全 文 :广西八角茴香药材挥发油 GC指纹图谱研究
梁芳琳,唐春,吕高荣,邹节明
(桂林三金药业股份有限公司,广西 桂林 541004)
[摘要] 目的:研究八角茴香中挥发油的气相色谱指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法。方法:采用
GC分析方法,测定10批广西产八角茴香样品。色谱条件:HPFFAP(053mm×30m,10μm)分析柱;空气流速250mL·
min-1;氢气流速40mL·min-1;氮气流速4mL·min-1;柱程序升温80℃保持8min,以6℃·min升至180℃,保持35min。
结果:10批八角茴香得到的指纹图谱有5个共有峰,根据对照品保留时间比较,色谱中3号峰为反式茴香醚。结论:建立的
GC色谱指纹图谱分析法简单、准确,可用于八角茴香挥发油的质量控制。
[关键词] 八角茴香;气相色谱;指纹图谱;挥发油;反式茴香醚
[收稿日期] 20090406
[通信作者] 邹节明,教授级高工,博士生导师,Tel:(0773)
5842588,Email:Sanjin@glgxcninfonet
[作者简介] 梁芳琳,Tel:13507739101,Email:gxlfl777@163.com
八角茴香为木兰科植物八角茴香茴香 Ilicium
verumHookf的干燥成熟果实,性温味辛,归肝、
肾、脾、胃经。分布于广西、云南、广东、贵州等地。
具有温阳散寒、理气止痛之功效。文献[1]研究表
明本品具有抗菌、升高白细胞、雌激素活性、促进胃
肠道蠕动、促进呼吸道分泌细胞分泌等作用。据文
献[13],八角茴香中含挥发油、脂肪油、黄酮类等成
份,其中挥发油中以反式茴香醚为主,占80%以上。
广西是全国最大的八角茴香产地,气候合适八
角茴香生长,作为香料种植历史悠久,是重要经济作
物,也是一种极具广西地方特色的药材 。为更好利
用这个药材,笔者对广西不同产地八角茴香所含挥
发油进行了GC指纹图谱研究。
1 材料
Aglient6890plus+气相色谱仪,Aglient6890化
学工作站;挥发油提取器;无水乙醇(分析纯,国药
集团化学试剂有限公司),无水硫酸钠(分析纯,广
州化学试剂一厂),反式茴香醚对照品(Sigma公司,
批号A0226815);药材经专人采集,经邹节明教授鉴
定为木兰科植物八角茴香茴香 Ilicium verum
Hookf的干燥成熟果实)。各药材来源见表1。
2 方法与结果
21 对照品溶液配制
精密称取反式茴香醚对照品适量,加无水乙醇
溶解,制成每1mL含反式茴香醚36g·L-1对照品
溶液。
表1 10批八角茴香药材
No 采集地点 采集日期
1 广西容县 200610
2 广西容县 200705
3 广西玉林 200705
4 广西防城港 200710
5 广西玉林 200710
6 广西玉林 200810
7 广西容县1 200810
8 广西容县2 200810
9 广西容县3 200810
10 广西防城港 200810
22 供试品溶液的制备
取八角茴香药材粉碎成粗粉(10~20目),称取
100g置1000mL挥发油提取器,加入600mL水,
水蒸汽蒸馏提取挥发油时间8h,收集挥发油,加入
适量无水硫酸钠脱水,称取018g挥发油,加无水
乙醇溶解并定容成5mL,摇匀备用。
23 方法学考察
231 色谱条件 HPFFAP(053mm×30m,10
μm)色谱柱;氮气流速4mL·min-1;柱程序升温:
80℃保持8min,以6℃·min-1升至180℃,保持
35min。空气流速250mL·min-1;氢气流速40mL
·min-1;进样器温度250℃;检测器温度250℃;分
流比30∶1。
232 精密度试验 精密吸取八角茴香药材(批
号0705011)供试品溶液 1μL,连续进样 5次,按
231项下条件测定,结果表明,指纹图谱中规定标
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定峰的绝对保留时间、相对保留时间、面积百分比基
本一致,(RSD分别为0% ~003%,0% ~003%,
099%~133%)符合指纹图谱的检测要求。
233 稳定性试验 八角茴香药材(批号070501
1)供试品溶液,分别在0,2,4,24,30,48h,精密吸取
1μL进样,按231项下条件测定,结果表明,指纹
图谱中规定标定峰的绝对保留时间、相对保留时间、
面积百分比基本一致,(RSD分别为0% ~006%,
0%~015%,052% ~153%),表明样品在 48h
稳定。
234 重复性试验 八角茴香药材(批号070501
1),按22项下要求平行制备5份供试品溶液,分别
精密吸取1μL进样,按231项下色谱条件测定,
结果表明,指纹图谱中规定标定峰的绝对保留时间、
相对保留时间、面积百分比基本一致,(RSD分别为
0%~004%,001% ~003%,182% ~295%),
表明方法重复性良好。
24 指纹图谱的建立
241 指纹图谱的制备方法 药材按22项下方
法处理得供试品溶液,分别精密吸取对照品溶液和
各供试品溶液各 1μL注入气相色谱仪,分别按
231项下色谱条件测定,记录60min的色谱图。
242 共有峰的确定 取表1中的10批八角茴香
药材,分别按22中的方法制备供试品溶液,分别按
231项下色谱条件测定,记录 60min的色谱图。
将测定结果导入国家药典委员会公布的中药指纹图
谱评价软件进行处理,共标示了5个共有峰,以反式
茴香醚的色谱峰积分百分比最大且最稳定,因此选
择为参照物峰,其标号为S,其余共有峰的标号依次
为1,2,3(S),4,5。见图1。
图1 广西八角茴香药材挥发油气相色谱图谱
243 特征指纹峰相对保留时间及积分相对比值
根据10批供试品图谱中共有指纹峰与峰3(S)的
相对保留时间,计算平均值,标定共有峰的相对保留
时间,结果见表2。
表2 10批供试品共有峰与对照峰的相对保留时间比值
No
峰3
峰1 峰2 (S) 峰4 峰5
1 0287 0866 1 1167 0857
2 0287 0867 1 1167 0857
3 0282 0865 1 1166 0857
4 0287 0866 1 1167 0857
5 0287 0866 1 1167 0857
6 0287 0866 1 1167 0857
7 0287 0866 1 1167 0857
8 0287 0866 1 1167 0857
9 0287 0866 1 1167 0857
10 0286 0866 1 1166 0857
平均 0286 0866 1 11668 0857
根据10批供试品的测定结果,每批样品中峰3
的含量大,质量分数为 8708% ~9500%,除峰 3
外,其他各共有峰各自的百分含量均 <5%,故各共
有峰与3号峰的峰面积比值不做考察。非共有峰总
面积占总峰面积百分比为072%~271%。
244 指纹图谱的相似度计算 按照国家药典委
员会公布的中药指纹图谱评价软件计算方法,得到
各批次药材色谱指纹图谱相似度计算均在099以
上。
3 结论
从以上研究结果表明本文建立的方法用于八角
茴香中挥发油的指纹图谱质量控制,方法可行。从
研究过程测定的10批八角茴香样品看出,广西产的
八角茴香含挥发油纯度高,特征峰中,3号峰为反式
茴香醚,质量分数在挥发油中占87%以上,其他 4
个共有峰对应成分的各自质量分数均 <5%。限于
对照品,目前对5个特征峰中仅峰3确定成份,其他
4个峰的成份有待进一步研究。
[参考文献]
[1] 阴健等中药现代研究与临床应用Ⅱ[M]北京:中医古籍出
版社,1995:9
[2] 邹节明,吕高荣,钟小清,等广西不同产地八角茴香中茴香
脑的含量测定[J]中药材,2005,28(2):106
[3] 钟昌勇,陈海燕,刘虹,等八角茴香茴油提纯茴脑技术[J]
林业科技开发,2008,22(3):89
[责任编辑 周驰]
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