全 文 ：附子炮制前后有效部位强心作用的实验研究
王立岩，张大方，曲晓波，张志仁，王奕琛
（长春中医药大学，吉林 长春 １３０１１７）
［摘要］　目的：研究附子炮制前后有效部位的强心作用。方法：采取离体蛙心灌流的方法检验附子炮制前后有效部位强
心作用，并初步考察有效部位的量效关系；采用股静脉注射戊巴比妥钠对大鼠造成急性心力衰竭，观察附子炮制前后有效部
位经十二指肠给药对大鼠血流动力学影响，进一步阐明其强心作用。结果：附子炮制前后有效部位对离体蛙心有增大振幅作
用（Ｐ＜００５），最大增幅 ９１１１％ ±８７６６％（Ｐ＜００１），对振动频率无显著作用；对在体大鼠血流动力学指标左室内压
（ＬＶＳＰ），左室最大上升速率＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ，左室最大下降速率－ｄｐ／ｄｔｍａｘ，左室舒张末期压（ＬＶＥＤＰ）有显著性差异（Ｐ＜００１，Ｐ＜
０００１），各给药组心衰大鼠心率变化无显著性差异。结论：附子炮制前后有效部位在离体蟾蜍与在体大鼠上均有强心作用。
［关键词］　附子；有效部位；蟾蜍；大鼠；强心作用
［收稿日期］　２００８０７２８
［基金项目］　国家重大基础研究项目计划（９７３）（２００６ＣＢ５０４７０６）
［通信作者］　张大方，教授，博士生导师，Ｅｍａｉｌ：ｚｄｆ０４３１＠１２６．ｃｏｍ
［作者简介］　王立岩，博士研究生，医药工程师，Ｔｅｌ：１３１８０８２３７１８，
Ｅｍａｉｌ：ｗｌｙ８９９２＠１２６ｃｏｍ
　　附子具有回阳救逆、温阳补肾、散寒止痛等功
效，其有毒成分为双酯型生物碱，以往研究结果表明
附子所含双酯型生物碱，既是毒性成分，在镇痛方面
又是有效成分。也有文献报道乌头碱是强心成分，
但都局限于动物离体心脏灌流的实验或在体以静脉
方式给药的实验［１］。口服附子煎剂更符合传统中
医临床用药经验，本研究报道了附子炮制前后有效
部位经十二指肠给药对在体心衰大鼠有强心作用，
证明了双酯型生物碱既是有毒成分，又是治疗心衰
的有效成分，为临床合理用药提供佐证。戊巴比妥
钠致大鼠急性心衰模型，经改良后操作方法简便、稳
定，＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ下降到正常值的１／３左右（形成严重
心衰）可维持１ｈ以上，且对附子的正性肌力作用敏
感，这也为本课题的继续研究工作提供了药理方法
学平台。
１　材料
１．１　动物及仪器
蟾蜍（６０～８０ｇ）（购自吉林大学实验动物中
心），雄性ＳＤ大鼠（２４０～２６０ｇ）（购自吉林大学实
验动物中心，合格证号吉２００３０００１）；斯氏蛙心套
管，ＢＬ－４１０四道仪及张力换能器（成都泰盟科技有
限公司）；ＭＰ－１５０１６道生理记录仪（美国 Ｂｉｏｐａｃ
公司）；ＭＰ－２００３注射泵（上海雷恩医疗器械有限
公司）。
１．２　药品
附子及炮附子 ＡｃｏｎｉｔｕｍｃａｒｍｉｃｈａｅｌｉＤｅｂｘ（原药
材购于四川江油并经长春中医药大学王淑敏教授鉴
定）水煎醇沉液，批号０８０５２４；附子炮制前后有效部
位（由中国科学院长春市应用化学研究所提供，专
利号 ＣＮ２００７１００５５９７７３）分别为双酯型生物碱
（ＤＤＡＳ，产率１８９％）和单酯热解型生物碱（ＭＤＡ
Ｐ，产率０３１％），批号０８０５１６；戊巴比妥钠（上海爱
紫特生物科技有限公司），批号０６０７１９。
１．３　试剂
任氏液：ＮａＣｌ６５ｇ，ＫＣｌ０１４ｇ，ＮａＨ２ＰＯ４·２
Ｈ２Ｏ０００６５ｇ，ＮａＨＣＯ３０２ｇ，ＣａＣｌ０１２ｇ，葡萄糖
２ｇ，双蒸水 １０００ｍＬ。
低钙任氏液：ＣａＣｌ含量为任氏液的１／１０。
乌拉坦：２０ｇ乌拉坦中加入１００ｍＬ生理盐水。
２　方法
２．１　对离体蛙心强心作用
选６０～８０ｇ，蟾蜍 ８０只，分成 ８组，空白对照
组；ＤＤＡｓ组（００１５６，０００７８，０００５２ｇ·Ｌ－１３个
剂量组）；ＭＤＡＰ组（００４７０，００２３５，００１５７，
００１１８ｇ·Ｌ－１４个剂量组），每组１０只，采用斯氏
法制备离体心脏标本［１］。蛙心夹通过张力换能器
连接ＢＬ４１０操作系统，记录正常蛙心搏动曲线，用
滴管抽出插管内的正常任氏液后，换入等量（０５
ｍＬ）低钙任氏液，进行造模，当心脏收缩显著减弱无
上升趋势时，即为造模成功。向斯氏管内加入体积
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为０１２５ｍＬ药液，观察心脏收缩情况，及搏动频率
并记录心搏动曲线。
２．２　对实验性心衰大鼠血流动力学影响
２．２．１　实验分组及剂量　参照 ｂｌｉｓｓ法［３］测出
ＤＤＡＳ的 ＬＤ５０为 ０２５ｇ·ｋｇ
－１及 ＭＤＡＰ的 ＬＤ５０为
０７２３ｇ·ｋｇ－１，对照组生附子及炮附子根据临床等
效剂量（按体表面积法折算成大鼠口服量），双酯型
生物碱及单酯型生物碱是等毒剂量（ＬＤ５０的１／１０），
雄性ＳＤ大鼠分成空白对照组（生理盐水），生附子
组（生药 ０１ｇ·ｋｇ－１）、炮附子组（生药 ０１ｇ·
ｋｇ－１）、双酯型生物碱（ＤＤＡＳ）（浸膏 ００２５ｇ·
ｋｇ－１）、单酯热解型生物碱（ＭＤＡＰ）（浸膏００７２３ｇ
·ｋｇ－１），每组８只。
２．２．２　实验步骤　参照孙氏造模法［４］略加改进，
２０％乌拉坦０５ｍＬ·１００ｇ－１腹腔注射麻醉，将动物
固定在手术台上。分离右侧颈总动脉，经颈总动脉
插入充满肝素的导管进入左心室，另一端通过压力
换能器连接１６道生理记录仪，当血压峰最低点在０
ｍｍＨｇ时说明插管成功，同步测量各项血流动力学
指标：左室内压（ＬＶＳＰ）、左室舒张末期压（ＬＶ
ＥＤＰ）、左室最大上升速率（＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ）、左室最大下
降速率（－ｄｐ／ｄｔｍｉｎ）四肢皮下埋入针式电极观察Ⅱ
导联心电图及心率（ＨＲ）。记录各组的正常指标
后，股静脉恒速注射１０％戊巴比妥纳（６ｍＬ·ｈ－１）
当＋ＬＶｄｐ／ｄｔｍａｘ降到正常值的２０％～４０％，用３ｍＬ
·ｈ－１维持给药稳定，模型稳定５ｍｉｎ以上即视为心
衰模型［３］成功，十二指肠给予受试药物，空白组给
予等量的蒸馏水。
２．３　所有数据采用
ＳＰＳＳ１１０统计学处理，数据均以［（珋ｘ±ｓ）］表示，
组间比较ｔ检验，Ｐ＜００５为统计学有显著差异。
３　结果
３．１　附子炮制前后有效部位对离体蛙心的作用
附子炮制前后有效部位有显著提高离体蛙心振
幅的作用（Ｐ＜００５），附子炮制前有效部位最大提
升（５６６９±５２３４）％，而附子炮制后有效部位最大
提高（９１１１±８７６６）％，结果见表１。二者对离体
蛙心振动频率无显著影响。
表１　双酯型生物碱（ＤＤＡｓ）和单酯热解型生物碱（ＭＤＡＰ）对离体蛙心的作用（珋ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
组别 剂量／ｇ·Ｌ－１ 给药前／ｍｍ 给药后／ｍｍ 变化率／％
空白组 － ００９６±００７１ ００９３±００７８ －５６４１±８９７
ＤＤＡｓ ００１５６ ０１３２±００３１ ０２０２±００６８１） ５６６９１±５２３４１）
　 ０００７８ ０１４１±００３７ ０２２９±００８６２） ７５５４２±９４１２２）
　 ０００５２ ０１５６±００４７ ０１６０±００４８ 　３４８９±１０２４
ＭＤＡＰ ００４７０ ０１３４±００２７ ０２５０±０１０６１） ９１１０７±８７６６１）
　 ００２３５ ０１５３±００３９ ０２０２±００６３２） 　３６３８±４４１４１）
　 ００１５７ ０１５９±００４７ ０１８３±００７１ １５３０５±１６３１
　 ００１１８ ０１６４±００４４ ０１６３±００４０ 　０８０４±１３０７
　　注：与模型组比较１）Ｐ＜０００１，２）Ｐ＜００５。
３．２　附子炮制前后有效部位对心衰大鼠血流动力
学指标的影响
附子炮制前后有效部位 ５ｍｉｎ时均有显著提
高ＬＶＳＰ（Ｐ＜０００１），１０ｍｉｎ时炮制后有效部位有
显著提高 ＬＶＳＰ（Ｐ＜０００１），与生附子和炮附子比
作用时间短（Ｐ＜００５），效强弱（Ｐ＜００５）；附子
炮制前后有效部位 ５ｍｉｎ时均有显著提高 ＋ｄｐ／
ｄｔｍａｘ（Ｐ＜０００１），１０ｍｉｎ时炮制后有效部位有显
著提高 ＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ（Ｐ＜０００１），与生附子和炮附子
比作用时间短（Ｐ＜００５），效强弱（Ｐ＜００５）；附
子炮制前后有效部位５ｍｉｎ时均有显著提高 －ｄｐ／
ｄｔｍａｘ（Ｐ＜０００１），１０ｍｉｎ时炮制后有效部位有显
著提高 －ｄｐ／ｄｔｍａｘ（Ｐ＜００１），与生附子和炮附子
比作用时间短（Ｐ＜００５），效强弱（Ｐ＜００５）；附
子炮制前后有效部位降低 ＬＶＥＤＰ显著（Ｐ＜
０００１，Ｐ＜００１，Ｐ＜００５），最大变化率为 －
３５３７％［±２０００％（Ｐ＜０００１）］，且作用时间
长，与生附子和炮附子相比有显著或极显著性差
异（Ｐ＜０００１，Ｐ＜００５）。实验结果及作用趋势
详见表２和图１～４；生附子给药５ｍｉｎ有心率有差
异（Ｐ＜００５），其他各给药组对心率影响无显著性
差异。
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表２　生附子有效部位（ＤＤＡｓ）与炮附子有效部位（ＭＤＡＰ）对急性心衰大鼠血流动力学的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝８）
组别
ＬＶＳＰ
／ｍｍＨｇ
＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ
／ｍｍＨｇ·ｓ－１
－ｄｐ／ｄｔｍａｘ
／ｍｍＨｇ·ｓ－１
ＬＶＥＤＰ
／ｍｍＨｇ
ＨＲ
／ＢＭＰ
空白 １５９８３±９５４ ４１７８２３±１９１４７ ４００７３９±２２９３５ －６８４±１６２ ４４１６６±２１６５
模型 ７５５１±６１５１） １４６４４７±１５７３７１） １４２３９２±１４７３０１） ９５３±１４２１） ２０５７８±３９３８１）
给药后５ｍｉｎ ７６２８±４４２ １４８８５１±２０４７４ １３０３１８±１３４３８ １１９８±２３６ ２０３６２±３７４０
给药后１０ｍｉｎ ７５２２±３２８ １４３７５５±１３７４４ １３１０８１±１２４０１ １２２６±２４８ ２０６１３±５７１７
生附子 １６０４３±９８９ ４００３３２±２０６５１ ３９７７１５±２６４０３ －６４０±１７９ ４２６７０±２４３６
模型 ７３４０±５６７１） １４２４４３±９９１４１） １２８０９９±１０１１４１） ８２０±２５２１） ２１１１８±５２２１１）
给药后５ｍｉｎ ９１４４±９４０３） １６５６３２±１２４８１２） １５１１６８±２４９９５２） ７８０±１５４２） ２２８９７±４５４０２）
给药后１０ｍｉｎ １００８０±９５６４） １８５９８９±２２１１７４） １７３３１６±１１９４４４） １１６６±２４６ ２６２８９±５７５８
炮附子 １５６１５±８１３ ４６１６６６±２８２２０ ４０１８６７±１６８９８ －６００±１５３ ４７４８１±２４９５
模型　 ７５８１±５６５１） １４１０３８±１５８６１１） １３７０７６±１１１７２１） ７２２±１４９１） １８９３６±４９３８１）
给药后５ｍｉｎ ８５１８±８２２２） １５６６７４±１３８６７ １３６４６４±９４０６ １０２４±２３０ ２１１６４±９１８５
给药后１０ｍｉｎ ９２７６±８７３３） １６６９４７±１９６９３３） １５５５９０±１８９６５２） １２１３±２１６ ２３４４７±１０９７１
ＤＤＡｓ １４８６５±１０４０ ４２０３４１±２６５２５ ４００６１４±２６１１５ －７１８±２０４ ４３５４４±３７５８
模型 ７７３１±６４３１） １４０１６３±１３１８３１） １２７１１７±１０１９８１） ８２７±０９９１） ２２９５２±４０８０１）
给药后５ｍｉｎ ９４５５±５１０４） １８２１９０±１５７３２３） １６７３４８±１２６３９４） ５２４±１３５４） ２９４５６±６７０５
给药后１０ｍｉｎ ８２６３±６８２ １４９１９５±１１９２０ １２６８４０±１４３８３ ５３８±１３５３） ２３１６１±６９９５
ＭＤＡＰ １５１３８±１１４７ ４０７４３５±２７８０６ ３８４５９６±２５１００ －６９３±１５６ ４２９４３±４０１７
模型 ７８９３±３７５１） １３６９５１±１２５１７１） １２３５４２±１１０１２１） ７０７±４５９１） ２１２４４±４９６１１）
给药后５ｍｉｎ ９２３１±４４４４） １７６７４４±１２５１７３） １５７１３３±１３３０７４） ４６９±１３０４） ２３７５７±５８６４
给药后１０ｍｉｎ ９２６３±４８７４） １７３６７５±１２３３５４） １４９４８６±１４９６９３） ４８２±１０９３） １３４１±２３３４
　　注：与空白比较１）Ｐ＜０００１；与模型比较２）Ｐ＜００５，３）Ｐ＜００１，４）Ｐ＜０００１。
图１　附子炮制前后对急性心衰大鼠ＬＶＳＰ的作用
图２　附子炮制前后对急性心衰大鼠＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ的作用
４　讨论
通过蛙心实验结果得出与 ＤＤＡＳ比较，ＭＤＡＰ
毒性减弱且有效剂量范围宽，双酯型生物碱有效剂
量范围窄，说明单酯型生物碱毒性低于双酯型生物
　　
图３　附子炮制前后对急性心衰大鼠ＬＳＥＤＰ的作用
图４　附子炮制前后对急性心衰大鼠－ｄｐ／ｄｔｍａｘ的作用
碱，可能是双酯型生物碱在炮制过程中发生热解反
应生成相应的热解产物［５］；而在急性心衰大鼠上
ＤＤＡＳ和ＭＤＡＰ起效时间在５～１０ｍｉｎ，１０ｍｉｎ以后
迅速减弱，３０ｍｉｎ后不起强心作用，由上图可看出
ＤＤＡＳ和ＭＤＡＰ作用时间短，与孟甄等
［６］报道一致，
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且与生附子和炮附子作用趋势相似，所以附子炮制
过程中既要减毒更要存效。
传统中医临床在附子用于回阳救逆时，采取大
剂量顿服的方法，说明附子治疗急性心力衰竭且起
效快的特点，而本实验中 ＤＤＡＳ和 ＭＤＡＰ的作用特
点是５ｍｉｎ达到最大效强，时间上在水煎液之前，更
适合临床急救。
［参考文献］
［１］　陈信义，李　峨，侯　丽，等．乌头类生物碱研究进展与应用前
景评述［Ｊ］．中国中医药信息杂志，２００４，１１（１０）：９２３．
［２］　陈　奇．中药药理研究方法学［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，
２００６，１：７９．
［３］　张大方，金若敏．药理与中药药理实验［Ｍ］．２版．上海：上海科
学技术出版社，２００６：２９．
［４］　孙成文，雷春利，吕文伟，等．黄芪皂甙对实验性心力衰竭的作
用［Ｊ］．白求恩医科大学学报，１９９４，２０（２）：１２５．
［５］　越　皓，皮子凤，刘淑莹，等．电喷雾串联质谱分析附子炮制中
的化学成分变化［Ｊ］．分析化学研究报告，２００７，７（３５）：９５９．
［６］　孟　甄，杜力军，鲁　静，等．生、制乌头总生物碱对心脏功能
及其毒性的比较［Ｊ］．中国药理学通报，２００４，２０（７）：８０１．
Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｒｅｓｅａｒｃｈｏｎｃａｒｄｉｏｔｏｎｉｃｅｆｅｃｔｏｆａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｕｄ
ｆｒｏｍｒａｗａｎｄｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇａｃｏｎｉｔｅｒｏｏｔｓ
ＷＡＮＧＬｉｙａｎ，ＺＨＡＮＤＤａｆａｎｇ，ＱＵＸｉａｏｂｏ，ＺＨＡＮＧＺｈｉｒｅｎ，ＷＡＮＧＹｉｃｈｅｎ
（ＣｈａｎｇｃｈｕｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ１３００１７，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｃａｒｄｉｏｔｏｎｉｃｅｆｅｃｔｏｆａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｕｄｆｒｏｍｒａｗａｎｄｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇａｃｏｎｉｔｅｒｏｏｔｓｕｓｅｄｒａｔｓ
ｗｉｔｈａｃｕｔｅｈｅａｒｔｆａｉｌｕｒｅ（ＡＨＦ）ａｓｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｎｉｍａｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｉｓｏｌａｔｅｄｔｏａｄｃｏｒｄｉｓｗａｓｅｍｐｌｏｙｅｄｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｃａｒｄｉｏｔｏｎｉｃ
ｅｆｅｃｔａｎｄｔｈｅＡＨＦｍｏｄｅｌｓｗｅｒｅｒｅｐｒｏｄｕｃｅｄｉｎｒａｔｓｂｙｐｅｎｔｏｂａｒｂｉｔａｌｓｏｄｉｕｍｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｈｅｍｏｄｙｎａｍｉｃｓｍａｒｋｅｒａｃｕｔｅｈｅａｒｔｆａｉｌｕｒｅ，
ａｎｄｅｌｕｃｉｄａｔｅｃａｒｄｉｏｔｏｎｉｃｅｆｅｃｔ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＴｈｅＤＤＡＳａｎｄＭＤＡＰｉｍｐｒｏｖｅｄｃｏｎｔｒａｃｔｉｌｅｆｏｒｃｅｏｂｖｉｏｕｓｌｙｏｎｉｓｏｌａｔｅｄｔｏａｄｃｏｒｄｉｓ（Ｐ＜
００５）．Ａｎｄｔｈｅｍｏｓｔａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｃｏｎｔｒａｃｔｉｌｅｆｏｒｃｅｗａｓ９１１０７％ ±８７６６３％ （Ｐ＜００１）．Ｂｕｔｔｈｅｅｆｅｃｔｏｎｉｓｏｌａｔｅｄｈｅａｒｔｒａｔｅｓ
ｗａｓｎｏｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ．ＴｈｅｃｈａｎｇｅｏｆＬＶＳＰ，±ｄｐ／ｄｔｍａｘ，ＬＶＥＤＰｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（Ｐ＜００１，Ｐ＜０００１），ａｎｄｔｈｅＨＲｉｎｃｒｅａｓｅｄｅｖｉ
ｄｅｎｔｌｙｂｙａｄｍｎｉｎｓｔｒａｔｅｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇａｃｏｎｉｔｅｒｏｏｔｓａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｕｄｓａｆｔｅｒｔｈｅａｇｅｎｔｉｎ５ｍｉｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｒｅａｒｅｃａｒｄｉｏｔｏｎｉｃｅｆｅｃｔｏｎ
ｉｓｏｌａｔｅｄｔｏａｄｃｏｒｄｉｓｉｎｒａｔｓｗｉｔｈａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｕｄｓｆｒｏｍｒａｗａｎｄｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇａｃｏｎｉｔｅｒｏｏｔｓ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　ａｃｏｎｉｔｅｒｏｏｔｓ；ａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｕｄ；ｔｏａｄ；ｒａｔ；ｃａｒｄｉｏｔｏｎｉｃｅｆｅｃｔ
［责任编辑　周　驰］
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