出版社,1996:161
[2] MasayukiYoshikawa,HiromiShimada,MasamiSaka,etal.Me
dicinalfoodstufs.VMoroheiya.(1):Absolutestereostructures
ofcorchoionosidesA,B,andC,histaminereleaseinhibitors
fromtheleavesofvietnameseCorchorusolitoriusL.(Tiliaceae)
[J].ChemPharmBul,1997,45(3):464
[3] 肖永庆,李丽,谷口雅颜,等.云南羌活的苷类成分[J].药
学学报,2001,36(7):519
[4] BuschiCA,PomilioAB.Isorhamnetin3Orobinobiosidefrom
Gomphrenamartiana[J].JNatProd,1982,45(5):557.
[5] 王祝举,唐力英,付梅红,等.夏枯草中的黄酮类化合物研
究[J].时珍国医国药,2008,19(8):1966
[6] 李人久,任丽娟,陈玉武.中药三白草的化学成分研究(I)
[J].中国中药杂志,1999,24(8):479
[7] YasukawaK,TakidoM.Studiesonthechemicalconstituentsof
genusLysimachiaIOnthewholepartsofLysimachiajaponica
ThunbandLysimachiaclethroidesDuby[J].YakugakuZasshi,
1986,106(10):939
[8] YasukawaK,TakidoM.AflavonolglycosidefromLysimachia
mauritiana[J].Phytochemistry,1987,26(4):1224
[9] GeofreyCKite,CharloteASroneham,NigelCVeitch.Flavonol
tetraglycosidesandotherconstituentsfromleavesofStyphnolobi
umjaponicum(Leguminosae)andrelatedtaxa[J].Phytochemis
try,2007,68(10):1407
[10] 龚运淮.天然产物核磁共振碳谱分析[M].昆明:云南科技出
版社,2006:563
·999·
第35卷第8期
2010年4月
Vol35,Issue 8
April,2010
ChemicalconstituentsofClausenalansium
ZHAOQing,LIChuangjun,YANGJingzhi,ZHANGDongming
(KeyLaboratoryofBioactiveSubstancesandResourcesUtilizationofChineseHerbalMedicine,InstituteofMateriaMedica,
ChineseAcademyofMedicalSciencesandPekingUnionMedicalColege,Beijing100050,China)
[Abstract] Objective:TostudythechemicalconstituentsoftheleafofClausenalansium(Lour)Skeels.Method:Thecom
poundswereisolatedbyvariouschromatographictechniquesandtheirstructureswereelucidatedbytheirphysicochemicalpropertiesand
theanalysisoftheirspectroscopicdata.Result:SevencompoundswereisolatedandidentifiedascorchoionosideC(1),1′OβDglu
copyranosyl(2R,3S)3hydroxynodakenetin(2),quercetin3Orobinobioside(3),rutin(4),quercetin3Oscilabioside(5),ke
ampferol3OαLrhamnopyranosyl(1→2)[αLrhamnopyranosyl(1→6)]βDglucopyranoside(6),mauritianin(7).Conclusion:
Compounds17wereisolatedfromthegenusClausenaforthefirsttime
[Keywords] Clausenalansium;chemicalconstituents;flavonoidglycoside
doi:10.4268/cjcmm20100812
[责任编辑 王亚君]
全国第十次中药鉴定学术会议征文通知(第一轮)
中华中医药学会中药鉴定分会定于2010年7月在陕西省咸阳市召开“全国第十次中药鉴定学术研讨会”,会期3天。会
议将邀请著名专家及相关人士就中药鉴定与品质评价、中药质量标准化、信息化、网络化进展情况;中药资源开发及可持续利
用、中药鉴定学和生药学教学及实验、教材与标本等问题做专题报告。相关征文事宜通知如下:
1 征文内容
①中药鉴定学及生药学的新方法、新技术、新思路、新观点;②中药质量标准研究、品质评价相关内容;③中药品种考证及
相关内容;④道地药材、中药资源开发与可持续利用研究及中药材规范化种植(GAP)、采收期、加工、储藏、保管等相关内容;
⑤中药珍稀、濒危物种的开发及可持续发展战略问题的讨论;⑥民族药的开发、保护与可持续利用;⑦分子生物学技术、信息
技术、生物工程技术在中药现代化研究中的应用;⑧中药化学成分及有效成分的提取、分离及鉴定研究、药效学研究以及其它
相关领域的研究论文;⑨有关《中药鉴定学》和《生药学》的教学内容、教学方法、教学手段、教学改革等方面的论文;瑏瑠中药标
本的采集、制做、保存新方法、新技术;瑏瑡标本馆现代化管理及网络技术平台的建设。
2 征文要求
①征文为未公开发表的论文。请在论文及信封右上角注明中药鉴定或中药标本研讨会稿件字样。②稿件一律用 Mi
crosoftWord文档标准A4版面,标题3号宋体,作者及单位小4号楷体,摘要与关键词小5号宋体,正文5号宋体,页边距:上3
cm,下、左、右2.5cm。③请附400字以内摘要及关键词。④截止日期2010年5月15日,请自留底稿,概不退稿。请将论文发
送如下Email地址,注明中药鉴定研讨会稿件字样。⑤ 论文一经采用,将收入会议论文集,并通知作者出席会议,会议期间颁
发论文证书,参会代表计国家级Ⅰ类继续教育学分6分。
3 联系方式
地址:陕西中医学院生药教研室(陕西省咸阳市世纪大道),邮编S712046。联系人:刘阿萍:13818946096,Tel/Fax:(029)
38185178,Email:shengyaojysh@163.com,沈霞:13991046336,Email:shengyaojysh@163.com,胡本祥:13891085127,Email:
hubenxiang@tom.com。
·0001·
第35卷第8期
2010年4月
Vol35,Issue 8
April,2010