全 文 ：钩藤散对 ＡｌＣｌ３所致老年痴呆模型鼠的影响
黄厚才，钟荣玲，曹 鹏，王春如，杨德功
（江苏省中医药研究院，江苏 南京 ２１００２８）
［摘要］ 目的：观察钩藤散对老年性痴呆模型鼠脑指数，ＭＡＯＢ，ＳＯＤ，ＧＳＨＰＸ，ＮＯ，ＬＤＨ等的影响，从而了解
其作用机制。方法：１２０只大鼠随机均分为６组、实验组分高、中、低（５，２５，１２５ｇ·ｋｇ－１）３种剂量每天灌给钩藤
散浸膏，模型组及正常组灌以等量生理盐水（００１ｍＬ·ｇ－１），阳性药组每天给予茴拉西坦胶囊（三乐喜，０１ｇ·
ｋｇ－１），给药第５天时，除正常组外，各组腹腔注射ＡｌＣｌ３（１００ｍｇ·ｋｇ
－１），隔日１次，连续５０ｄ后，分别测定各组大
鼠的死亡率、增重、学习成绩、脑指数、脑组织ＭＡＯＢ，ＳＯＤ，ＧＳＨＰＸ和血清ＮＯ，ＬＤＨ等含量的变化。结果：实验组
的脑指数显著（Ｐ＜００５）高于、ＳＯＤ，ＧＳＨＰＸ活力和 ＮＯ含量极显著（Ｐ＜００１）高于、ＬＤＨ显著（Ｐ＜００５）低于、
高、中剂量组的ＭＡＯＢ含量极显著（Ｐ＜００１）低于、学习成绩和增重极显著（Ｐ＜００１）好于模型组，与正常组比，
实验组除ＬＤＨ偏高外其他各指标相近。结论：钩藤散能提高脑指数，降低死亡率，保持体重处于正常状况，增强抗
氧化能力，抑制ＭＡＯＢ活性，加强清除脂质过氧化物及其代谢废物的作用，减少 ＬＤＨ的漏出，维持 ＮＯ于正常水
平，从而保护细胞，抵抗痴呆。
［关键词］ 钩藤散；ＡｌＣｌ３；老年性痴呆；脑指数；鼠
［中图分类号］Ｒ２８５５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）０５０５５３０４
［收稿日期］ ２００７０７１７
［基金项目］ 江苏省中医药管理局项目（ＺＹ０３０３）
［通讯作者］ 黄厚才，Ｔｅｌ：（０２５）８５６３７９９４，Ｅｍａｉｌ：ｈｕａｎｇ
ｈｏｕｃａｉ＠ｓｉｎａｃｏｍ
关于老年痴呆和衰老的发生机制，国内外学者
提出了近３００种学说或假说，其中主要的有遗传学
说、自由基学说、体细胞突变学说、神经缠结学说、免
疫功能改变学说、中枢神经系统功能衰退学说等，在
这些学说中自由基学说一直为人们普遍关注。虽然
这一学说还不能完全解释衰老和痴呆这一机体非常
复杂的过程，但自由基和衰老、痴呆之间密切联系已
是大家所认同的。钩藤散源自《本事方》，由钩藤、
石膏、陈皮、麦冬、半夏、菊花等１１味药组成，原治肝
厥头晕之证。目前，国内外常有将钩藤散用于治疗
老年痴呆（ＡＤ）的报道，但其治疗老年痴呆作用机制
研究的报道较少。慢性铝中毒所致老年性痴呆鼠是
目前常用的研究 ＡＤ较为理想的模型之一，因此本
实验采用ＡｌＣｌ３造模，通过测定自由基、抗氧化酶等
指标，观察钩藤散浸膏对老年性痴呆模型鼠的影响
及作用机制。
１ 材料
１１ 仪器 ＭＧ－２迷宫（张家港市生物医学仪器
厂），高速冷冻离心机（贝克曼，美国），７２１分光光度
计（上海第三分析仪器厂），高速分散器ＸＨＦ－１（上
海金达生化仪器厂），ＢｅｃｋｍａｎＣｏｕｌｆｅｒＬＸ２０全自动
生化仪（贝克曼，美国）。
１２ 药品与试剂 钩藤散（１９ｍＬ钩藤散浸膏加蒸
馏水配至１００ｍＬ，变成０５ｇ·ｍＬ－１浸膏溶液，实验
中所用剂量均以生药量计）；ＡｌＣｌ３（上海金山区兴塔
美兴化工厂，批号 ０３０９０１１，使用前用蒸馏水配成
４０ｍｇ·ｍＬ－１溶液）；茴拉西坦胶囊（三乐喜，０１ｇ／
粒，无锡凯西药业有限公司产品，批号２００４１０２３）；
超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、单胺氧化酶（ＭＡＯＢ）、一
氧化氮（ＮＯ）、谷光甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰＸ）、考
马斯亮蓝蛋白测定试剂盒（南京建成生物工程研究
所，批号分别为 ２００４１２２４，２００５０２２６，２００５０２２５，
２００４１２０６，２００５０２２４）。
１３ 动物 清洁级 ＳＤ大鼠，２２０～２５０ｇ，雌雄各
半，由中国科学院上海实验动物中心提供，许可证号
ＳＣＸＫ（沪）２００２００１０。
１４ 环境 清洁级，合格证号 ＳＹＸＫ（苏）２００２
０００７。
２ 方法
２１ 分组、造模［１］、给药 将大鼠分为６组，每组２０
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第３３卷第５期
２００８年３月
中 国 中 药 杂 志
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Ｖｏｌ３３，Ｉｓｓｕｅ ５
Ｍａｒｃｈ，２００８
只，雌雄各半，实验高剂量组每天灌胃给５ｇ·ｋｇ－１体
重（人的１０倍等效量），中剂量组２５ｇ·ｋｇ－１，低剂
量１２５ｇ·ｋｇ－１，阳性组每天给茴拉西坦胶囊（三乐
喜）０１ｇ·ｋｇ－１体重（人的１０倍等效量），模型组及
正常组均灌以等量生理盐水，００１ｍＬ·ｇ－１。给药５
ｄ后进行造模，除正常组外，各组用ＡｌＣｌ３以１００ｍｇ·
ｋｇ－１体重进行腹腔注射，隔日１次，连续５０ｄ，以复制
慢性铝中毒老年性痴呆模型。每周称体重１次。最
后一次腹腔注射ＡｌＣｌ３及灌胃给药１ｈ后进行迷宫试
验。结束后采血、取脑，血浆离心得血清和脑一起放
低温冰箱保存，待测相关指标。
２２ 学习训练 最后一天给药后１ｈ进行学习训
练。训练时，将大鼠放入Ⅰ臂起步区停留３ｍｉｎ后
给予电击（３５Ｖ），按Ⅰ→Ⅱ→Ⅲ→Ⅰ或Ⅰ→Ⅲ→Ⅱ
→Ⅰ连续试验：ａ项，大鼠到达安全区停留０５ｍｉｎ，
然后取出放回原臂，１ｍｉｎ后给予下次电击，达到连
续２次直接逃至安全区后，以逃入的安全区作为起
步区进行电击训练。当大鼠在三臂均达到连续２次
直接逃至安全区后，进行ｂ项试验，大鼠在Ⅰ臂起步
区停留 １ｍｉｎ后给予电击，逃至安全区停留 ０５
ｍｉｎ，再以此区作为起步区予以电击，连续循环电击
训练（每两次电击之间休息１ｍｉｎ），以大鼠连续１０
次（或９／１０）正确反应（直接逃入安全区）作为空间
辨别记忆指标，每回连续学习的电击总次数一般不
超过３０次。最后将ａ项和ｂ项相加作为训练成绩，
统计学习成绩。
２３ 记忆测试 训练后２４ｈ进行测试，测试方法
同训练。
２４ 血中 ＮＯ，ＬＤＨ测定 测试后眼眶取血，３０００
ｒ·ｍｉｎ－１离心，取上清液按试剂盒说明书所述步骤
操作，测定ＮＯ含量；ＬＤＨ由本院检验科在全自动生
化仪上测定。
２５ 脑中 ＭＡＯＢ，ＳＯＤ，ＧＳＨＰＸ的测定 大鼠取
血、处死取脑，置高速分散器中，加入预冷生理盐水
制成１０％（ｇ·ｍＬ－１）脑匀浆，按试剂盒说明书所述
步骤操作，测定蛋白质含量和ＭＡＯＢ，ＳＯＤ，ＧＳＨＰＸ
活力。
２６ 统计学处理 全部数据用 珋ｘ±ｓ表示，进行组
间ｔ检验。
３ 结果
３１ 对学习记忆的影响 钩藤散组测试成绩明显
好于模型组（Ｐ＜００１），和正常组比无明显差异。
而模型组测试成绩极显著差于正常组（Ｐ＜００１）。
由此可见，造模是成功的，并且钩藤散对 ＡｌＣｌ３所致
痴呆模型鼠有较好的益智作用（表１）。
表１ 钩藤散对ＡｌＣｌ３所致老年痴呆模型鼠
学习记忆的影响（珋ｘ±ｓ）
组别 剂量／ｇ·ｋｇ－１ ｎ 测试成绩／次
正常 － １８ ２８８３±６８４２）
模型 － １１ ４０１８±１１４４
三乐喜 ０１ １７ ３１２９±６８９２）
钩藤散 ５ １７ ２８１８±３７６２）
２５ １５ ３０００±５０１２）
１２５ １６ ３２５３±５３０１）
注：与模型组比１）Ｐ＜００５，２）Ｐ＜００１（表３同）
３２ 对脑指数的影响 模型组老鼠脑指数最低，与
正常组比有明显差异（Ｐ＜００５），说明造模是成功
的；钩藤散组与模型组比，脑指数较高，特别是高、中
剂量组差异较显著（Ｐ＜００５），与正常组比无显著
差异，说明钩藤散对ＡｌＣｌ３所造成的铝中毒性痴呆大
鼠的脑组织有较好的保护作用（表２）。
表２ 钩藤散对ＡｌＣｌ３所致老年痴呆模型鼠
脑指数的影响（珋ｘ±ｓ）
组别 剂量／ｇ·ｋｇ－１ ｎ 脑指数
正常 － １８ ００５２４±０００８９１）
模型 － １１ ００４６３±０００５０
三乐喜 ０１ １７ ００４９２±０００４４
钩藤散 ５ １７ ００５１４±０００７０１）
２５ １５ ００５０９±０００６８１）
１２５ １６ ００４９８±０００４６
注：与模型组比１）Ｐ＜００５
３３ 对增重的影响 在第１周时各组大鼠体重比
较均匀无明显差异，直到第７周，各组间体重，除了
阳性药组与模型组比差异较显著，其他各组与模型
组仍无显著差异，从第８周到第１０周，模型组与各
组比体重已有明显差异。最后１周时，模型组体重
明显最低，与高剂量组比差异极显著（Ｐ＜００１），与
中剂量组比有明显差异（Ｐ＜００５）。而钩藤散各组
与正常组比无明显差异。由此可见钩藤散能防止
ＡｌＣｌ３所致的体质下降和消瘦（表３）。
３４ 对死亡率的影响 模型组的死亡率最高，几乎
达到一半，是其他组的２倍或２倍多，虽无统计学差
异，但明显比实验组高。并且在实验过程中发现模
型组有典型的痴呆症状，老鼠不光消瘦，而且脖子歪
扭、被毛不光泽、腹腔变大有腹水、目光呆滞、反应迟
钝、食欲较差，而其他组虽有的症状也有，但只是个
别大鼠有以上症状之一且症状很轻。由此可见，钩
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第３３卷第５期
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表３ 不同时间各组大鼠体重变化（珋ｘ±ｓ）
时间
／周
正常组
（ｎ＝１８）
模型组
（ｎ＝１１）
阳性组
（ｎ＝１７）
钩藤散组
高剂量（ｎ＝１７） 中剂量（ｎ＝１５） 低剂量（ｎ＝１６）
１ ２３９１±２７３ ２４５１±２８２ ２３８１±２５６ ２３８８±２６９ ２４２６±２８９ ２４２９±２９１
６ ３０４１±４７４ ２９３１±５２８ ３２０３±３２４ ３２４７±４２４ ３０６４±３６９ ３０６２±４０１
７ ３１０７±５１６ ２８６６±５４９ ３２２１±３５６１） ３２１１±４４９ ３１８８±４０３ ３２１９±４３２
８ ３２７２±５８５１） ２８３８±５８９ ３３３２±４１８２） ３３３７±４９９１） ３３０６±３６８１） ３２４８±４４８１）
９ ３３２１±６０８ ２９１２±４３７ ３３６９±４１１２） ３４２２±３９７２） ３３３４±４００１） ３３０１±４５１１）
１０ ３３９３±６３４１） ２９２６±４７３ ３４０１±４４２１） ３４７９±４２０２） ３３６１±４２８１） ３２９５±４７２
藤散可降低ＡｌＣｌ３所致大鼠死亡率，改善大鼠身体体
质，延缓衰老（表４）。
表４ 钩藤散对ＡｌＣｌ３所致老年痴呆模型鼠
死亡率的影响（ｎ＝２０）
组别 剂量／ｇ·ｋｇ－１ 死亡／只 死亡率／％
正常 － ２ １０
模型 － ９ ４５
三乐喜 ０１ ３ １５
钩藤散 ５ ３ １５
２５ ５ ２５
１２５ ４ ２０
３５ 对脑中ＭＡＯＢ，ＧＳＨＰＸ，ＳＯＤ的影响 高、中
剂量组脑中 ＭＡＯＢ的含量明显较模型组低（Ｐ＜
００１），与正常组持平，而模型组 ＭＡＯＢ的含量显
著比正常组高（Ｐ＜０００１）。由此可见，ＡｌＣｌ３可致大
鼠脑中ＭＡＯＢ的含量明显上升，钩藤散能明显降低
单氨氧化酶的含量。与模型组比，钩藤散组的谷光
甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰＸ）含量明显较高（Ｐ＜
００１）；与正常组比，高剂量组的 ＧＳＨＰＸ含量也明
显高（Ｐ＜００１），中、低剂量组与之持平。而模型组
ＧＳＨＰＸ含量明显低于正常组（Ｐ＜００５）。由此可
见钩藤散能显著提高大鼠脑组织的 ＧＳＨＰＸ的含
量，从而加强清除过氧化物的能力，保护脑组织。模
型组脑中的 ＳＯＤ的含量明显低于正常组（Ｐ＜
００１）；钩藤散组ＳＯＤ含量明显高于模型组，并呈一
定的剂量关系，与正常组比差异不大，只是低剂量与
之相比有一定的差异。说明钩藤散能显著提高
ＳＯＤ的含量，增强抗氧化能力（表５）。
３６ 对血清中ＮＯ，ＬＤＨ的影响 钩藤散组大鼠血
表５ 钩藤散对ＡｌＣｌ３所致老年痴呆模型鼠脑ＭＡＯＢ，ＧＳＨＰＸ及ＳＯＤ的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
组别 剂量／ｇ·ｋｇ－１ ＭＡＯＢ／Ｕ·ｈ－１·ｍＬ－１ ＧＳＨＰＸ／μｍｏｌ·Ｌ－１ ＳＯＤ／Ｕ·ｍｇ－１
正常 － ２３３５±１７２ ０１９９１±０１４ ５９５０１±１２０
模型 － ３１５７±５０４ ００８４９±００５ ４４７１８±０６６
三乐喜 ０１ ２７５７±２９９１，５） ０２７２３±００４３） ５０７６６±０５９１）
钩藤散 ５ ２４４３±２４７３） ０３４５６±００４３，５） ５５５５５±０７５２）
２５ ２５０２±２８２２） ０２４８６±００５３） ５１１２５±０３９１）
１２５ ２７８３±３４８５） ０１９９４±０１０２） ５０５７３±０４７１，４）
注：与模型组比１）Ｐ＜００５，２）Ｐ＜００１，３）Ｐ＜０００１；与正常组比４）Ｐ＜００５，５）Ｐ＜００１（表５同）
清中 ＮＯ的含量显著高于模型组（Ｐ＜００１），与正
常组比无显著差异。模型组血清中ＮＯ的含量显著
低于正常组（Ｐ＜００５）。说明，ＡｌＣｌ３可导致大鼠血
中ＮＯ水平下降，钩藤散能抵抗这种下降，使 ＮＯ维
持于正常水平。模型组的ＬＤＨ最高，明显高于正常
组（Ｐ＜００１）、实验组（Ｐ＜００５），说明钩藤散对
ＬＤＨ有明显的降低作用；与正常组比，高剂量组与
之基本持平无明显差异，中、低剂量组与之有明显差
异（Ｐ＜００１），但比模型组要明显低（Ｐ＜００５）。
说明钩藤散能明显保护细胞，抑制 ＬＤＨ的漏出，从
而预防痴呆的发生（表６）。
４ 讨论
表６ 钩藤散对ＡｌＣｌ３所致老年痴呆模型鼠血清中
ＮＯ，ＬＤＨ的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
组别
剂量
／ｇ·ｋｇ－１
ＮＯ
／μｍｏｌ·Ｌ－１
ＬＤＨ
／Ｕ·Ｌ－１
正常 － １５３５２９±３８４ １４４４３±３６６５
模型 － １２２９４１±２４２ ２４６６２±７３９８
三乐喜 ０１ １５２９４１±２２７１） １８６１１±４２２８１，４）
钩藤散 ５ １６６４７１±３１３２） １８１１６±５１９２１）
２５ １６１７６５±２７１２） １８９２４±３２５３１，５）
１２５ １６４１１８±１７６３） １８６１１±４２２８１，５）
研究表明，ＡＤ患者脑中有高浓度铝的积累，铝
是ＡＤ发病的重要因素，在许多动物实验中已证实，
铝对神经系统有毒性作用。可溶性铝盐可在兔体内
诱导出神经原纤维缠结（ＮＦＴ）的产生，免疫组织化
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第３３卷第５期
２００８年３月
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