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Chemical constituents from Lespedeza virgata

细梗胡枝子化学成分研究



全 文 :细梗胡枝子化学成分研究
陈 艳,邓虹珠,周 毅,陈少伟,陈 彬
(南方医科大学 中医药学院,广东 广州 510515)
[摘要] 目的:研究豆科植物细梗胡枝子Lespedezavirgata的化学成分。方法:将乙醇提取物的醋酸乙酯部分
进行反复柱色谱,利用质谱对分离得到的单体进行结构鉴定。结果:分离并鉴定了7个化合物,包括4个黄酮类化
合物和3个酚酸类化合物。其中4个黄酮类化合物,分别为槲皮素3O[2″O(E6O阿魏酰基)βD葡萄糖]β
D半乳糖苷(1),7Oα吡喃鼠李糖基山柰酚苷(2),7OαL吡喃鼠李糖基山柰酚3OβD吡喃葡萄糖苷(3),槲
皮素(4),3个酚酸类化合物,分别为对羟基反式肉桂酸(5),原儿茶酸(6),对羟基苯甲酸(7)。结论:7个化合物均
为首次从该植物中分离获得。
[关键词] 细梗胡枝子;化学成分;结构鉴定
[中图分类号]R284.1 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2008)09102403
[收稿日期] 20070823
[基金项目] 广东省科技攻关项目(2006B35603002)
[通讯作者] 邓虹珠,Tel:(020)62789106,Email:denghz@
fimmu.com
  豆科胡枝子属 Lespedeza植物约60余种,主要
分布于东亚、澳大利亚东北部及北美。我国产 26
种,广泛分布于全国各省区[1]。对于胡枝子属植物
的药用价值早在《救荒本草》、《分类草药性》、《滇南
本草》中就有记载,其茎叶及根入药,味微苦,性平,
具强筋益肾,健脾祛湿,润肺清热之功效,在民间广
为应用。从20世纪40年代起,国外就胡枝子属植
物进行了化学成分的研究工作[2],从胡枝子属中分
离得到黄酮、萜类、生物碱、甾醇等多种成分,但对于
胡枝子中的另一个种L.virgata(Thurb)DC(细梗胡
枝子)的成分研究工作却少见报道。作者前期的工
作证明[3],细梗胡枝子能明显改善微小病变性肾炎
模型大鼠的肾功能。本课题组对湖北罗田产的细梗
胡枝子地上部分进行了化学成分研究,从该植物的
醋酸乙酯部分分离得到了7个化合物,经波谱解析
和对照理化常数的方法,确定结构,皆为首次从细梗
胡枝子中分离获得。
1 材料
MD-S2显微熔点测定仪,未校正;PELamda25
紫外可见分光光度计测定紫外光谱;WQF-410FT
-IR红外光谱仪(KBr压片法);ESIMS用 MDS
SCIEXAPCI2000LC-MC-MS质谱仪,直接进样测
定;BrukerDRX-400型超导核磁共振仪,内标为四
甲基硅烷(TMS);ShimadzuLC-6AD型高效液相色
谱仪(HPLC),ShimadzuRID-6A视差折光检测器,
制备色谱柱为YMCPackODSA(20mm×250mm);
柱色谱硅胶为青岛海洋化工厂生产;色谱用聚酰胺
树脂为上海摩速公司生产;柱色谱反相硅胶使用十
八烷基硅醚(DevelosilODS,5μm)、柱色谱葡聚糖
凝胶为 SephadexLH-20(AmershamBiosciences,
Sweden)均为日本 FujiSilysiaChemical.Ltd产品;
柱色谱大孔吸附树脂 DiaionHP-20为天津欧瑞生
物科技有限公司生产;实验所用试剂为广州化学试
剂厂生产,均为分析纯。
细梗胡枝子购自湖北罗田药材公司,经南方医
科大学中医药学院鉴定教研室马骥教授鉴定为豆科
胡枝子属L.virgata的细梗胡枝子的地上部分。
2 提取和分离
干燥的细梗胡枝子地上部分(57kg),用95%
乙醇回流提取3次,每次15h,提取液减压回收乙
醇浓缩得浸膏800g。将浸膏加水混悬,依次用石油
醚、氯仿、醋酸乙酯和正丁醇进行萃取。醋酸乙酯萃
取液经浓缩后得浸膏18g。将该浸膏拌样上正向硅
胶柱,用氯仿甲醇(95∶5,9∶1,8∶2)梯度洗脱得到3
个部分(Ⅰ ~Ⅲ)。将第Ⅰ部分17g上 ODS反相
硅胶柱,用甲醇水(4∶6)洗脱,获得化合物 4(25
mg)。第Ⅲ部分 2g拌样上聚酰胺柱,以乙醇水
(4∶6,1∶1,6∶4)梯度洗脱,获得化合物 1(27mg)。
第Ⅱ部分 35g上常压反相硅胶柱,依次用 3∶7,
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2008年5月
         
    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol.33,Issue 9
May,2008
1∶1,7∶3比例的甲醇水洗脱,又得到 3个部分
(Ⅱ1~3)。Ⅱ1部分共074g,上SephadexLH-20
柱,用甲醇洗脱,获得化合物5(25mg),6(22mg)。
Ⅱ2部分 035g,用制备 HPLC分离,以甲醇水
(6∶4)为流动相,获得化合物2(10mg),3(17mg)。
Ⅱ3部分056g上SephadexLH-20,用甲醇洗脱,
获得化合物7(32mg)。
3 结构鉴定
化合物1 淡黄色粉末,MgHCl反应阳性,Mol
ish反应阴性,ESIMSm/z803[M+H]+。1HNMR
(DMSOd6,400MHz)δ:1263(1H,s,5OH),1076
(1H,s,7OH),983(1H,s,4′OH),943(1H,s,
3′OH),761(1H,dd,J=84,20Hz,H6′),754
(1H,d,J=20Hz,H2′),737(1H,d,J=160Hz,
Hα),709(1H,d,J=16Hz,H2″″),687(1H,dd,
J=80,16Hz,H6″″),685(1H,d,J=84Hz,H
5′),673(1H,d,J=80Hz,H5″″),628(1H,d,
J=16Hz,H8),618(1H,d,J=160Hz,Hβ),
615(1H,d,J=16Hz,H6),569(1H,d,J=78
Hz,H1″),467(1H,d,J=80Hz,H1),374
(3H,s,OCH3)。
13CNMR(DMSOd6,100MHz)δ:
1777(C4),1666(Cγ),1641(C7),1613(C
5),1561(C9),1555(C2),1494(C4″″),1486
(C4′),1478(C3″″),1449(Cα),1448(C3′),
1330(C3),1256(C1″″),1229(C6″″),1212
(C6′),1209(C1′),1160(C5′),1154(C2′),
1152(C5″″),1143(Cβ),1110(C2″″),1046
(C1),1039(C10),986(C6),987(C1″),
935(C8),813(C2″),765(C5″),757(C3),
747(C2),739(C5),733(C3″),695(C
4),677(C4″),634(C6),599(C6″),558
(OCH3)。以上数据与文献[4]报道一致,故鉴定为
槲皮素3O[2″O(E6O阿魏酰基)βD葡萄
糖]βD半乳糖苷。
化合物 2 黄色粉末状结晶,MgHCl反应阳
性,Molish反应阳性。ESIMSm/z431[M-H]-。
1HNMR(DMSOd6,400MHz)δ:1246(1H,s,5
OH);1013(1H,s,OH4′),806(2H,d,J=80Hz,
H2′,6′),691(2H,d,J=80Hz,H3′,5′),1013
(1H,sOH4′);958(1H,s,OH3);681(1H,s,H
8),641(1H,s,H6),554(1H,d,J=2Hz)为鼠李
糖的端基质子信号,根据其偶合常数确定苷键构型
为α型;112(3H,d,J=4Hz)为鼠李糖上甲基的H
信号。13CNMR谱中,苷元部分给出了 15个碳信
号,13CNMR(DMSOd6,100MHz)δ:1761(C4),
1628(C7),1604(C5),1594(C4′),1557(C
9),1475(C2),1360(C3),1297(C2′,6′),
1155(C3′,5′),1215(C1′),1047(C10),988
(C6),943(C8),984(C1″),716(C2″),703
(C3″),701(C4″),698(C5″),179(C6″)。
其1HNMR,13CNMR谱数据与文献[5]对照相一
致,故鉴定化合物为山柰酚7OαL吡喃鼠李糖苷
(kaempferol7OαLrhamnopyranoside)。
化合物 3 黄色无定形粉末,MgHCl反应阳
性,Molish反应阳性。ESIMSm/z593[M-H]-。
1HNMR(DMSOd6,400MHz)δ:1259(1H,s,5
OH),1016(1H,s,4′OH);808(2H,d,J=80Hz,
H2′,6′),687(2H,d,J=80Hz,H3′,5′),682
(1H,s,H8),644(1H,s,H6),110(3H,d,J=64
Hz,HRha6),554(1H,d,J=2Hz,HRha1),546
(1H,d,J=64Hz,HGlc1)。13CNMR(DMSOd6,
100MHz)δ:1776(C4),1616(C7),1609(C5),
1601(C4′),1567(C2),1560(C9),1335(C
3),1310(C2′,6′),1151(C3′,5′),1208(C1′),
1057(C10),984(C6),945(C8);1008(Glc
1),776(Glc5),764(Glc3),742(Glc2),702
(Glc4),608(Glc6),994(Rha1),716(Rha
4),702(Rha3),701(Rha2),698(Rha5),178
(Rha6)。以上质谱数据与文献[6]报道一致,故鉴
定化合物3为7OαL吡喃鼠李糖基山柰酚3Oβ
D吡喃葡萄糖苷(7OαLrhamnopyransylkaempef
erol3OβDglucopyranoside)。
化合物4 黄色针状结晶,MgHCl反应阳性,
Molish反应阴性。ESIMSm/z301[M-H]-。其
1HNMR(DMSOd6,400MHz),
13CNMR(DMSOd6,
100MHz)谱数据与文献[7]一致,故鉴定化合物为
槲皮素(quercetine)。
化合物 5 白色颗粒状结晶;ESIMSm/z163
[M-H]-。mp135~136℃;1HNMR(acetoned6,
400MHz)δ:763(1H,d,J=16Hz,Hβ);755(2H,
d,J=10Hz,H2,6);690(2H,d,J=10Hz,H3,
5),633(1H,d,J=16 Hz,Hα)。13 CNMR
(acetoned6,100MHz)δ:1681(C9),1607(C4),
1446(C7),1299(C2,6),1266(C1),1175(C
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8),1160(C3,5)。以上数据与文献[8]报道的对
羟基反式肉桂酸一致,故化合物5确定为对羟基反
式肉桂酸(Eβhydroxycinnamicacid)。
化合物6 白色片状结晶;mp197~198℃;ESI
MSm/z153[M -H]-。1HNMR(DMSOd6,400
MHz)δ:1227(1H,s,COOH),1015(2H,s,3,4
OH),734(1H,d,J=2Hz,2H),729(1H,dd,J=
20,8Hz,6H),677(1H,d,J=8Hz,5H)。13C
NMR(DMSOd6,100MHz)δ:1675(C7),1502(C
4),1450(C3),1221(C6),1219(C1),1167
(C2),1154(C5)。以上数据与文献[9]报道原儿
茶酸一致,故化合物6确定为原儿茶酸(protocate
chuicacid)。
化合物7 白色颗粒状结晶;mp210~211℃;
ESIMSm/z153[M-H]-;1HNMR(DMSOd6,400
MHz)δ:779(2H,d,J=8Hz,H2,6),682(2H,d,
J=8Hz,H3,5)。13CNMR(DMSOd6,100Mz)δ:
1664(C7),1618(C4),1302(C2,6),1217(C
1),1153(C3,5)。以上1HNMR,13CNMR谱数据
与文献[10]对照相一致,故鉴定化合物7为对羟基
苯甲酸(phydroxybenzoic)。
[参考文献]
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ChemicalconstituentsfromLespedezavirgata
CHENYan,DENGHongzhu,ZHOUYi,CHENShaowei,CHENBin
(InstituteofTraditionalChineseMedicine,SouthMedicalUniversity,Guangzhou510515,China)
[Abstract] Objective:ToinvestigatethechemicalconstituentsofLespedezavirgata.Method:Theconstituentswereisolated
bycolumnchromatographyandtheirstructureswereelucidatedbychemicalpropertiesandspectroscopicevideuce.Result:Sevencom
ponentswereisolatedandidentifiedasquercetin3O[2″O(E6Oferuloyl)βDglucopyranosyl]βDgalactopyranoside(1),
kaempferol7OLrhamnopyranoside(2),7OαLrhamnopyransylkaempeferol3OβDglucopyranoside(3),quercetine(4),Eβ
hydroxycinnamicacid(5),protocatechuicacid(6),phydroxybenzoic(7).Conclusion:SevencomponentsareisolatedfromL.vir
gataforthefirsttime.
[Keywords] Lespedezavirgata;chemicalconstituents;structuralidentification
[责任编辑 王亚君
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