全 文 :新鲜旱芹的化学成分研究
周凯岚,毋冰,庄玉磊,丁丽琴,刘志辉,邱峰
(沈阳药科大学 天然药物化学教研室,辽宁 沈阳 110016)
[摘要] 目的:对新鲜旱芹 Apiumgraveolens全草进行化学成分研究。方法:应用硅胶柱色谱、制备薄层色谱、Sephadex
LH20,ODS,高效液相色谱等方法进行分离纯化,通过波谱解析进行结构鉴定。结果:从新鲜旱芹70%乙醇提取物中分离得
到20个化合物,分别鉴定为发卡二醇(1),(9Z)1,9heptadecadiene4,6diyne3,8,11triol(2),oplopandiol(3),香柑内酯(4),
5,8二甲氧基补骨脂素(5),异芩皮素(6),丁香酚(7),反式阿魏酸(8),反式桂皮酸(9),阿魏酸对羟基苯乙醇酯(10),绿原
酸(11),5反式香豆酰基奎宁酸(12),瑟丹内酯(13),lunularin(14),lunularicacid(15),2(3甲氧基4羟基苯基)丙烷1,3二
醇(16),D阿洛糖(17),β谷甾醇(18),苯甲酸(19)和丁二酸(20)。结论:化合物2,3,6,10,12,14~17系首次从该属植物中
分离得到。
[关键词] 新鲜旱芹;化学成分;分离鉴定
[收稿日期] 20081126
[通信作者] 邱峰,Tel:(024)23986463,Fax:(024)23993994,E
mail:fengqiu2000@tom.com
旱芹 ApiumgraveolensL.为伞形科芹属植物旱
芹的新鲜全草,一年或两年生草本,古称堇葵,现又
称药芹、香芹、蒲芹,兰鸭儿芹等[1],以嫩茎、叶(未
开花者)供食用和药用,其根也作药用,具有降压、
降血脂、开胃、利尿、调经及提高记忆等功效,主治高
血压、高胆固醇血症、乳糜尿等[24]。迄今为止,从旱
芹籽中分离得到多种化合物,主要有挥发油类[56]、
苯酞类[7]、黄酮类[8]、香豆素类[912]、倍半萜类[13]、
芳香苷类[13]等成分,而未见对新鲜旱芹的研究报
道。作者对该植物的新鲜全草的70%乙醇提取物
进行了研究,从中共分离鉴定出20个化合物,其中
2,3,6,10,12,14~17系首次从该属植物中分离
得到。
1 仪器与试药
Agilent1100LC离子阱质谱测定仪(Agilent,
USA);BrukerARX300型核磁共振仪(TMS为内
标);Waters600高效液相色谱仪,PDA996检测器,
Milennium32色谱工作站 (Waters,USA);Intersil
PrepODS柱(20mm×250mm)(GLscienceInc.);
薄层色谱硅胶和柱色谱硅胶(青岛海洋化工有限公
司);聚酰胺填料(上海方腾化工试剂有限公司);
SephadexLH20,ODS填料(Pharmacia公司);反相
C18板(Merk公司);色谱纯(天津康科德科技有限公
司);分析纯(天津大茂试剂有限公司);水为实验室
自制。
新鲜旱芹于2007年7月16日采自沈阳,经沈
阳药科大学中药鉴定教研室孙启时教授鉴定为伞形
科植物旱芹 A.graveolens,标本(20070716)保存在
沈阳药科大学天然药物化学教研室。
2 提取分离
新鲜旱芹全草100kg切成小段后,用70%的乙
醇回流提取2次,每次2h,合并提取液,减压浓缩回
收至无醇味,混悬于20L水中,依次用等体积的石
油醚和醋酸乙酯萃取3次,得石油醚萃取物17g,醋
酸乙酯萃取物70g和水提取物。取石油醚层萃取
物上硅胶柱色谱,以三氯甲烷丙酮梯度洗脱,经制
备薄层和重结晶得到化合物4(5mg),5(6mg),7
(32mg),13(7mg),18(10mg),19(65mg),20(40
mg)。醋酸乙酯萃取部分经硅胶柱色谱,三氯甲烷
甲醇梯度洗脱后,所得各流分经 SephadexLH20,
ODS和高效液相色谱得到化合物1(80mg),2(12
mg),3(6mg),6(41mg),8(9mg),9(26mg),10
(10mg),14(7mg),15(8mg),16(10mg)。水层经
大孔吸附树脂和聚酰胺柱色谱,得到化合物 11(8
mg),12(19mg),17(10mg)。
3 结构鉴定
化合物2 浅黄色油状物(甲醇),香草醛浓
H2SO4显色为黑色斑点(三氯甲烷甲醇 13∶1,Rf
04);UV(MeOH)nm:206,230,244,258;ESIMS
m/z229[M +Na]+,575[2M +Na]+。1HNMR
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(CDCl3,300MHz)δ:542(1H,d,J=170Hz,H
1a),522(1H,d,J=102Hz,H1b),590(1H,
ddd,J=52,101,164Hz,H2),489(1H,brd,
J=51Hz,H3),526(1H,brd,J=81Hz,H8),
559(1H,m,H9),555(1H,m,H10),440(1H,br
q,J=62Hz,H11),158(1H,m,H12a),145
(1H,m,H12b),125(8H,m,H13~H16),086
(t,J=68Hz,H17)。13CNMR(CDCl3,75MHz)δ:
1176(C1),1360(C2),634(C3),793(C4),
702(C5),693(C6),788(C7),678(C8),
1296(C9),1359(C10),585(C11),371(C
12),319(C13),294(C14),253(C15),228
(C16),143(C17)。以上数据与文献[14]报道的
一致,因此化合物2鉴定为(9Z)1,9heptadecadiene
4,6diyne3,8,11triol。
化合物3 浅黄色油状物(甲醇),香草醛浓
H2SO4显色为黑色斑点(环己烷醋酸乙酯 1∶1,Rf
05);UV(MeOH)nm:204,230,241,255,269,283。
1HNMR(CDCl3,300MHz)δ:099(3H,t,J=74
Hz,H1),172(2H,m,H2),436(1H,t,J=64
Hz,H3),518(1H,brd,J=81Hz,H8),559
(1H,m,H9),550(1H,m,H10),209(2H,dq,
J=69,15Hz,H11),136(1H,m,H12),125
(10H,m,H13~H16),086(3H,t,J=69Hz,H
17)。13CNMR(CDCl3,75MHz)δ:95(C1),308
(C2),643(C3),809(C4),692(C5),692(C
6),794(C7),588(C8),1348(C9),1279(C
10),279(C11),295(C12),293(C13),294
(C14),229(C15),320(C16),143(C17)。以
上数据与文献[15]一致,因此鉴定化合物3为oplo
pandiol。
化合物6 无色针晶(丙酮),mp142~145℃,
三氯化铁铁氰化钾反应显阳性。UV(MeOH)nm:
212,342。ESIMSm/z245[M+Na]+,221[M-
H]-。1HNMR(DMSOd6,300MHz)δ:990(1H,
s,OH),703(1H,s,H5),790(1H,d,J=96Hz,
H4),624(1H,d,J=96Hz,H3),383(6H,s,
2×OCH3);
13CNMR(DMSOd6,75MHz)δ:1602
(C2),1120(C3),1448(C4),1044(C5),
1456(C6),1440(C7),1346(C8),1430(C
4a),1102(C8a),607(C6OCH3),561(C8
OCH3)。以上数据与文献[16]一致,因此化合物6
鉴定为异芩皮素(isofraxidin)。
化合物10 白色针晶(甲醇),mp90~95℃,
三氯化铁铁氰化钾反应阳性。UV(MeOH)nm:
219,292,325。ESIMSm/z337[M+Na]+,313
[M-H]-,627[2M-H]-。1HNMR(DMSOd6,300
MHz)δ:731(1H,brs,H2),679(1H,d,J=81
Hz,H5),709(1H,brd,J=81Hz,H6),753
(1H,d,J=159Hz,H7),644(1H,d,J=159Hz,
H8),707(2H,d,J=84Hz,H2′,6′),669(2H,
d,J=84Hz,H3′,5′),283(2H,t,J=69Hz,H
7′),426(2H,t,J=69Hz,H8′),381(3H,s,
OCH3)。
13CNMR(DMSOd6,75MHz)δ:1256(C
1),1112(C2),1479(C3),1494(C4),1144
(C5),1232(C6),1451(C7),1155(C8),
1666(C9),1280(C1′),1298(C2′),1152(C
3′),1559(C4′),1152(C5′),1298(C6′),337
(C7′),647(C8′),557(OCH3)。结合HMBC和
溶剂效应,参考文献[17],化合物10鉴定为阿魏酸
对羟基苯乙醇酯(phydroxyphenylethanolferulate)。
化合物12 灰色粉末(甲醇),三氯化铁铁氰
化钾反应阳性,溴酚蓝反应显阳性。UV(MeOH)
nm:232,312。ESIMSm/z361[M+Na]+,337[M-
H]。1HNMR(DMSOd6,300MHz)δ:178(1H,dd,
J=91,138Hz,H2a),196(1H,brd,J=138Hz,
H2b),392(1H,brd,J=28Hz,H3),356(1H,
brd,J=92Hz,H4),507(1H,m,H5),200(2H,
m,H6),627(1H,d,J=160Hz,H8′),749(1H,
d,J=160Hz,H7′),753(2H,d,J=83Hz,H3′,
5′),680(2H,d,J=83Hz,H2′,6′)。13CNMR
(DMSOd6,75MHz)δ:736(C1),372(C2),705
(C3),709(C4),682(C5),364(C6),1750
(C7),1598(C4′),1252(C1′),1303(C2′,
6′),1158(C3′,5′),1446(C7′),1145(C8′),
1658(C9′)。参考文献[18],结合溶剂效应,化合
物12鉴定为5反式香豆酰基奎宁酸(5ptranscou
maroylquinicacid)。
化合物14 白色针晶(甲醇),三氯化铁铁氰
化钾反应阳性。UV(MeOH)nm:204,220,274。ESI
MSm/z241[M+Na]+。1HNMR(CD3OD,300MHz)
δ:667(2H,d,J=80Hz,H2,6),696(2H,d,J=
80Hz,H3,5),660(1H,s,H2′),661(1H,d,J=
78Hz,H4′),703(1H,t,J=78Hz,H5′),664
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(1H,m,H6′),276(4H,s,H7,8)。13CNMR(CD3
OD,75MHz)δ:1565(C1),1161(C2,6),1305
(C3,5),1341(C4),383(C7),396(C8),
1449(C1′),1165(C2′),1583(C3′),1138(C
4′),1313(C5′),1210(C6′)。以上数据与文献
[19]一致,因此化合物14鉴定为lunularin。
化合物 15 无色针晶(甲醇),mp193~195
℃,三氯化铁铁氰化钾反应阳性,溴酚蓝反应阳性,
三氯化铝反应生成黄色沉淀,该沉淀在365nm下有
强的黄色荧光;ESIMSm/z257[M-H]-。1HNMR
(CD3OD,300MHz)δ:665(2H,brd,J=84Hz,H
2,6),697(2H,brd,J=84Hz,H3,5),274(2H,
m,H7),309(2H,m,H8),665(1H,dd,J=80,
20Hz,H4′),722(1H,dd,J=79,80Hz,H5′),
674(1H,dd,J=82,20Hz,H6′)。13CNMR
(CD3OD,75MHz)δ:1566(C1),1162(C2,6),
1304(C3,5),1345(C4),388(C7),398(C
8),1345(C1′),1461(C2′),1627(C3′),1153
(C4′),1234(C5′),1162(C6′)。以上数据与文
献[20]一致,因此化合物15鉴定为lunularicacid。
化合物16 白色粉末(甲醇),三氯化铁铁氰
化钾反应阳性,香草醛浓 H2SO4显紫红色。UV
(MeOH)nm:220,276。ESIMSm/z221[M +
Na]+。1HNMR(CD3OD,300MHz)δ:683(1H,d,
J=15Hz,H2),674(1H,d,J=81Hz,H5),
668(1H,d,J=81Hz,H6),285(1H,m,H7),
373(1H,dd,J=108,65Hz,H8a),382(1H,dd,
J=108,69Hz,H8b),373(1H,dd,108,65
Hz,H9a),382(1H,dd,J=108,69Hz,H9b),
385(3H,s,H10)。13CNMR(CD3OD,75MHz)δ:
1337(C1),1131(C2),1490(C3),1464(C
4),1163(C5),1218(C6),518(C7),652(C
8),652(C9),565(C10)。以上数据与文献[21]
一致,因此化合物 16鉴定为 2(3methoxy4
hydroxyphenol)propane1,3diol。
化合物17 无色针晶(水),溴酚蓝乙醇溶液
显蓝色,mp163~164℃。EIMSm/z(%)183[M+
H]+(028),146(21),133(169),115(28),103
(496),85(108),74(431),73(100),61
(752)。1HNMR(CDCl3,600MHz)δ:35~39
(8H,m,H2~H5)。13CNMR(CDCl3,75MHz)δ:
736(C3,C4),723(C2,C5),659(C1,C6)。
以上数据与文献[22]一致,因此化合物17鉴定为
D阿洛糖(Dalitol)。
化合物1,4,5,7~9,11,13,18~20 经理化数
据和波谱数据分别鉴定为发卡二醇(falcariondi
ol)[14],香柑内酯(bergapten)[23],5,8二甲氧基补
骨脂素(5,8dimethoxypsoralen)[24],丁香酚(eugen
icacid)[25],反式阿魏酸(transferulicacid)[26],反式
桂皮酸 (transcinnamicacid) [27],绿原酸 (caf
feoylquinicacid)[28],瑟丹内酯(sedanolide)[7],β谷
甾醇(βsitosterol),苯甲酸(benzoicacid),丁二酸
(succinicacid)。
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ZHOUKailan1,WUBing1,ZHUANGYulei1,DINGLiqin1,LIUZhihui1,QIUFeng1
(1.DepartmentofNaturalProductsChemistry,ShenyangPharmaceuticalUniversity,Shenyang110016,China)
[Abstract] Objective:Tostudythechemicalconstituentsofthewholeplantoffreshcelery(Apiumgraveolens).Method:
Theconstituentswereisolatedandpurifiedbysilicagel,SephadexLH20,ODScolumnchromatography,PTLC,HPLC,andtheir
structureswereelucidatedonthebasisofspectralevidences.Result:Twentycompoundswereobtainedandidentifiedasfalcariondiol
(1),(9Z)1,9heptadecadiene4,6diyne3,8,11triol(2),oplopandiol(3),bergapten(4),5,8dimethoxypsoralen(5),isofrax
idin(6),eugenicacid(7),transferulicacid(8),transcinnamicacid(9),phydroxyphenylethanolferulate(10),cafeoylquinic
acid(11),5ptranscoumaroylquinicacid(12),sedanolide(13),lunularin(14),lunularicacid(15),2(3methoxy4hydroxy
phenol)propane1,3diol(16),Dalitol(17),βsitosterol(18),benzolicacid(19),succinicacid(20).Conclusion:Com
pounds2,3,6,10,12,1417wereisolatedfromgenusApiumforthefirsttime.
[Keywords] freshcelery;Apiumgraveolens;chemicalconstituents;isolationandidentification
[责任编辑 王亚君]
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