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Phenolic and phenylethanoidal glycosides from branch of Fraxinus sieboldiana

小蜡树的酚苷及苯乙醇苷类成分



全 文 :·化学·
小蜡树的酚苷及苯乙醇苷类成分
林生,刘明韬,王素娟,李帅,杨永春,石建功
(中国医学科学院 北京协和医学院 药物研究所 中草药物质基础与资源利用
教育部重点实验室,北京 100050)
[摘要] 目的:系统研究小蜡树Fraxinuxsieboldiana枝乙醇提取物的化学成分。方法:运用正相和反相硅胶、大孔吸附树
脂、凝胶、反相高效液相等色谱方法进行分离;应用包括一维和二维 NMR等波谱方法鉴定化合物的结构。结果:从小蜡树枝
的乙醇提取物水相部位分离得到4个酚苷和12个苯乙醇苷类成分,分别鉴定为:2,6二甲氧基对苯二酚4OβD吡喃葡萄
糖苷(1),2,6二甲氧基对苯二酚1OβD吡喃葡萄糖苷(2),4羟基3甲氧基苯基βD吡喃葡萄糖苷(3),4羟基3甲氧基
苯基βD吡喃木糖基(1→6)OβD吡喃葡萄糖苷(4),osmanthusideH(5),2(4羟基苯基)乙基βD吡喃葡萄糖苷(6),2(3,
4二羟基苯基)乙基βD吡喃葡萄糖苷(7),2羟基4(2羟基乙基)苯基βD吡喃葡萄糖苷(8),4(2羟基乙基)2甲氧基苯
基βD吡喃葡萄糖苷(9),calceolariosideB(10),calceolariosideA(11),feruginosideA(12),isolugrandoside(13),类叶升麻苷
(14),chiritotosideC(15)和plantasisoside(16)。结论:化合物1~4,9,12,13和16为首次从该属植物中分离得到。
[关键词] 小蜡树;化学成分;酚苷;苯乙醇苷
[收稿日期] 20091228
[基金项目] 长江学者和创新团队发展计划“PCSIRT”(IRT0514);
新世纪优秀人才支持计划(NCET)
[通信作者]  石建功,Tel:(010)83154789,Fax:(010)63017757,
Email:shijg@imm.ac.cn
  小蜡树Fraxinuxsieboldiana,又称庐山腀,其茎
皮在我国江西当地和日本作为中药秦皮使用,具有
利尿、止咳平喘、治疗风湿关节炎的作用[1]。为了
从该植物中获得可供新药先导物筛选发现的结构多
样性天然产物,作者对采自江西庐山的小蜡树枝化
学成分进行了系统的研究。前文对其乙醇提取物中
得到的9个新化合物结构以及香豆素类成分及其生
物活性进行了详细报道[23],本文报道 4个酚苷
(1~4)和12个苯乙醇苷类成分(5~16)的结构鉴
定。其中,化合物1~4,9,12,13和16为首次从该
属植物中发现。
1 材料
Inova500核磁共振仪,MicromassAutospecUlti
maETOF质谱仪。Waters600高效液相色谱仪(Al
tech公 司 EconosphereC18制 备 柱,250mm ×
22mm×10μm,Waters2478型检测器)。中压液相
色谱仪(BúchiGradientFormerB687,RpC18,43~
60μ,Pharmacia公司)。闪式快速分离系统(Sq
16x,combiFlash,RpC18,40~60μ,MicronSilicag
Gel,Isco公司)。SephadexLH20为Pharmacia公司
产品。RA型大孔树脂为北京化工七厂产品。柱色
谱硅胶(200300目)和薄层色谱硅胶 GF254(60
型)均为青岛海洋化工厂生产。
小蜡树药材于2004年8月采自江西省庐山,由
中国医学科学院药物研究所马林副教授鉴定为小蜡
树F.sieboldiana的枝及枝皮,标本现存于中国医学
科学院药物研究所植物标本库,标本号为 No.
ZH02272。
2 提取分离
药材的提取和初步分离过程见文献[3]。C部
分经正相硅胶柱色谱分离,氯仿甲醇(90∶10~0∶
100)梯度洗脱,得到5个亚组分(C1~C5)。C1亚组
分经SephadexLH20柱色谱纯化(甲醇),再经反相
HPLC制备纯化 (甲醇水 25∶75)得到化合物 1
(157mg),2(122mg),3(91mg)。C2亚组分经
反相HPLC制备纯化(甲醇水 25∶75)得到化合物6
(629mg),7(453mg)和8(162mg)。C3亚组分
经SephadexLH20柱色谱(甲醇水 70∶30)和反相
HPLC制备(甲醇水 20∶80)反复纯化,得到化合物
4(2058mg)和5(115mg)。
30%乙醇洗脱部分用反相中压液相色谱分离,
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0~100%甲醇梯度洗脱,一共得到 F~J5个洗脱部
分。G部分经正相硅胶柱色谱分离,氯仿甲醇
(100∶0~50∶50)梯度洗脱,得到3个亚组分(G1~
G3)。G1亚组分经反相 HPLC制备纯化 (甲醇水
30∶70)得到化合物9(101mg)。G2亚组分经Seph
adexLH20柱色谱反复纯化(甲醇),再经反相
HPLC制备纯化(甲醇水 30∶70)得到化合物 10
(2158mg),11(225mg),12(130mg),13
(110mg),14(168mg)和15(116mg)。I部分
经正相硅胶柱色谱分离,氯仿甲醇(100∶0~50∶50)
梯度洗脱,得到3个亚组分 (I1~I3)。I2亚组分经
反相HPLC制备纯化(甲醇水30∶70)得到化合物
16(40mg)。
3 结构鉴定
化合物 1 白色粉末;ESIMSm/z355[M+
Na]+,371[M +K]+;1HNMR(DMSOd6,500
MHz)δ:630(2H,s,H3,5),460(1H,d,J=80
Hz,H1′),320(1H,dd,J=80,85Hz,H2′),
324(1H,dd,J=85,85Hz,H3′),309(1H,dd,
J=90,85Hz,H4′),335(1H,m,H5′),370
(1H,dd,J=115,20Hz,H6a′),339(1H,dd,
J=115,50Hz,H6b′),365(6H,2×OMe),776
(1H,s,OH1)。13CNMR(DMSOd6,125MHz)δ:
1304(C1),1481(C2,6),950(C3,5),1503
(C4),1016(C1′),733(C2′),768(C3′),
701(C4′),772(C5′),609(C6′),558(2×
OMe)。以上数据与文献报道2,6二甲氧基对苯二
酚4OβD吡喃葡萄糖苷(2,6dimethoxyphydro
quinone4OβDglucopyranoside)的数据一致[4]。
化合物 2 白色粉末;ESIMSm/z355[M+
Na]+,371[M+K]+;1HNMR(DMSOd6,500
MHz)δ:605(2H,s,H3,5),463(1H,d,J=75
Hz,H1′),319(1H,dd,J=75,85Hz,H2′),
316(1H,dd,J=85,85Hz,H3′),310(1H,dd,
J=90,85Hz,H4′),300(1H,m,H5′),359
(1H,dd,J=115,20Hz,H6a′),341(1H,dd,
J=115,50Hz,H6b′),367(6H,2×OMe),919
(1H,s,OH4)。13CNMR(DMSOd6,125MHz)δ:
1275(C1),1531(C2,6),938(C3,5),1538
(C4),1034(C1′),741(C2′),764(C3′),
700(C4′),769(C5′),610(C6′),561(2×
OMe)。以上数据与文献报道2,6二甲氧基对苯二
酚1OβD吡喃葡萄糖苷(2,6dimethoxyphydro
quinone1OβDglucopyranoside)的数据一致[5]。
化合物 3 白色粉末;ESIMSm/z325[M+
Na]+;1HNMR(DMSOd6,500MHz)δ:667(1H,
d,J=25Hz,H2),663(1H,d,J=90Hz,H5),
644(1H,dd,J=90,25Hz,H6),465(1H,d,
J=75Hz,H1′),319(1H,dd,J=75,85Hz,H
2′),324(1H,dd,J=85,85Hz,H3′),317
(1H,dd,J=90,85Hz,H4′),323(1H,m,H
5′),365(1H,dd,J=115,20Hz,H6a′),342
(1H,dd,J=115,50Hz,H6b′),372(3H,
OMe),850(1H,s,OH4)。13CNMR(DMSOd6,
125MHz)δ:1507(C1),1017(C2),1478(C
3),1413(C4),1152(C5),1079(C6),1025
(C1′),733(C2′),771(C3′),699(C4′),
767(C5′),608(C6′),555(OMe)。以上数据
与文献报道4羟基3甲氧基苯基 βD吡喃葡萄糖
苷(4hydroxy3methoxyphenylβDglucopyranoside)
的数据一致[6]。
化合物 4 白色粉末;ESIMSm/z457[M+
Na]+,473[M+K]+;1HNMR(DMSOd6,500MHz)
δ:661(1H,d,J=25Hz,H2),664(1H,d,J=
85Hz,H5),649(1H,dd,J=85,25Hz,H6),
463(1H,d,J=80Hz,H1′),415(1H,d,J=75
Hz,H1″),372(3H,OMe),848(1H,s,OH4)。
13CNMR(DMSOd6,125MHz)δ:1507(C1),
1023(C2),1478(C3),1413(C4),1154(C
5),1079(C6),1016(C1′),733(C2′),765
(C3′),699(C4′),766(C5′),686(C6′),
1041(C1″),732(C2″),757(C3″),696(C
4″),656(C5″),555(OMe)。以上数据与文献报
道4羟基3甲氧基苯基βD吡喃木糖基(1→6)O
βD吡喃葡萄糖苷[4hydroxy3methoxyphenylβD
xylopyranosyl(1→6)OβDglucopyranoside]的数据
一致[6]。
化合物 5 无色透明胶状物;ESIMSm/z455
[M+Na]+,471[M+K]+,431[M-H]-;1HNMR
(DMSOd6,500MHz)δ:703(2H,d,J=80Hz,H
2,6),665(2H,d,J=80Hz,H3,5),272(2H,t,
J=70Hz,H27),382(1H,m,H8a),356(1H,
m,H8b),416(1H,d,J=75Hz,H1′),293
(1H,dd,J=85,80Hz,H2′),311(1H,dd,J=
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90,85Hz,H3′),298(1H,dd,J=90,85Hz,
H4′),323(1H,m,H5′),383(1H,dd,J=115,
30Hz,H6a′),340(1H,dd,J=115,70Hz,H
6b′),484(1H,d,J=30Hz,H1″),374(1H,d,
J=30Hz,H2″),383(1H,d,J=95Hz,H4a″),
357(1H,d,J=95Hz,H4b″),332(2H,d,J=
50Hz,H5″),912(1H,s,OH4),445~503
(6H,6×OH);13CNMR(DMSOd6,125MHz)δ:
1286(C1),1297(C2,6),1150(C3,5),
1557(C4),348(C7),699(C8),1028(C
1′),733(C2′),766(C3′),702(C4′),755
(C5′),677(C6′),1092(C1″),758(C2″),
788(C3″),732(C4″),631(C5″)。以上数据
与文献报道osmanthusideH的数据一致[7]。
化合物6 无色透明胶状物;ESIMSm/z323
[M+Na]+;NMR数据与文献报道2(4羟基苯基)
乙基βD吡喃葡萄糖苷[2(4hydroxyphenyl)ethyl
βDglucopyranoside]的数据一致[8]。
化合物7 棕色胶状物;ESIMSm/z339[M+
Na]+;1HNMR(DMSOd6,500MHz)δ:660(1H,
brs,H2),661(1H,d,J=80Hz,H5),646
(1H,dd,J=80,25Hz,H6),265(2H,t,J=70
Hz,H27),385(1H,m,H8a),353(1H,m,H
8b),415(1H,d,J=75Hz,H1′),295(1H,dd,
J=85,80Hz,H2′),314(1H,dd,J=85,85
Hz,H3′),303(1H,dd,J=90,85Hz,H4′),
307(1H,m,H5′),365(1H,dd,J=115,20
Hz,H6a′),343(1H,dd,J=115,60Hz,H6b′);
13CNMR(DMSOd6,125MHz)δ:1293(C1),
1155(C2),1450(C3),1435(C4),1163(C
5),1195(C6),351(C7),700(C8),1029
(C1′),735(C2′),769(C3′),701(C4′),
768(C5′),611(C6′)。以上数据与文献报道2
(3,4二羟基苯基)乙基βD吡喃葡萄糖苷[2(3,4
dihydroxyphenyl)ethylβDglucopyranoside]的数据一
致[9]。
化合物8 棕色胶状物;ESIMSm/z339[M+
Na]+,355[M+K]+;NMR(DMSOd6,500MHz)数
据与文献报道2羟基4(2羟基乙基)苯基 βD吡
喃葡萄糖苷[2hydroxy4(2hydroxyethyl)phenylβ
Dglucopyranoside]的数据一致[10]。
化合物9 棕色胶状物;ESIMSm/z355[M+
Na]+;1HNMR(MeOHd4,500MHz)δ:683(1H,
d,J=20Hz,H2),702(1H,d,J=80Hz,H5),
670(1H,dd,J=80,20Hz,H6),271(2H,t,J=
70Hz,H27),367(2H,J=70Hz,H28),476
(1H,d,J=70Hz,H1′),342(1H,dd,J=85,80
Hz,H2′),341(1H,dd,J=90,85Hz,H3′),
329(1H,dd,J=90,85Hz,H4′),330(1H,m,
H5′),381(1H,dd,J=125,25Hz,H6a′),363
(1H,dd,J=125,50Hz,H6b′),380(3H,s,
OMe);13CNMR(MeOHd4,125MHz)δ:1355(C
1),1146(C2),1508(C3),1464(C4),1183
(C5),1225(C6),398(C7),643(C8),1031
(C1′),750(C2′),782(C3′),714(C4′),779
(C5′),625(C6′),567(OMe)。以上数据与文献
报道4(2羟基乙基)2甲氧基苯基 βD吡喃葡萄
糖苷[4(2hydroxyethyl)2methoxyphenylβDgluco
pyranoside]的数据一致[11]。
化合物 10 黄色胶状物。ESIMSm/z501
[M+Na]+;1HNMR(DMSOd6,500MHz)δ:660
(1H,d,J=15Hz,H2),657(1H,d,J=80Hz,H
5),645(1H,dd,J=80,15Hz,H6),265(2H,t,
J=70Hz,H27),379(1H,m,H8a),358(1H,m,
H8b),423(1H,d,J=80Hz,H1′),299(1H,
dd,J=85,80Hz,H2′),313(1H,dd,J=95,90
Hz,H3′),317(1H,dd,J=90,85Hz,H4′),
340(1H,m,H5′),439(1H,brd,J=115Hz,H
6a′),415(1H,dd,J=115,60Hz,H6b′),704
(1H,d,J=15Hz,H2″),674(1H,d,J=80Hz,
H5″),696(1H,dd,J=80,15Hz,H6″),746
(1H,d,J=160Hz,H7″),627(1H,d,J=160
Hz,H8″);13CNMR(DMSOd6,125MHz)δ:1292
(C1),1158(C2),1450(C3),1435(C4),
1163(C5),1195(C6),352(C7),702(C8),
1030(C1′),734(C2′),765(C3′),701(C
4′),738(C5′),636(C6′),1255(C1″),1138
(C2″),1456(C3″),1485(C4″),1155(C5″),
1214(C6″),1453(C7″),1149(C8″),1666(C
9″)。以上数据与文献报道 calceolariosideB的数据
一致[12]。
化合物 11 黄色胶状物。ESIMSm/z501
[M+Na]+;1HNMR(DMSOd6,500MHz)δ:661
(1H,brs,H2),662(1H,d,J=80Hz,H5),648
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(1H,brd,J=80Hz,H6),265(2H,t,J=70Hz,
H27),388(1H,m,H8a),358(1H,m,H8b),
427(1H,d,J=80Hz,H1′),308(1H,dd,J=
85,85Hz,H2′),344(1H,dd,J=95,90Hz,
H3′),463(1H,dd,J=90,95Hz,H4′),340
(1H,m,H5′),339(1H,brd,J=115Hz,H6a′),
332(1H,dd,J=115,65Hz,H6b′),704(1H,
brs,H2″),675(1H,d,J=80Hz,H5″),699
(1H,brd,J=80Hz,H6″),746(1H,d,J=160
Hz,H7″),623(1H,d,J=160Hz,H8″);13C
NMR(DMSOd6,125MHz)δ:1291(C1),1158
(C2),1450(C3),1436(C4),1163(C5),
1195(C6),351(C7),702(C8),1028(C
1′),736(C2′),747(C3′),713(C4′),741
(C5′),609(C6′),1254(C1″),1139(C2″),
1458(C3″),1486(C4″),1155(C5″),1213
(C6″),1454(C7″),1149(C8″),1659(C
9″)。以上数据与文献报道 calceolariosideA的数据
一致[12]。
化合物 12 棕色胶状物。ESIMSm/z663
[M+Na]+;1HNMR(DMSOd6,500MHz)δ:654
(1H,brs,H2),653(1H,brd,J=80Hz,H5),
640(1H,brd,J=80Hz,H6),256(2H,t,J=
70Hz,H27),379(1H,m,H8a),354(1H,m,
H8b),447(1H,d,J=80Hz,H1′),423(1H,
d,J=75Hz,H1″),706(1H,brd,H2),676
(1H,d,J=80Hz,H5),700(1H,brd,J=80
Hz,H6),747(1H,d,J=160Hz,H7),626
(1H,d,J=160Hz,H8);13CNMR(DMSOd6,
125MHz)δ:1292(C1),1158(C2),1449(C
3),1435(C4),1163(C5),1196(C6),350
(C7),698(C8),1001(C1′),742(C2′),
757(C3′),701(C4′),734(C5′),683(C
6′),1034(C1″),735(C2″),769(C3″),700
(C4″),767(C5″),610(C6″),1256(C1),
1142(C2),1456(C3),1484(C4),1154
(C5),1213(C6),1451(C7),1149(C
8),1657(C9)。以上数据与文献报道ferugino
sideA的数据一致[13]。
化合物 13 棕色胶状物。ESIMSm/z663
[M+Na]+;1HNMR(DMSOd6,500MHz)δ:662
(1H,brs,H2),661(1H,brd,J=80Hz,H5),
648(1H,brd,J=80Hz,H6),267(2H,t,J=
70Hz,H27),386(1H,m,H8a),354(1H,m,
H8b),433(1H,d,J=80Hz,H1′),422(1H,
d,J=75Hz,H1″),704(1H,brd,H2),674
(1H,d,J=80Hz,H5),699(1H,brd,J=80
Hz,H6),745(1H,d,J=160Hz,H7),625
(1H,d,J=160Hz,H8);13CNMR(DMSOd6,
125MHz)δ:1292(C1),1158(C2),1448(C
3),1436(C4),1164(C5),1195(C6),350
(C7),701(C8),1025(C1′),714(C2′),
775(C3′),679(C4′),753(C5′),681(C
6′),1034(C1″),735(C2″),769(C3″),700
(C4″),767(C5″),610(C6″),1255(C1),
1146(C2),1457(C3),1485(C4),1155
(C5),1211(C6),1450(C7),1148(C
8),1661(C9)。以上数据与文献报道 isolug
randoside的数据一致[14]。
化合物 14 棕色胶状物。ESIMSm/z663
[M+Na]+;NMR(DMSOd6)数据与文献报道类叶
升麻苷(acteoside)的数据一致[15]。
化合物 15 黄色胶状物。ESIMSm/z663
[M+Na]+,679[M+K]+;NMR(DMSOd6)数据
与文献报道chiritotosideC的数据一致[12]。
化合物 16 黄色胶状物。ESIMSm/z475
[M-H]-;1HNMR(MeOHd4,500MHz)δ:685
(1H,d,J=20Hz,H2),673(1H,d,J=80Hz,H
5),670(1H,dd,J=80,20Hz,H6),456(1H,
dd,J=110,30Hz,H7),395(1H,dd,J=135,30
Hz,H8a),364(1H,dd,J=135,110Hz,H8b),
446(1H,d,J=80Hz,H1′),320(1H,dd,J=
100,80Hz,H2′),362(1H,dd,J=100,100Hz,
H3′),346(1H,dd,J=100,100Hz,H4′),373
(1H,m,H5′),455(1H,dd,J=120,20Hz,H
6a′),434(1H,dd,J=120,60Hz,H6b′),705
(1H,d,J=20Hz,H2″),678(1H,d,J=80Hz,H
5″),695(1H,dd,J=80,20Hz,H6″),758(1H,
d,J=160Hz,H7″),630(1H,d,J=160Hz,H
8″);13CNMR(MeOHd4,125MHz)δ:1299(C1),
1147(C2),1465(C3),1463(C4),1165(C
5),1194(C6),788(C7),728(C8),995(C
1′),809(C2′),750(C3′),720(C4′),772(C
5′),645(C6′),1277(C1″),1150(C2″),1468
·599·
第35卷第8期
2010年4月
                             
Vol35,Issue 8
April,2010
(C3″),1496(C4″),1161(C5″),1231(C6″),
1473(C7″),1150(C8″),1690(C9″)。以上数
据与文献报道 plantasisoside的数据一致,并通过
DEPT,HSQC和HMBC谱对其数据进行了准确的归
属[16]。
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Phenolicandphenylethanoidalglycosidesfrombranch
ofFraxinussieboldiana
LINSheng,LIUMingtao,WANGSujuan,LIShuai,YANGYongchun,SHIJiangong
(KeyLaboratoryofBioactiveSubstancesandResourcesUtilizationofChineseHerbalMedicine,MinistryofEducation,
InstituteofMateriaMedica,ChineseAcademyofMedicalSciencesandPekingUnionMedicalColege,Beijing100050,China)
  [Abstract] Objective:ToinvestigatechemicalconstituentsfromanethanolicextractofthebranchofFraxinussieboldiana
(Oleaceaue).Method:Theconstituentswereisolatedandpurifiedbyacombinationofvariouschromatographictechniquesincluding
silicagel,macroporousadsorbentresin,SephadexLH20,andpreparativeHPLC.Structuresoftheisolateswereelucidatedbyspectro
scopicmethodsincluding1Dand2DNMRandMStechniques.Result:Fourphenolicandtwelvephenylethanoidalglycosideswereob
tainedandtheirstructureswereidentifiedas2,6dimethoxyphydroquinone4OβDglucopyranoside(1),2,6dimethoxyphydro
quinone1OβDglucopyranoside(2),4hydroxy3methoxyphenylβDglucopyranoside(3),4hydroxy3methoxyphenylβDxy
lopyranosyl(1→6)OβDglucopyranoside(4),osmanthusideH(5),2(4hydroxyphenyl)ethylβDglucopyranoside(6),2(3,
4dihydroxyphenyl)ethylβDglucopyranoside(7),2hydroxy4(2hydroxyethyl)phenylβDglucopyranoside(8),4(2hydroxy
ethyl)2methoxyphenylβDglucopyranoside(9),calceolariosideB(10),calceolariosideA(11),feruginosideA(12),isolugran
doside(13),acteoside(14),chiritotosideC(15),andplantasisoside(16).Conclusion:Compounds14,9,12,13and16were
obtainedfromthegenusFraxinusforthefirsttime.
[Keywords] Fraxinussieboldiana;chemicalconstituents;phenolicglycosides;phenylethanoidglycosides
doi:10.4268/cjcmm20100811
[责任编辑 王亚君]
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第35卷第8期
2010年4月
                             
Vol35,Issue 8
April,2010