全 文 ：佩兰药材中石竹烯含量测定方法研究
刘东静１，赵晓宏１，薛健１，陈士林１，卞庆亚１，２
（１．中国医学科学院 北京协和医学院 药用植物研究所，北京 １００１９３；
２．江苏盐城卫生职业技术学院，江苏 盐城 ２２４００６）
［摘要］　目的：建立佩兰药材中石竹烯含量的测定方法。方法：采用溶剂超声提取样品、气相色谱法［ＤＢ１７０１弹性毛细
管柱（０３２ｍｍ×３００ｍ，０２５μｍ）］测定佩兰药材中石竹烯的含量。结果：石竹烯在浓度为０００２～２０ｇ·Ｌ－１呈良好线性
关系（ｒ＝０９９９９），加样回收率在９６８％～１０４２％。结论：本方法准确可靠、简便、重复性好，可用于佩兰的质量控制。
［关键词］　佩兰；石竹烯；气相色谱法；含量测定
［收稿日期］　２００９０４０１
［基金项目］　《中国药典》２０１０年版一部标准研究 （ＹＳ２０９）
［通讯作者］　薛健，研究员。主要从事中药有效成分及污染物研
究。Ｔｅｌ：（０１０）６２８９５０７６，Ｅｍａｉｌ：ｘｕｅｊｉａｎ２００＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ
［作者简介］　刘东静，在读研究生，分析化学专业。Ｔｅｌ：（０１０）
６２８９５０７６，Ｅｍａｉｌ：ｌｉｕｄｏｎｇｊｉｎｇ１１０１＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ
　　佩兰，为菊科多年生植物佩兰 Ｅｕｐａｔｏｒｉｕｍｆｏｒ
ｔｕｎｅＴｕｒｃｚ．的干燥地上部分，具有芳香化湿和中、醒
脾开胃、发表解暑之功效，用于湿阻中焦，脾经湿热
证，急性肠胃炎，脘痞呕恶，暑湿表证，头胀胸闷等
症［１］，是一种常用的化湿、解表中药。目前对于佩
兰的化学成分的研究主要集中在挥发油上［２４］，而对
于佩兰中成分的含量测定方法未见报道。佩兰样品
中主要成分为石竹烯，本文采用气相色谱法对其进
行含量测定。另外，有文献报道［５］用毛细管气相色
谱法测定青蒿和青蒿油中的石竹烯含量，但该方法
样品提取过程烦琐，费时。此外佩兰挥发油的成分
比较复杂，成分也会因产地不同而有差异，造成佩兰
药材的质量差异较大。因此制定佩兰的含量测定标
准对于佩兰质量的控制有极其重要的意义。
１　材料
Ａｇｉｌｅｎｔ６８９０Ｎ气相色谱仪（ＦＩＤ检测器），超声
波提取器（天鹏电子新技术（北京）有限公司的 ＴＰ
１５０）。石竹烯对照品 （ＲＳＳｉｇｍａ，４３２０８２４２，
#
９８５％），９５％乙醇，石油醚，醋酸乙酯均为分析纯。
佩兰药材（市售）经中国医学科学院药用植物研究
所资源中心张昭研究院鉴定。
２　方法与结果
２．１　测定方法
气相色谱条件：色谱柱 Ａｇｉｌｅｎｔ公司的 ＤＢ１７０１
弹性石英毛细管柱（柱长３０ｍ，内径０３２ｍｍ，膜厚
度０２５μｍ）。升温程序，５４℃（１℃·ｍｉｎ－１）～６５
℃（１０℃·ｍｉｎ－１）～１１５℃（１℃·ｍｉｎ－１）～１２０℃
（０５℃·ｍｉｎ－１）～１２５℃（８０℃·ｍｉｎ－１）～２８０℃
（５ｍｉｎ）。进样口温度２３０℃；检测器温度３００℃。
流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１；尾吹流量３５０ｍＬ·ｍｉｎ－１；Ｈ２
流量 ４００ｍＬ·ｍｉｎ－１；空气流量 ４５０ｍＬ·ｍｉｎ－１。
不分流模式，进样量１μＬ。
石竹烯对照品溶液及佩兰样品溶液气相色谱图
如图１所示。
２．２　样品提取方法的研究
２．２．１　样品提取方式和提取溶剂的选择　分别采
用超声提取法、回流提取法提取样品，每种提取方法
分别采用乙醇、醋酸乙酯和石油醚作为提取溶剂。
样品取样量为２０ｇ，溶剂用量为３０ｍＬ。每种处理
重复３次。实验结果见表１。
　　从提取方法来看，醋酸乙酯和石油醚回流提取
法的提取效果好于超声提取法，而乙醇溶剂的两种
提取方法效果相当。醋酸乙酯回流提取法提取的石
竹烯的含量最大为００６７６％，但是考虑到回流提取
法相对于超声提取法，时间较长，提取步骤较为烦
琐，且醋酸乙酯溶剂对呼吸道粘膜有刺激性。因此，
综合考虑选择乙醇超声提取法作为佩兰药材中石竹
烯含量测定的提取方法。
２．２．２　提取参数的优化　上节中确定的提取方法
为乙醇超声法提取。在此基础上，进一步对其它参
数进行选择优化。对超声提取结果有影响的参数主
要为：溶剂用量和提取时间。
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第３４卷第２２期
２００９年１１月
　　　　　 　 　 　 　 　　　　　 　 　 　 　
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　Ｎｏｖｅｍｂｅｒ，２００９
ａ．石竹烯对照品溶液气相色谱图；ｂ．佩兰药材乙醇提取溶液气相色谱图
图１　石竹烯对照品溶液以及佩兰药材乙醇提取溶液气相色谱图
表１　３种溶剂两种提取方式测定的石竹烯
百分含量均值（ｎ＝３）
溶剂 超声提取法／％ ＲＳＤ／％ 回流提取法／％ ＲＳＤ／％
乙醇　　 ００６１４ １７ ００６１６ ２５
醋酸乙酯 ００５４２ １６ ００６７６ ２１
石油醚　 ００５６６ ２０ ００６３１ ０７５
　　结合药典其它药材超声提取法中的料液比和超
声时间，笔者对溶剂用量分别为２０，３０ｍＬ两个水
平，超声时间分别为２０，３０，４０ｍｉｎ进行考察。考察
结果如表２所示。
表２　佩兰药材提取参数优化试验结果（ｎ＝３）
乙醇用量／ｍＬ 提取时间／ｍｉｎ 平均值／％ ＲＳＤ／％
２０ ２０ ００４７４ ２２３
　 ３０ ００４２６ ２５１
　 ４０ ００４６１ １５１
３０ ２０ ００３７６ ２９０
　 ３０ ００４９５ ０９１
　 ４０ ００５０５ １１２
　　各处理的３次平行实验的 ＲＳＤ值一般都小于
或等于３０％，说明３次平行的重复性较好。
当溶剂用量为 ３０ｍＬ时，超声 ２０，３０，４０ｍｉｎ
的提取对石竹烯依次增高，但３０ｍｉｎ和４０ｍｉｎ时
对石竹烯的提取效果无显著差异；因此提取时间
为３０ｍｉｎ，溶剂用量为３０ｍＬ时就可以得到很好
的提取效果。
２．２．３　提取方法确定　根据２２１和２２２两节
可以确定佩兰药材含量测定供试品溶液的制备步骤
为：精密称取药材２０ｇ，置于１００ｍＬ锥形瓶中，精
密加入３０ｍＬ乙醇，称定质量（除塞），超声提取３０
ｍｉｎ。放冷，用乙醇补足质量（除塞）。摇匀，提取液
过滤，取续滤液，即得供试品溶液。
２．３　标准曲线
石竹烯系列对照溶液的配置：精密称取石竹烯
对照品适量，用乙醇配制成为石竹烯含量为１００ｇ
·Ｌ－１的对照品储备液。精密移取对照品储备液适
量，分别配制成２０，０５，００５，０００５，０００２ｇ·Ｌ－１
的对照品溶液。分别吸取上述系列对照品溶液 １
μＬ，进样，测定。以对照品浓度为横坐标，对照品峰
面积为纵坐标进行线性回归，得回归方程 Ｙ＝２３
８３７Ｘ＋４０９５４，Ｒ２＝１，石竹烯在浓度为２０～０００２
ｇ·Ｌ－１线性关系良好。
２．４　进样精密度
取同一供试品溶液，连续进样６次测定峰面积，
计算得石竹烯的峰面积 ＲＳＤ０３％，说明进样精密
度量良好。
２．５　重复性试验
取同一佩兰样品６份，平行提取测定。测得石
竹烯含量的ＲＳＤ＝０５７％，重复性良好。
２．６　加样回收率试验
取已知含量样品粉末１０ｇ，共６份，精密称定，
置于１００ｍＬ锥形瓶中，精密加入相当于样品中石竹
烯含量一半的对照品溶液１ｍＬ，加入２９ｍＬ乙醇，
称定质量，超声提取３０ｍｉｎ。放冷，用乙醇补足质量
（除塞）。摇匀，提取液过滤，取续滤液，既得供试品
溶液。按上述气相条件进行测定。测定结果如表３
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所示。
表３　石竹烯加样回收率试验
样品中量／μｇ 加入量／μｇ 测得量／μｇ 回收率／％ ＲＳＤ／％
３９３９ ３９３９ ７７６３０ ９７１ 　
３９３９ ３９３９ ８０４２３ １０４２ 　
３９３９ ３９３９ ７８８４４ １００２
２９
３９３９ ３９３９ ７８３８２ ９９０ 　
３９３９ ３９３９ ７８０５４ ９８２ 　
３９３９ ３９３９ ７７１４３ ９５８ 　
　　本实验的加样回收率在 ９５８％ ～１０４２％，
ＲＳＤ％为２９％，符合药典加样回收率９５％ ～１０５％
及ＲＳＤ小于５％的要求。
２．７　溶液的稳定性
取药材乙醇提取溶液１μＬ，分别于０，２，４，８，
２４，３６ｈ进样，测定石竹烯的峰面积ＲＳＤ０５７％，说
明样品溶液在３６ｈ内稳定。
２．８　对照品溶液的制备及样品测定
精密称取石竹烯对照品适量，加入乙醇配制成
浓度为０３６ｇ·Ｌ－１的标准储备液。再取１ｍＬ储备
液放置于１０ｍＬ的量瓶中，用乙醇加至刻度，摇匀静
置，得浓度为３６ｍｇ·Ｌ－１的石竹烯对照品溶液。
样品溶液按２２３方法制备，按２１测定方法
项下色谱条件对不同产地的佩兰药材进行测定，测
定结果如表４。
３　讨论
本方法直接从药材中提取目标成分，中间无转移
过程，损失较少。与其他挥发性药材经过水蒸气蒸馏
表４　佩兰样品石竹烯质量分数（ｎ＝２） ％
Ｎｏ． 样品名称 质量分数 Ｎｏ． 样品名称 质量分数
１ 佩兰（江苏） ００２５６ ６ 佩兰（广东） ００１１３
２ 佩兰（江苏） ００３２４ ７ 佩兰（江西） ００４４５
３ 佩兰（浙江） ０００９６ ８ 佩兰（四川） ０００９９
４ 佩兰（安徽） ００９９６ ９ 佩兰（四川） ００１０２
５ 佩兰（安徽） ００５４６ １０ 佩兰（河南） ００２１０
后用挥发油进行含量测定的方法相比，本方法简便、
快速，同时也避免了挥发油提取过程中由于提取温
度过高引起的挥发油量减少而导致的测定误差。
由所测定的样品可以看出，佩兰药材中石竹烯
的含量因产地不同而有所差异。其中以安徽产地的
佩兰样品中石竹烯含量最高，四川的样品中的石竹
烯的含量较低。
此外，石竹烯具有挥发性，因此，药材粉碎后必
须立刻进行处理、测定，以避免佩兰药材中的测定成
分挥发。
［参考文献］
［１］　中国药典．一部［Ｓ］．２００５：１５０．
［２］　曾虹燕．不同方法提取的佩兰挥发油指纹图谱分析［Ｊ］．食品
科学，２００４，２５（１）：１２３．
［３］　崔兆杰，邱琴，刘廷礼，等．佩兰挥发油化学成分的研究［Ｊ］．药
物分析杂志，２００２，２２（２）：１１７．
［４］　曾虹燕，李京龙．超临界ＣＯ２和徼波辅助萃取佩兰挥发油工艺
的研究［Ｊ］．食品科学，２００４，２５（４）：１２４．
［５］　刘亚梅，蒲旭峰，张良．毛细管气相色谱法测定青蒿及青蒿油
中石竹烯和樟脑的含量［Ｊ］．华西药学杂志，２００７，２２（２）：２１８．
ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｃａｒｙｏｐｈｙｌｅｎｅｉｎＥｕｐａｔｏｒｉｕｍｆｏｒｔｕｎｅ
ＬＩＵＤｏｎｇｊｉｎｇ１，ＺＨＡＯＸｉａｏｈｏｎｇ１，ＸＵＥＪｉａｎ１，ＣＨＥＮＳｈｉｌｉｎ１，ＢＩＡＮＱｉｎｇｙａ１，２
（１．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭｅｄｉｃｉｎａｌＰｌａｎｔＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓＰｅｋｉｎｇＵｎｉｏｎ
ＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｅｇｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００１９３，Ｃｈｉｎａ；
２．ＹａｎｃｈｅｎｇＨｅａｌｔｈＶｏｃａｔｉｏｎａｌ＆ＴｅｃｈｎｉｃａｌＣｏｌｅｇｅ，Ｙａｎｃｈｅｎｇ２２４００６，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｄｅｖｅｌｏｐａＧＣｍｅｔｈｏｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｃａｒｙｏｐｈｙｌｅｎｅｉｎＥｕｐａｔｏｒｉｕｍｆｏｒｔｕｎｅ．Ｍｅｔｈｏｄ：
ＴｈｅｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｏｎａＤＢ１７０１（０３２ｍｍ×３０ｍ，０２５μｍ）ｑｕａｒｔｚｃａｐｉｌａｒｙｃｏｌｕｍｎ．Ａｎｄｔｈｅｓａｍｐｌｅ．ｗａｓｅｘｔｒａｃｔｅｄ
ｗｉｔｈｅｔｈａｎｏｌｂｙｔｈｅｕｌｔｒａｓｏｎｉｃａｓｓｉｓｔｅｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎｃｕｒｖｅｏｆｃａｒｙｏｐｈｙｌｅｎｅｉｓｌｉｎｅｒｏｖｅｒｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ０００２２０ｇ
·Ｌ－１（Ｒ２＝１）．Ｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｙｗａｓｆｒｏｍ９６７６％ ｔｏ１０４１５％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｉｓａｃｃｕｒａｔｅ，ｓｉｍｐｌｅｗｉｔｈａｇｏｏｄｒｅｐｒｏｄｕｃ
ｉｂｉｌｉｔｙ．ＩｔｃａｎｂｅｕｓｅｄｔｏｃｏｎｔｒｏｌｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆＥ．ｆｏｒｔｕｎｅ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　Ｅｕｐａｔｏｒｉｕｍｆｏｒｔｕｎｅ；ｍａｉｎｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔ；ＧＣ；ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ；ｃａｒｙｏｐｈｙｌｅｎｅ
［责任编辑　王亚君］
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