全 文 ：超临界流体萃取党参中党参炔苷的研究
刘同举，李淑芬，闵　江，包小妹
（天津大学 化工学院 教育部绿色合成与转化重点实验室，天津 ３０００７２）
［摘要］　目的：党参炔苷是党参中开发一条绿色快速的工艺路线，提取党参中的重要的有效成分之一党参炔苷（ｌｏｂｅｔｙｏ
ｌｉｎ）。方法：本实验对党参中党参炔苷的超临界ＣＯ２萃取工艺进行了研究。采用中心实验设计结合响应曲面法考察了压力、
温度、萃取时间和夹带剂用量等因素对党参炔苷得率的影响及其交互作用。结果：确定了夹带剂用量是关键因素，在动态夹
带剂乙醇流速为１ｍＬ·ｍｉｎ－１，常压ＣＯ２流速为２Ｌ·ｍｉｎ
－１，３０ＭＰａ，６０℃下条件下萃取１００ｍｉｎ，党参炔苷得率为００７８６ｍｇ
·ｇ－１，优于传统超声萃取法。结论：采用带夹带剂的超临界流体萃取党参中党参炔苷是可行的。
［关键词］　超临界萃取；党参；党参炔苷；响应曲面法；中药
［收稿日期］　２００８０８１８
［通信作者］　李淑芬，教授，博士生导师，Ｔｅｌ：（０２２）８７８９４２５２，Ｅ
ｍａｉｌ：Ｓｈｆｌｉ＠ｔｊｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
　　党参为桔梗科植物党参Ｃｏｄｏｎｏｐｓｉｓｐｉｌｏｓｕｌａ及其
同属多种植物的干燥根。具有补中益气、健脾益肺
之功效，主治脾肺虚弱，气短心悸，食少便溏，虚喘咳
嗽，内热消渴等证［１］。党参炔苷（ｌｏｂｅｔｙｏｌｉｎ）是党参
中重要的有效成分之一［２４］，其结构式如图１所示，
党参炔苷对乙醇造成的胃黏膜损伤有很好的保护作
用［２］，在２００５年版《中国药典》中新增了党参炔苷
为特征性成分用以鉴定党参。
图１　党参炔苷结构式
　　目前对中药党参的研究多集中在其药理作用和
成分分析方面［２４］，对新型提取工艺研究较少［５］。
超临界ＣＯ２萃取作为一种新型的绿色化学技术具有
萃取、分离一次完成，萃取效率高，活性成分保留完
好，无溶剂残留等优点，在食品和医药领域得到迅猛
发展［６７］。本研究采用超临界流体萃取技术提取党
参中的党参炔苷，采用中心试验设计（ＣＣＤ）或称旋
转设计和二次响应曲面法，系统考察温度、压力、夹
带剂用量、和萃取时间对萃取结果的影响及其相互
作用，并进一步结合单因素实验优化提取工艺。
响应曲面法（ＲＳＭ）［８］将多因子试验中因素与
试验结果（响应值）的关系用多项式近似。把因子
与试验结果的关系函数化，依次可对函数进行面分
析，定量地分析各因素及其交互作用对响应值的影
响，并用响应面图和等高线图将其形象地表示出来。
１　仪器和试剂
党参（产地甘肃，亳州饮片有限责任公司，产品
编号６１０２９０３０６）。党参炔苷对照品（纯度９８％，天
津一方科技有限公司）。ＣＯ２（纯度９９９５％，北京氦
普北分气体工业公司）。天津市大茂试剂公司，其
中甲醇、乙腈为色谱纯，其他试剂为分析纯。超临界
萃取仪 Ｓｐｅｅｄ（美国 ＡｐｐｌｉｅｄＳｅｐａｒａｔｉｏｎ公司）；高压
液相色谱 ＬａｂＡｌｉａｎｃｅｓｅｒｉｅｓⅢ（美国科学系统公
司）；色谱柱ＡｇｉｌｅｎｔＴＣＣ１８柱（４６ｍｍ×２００ｍｍ，５
μｍ）（美国 Ａｇｉｌｅｎｔ公司）；数控超声波清洗器 ＫＱ
２００ＤＦ（昆山超声仪器有限公司）。
２　方法与结果
２．１　党参的超临界萃取实验步骤
装料：本实验采用３２ｍＬ萃取柱，内径与高度分
别为１４４ｍｍ，１９５ｍｍ，两端封头内有孔径５μｍ的
过滤片防止原料夹带。每次装入为８ｇ粉碎粒度为
４０～６０目中药党参原料和适量夹带剂，并在两端放
入脱脂棉填充富裕空间。
实验流程简述：从钢瓶出来的 ＣＯ２经冷却槽冷
却后通过高压泵升至设定压力（最大压力６９ＭＰａ，
精度为±０１ＭＰａ）然后与夹带剂混合，在空气浴恒
温箱加热到设定温度（精度为 ±１℃）后，达到超临
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界状态或近临界状态。超临界流体进入萃取柱将党
参中的有效成分萃取出来。当溶解了萃取物的超临
界流体离开萃取柱，通过节流膨胀变为常压气体后，
溶解能力丧失，萃取物析出被收集到接收瓶中，常压
ＣＯ２通过流量计计量后排出。
２．２　党参炔苷的ＨＰＬＣ分析方法
２．２．１　标准曲线的绘制　本实验采用与文献［２］
相同的色谱条件分析测定党参炔苷的含量，流动相
乙腈水（体积比２８∶７２）；流速１ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波
长２６７ｎｍ，进样量２０μＬ。用甲醇为溶剂，使用党参
炔苷对照品分别配制溶度为 ０２，０１，００８，００６，
００４ｇ·Ｌ－１的对照品液。得标准曲线方程 Ｙ＝
１４９９×１０７Ｘ＋３７８０，ｒ＝０９９２８。
２．２．２　党参炔苷含量的测定　将超临界流体萃取
所得的萃取液减压旋转蒸干溶剂，浸膏用甲醇溶解
并定量到 １０ｍＬ，用微孔滤器（０４５μｍ）过滤，用
２．３．１法检测其中党参炔苷含量Ｘ（ｇ·Ｌ－１），乘以稀
释用的溶剂量除以所用原料量即为党参炔苷得率 Ｙ
（ｍｇ·ｇ－１）。
Ｙ＝提取出来的党参炔苷量／ｍｇ实验所用的党参原料量／ｇ
２．２．３　党参原料中的党参炔苷测定［４］　精密称取
党参Ａ样品０５ｇ，置锥形瓶中，依次精密加入无水
乙醇１０，８，８ｍＬ，分别超声提取２５，１５，１０ｍｉｎ，并过
滤。用 ２．２．２方法检测其中党参炔苷含量为
００７２８ｍｇ·ｇ－１。各提取方法的回收率计算：
回收率＝提取出来的党参炔苷量／ｍｇ原料中的党参原料量／ｍｇ×１００％
３　结果和讨论
３．１　不同夹带剂的影响
由图１可知党参炔苷结构为聚乙炔醇通过糖苷
键与１分子葡萄糖组成的化合物，具有一定的极性，
前期实验证明纯超临界ＣＯ２萃取不能将党参炔苷提
取出来。由文献［３］可知党参炔苷是由党参的乙醇
提取物中的正丁醇萃取部位中提取分离出来的，不
同极性和溶解性能的溶剂对党参炔苷有不同的作
用，本实验分别加入８ｍＬ无水乙醇
#
醋酸乙酯和
８０％乙醇和正丁醇作为静态夹带剂，在３０ＭＰａ和
６５℃的条件下萃取２ｈ，考察这几种不同夹带剂对
萃取效果的影响，结果党参炔苷得率分别为００４５，
００２１，００３７，００１５ｍｇ·ｇ－１。
３．２　响应曲面法优化超临界萃取条件。
中心组合实验设计和响应曲面法是一种把回归
和正交结合在一起的实验设计和统计分析方法，可
以以较少的实验次数获得更为科学、充分、有用的信
息，并能将变量间的相互关系以回归方程的形式进
行数量化，而响应面图和等高线图则可将变量间的
交互作用形象地动态化表示出来。本研究使用 Ｄｅ
ｓｉｇｎＥｘｐｅｒｔ软件进行实验设计和统计分析，采用中
心实验设计和二次响应曲面法，以党参炔苷得率为
指标，系统考察温度、压力、夹带剂用量、和萃取时间
等因素对萃取结果的影响及各因素间的相互作用。
本试验采用 ４因素 ３水平的中心试验设计
（ＣＣＤ）进行工艺优化。将各考察因子（真实值）作
为自变量进行编码，－１，０，＋１依次代表低、中、高
水平，再增加＋２，－２两个水平作为特征值，以保证
各因素在试验设计中的可旋转性，具体编码见表１。
表１　因素水平及编码
水平及编码
因素
温度／℃ 压力／ＭＰａ 时间／ｈ夹带剂量／ｍＬ
未编码项 ａ ｂ ｃ ｄ
编码项 Ａ Ｂ Ｃ Ｄ
－２ ４０ １５ ０５ ４
－１ ５０ ２０ １ ６
０ ６０ ２５ １５ ８
１ ７０ ３０ ２ １０
２ ８０ ３５ ２５ １２
　　注：编码值与真实值的关系为Ａ＝（ａ－６０）／１０，Ｂ＝（ｂ－２５）／５，
Ｃ＝（ｃ－１５）／０５，Ｄ＝（ｄ－８）／２。
　　采用中心试验设计进行二次曲面回归的试验设
计表见表２。
　　采用超临界流体萃取党参炔苷的实验结果见表
３。利用 ＤｅｓｉｇｎＥｘｐｅｒｔ软件对表３结果进行多元回
归拟合，得到响应值党参炔苷得率对各自变量的模
型为：
Ｙ×１０３＝４９－００６×Ａ＋３５１０×Ｂ＋０６７×
Ｃ＋９４０×Ｄ－２４９×ＡＢ－０８４×ＡＣ－１０３×ＡＤ－
０９４×ＢＣ＋０９３×ＢＤ－１１７１×ＣＤ－２４３×Ａ２－
２８９×Ｂ２－１０２×Ｃ２－１６４×Ｄ２，式中 Ｙ为党参炔
苷的预测值，Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ分别为各自变量的编码值。
由表２可知，模型Ｐ＝００１５４＜００５，信噪比为
６８５７＞４，说明模型是显著的。失拟项的 Ｐ＝０８５５
２远大于００５，说明失拟项是不显著的，且这种不显
著有８５％的机会是误差造成的。以上结果说明该
模型结果是可靠的。压力项的 Ｐ接近于００５，说明
压力只有５％的可能是不显著的。夹带剂用量 Ｐ＜
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　　 表２　ＣＣＤ试验设计及结果
温度
／℃
压力
／ＭＰａ
时间
／ｈ
夹带剂量
／ｍＬ
党参炔苷得率
／ｍｇ·ｇ－１
５０ ２０ １ ６ ００２１１
７０ ２０ １ ６ ００３４６
５０ ３０ １ ６ ００３３４
７０ ３０ １ ６ ００３４０
５０ ２０ ２ ６ ００２５１
７０ ２０ ２ ６ ００３６６
５０ ３０ ２ ６ ００３８９
７０ ３０ ２ ６ ００２６３
５０ ２０ １ １０ ００５２９
７０ ２０ １ １０ ００４１５
５０ ３０ １ １０ ００５２２
７０ ３０ １ １０ ００６０８
５０ ２０ ２ １０ ００３９６
７０ ２０ ２ １０ ００５０８
５０ ３０ ２ １０ ００５７０
７０ ３０ ２ １０ ００４５０
４０ ２５ １５ ８ ００４２６
８０ ２５ １５ ８ ００３７２
６０ １５ １５ ８ ００２８３
６０ ３５ １５ ８ ００４７７
６０ ２５ ０５ ８ ００３８６
６０ ２５ ２５ ８ ００５２４
６０ ２５ １５ ４ ００２４０
６０ ２５ １５ １２ ００６２０
６０ ２５ １５ ８ ００４４７
６０ ２５ １５ ８ ００４１９
６０ ２５ １５ ８ ００４８６
６０ ２５ １５ ８ ００６８５
６０ ２５ １５ ８ ００４１２
６０ ２５ １５ ８ ００４８８
　　注：表中各自变量均使用真实值而非编码值。
表３　对党参炔苷得率的二次多项式方差分析表
变异源 平方和 自由度 均方 Ｆ Ｐ
模型 ２９８Ｅ０３ １４ ２１３Ｅ０４ ３２４ ００１５４
ＡＴ ８８４Ｅ０８ １ ８８４Ｅ０８ ０００ ０９７１２
ＢＰ ２９６Ｅ０４ １ ２９６Ｅ０４ ４４９ ００５１１
Ｃｔ １０９Ｅ０５ １ １０９Ｅ０５ ０１７ ０６８９１
Ｄｖ ２１２Ｅ０３ １ ２１２Ｅ０３ ３２２９ ＜００００１
ＡＢ ９９６Ｅ０５ １ ９９６Ｅ０５ １５１ ０２３７５
ＡＣ １１２Ｅ０５ １ １１２Ｅ０５ ０１７ ０６８５８
ＡＤ １７３Ｅ０５ １ １７３Ｅ０５ ０２６ ０６１５７
ＢＣ １４３Ｅ０５ １ １４３Ｅ０５ ０２２ ０６４７６
ＢＤ １４０Ｅ０５ １ １４０Ｅ０５ ０２１ ０６５１１
ＣＤ ２１９Ｅ０５ １ ２１９Ｅ０５ ０３３ ０５７２１
Ａ２ １６２Ｅ０４ １ １６２Ｅ０４ ２４７ ０１３７１
Ｂ２ ２３１Ｅ０４ １ ２３１Ｅ０４ ３５０ ００８０８
Ｃ２ ２９０Ｅ０５ １ ２９０Ｅ０５ ０４４ ０５１６９
Ｄ２ ７４２Ｅ０５ １ ７４２Ｅ０５ １１３ ０３０５１
残项 ９８７Ｅ０４ １５ ６５８Ｅ０５ 　 　
失拟项 ４７８Ｅ０４ １０ ４７８Ｅ０５ ０４７ ０８５５２
误差项 ５０９Ｅ０４ ５ １０２Ｅ０４ 　 　
总合 ３９７Ｅ０３ ２９ 　 　 　
图２　夹带剂用量和时间对党参炔苷得率的响应图
图３　温度压力对党参炔苷得率的等高线
００００１，说明该因素极为显著。
由图２可见，夹带剂用量提高可以显著提高党
参炔苷得率，而且夹带剂用量高时，较短的萃取时间
就使响应值达到最高点，说明提高夹带剂用量不但
可以提高党参炔苷得率还加快萃取速度，是各因素
中的关键因素。由图３可知，在保持其他２条件不
变的情况下，党参炔苷得率并不随温度压力的增加
而线性增大，而是有一个最佳条件区域，即温度
５５～６０℃，压力３０ＭＰａ附近这个条件范围，炔苷得
率最高。
３．３　带动态夹带剂的超临界萃取党参炔苷的研究
实验范围内所得的最高党参炔苷得率为００６２０
与用超声法测的原料中含量００７２８相比，回收率为
８５％，说明党参中的党参炔苷并未萃取完全。考虑到
夹带剂对超临界萃取党参炔苷的显著影响，通过动态
加入方式，进一步加大夹带剂的加入量。在３０ＭＰａ、
６０℃、常压 ＣＯ２流速为 ２Ｌ·ｍｉｎ
－１条件下分别以
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０５，０７５，１ｍＬ·ｍｉｎ－１流速动态加入无水乙醇夹带
剂，所得党参炔苷得率萃取时间图见图４。
图４　动态加入夹带剂时党参炔苷得率萃取时间图
由图４可见，前８０ｍｉｎ内党参炔苷已经基本被
萃出，之后变化很小。在该实验条件下，夹带剂比例
较高（０５ｍＬ·ｍｉｎ－１的夹带剂与常压ＣＯ２流速为２Ｌ
·ｍｉｎ－１换算得到夹带剂质量百分比在１０％左右），
已经不能与超临界流体完全互溶。萃取过程是含夹
带剂的超临界混合流体与高压乙醇两者共同作用的
结果。由图可见，０５ｍＬ·ｍｉｎ－１萃取速度较慢收率
较低，０７５ｍＬ·ｍｉｎ－１与１ｍＬ·ｍｉｎ－１二者差别不大。
０５ｍＬ·ｍｉｎ－１时夹带剂含量还不算太高，萃取过程
还是由超临界流体萃取主导；而０７５ｍＬ·ｍｉｎ－１与１
ｍＬ·ｍｉｎ－１时则是由高压乙醇萃取主导。
将４０～６０目的中药党参在动态夹带剂乙醇流
速为１ｍＬ·ｍｉｎ－１，ＣＯ２流速为２Ｌ·ｍｉｎ
－１，３０ＭＰａ，
６０℃下萃取１００ｍｉｎ，党参炔苷得率为００７８６，超
　　
过由超声法测得的原料中含量００７２８，说明带夹带
剂的超临界萃取法较超声萃取更为完全。
４　结论
本实验采用中心实验设计和二次响应曲面法，
系统考察温度、压力、夹带剂用量和时间对萃取结果
的影响及其相互作用，确定了夹带剂用量是提高党
参炔苷生产效率最有效的控制因素。然后利用单因
素实验进一步优化了含动态夹带剂的党参炔苷超临
界萃取工艺。中药党参在动态夹带剂乙醇流速为１
ｍＬ·ｍｉｎ－１，ＣＯ２流速为２Ｌ·ｍｉｎ
－１，３０ＭＰａ，６０℃
下萃取１００ｍｉｎ，党参炔苷得率为００７８６，优于传统
超声萃取法。
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ＥｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｌｏｂｅｔｙｏｌｉｎｆｒｏｍｃｏｄｏｎｏｐｓｉｓｗｉｔｈｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌＣＯ２
ＬＩＵＴｏｎｇｊｕ，ＬＩＳｈｕｆｅｎ，ＭＩＮＪｉａｎｇ，ＢＡＯＸｉａｏｍｅｉ
（ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＧｒｅｅｎＣｈｅｍｉｃａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆＳｔａｔｅＥｄｕｃａｔｉｏｎＭｉｎｉｓｔｒｙ，Ｓｃｈｏｏｌｏｆ
ＣｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＴｉａｎｊｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔｉａｎｊｉｎ３０００７２，Ｃｈｉｎａ）
　　［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｄｅｖｅｌｏｐａｇｒｅｅｎａｎｄｒａｐｉｄｍｅｔｈｏｄｆｏｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｌｏｂｅｔｙｏｌｉｎｆｒｏｍＣｐｉｌｏｓｕｌａ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆ
ｌｏｂｅｔｙｏｌｉｎｆｒｏｍＣｐｉｌｏｓｕｌａｗｉｔｈｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌｃａｒｂｏｎｄｉｏｘｉｄｅｉｎｔｈｅｐｒｅｓｅｎｃｅｏｆｅｔｈａｎｏｌｗａｓｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｅｅｆｅｃｔｓｏｆｐｒｅｓｓｕｒｅ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，
ｖｏｌｕｍｅｏｆｃｏｓｏｌｖｅｎｔａｎｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅｏｎｅｆｉｃｉｅｎｃｙａｎｄｔｈｅｉｒｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓｗｅｒｅｄｉｓｃｕｓｓｅｄ，ｂａｓｅｄｏｎｃｅｎｔｒａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｅｄｅｓｉｇｎ
ａｎｄｒｅｓｐｏｎｓｅｓｕｒｆａｃｅｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ（ＲＳＭ）．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅｋｅｙｅｆｅｃｔｆａｃｔｏｒｗａｓｖｏｌｕｍｅｏｆｃｏｓｏｌｖｅｎｔ．Ｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｙｉｅｌｄｏｆｌｏｂｅｔｙｏｌｉｎｗａｓ
００７８６ｍｇ·ｇ－１ｗｈｅｎＣｐｉｌｏｓｕｌａ（４０６０ｍｅｓｈ）ｗａｓｅｘｔｒａｃｔｅｄａｔ３０ＭＰａ，６０℃ ａｎｄ２Ｌ·ｍｉｎ－１（ａｓＣＯ２ｉｎｎｏｒｍａｌｐｒｅｓｓｕｒｅａｎｄｔｅｍ
ｐｅｒａｔｕｒｅ）ｆｏｒ１００ｍｉｎｕｔｅｓｗｉｔｈｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌＣＯ２ａｎｄ１ｍＬ·ｍｉｎ
－１ｅｔｈａｎｏｌａｓｄｙｎａｍｉｃｃｏｓｏｌｖｅｎｔ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｉｓｒｅｓｕｌｔｉｓｂｅｔｅｒｔｈａｎ
ｔｈａｔｏｂｔａｉｎｅｄｆｒｏｍｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｔｈｅｏｐｔｉｍｉｚｅｄｐｒｏｃｅｓｓｉｓｖａｌｕａｂｌｅｆｏｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｌｏｂｅｔｙｏｌｉｎｆｒｏｍＣｐｉｌｏｓｕｌａ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌｆｌｕｉｄｅｘｔｒａｃｔ；Ｃｏｄｏｎｏｐｓｉｓｐｉｌｏｓｕｌａ；ｌｏｂｅｔｙｏｌｉｎ；ｒｅｓｐｏｎｓｅｓｕｒｆａｃｅｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ；ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅ
ｍｅｄｉｃｉｎｅ
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