全 文 ：2110 样品测定 对 v批样品进行测定 o每粒胶囊
含量分别为 s1uwuos1uwtos1uvy °ª∀
3 讨论
本试验中曾对甲醇 2水 kyxΒvxoysΒwsoxxΒwxlv种流
动相进行比较 o结果甲醇 2水 kxxΒwxl分离效果较好 ∀
进行了甲醇 !乙醇及 ysh乙醇 v种提取溶剂作
比较 o结果 v种提取溶剂效率相仿 o但稀乙醇提取杂
质较多 ∀采用甲醇作溶剂比乙醇柱效高 o故选择甲
醇作为提取溶剂 ∀
≈参考文献
≈t 苗明山 o李振国 1中药质量控制技术 ≈ 1北京 }人民卫生出
版社 ousss}t||1
≈u 吴晓风 o陈 虹 o赵志茹 1°≤法测定生脉饮中五味子醇甲
的含量 ≈ 1药物分析杂志 oussvou{kul}v|1
≈v 陈志林 o贾梅林 o谢 桦 1°≤法测定五味子醇囊中五味子
醇甲的含量 ≈ 1药物分析杂志 oussvouvkvl}uvs1
≈责任编辑 鲍 雷
≈收稿日期 ussw2tu2ts
≈通讯作者 3 王宗春 oר¯}tvszuzt||u{o∞2°¤¬¯} ¬¯∏«²±ªº½¦
«²·°¤¬¯1¦²°
苦碟子注射液中细菌内毒素的检测方法
王宗春 t3 o常 聪 u o彭 燕 t o张玲莉 t
kt1武汉大学 人民医院 药学部 o湖北 武汉 wvssys~ u1武汉大学 药学院 o湖北 武汉 wvsszul
苦碟子注射液主要成分为抱茎苦荬菜 o具有活
血止痛 !清热祛瘀作用 o临床用于瘀血闭阻的胸痹 !
胸闷 !心痛 !口苦 !舌暗红或存瘀斑等 ∀至今未有该
制剂细菌内毒素检查的报道 o本研究通过实验探讨
以鲎试剂法取代热原检查法检测苦碟子注射液中细
菌内毒素的可行性 ∀
1 仪器与材料
微量取液器 kxs ∗ uxs Λo上海金林生化试剂
仪器厂 l~≥• p {s型旋涡混合器 k上海医科大学仪
器厂 l~恒温水浴箱 k江苏南通嘉程仪器有限公司 l~
细菌内毒素检查用水 k厦门鲎试剂实验厂 o批号
ussvstuwo每支 u °l~细菌内毒素标准品 k中国药
品生物制品检定所 o批号 ussu2zo每支 txs ∞l~鲎
试剂 k厦门鲎试剂实验厂 o批号 ussvswsto灵敏度
s1x ∞# °pt ~批号 ussvsxuto灵敏度 s1ux ∞#
°pt l~鲎试剂 k湛江安度斯生物有限公司 o批号
ussvswtuo灵敏度 s1ux ∞# °pt l~细菌内毒素检
查用具 k厦门鲎试剂实验厂 l~苦碟子注射液 k通化
华夏药业有限责任公司 o规格 ts °o批号
ussvsxttoussvsvtxoussvswu|l∀
2 方法与结果
211 鲎试剂灵敏度复核 ≈t
将细菌内毒素工作标准品用细菌内毒素检查
用水溶解 o在旋涡混合器上混匀 tx °¬±o然后稀释
成 u1sot1sos1xos1ux Κw个浓度等级的内毒素标
准溶液 o每稀释一步均应在旋涡混合器上混合 vs
¶∀每一浓度平行做 w支 o每管加入待复核的鲎试
剂 s1t °和内毒素标准溶液 s1t °∀同时用细
菌内毒素检查用水做 u支阴性对照管 o共 t{管 o
轻轻混匀后 o封闭管口 o垂直放入 kvz ? tl ε 恒温
水浴箱中 o保温 kys ? ul °¬±o结果表明 s1x Κ Κ
¦u Κo见表 t∀
表 t 鲎试剂灵敏度复核
厂家
Κ
r∞# °pt
细菌内毒素浓度 rΚ
uqs tqs sqx squx
阴性对照
Κ≤
r∞# °pt
厦门鲎试剂 sqx n n n n n n n n p p p p p p p p p p sqxs
厦门鲎试剂 squx n n n n n n n n p p p p p p p p p p squx
湛江安度斯 squx n n n n n n n n p p p p p p p p p p squx
212 初筛实验
21211 细菌内毒素限值 kΛl的确定 ≈uov 苦碟子注
射液临床每次最大用量为 ws °o加入于 uxs °输
#szwt#
第 vt卷第 tz期
ussy年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφΧηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vto¶¶∏¨ tz
≥ ³¨·¨°¥¨ µoussy
液 ks1|h氯化钠或 xh葡萄糖注射液 l中在 t «内滴
注完毕 o故 Μ wsrkt ≅ ysl s1yz °# ®ªpt # «pt
k输液时间不足 t «按 t «计算 o人平均体重按 ys ®ª
计算 lo静脉注射剂的致热阈值 Κ为 x ∞# ®ªpt #
«pt o因此细菌内毒素限值 ΛΚ/Μ z1x ∞ # °pt ∀
21212 稀释供试品 ≈wox 计算苦碟子注射液的有
效稀释倍数 ∂ ⁄o ∂ ⁄ ΛrΚo当 Κ为 s1xos1uxo
s1tuxos1syos1sv ∞ # °pt时 o相应的 ∂ ⁄s1x
txo ∂ ⁄s1ux vso ∂ ⁄s1tux yso ∂ ⁄s1sy tuso
∂ ⁄s1sv uwso用细菌内毒素检查用水把供试品稀
释成以上 x个浓度 o备用 ∀
21213 稀释内毒素工作标准品 用上述不同浓度
的样品系列溶液将内毒素工作标准品稀释成 t1s
∞# °pt kuΚlo备用 ∀
21214 加样及反应 进行供试品阴性对照 k°≤ l
和供试品阳性对照 k°°≤ lu个系列的反应 ∀ °≤系
列 }取上述经灵敏度复核合格的鲎试剂 kΚ s1x ∞
# °pt l加细菌内毒素检查用水溶解 o分别取 s1t
°于 ts支反应管中 o再各加入上述稀释好的供试
品 s1t °o每一供试品浓度重复 u反应管 ∀ °°≤系
列 }取上述鲎试剂 kΚs1x ∞# °pt l加细菌内毒
素检查用水溶解 o分别取 s1t °于 ts支反应管中 o
再各加入上述稀释好的 uΚ的内毒素工作标准品
s1t °o每一供试品浓度重复 u反应管 ∀将两系列
的反应管置 kvz ? tl ε 水浴中 o保温 kys ? ul °¬±∀
反应结果见表 u∀
表 u 苦碟子注射液初步筛选试验
供试品稀释倍数 tx vs ys tus uws
°≤系列 p p p p p p p p p p
°°≤系列 p p n n n n n n n n
213 干扰试验
根据初筛实验结果 o选择供试品稀释倍数为 vs
倍 o即可排除干扰作用 ∀选取灵敏度为 s1ux ∞#
°pt的不同产家鲎试剂 o用细菌内毒素检查用水将
样品稀释 vs倍进行干扰试验 ∀干扰试验按药典
usss年版细菌内毒素检查法的供试品干扰试验项
进行 o结果见表 v∀
结果显示 o∞¶在 s1x ∗ u1sΚ且 ∞·在 s1x ∗ u1s
∞¶o故认为将供试品稀释 vs倍以上对不同厂家生产
的鲎试剂与内毒素的反应不产生干扰 ∀
表 v 苦碟子注射液干扰试验
鲎试剂厂家 样品批号
内毒素浓度 r∞# °pt
sqxs squx sqtux sqsy
阴性对照 结果
厦门鲎试剂 检查用水 n n n n n n n n n p p p p p p p p p ∞¶ squt
实验厂 ussvsxtt n n n n n n n p p p p p p p p p p p ∞· sqvs
ussvsvtx n n n n n n n n n p p p p p p p p p ∞· squt
ussvswu| n n n n n n n n n n p p p p p p p p ∞· sqt{
湛江安度斯 检查用水 n n n n n n n p p p p p p p p p p p ∞¶ sqvs
生物有限公司 ussvsxtt n n n n n n n n n p p p p p p p p p ∞· squt
ussvsvtx n n n n n n n p p p p p p p p p p p ∞· sqvs
ussvswu| n n n n n n n n n p p p p p p p p p ∞· squt
3 讨论
注射剂质量控制中 o采用家兔法控制细菌内毒
素操作复杂 o影响因素多 o而且费时 ~鲎试剂法具有
操作简单 !灵敏度高 !重复性好 !实验性强等优点 ∀
初筛试验只是一种预试验 o最终要经干扰试验
验证 o目的是评价样品对鲎试剂与内毒素凝集反应
的干扰性质及干扰程度 o以便初步筛选出对检查无
干扰的样品浓度范围及相应的鲎试剂灵敏度 o从而
为干扰试验提供参数 o避免鲎试剂的浪费 ∀从表 u
结果可看出 o样品对细菌内毒素检查的干扰性质为
抑制作用 o对内毒素检查法无干扰的有效稀释倍数
为 vs倍 o可选择灵敏度为 s1ux ∞∏# °pt的鲎试剂
对相应的样品稀释浓度进行干扰试验 ∀
≈参考文献
≈t 中国药典 ≈≥ q二部 q usss}附录 {yq
≈u 黄清泉 o夏振民 q药品细菌内毒素检查的实验设计 ≈ q中国
药学杂志 ot||zo vukulΒzuq
≈v 苑庆华 o唐元泰 o赵海山 o等 q右旋糖酐 us葡萄糖注射液细菌
内毒素检测 ≈ q药物分析杂志 o usstoutkwl}u|vq
≈w 施 震 o尹银嘉 o李 华 q注射用头孢替唑中细菌内毒素的
检测 ≈ q中国药学杂志 oussvo v{kxl}vzzq
≈x 张庚伦 o祝清芬 o范治云 q胞磷胆碱钠氯化钠注射液细菌内
毒素检测方法的研究 ≈ q中国生化药物杂志 q ussuo uvkwl}
t{{q
≈责任编辑 鲍 雷
#tzwt#
第 vt卷第 tz期
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中 国 中 药 杂 志
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