全 文 ：淫羊藿苷对 ＨＣＹ诱导增殖血管平滑肌细胞
ＧＲＰ７８表达的影响
沈晓君，何航
（河南中医学院 基础医学院，河南 郑州 ４５０００８）
［摘要］ 目的：研究淫羊藿苷（ＩＣＡ）对同型半胱氨酸（ＨＣＹ）诱导的增殖血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）葡萄糖调节蛋白７８
（ＧＲＰ７８）基因表达的影响，探讨ＩＣＡ抗动脉粥样硬化的机制。方法：建立ＨＣＹ诱导的兔 ＶＳＭＣ增殖模型，与不同浓度的 ＩＣＡ
共同培养４８ｈ后，用流式细胞仪Ａｎｎｅｘｉｎ／ＰＩ双染法检测凋亡率；ＲＴＰＣＲ检测ＧＲＰ７８ｍＲＮＡ的表达；目的基因克隆、鉴定并测
序。结果：０２，０４ｍｇ·Ｌ－１的ＩＣＡ可显著促进兔ＶＳＭＣ凋亡，且存在剂量依赖性，与半胱氨酸组相比，差异显著（Ｐ＜００１）；
ＲＴＰＣＲ结果显示：０２，０４ｍｇ·Ｌ－１的淫羊藿苷作用于ＶＳＭＣ４８ｈ后，ＧＲＰ７８ｍＲＮＡ表达水平显著升高，与半胱氨酸组相比
差异显著（Ｐ＜００５）；测序结果表明，来源于ＶＳＭＣ的全长６４８ｂｐ的基因片断与兔葡萄糖调节蛋白７８基因高度同源。结论：
ＩＣＡ促进ＧＲＰ７８ｍＲＮＡ表达，诱导兔ＶＳＭＣ凋亡，可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一。
［关键词］ 淫羊藿苷；同型半胱氨酸；血管平滑肌细胞；葡萄糖调节蛋白７８；细胞凋亡
［收稿日期］ ２００９０２１０
［基金项目］ 河南省科技攻关计划项目（０６２４４２００２６）
［通信作者］ 沈晓君，Ｔｅｌ：（０３７１）６８３２７８６５，１３５２６６６９５８１，Ｅｍａｉｌ：
ｓｈｅｎｘｉａｏｊｕｎ０６２８＠１６３．ｃｏｍ
动脉内膜下脂质沉积伴血管平滑肌细胞（ｖａｓ
ｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌ，ＶＳＭＣ）增殖是动脉粥样硬
化（ａｔｈｅｍｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，ＡＳ）的主要形态特征。目前，中药
通过调节ＶＳＭＣ凋亡途径防治 ＡＳ的研究已经取得
了一定的成果，但中药黄酮类化合物淫羊藿苷（ｉｃａｒ
ｉｎ，ＩＣＡ）对ＶＳＭＣ增殖抑制作用分子机制的研究尚
未见报道。本实验通过观察 ＩＣＡ对同型半胱氨酸
（ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅｍｉａ，ＨＣＹ）诱导的血管平滑肌细胞增
殖及内质网应激途径标志蛋白葡萄糖调节蛋白７８
（ｇｌｕｃｏｓｅｒｅｇｕｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ，ＧＲＰ７８）基因表达的影响，
探讨其促进ＶＳＭＣ凋亡可能的作用靶点，为 ＩＣＡ治
疗新的适应症提供理论线索。
１ 材料
１．１ 细胞株、药品及试剂
兔主动脉平滑肌细胞（中国协和医科大学基础医
学院细胞培养中心）。ＩＣＡ对照品（中国药品生物制
品鉴定所，纯度９９％，批号１１０７３７２００３１２），ＨＣＹ（Ｓｉｇ
ｍａ公司，批号Ｃ７３５２），ｐＭＤ１９Ｔ载体，ＤＮＡ连接酶，
大肠杆菌ＪＭ１０９，限制性内切酶ＢａｍＨⅠ，限制性内切
酶ＨｉｎｃⅡ，Ｔａｑ酶（大连宝生物工程有限公司，Ｌｏｔ：
Ｃｋ４０１Ａ），ＤＭＥＭ 培 养 基 （ＧｉｂｃｏＢＲＬＵＳＡ，Ｌｏｔ：
１３２０１５８），高纯总ＲＮＡ快速提取试剂盒（上海捷瑞生
物工程有限公司，Ｌｏｔ：ＧＲＸ０１０），逆转录试剂盒（Ｆｅｒ
ｍｅｎｔａｓ，Ｌｏｔ：０００２７３６２），ＡｎｎｅｘｉｎＶＦＩＴＣ凋亡检测试
剂盒（南京凯基生物公司，Ｌｏｔ：ＫＧＡ１０７）。
１．２ 仪器
ＨｅｒａＣ０２细胞培养箱（德国 ＧＭＢＨ公司），２０９ｂ
型超净工作台（苏净集团安泰公司），ＢＨＮＩＣＢ型
倒置显微镜（日本 ＯｌｙｍｐｓｕＯｐｔｉｃａｌ公司），ＧｅｌＤｏｃ
２００ＴＭ型凝胶图像分析仪（美国 ＢＩＯＲＡＤ公司）；
ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ流式细胞仪（美国 ＢＤ公司）；ＴＧＲＡ
ＤＩＥＮＴ型ＰＣＲ仪（德国Ｂｉｏｍｅｔｒａ公司）。
２ 方法
２．１ 模型建立及实验分组
兔主动脉平滑肌细胞置于含有１０％小牛血清
的ＤＭＥＭ培养基中，加入终浓度为１００ｍｇ·Ｌ－１的
链霉素与青霉素，在３７℃，５％ＣＯ２条件下培养，用
含００１％ＥＤＴＡ的０２５％胰酶进行消化传代，处于
对数生长期的第３～５代细胞用于实验。取生长良
好的细胞按１×１０８个／Ｌ稀释后接种于９６孔培养板
培养２４ｈ，分为空白组、ＨＣＹ模型组、ＩＣＡ处理组，
每组设６个复孔，ＨＣＹ模型组、ＩＣＡ处理组均加入
同型半胱氨酸，剂量为１×１０－４ｍｏｌ·Ｌ－１，培养２４ｈ
后，ＩＣＡ处理组分别加入 ０４，０２，０１ｍｇ·Ｌ－１的
ＩＣＡ，继续培养４８ｈ后，分别收集细胞。
２．２ ＡｎｎｅｘｉｎＶＰＩ法检测细胞凋亡率
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试验按试剂盒说明操作，各组用 ＰＢＳ洗涤，
０２５％胰蛋白酶消化２～３ｍｉｎ，转移至离心管中，加
入培养液，混匀后１０００ｒ·ｍｉｎ－１离心４ｍｉｎ，弃上
清，加ＰＢＳ重悬细胞，调整细胞密度为 １×１０６个／
ｍＬ。取０５ｍＬ上述细胞悬液，１０００ｒ·ｍｉｎ－１离心
４ｍｉｎ，弃上清，加０５ｍＬＢｉｎｄｉｎｇＢｕｆｅｒ重悬细胞，
加入１μＬ荧光标记的ＡｎｎｅｘｉｎＶ试剂，混匀后避光
室温下孵育２０ｍｉｎ，加入５μＬＰＩ，混匀后避光４℃
下孵育５ｍｉｎ，加入５００μＬＢｉｎｄｉｎｇＢｕｆｅｒ，随即用流
式细胞仪检测凋亡率，使用 Ｆｌｏｗｍａｘ２４软件进行
数据处理。
２．３ ＲＴＰＣＲ检测ＧＲＰ７８ｍＲＮＡ表达
２．３．１ 总 ＲＮＡ提取 用高纯总 ＲＮＡ提取试剂盒
提取每组细胞总 ＲＮＡ，紫外分光光度仪测定，纯度
要求Ａ２６０ｎｍ／Ａ２８０ｎｍ＞１８，ｌ５％琼脂糖凝胶电泳鉴定
其完整性，２８Ｓ／１８Ｓ约等于２，置－７０℃冰箱保存。
２．３．２ ｃＤＮＡ合成 按逆转录试剂盒说明书操作，
在离心管加入总ＲＮＡ１０μＬ，Ｏｌｉｇｏ引物１μＬ，ＤＥＰＣ
处理水１μＬ，轻轻混合，瞬时离心，７０℃５ｍｉｎ，冰上
冷却，瞬时离心。加入５×ｂｕｆｅｒ４μＬ，逆转录酶抑
制剂１μＬ，１０ｍｍｏｌ·Ｌ－１ｄＮＴＰｍｉｘ２μＬ，３７℃ ５
ｍｉｎ，再加入ＭＭＬＶ逆转录酶１μＬ，４２℃６０ｍｉｎ，７０
℃ １０ｍｉｎ，冰上冷却。
２．３．３ ＰＣＲ 以 ｃＤＮＡ为模板，以 βａｃｔｉｎ为内参
照，扩增ＧＲＰ７８基因片段。βａｃｔｉｎ引物设计，上游
引物：５′ＣＴＡＣＡＡＴＧＡＧＣＴＧＧＴＧＴＧＧ３′，下游引物：
５′ＴＡＧＣＴＣＴＴＣＴＴＣＡＧＧＧＡＧＧＡ３′；ＧＲＰ７８序列引
物，上游：５′ＴＣＴＡＧＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＣＣＴＡＡＣ３′，下
游：５′ＧＴＴＣＴＣＴＣＡＡＴＴＴＴＣＴＣＣＣＡＡＣ３′，扩增片段
分别为２６８，６４８ｂｐ，反应体系为２５μＬ。反应条件：
９４℃ Ｃ预变性５ｍｉｎ，９４℃变性５０ｓ，５５℃退火５０
ｓ，７２℃延伸１ｍｉｎ，３０个反应循环，７２℃最后延伸３
ｍｉｎ。取５μＬＲＴＰＣＲ产物及５μＬＤＮＡＭａｒｋｅｒ进
行１５％琼脂糖凝胶电泳，采用ＧｅｌＤｏｃ２００ＴＭ型凝胶
图像分析仪进行吸光度扫描，结果以目的基因与 β
ａｃｔｉｎ的积分吸光度比值表示。
２．４ 克隆差异表达基因片段、酶切鉴定并测序
ＰＣＲ产物用１５％琼脂糖凝胶电泳分离，切下
目的片段，琼脂糖凝胶回收试剂盒回收。目的片段
与质粒ｐＭＤ１９Ｔ载体的重组连接、连接产物转化大
肠杆菌ＪＭ１０９、感受态的制备和转化方法参照文献
（分子克隆第３版）进行。重组质粒的筛选和鉴定
根据蓝白筛选原理，白色菌落即为重组克隆，随机挑
取５个阳性菌落转种于 Ａｍｐ＋ ＬＢ固体培养基，３７
℃培养１８～２４ｈ后准备鉴定。取少许菌落，溶于３０
μＬ去离子水中，１００℃煮沸１０ｍｉｎ，１２０００ｒ·ｍ－１
离心１０ｍｉｎ。取５μＬ上清作为模板，ＰＣＲ扩增３０
个循环，扩增产物用琼脂糖凝胶电泳分析。参照Ｖｉ
ｔａｇｅｎｅ日常型质粒 ＤＮＡ小量纯化试剂盒说明书进
行质粒提取。用限制性内切酶 ＢａｍＨⅠ单酶切，
ＢａｍＨⅠ和 ＨｉｎｃⅡ双酶切重组质粒 ｐＭＤ１９ＴＧＲＰ。
并将鉴定过已经转化进目的片段的细菌交于上海捷
瑞公司，采用 Ｓａｎｇｅｒ末端终止法进行测序，利用生
物学软件对测序结果进行分析。
２．５ 数据统计与分析
各组实验数据均以 珋ｘ±ｓ表示，采用 ＳＰＳＳ１００
软件包进行单因素方差分析，组间两两比较采用
ＬＳＤ方法。
３ 结果
３．１ ＡｎｎｅｘｉｎＶＦＩＴＣ／ＰＩ双染流式细胞仪检测结果
经ＩＣＡ处理４８ｈ后，０２，０４ｍｇ·Ｌ－１组细胞
凋亡百分率均高于ＨＣＹ组（Ｐ＜００１），且随ＩＣＡ剂
量增加而增加（表１）。
表１ ＩＣＡ对４８ｈＶＳＭＣ细胞凋亡的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
组别 剂量／ｍｇ·Ｌ－１ 凋亡率／％
空白对照 － １１２±０４７
ＨＣＹ２） １０－４ ０９３±０２２
ＩＣＡ ０１ １３４±０９４
０２ ７５２±１４９１）
０４ ９１５±０８１１）
注：①与ＨＣＹ组比较１）Ｐ＜００１；②２）剂量单位为 ｍｏｌ·Ｌ－１（表
２同）。
３．２ ＩＣＡ对ＶＳＭＣＧＲＰ７８ｍＲＮＡ表达的影响
根据上述流式细胞仪检测结果，ＩＣＡ处理组选
用０２，０４ｍｇ·Ｌ－１２组。ＲＴＰＣＲ结果显示，ＩＣＡ
处理组细胞 ＧＲＰ７８ｍＲＮＡ表达明显升高，与 ＨＣＹ
组比较差异显著（Ｐ＜００５）（表２）。
表２ ＩＣＡ对ＶＳＭＣＧＲＰ７８ｍＲＮＡ表达的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
组别 剂量／ｍｇ·Ｌ－１ ＧＲＰ７８ｍＲＮＡ／βａｃｔｉｎｍＲＮＡ
空白对照 － ０１０３±００４１
ＨＣＹ２） １０－４ ０２７５±００３５
ＩＣＡ ０２ ０３３６±００２９１）
０４ ０３８７±００２３１）
３．３ 克隆差异表达基因片段、电泳鉴定及测序结果
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菌液ＰＣＲ鉴定结果见图１；质粒酶切鉴定结果
见图２；测序结果显示，全长６４８ｂｐ的基因片断与兔
葡萄糖调节蛋白７８基因高度同源。
１，３，４．阳性克隆；２．阴性克隆Ｍ。
图１ ＰＣＲ阳性克隆筛选琼脂凝胶电泳
图２ 限制酶切质粒ＤＮＡ片断琼脂凝胶电泳
４ 讨论
ＶＳＭＣ发生表型转变、迁移、增生并分泌大量细
胞外基质，经其表面的 ＬＰＬ受体介导吞噬脂质形成
肌原性泡沫细胞是 ＡＳ的基本病变［１］。由于 ＡＳ发
病过程中平滑肌细胞的增殖始终占主导地位，因此，
促进ＶＳＭＣ凋亡、防止其过度增殖是治疗 ＡＳ的新
思路。
蛋白在内质网腔形成空间结构由许多分子伴侣
蛋白协助，ＧＲＰ７８是内质网中最重要的分子伴侣之
一，作为一种应激反应蛋白，ＧＲＰ７８在辅助蛋白质
折叠、稳定内质网中 Ｃａ２＋水平、调节内质网应激
（ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃｒｅｔｉｃｕｌｕｍｓｔｒｅｓｓ，ＥＲＳ）跨膜信号感受器
活性方面发挥重要功能，显示出细胞保护的潜在作
用。未折叠蛋白在内质网沉积，信号通过内质网膜
传入胞核和胞浆，效应蛋白上调编码 ＧＲＰ７８和
ＧＲＰ９４等内质网伴侣蛋白基因转录，减少蛋白翻
译，以利于内质网蛋白折叠形成，减少未折叠蛋白在
内质网沉积和聚集，使细胞能够耐受及生存［２］。因
此，ＧＲＰ７８被认为是 ＥＲＳ的一种标志蛋白，也被称
为内质网应激ｍａｒｋｅｒ蛋白。
高同型半胱氨酸血症（ｈｙｐｅｒｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅｍｉａ，
ＨＨＣＹ）是动脉粥样硬化发生的独立危险因子。研
究发现 ＨＣＹ通过诱导 ＶＳＭＣ的增殖导致 ＡＳ的发
生［３］。ＨＣＹ在诱导ＶＳＭＣ增殖的同时，还导致细胞
分泌胶原类型及模式的改变，最终加速 ＡＳ粥样斑
块的发生和发展［４］。目前的研究发现，在ＨＣＹ参与
形成的ＶＳＭＣ增生等ＡＳ病变中ＥＲＳ发挥了重要的
作用［５］。ＨＣＹ所含巯基作为还原性物质改变了细
胞内的氧化还原状态，使蛋白质分子在内质网内发
生错误折叠、大量聚集而造成ＥＲＳ。体外研究证实，
ＨＣＹ导致未折叠蛋白反应（ｕｎｆｏｌｄｅｄｐｒｏｔｅｉｎｒｅ
ｓｐｏｎｓｅ，ＵＰＲ）激活，从而上调ＧＲＰ７８等内质网应激
反应基因的表达［６］。ＺｈｏｕＪ等用高蛋氨酸饮食饲喂
载脂蛋白Ｅ缺乏（ＡｐｏＥ／）小鼠诱发 ＡＳ，用免疫组
织化学染色检测ＥＲＳ标志分子，结果发现富含平滑
肌细胞的ＡＳ斑块纤维帽处ＧＲＰ７８表达增高，ＡＳ病
变处泡沫细胞中 ＧＲＰ７８也显著增高［７］。本实验结
果表明ＨＣＹ对ＶＳＭＣ增殖有明显的促进作用，ＨＣＹ
组与空白组比较内质网应激标志物 ＧＲＰ７８基因表
达量增高，提示在 ＨＣＹ刺激下兔 ＶＳＭＣ发生 ＥＲＳ。
目前认为，适度的ＥＲＳ是细胞的一种适应性保护反
应，高表达的ＧＲＰ可限制 ＥＲＳ对细胞的损害，有助
于维持细胞生存［８］。本实验结果也提示一定程度
的ＥＲＳ对ＶＳＭＣ的保护作用可能是其在ＡＳ时过度
增殖的重要机制之一。
ＩＣＡ是从淫羊藿茎叶中提取的淫羊藿总黄酮中
主要有效成分，传统医学认为 ＩＣＡ具有补肾壮阳，
祛风湿、强筋骨等功效，近年来的研究表明其对心脑
血管疾病有很高的应用价值，具有极大的研究和开
发潜力。王茜［１０］等建立大鼠 ＡＳ模型，并用 ＩＣＡ干
预，结果发现，ＩＣＡ组无明显的病理变化，表明 ＩＣＡ
具有抗早期ＡＳ形成的作用。于永红［１１］等建立家兔
ＡＳ模型，光镜及电镜观察见高胆固醇组家兔血管内
膜增厚，并有大量泡沫细胞聚集，形成典型的纤维斑
块和粥样斑块，而ＩＣＡ治疗组无明显内膜损伤等ＡＳ
病变，证实ＩＣＡ可促进 ＡＳ病灶消退。药理作用机
制的微观研究表明，ＩＣＡ可通过促进 ＶＳＭＣ凋亡而
发挥抗ＡＳ疗效［１２］。王伟［１３］等的研究发现，ＩＣＡ可
促进白介素１诱导增殖的ＶＳＭＣ凋亡，与葛根素合
用，有明显的协同作用。本实验结果表明 ＩＣＡ组
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ＶＳＭＣ凋亡显著，进一步支持 ＩＣＡ抑制 ＶＳＭＣ增殖
的理论；ＩＣＡ组ＧＲＰ７８基因表达量增高，与 ＨＣＹ组
比较差异显著，测序结果证实该基因来源于兔
ＶＳＭＣ，提示 ＩＣＡ诱导的 ＶＳＭＣ凋亡过程可能与
ＥＲＳ有关。目前认为早期的 ＥＲＳ或 ＵＰＲ是一种自
身代偿过程，对细胞起到保护作用，而高度的 ＥＲＳ
则会通过 ｃａｓｐａｓｅ１２等途径启动凋亡［１４］。本试验
结果显示 ＩＣＡ可通过上调内质网应激蛋白 ＧＲＰ７８
基因表达、放大 ＥＲＳ信号而启动细胞凋亡通路，诱
导过度增殖的 ＶＳＭＣ凋亡，对 ＡＳ的治疗产生一定
作用，但ＩＣＡ调控ＧＲＰ７８表达并启动凋亡的信号转
导机制还有待于进一步的研究。
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Ｅｆｅｃｔｓｏｆｉｃａｒｉｎｏｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｇｌｕｃｏｓｅｒｅｇｕｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ７８ｉｎ
ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｉｎｄｕｃｅｄｂｙｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅｍｉａ
ＳＨＥＮＸｉａｏｊｕｎ，ＨＥＨａｎｇ
（ＨｅｎａｎＣｏｌｅｇｅｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５０００８，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｅｃｔｓｏｆｉｃａｒｉｎｏｎｔｈｅＧＲＰ７８ｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｉｎ
ｖｉｔｒｏａｎｄｔｏｅｌｕｃｉｄａｔｅｔｈｅａｎｔｉａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｉｃａｒｉｎ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅｍｏｄｅｌｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｂｙｕｓｉｎｇｈａｌｆｃｙｓｔｉｎｅｉｎｖｉｔｒｏ．
Ｔｈｅｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｈａｄｂｅｅｎｉｎｃｕｂａｔｅｄｗｉｔｈｖａｒｉｏｕｓｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｉｃａｒｉｎｆｏｒ４８ｈｏｕｒｓ．Ｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｒａｔｅｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄ
ｂｙｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙｕｓｉｎｇＡｎｎｅｘｉｎ／ＰＩｓｔａｉｎｉｎｇａｎｄＧＲＰ７８ｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｗａｓｔｅｓｔｅｄｂｙＲＴＰＣＲ．Ｔｈｅｓｅｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｆｒａｇ
ｍｅｎｔｓｗｅｒｅｃｌｏｎｅｄ，ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｎｄｓｅｑｕｅｎｃｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｉｃａｒｉｎａｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆ０２ａｎｄ０４ｍｇ·Ｌ－１ｏｂｖｉｏｕｓｌｙｐｒｏｍｏｔｅｄｔｈｅａｐｏｐ
ｔｏｓｉｓｏｆｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌ．Ｔｈｅｅａｒｌｙａｐｏｐｔｏｓｉｓｒａｔｅｗａｓｒａｉｓｅｄｍａｇｎｉｆｉｃｅｎｔｌｙｉｎａｄｏｓｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔｍａｎｎｅｒｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈａｔ
ｏｆｔｈｅｈａｌｆｃｙｓｔｉｎｅｇｒｏｕｐ（Ｐ＜００１）．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ｔｈｅｆｒａｇｍｅｎｔ，６４８ｂｐ，ｗａｓｓｉｍｉｌａｒｔｏｔｈｅｇｅｎｅｏｆｇｌｕｃｏｓｅｒｅｇｕｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎＧＲＰ７８
ｆｒｏｍＶＳＭＣ．ＩｃａｒｉｎｃｏｕｌｄｍａｇｎｉｆｉｃｅｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｔｈｅＧＲＰ７８ｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈａｔｏｆｔｈｅｈａｌｆｃｙｓｔｉｎｅｇｒｏｕｐ（Ｐ＜
００５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅａｎｔｉａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｉｃａｒｉｎｍｉｇｈｔｂｅｐａｒｔｌｙｄｕｅｔｏｔｈｅｐｒｏｍｏｔｉｏｎｏｆａｐｏｐｔｏｓｉｓａｎｄｔｈｅｐｒｏｍｏｔｉｏｎ
ｏｆｔｈｅＧＲＰ７８ｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｉｃａｒｉｎ；ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅｍｉａ；ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌ；ｇｌｕｃｏｓｅｒｅｇｕｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ７８；ｃｅｌａｐｏｐｔｏｓｉｓ
［责任编辑 古云侠］
·７６９１·
第３４卷第１５期
２００９年８月
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ １５
Ａｕｇｕｓｔ，２００９