全 文 ：RP2HPLC法测定注射用苦碟子中木犀草素
孔令钰1 ,于治国2 3 ,曲树明1
(1. 天津市医药科学研究所 ,天津 　300020 ;2. 沈阳药科大学药学院 ,辽宁 沈阳 　110016)
摘 　要 :目的 　建立 RP2HPLC 法测定注射用苦碟子中木犀草素的方法。方法 　样品经酸水解后测定。色谱条件
为 Apollo2C18色谱柱 (250 mm ×416 mm ,5μm) ;流动相 :012 %磷酸2乙腈 (74 ∶26) ;检测波长 :351 nm ;体积流量 :
110 mL/ min ;柱温 :室温 ;进样量 : 10μL 。结果 　木犀草素在 4158～4518μg/ mL 时 ,峰面积线性关系良好 ( r =
01999 9) ,平均回收率为 9913 %。结论 　该法适用于注射用苦碟子中木犀草素的测定。
关键词 :注射用苦碟子 ;木犀草素 ;高效液相色谱
中图分类号 :R286102 　　　文献标识码 :B 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0721076202
　　苦碟子为菊科植物抱茎苦荬菜 I xeris sonchi 2
f ol i a Hance 的当年生干燥全草 ,具有清热解毒、排
脓、止痛之功效[1 ] 。临床上注射用苦碟子用于治疗
冠心病、脑梗死等疗效显著[2 ] 。黄酮为注射用苦碟
子的主要有效成分 ,其中以木犀草素及其糖苷的量
较高 ,其具有较强的抗氧化活性 ,在体内有抗菌、抗
病毒及降低血脂和胆固醇的作用[3 ] 。由于苦碟子中
的木犀草素多以糖苷形式存在 ,苷元的量极低 ,难以
检测。故本实验通过酸水解方法 ,使许多复杂的木
犀草素糖苷转化成木犀草素黄酮苷元并通过高效液
相色谱法予以测定。本方法准确、可靠 ,对确保注射
用苦碟子的质量提供了可靠的检测方法。
1 　仪器与试药
　　Shimadzu L C —10A T vp 高效液相色谱仪 (日
本岛津) ,Shimadzu SPD —10A 紫外检测器 (日本岛
津) ,Anastar 色谱工作站 , Met tler A E 240 电子分
析天平。
　　木犀草素对照品 (中国药品生物制品检定所 ,批
号 :1115202200201) ,乙腈、甲醇为色谱纯 ,水为二次
重蒸水、注射用苦碟子 (自制) 。
2 　方法与结果
211 　色谱条件与系统适用性试验 :Apollo2C18 色谱
柱 (250 mm ×416 mm ,5μm) ;流动相 : 012 %磷酸2
乙腈 (74 ∶26) ;检测波长 : 351 nm ;体积流量 : 110
mL/ min ;柱温 :室温 ;进样量 : 10μL 。理论塔板数
按木犀草素峰计算不低于 5 000。在上述色谱条件
下 ,对照品和样品的色谱图见图 1。
212 　对照品储备溶液的制备 :取木犀草素对照品 t/ min3 2木犀草素3 2luteolin图 1 　木犀草素对照品( A) 、注射用苦碟子( B)和辅料( C)的 HPLC色谱图Fig11 　HPLC Chromatograms of luteolin reference 　　substrance ( A) , Plantula I xeridis Sonchi f oliaefor injection ( B) , and manntol ( C)9116 mg ,置于 50 mL 量瓶中 ,用甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,即得。取对照品储备溶液 0175 mL 置 10mL 量瓶中 ,用甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,即得。213 　供试品溶液的制备21311 　酸度的选择 :取装量差异下苦碟子冻干粉针5 支 ,分别用 30 mL 甲醇溶解在 100 mL 锥形瓶中 ,并分别加入 5 mL 体积分数分别为 20 %、25 %、30 %、35 %、40 % HCl ,于沸水浴中回流水解 2 h。放冷 ,置 50 mL 量瓶中 ,用甲醇稀释至刻度。经0145μm 微孔膜滤过后进行色谱分析。结果木犀草素质量分数依次为 01203、01 228、01268、01304、01215 mg/ 支。结果表明酸度过高、过低均导致木犀草素质量分数偏低 ,而以 35 % HCl 水解所得木犀草素质量分数较高。
21312 　水解温度对分析结果的影响 :取装量差异下
·6701· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 7 期 2009 年 7 月
3 收稿日期 :2008210205　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
作者简介 :孔令钰 (1980 —) ,女 ,天津人 ,研究实习员 ,硕士 ,主要研究药物分析及药动力学方面。
Tel :13682103787 　E2mail :lingyu_kong @1631com3 通讯作者　于治国
苦碟子冻干粉针 5 支 ,分别用 30 mL 甲醇溶解在
100 mL 锥形瓶中 ,加入 35 % HCl 5 mL ,分别在 80、
85、90、95、9919 ℃下水解 2 h。放冷 ,置 50 mL 量瓶
中 ,用甲醇稀释至刻度。经 0145μm 微孔膜滤过后
进行色谱分析。结果木犀草素质量分数依次为
01282、01310、01300、01295、01304 mg/ 支。表明以
85 ℃水浴水解较适宜。
21313 　水解时间对分析结果的影响 :取装量差异下
苦碟子冻干粉针 5 支 ,分别用 30 mL 甲醇溶解在
100 mL 锥形瓶中 ,加入 35 % HCl 5 mL ,在 85 ℃水
浴条件下 ,分别水解 115、2、215、3、315 h。放冷 ,置
50 mL 量瓶中 ,用甲醇稀释至刻度 ,经 0145μm 微
孔膜滤过后进行色谱分析。结果木犀草素质量分数
依次为 01260、01310、01327、01298、01304 mg/ 支。
表明水解 215 h 所得木犀草素质量分数较高 ,水解
较完全。
　　综合以上 3 方面因素 ,选取水解条件为 :取装量
差异下苦碟子冻干粉针 1 支 ,用 30 mL 甲醇溶解在
100 mL 锥形瓶中 ,加入 35 % HCl 5 mL ,在 85 ℃水
浴条件下水解 215 h。
21314 　供试品溶液的制备 :取装量差异下苦碟子冻
干粉针 1 支 ,用 30 mL 甲醇溶解在 100 mL 锥形瓶中 ,
加入 35 %HCl 5 mL ,在 85 ℃水浴条件下水解 215 h。
放冷 ,置 50 mL 量瓶中 ,用甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,用
微孔滤膜 (0145μm)滤过 ,取续滤液 ,即得。
214 　线性关系的考察 :分别吸取木犀草素对照品储
备溶液 0125、015、1、115、2、215 mL 置 10 mL 量瓶
中 ,用甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,分别精密吸取
10μL ,进样 ,测定木犀草素峰面积。以峰面积 ( Y)
对质量浓度 ( X ) 进行线性回归 ,得回归方程 Y =
15 103 430 X + 498 ( r = 01 9999) 。结果表明木犀草
素在 4158～4518μg/ mL 与峰面积呈良好的线性关系。
215 　精密度试验 :精密吸取木犀草素对照品溶液重复
进样 6 次 ,记录色谱图 ,结果峰面积 RSD 为 0147 %。
216 　稳定性试验 :精密吸取同一供试品溶液 ,分别在
0、2、4、6、8、10 h 进样 ,记录色谱图 ,结果木犀草素峰面
积 RSD 为 0133 % ,表明供试品溶液在 10 h 内稳定。
217 　重现性试验 :取同一批注射用苦碟子 ,制备 5
份供试品溶液 ,进样测定 ,测得木犀草素平均质量分
数为 01320 mg/ 支 ,RSD 为 216 %。
218 　回收率试验 :采用加样试验法。取同一批苦碟
子冻干粉针 10 支 ,混匀 ,精密称取 9 份 ,每份半支
量 ,分为 3 组 ,每组 3 份 ,各组分别加入木犀草素对
照品储备溶液 015、1、115 mL ,制备供试品溶液 ,测
定 ,计算回收率 ,结果平均回收率为 9913 % ,RSD 为
113 %( n = 9) 。
219 　样品测定 :取 3 批注射用苦碟子 ,制备供试品
溶液 ,测定 ,计算其中木犀草素的质量分数 ,分别为
01295、01331、01321 mg/ 支。
3 　讨论
　　流动相曾分别选用甲醇2014 %磷酸 (50 ∶50) 、
乙腈2012 %磷酸 (30 ∶70) 和乙腈2012 %磷酸 (26 ∶
74)试验。结果采用甲醇2014 %磷酸 (50 ∶50) 、乙
腈2012 %磷酸 (30 ∶70) 时 ,木犀草素与干扰峰未能
完全分离[4 ] ,乙腈2012 %磷酸 (26 ∶74) 分离效果最
佳 ,故选择。
参考文献 :
[ 1 ] 　江苏新医学院 1 中药大辞典 [ M]1 上海 :上海人民出版社 ,
19771
[ 2 ] 　国家中成药标准汇编[ S]1内科心系分册 ,20021
[ 3 ] 　王宪楷1 天然药物化学[ M ]1 第 2 版1 北京 :人民卫生出版社 ,
19941
[ 4 ] 　刘成红 ,曹　红 ,邢俊波1 HPLC 法测定广东紫珠及其制剂宫
复康胶囊中木犀草素[J ]1 中草药 ,2006 ,37 (4) :53925411
综合评分法优化蒜油的β2环糊精包合工艺
刘 　毅 ,张丽艳 3 ,谢 　宇 ,罗 　君 ,李 　健
(贵阳中医学院 药学系 ,贵州 贵阳 550002)
摘 　要 :目的 　优选蒜油β2环糊精包合的最佳工艺。方法 　以包合物收得率和大蒜素利用率为测评指标 ,采用正
交设计综合评分法优化蒜油β2环糊精包合工艺 。结果 　优选出包合工艺条件为 :大蒜油、β2环糊精和水比例为 1 ∶
8 ∶80 ,包合时间 1 h ,包合温度 35 ℃。结论 　蒜油的包合方法合理可行。
·7701·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 7 期 2009 年 7 月
3 收稿日期 :2008210210　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
基金项目 :中药现代化科技产业研究开发专项项目[黔科合中药专字 (2004) 13 号 ] ;贵州省科技厅专项项目
作者简介 :刘　毅 (1966 —) ,女 ,贵州贵阳人 ,副教授 ,主要从事药物制剂教学与新剂型、新制剂开发。
Tel :13984016122 　E2mail : liuyi6604 @1261com3 通讯作者　张丽艳　Tel : (0851) 5929104 　E2mail : zly1964 @1631com