全 文 ：中草喃ChineseTraditionalandHerbDrugs第37卷第4期2006年4月
RP—HPLC法测定苦碟子中腺苷
尹然，王凯，陈晓辉，毕开顺‘
(沈阳药科大学药学院．辽宁沈阳1i0016)
苦碟子，学名抱茎苦荬菜lxe—ssonchifolia
(Bge．)Hance，为菊科苦荚菜属(1xerisCass．)植
物，具有清热解毒、凉血、活血、排脓之功效o]。现代
药理学和临床试验表明，苦碟子具有镇痛、镇静和心
血管等多方面的活性，可用于冠心病、心绞痛、心肌
梗死等症口]。苦碟子主要成分有黄酮类、三萜类及腺
苷等。研究表明，腺苷(adenosine)具有明显的扩张
血管，改善微循环，增强组织细胞营养，改善缺血缺
氧的作用，同时还具有抗血小板聚集，降低全血粘度
的作用”]。目前对苦碟子药材中腺苷的测定尚未见
文献报道。本实验建立了RP—HPLC法测定苦碟子
中腺茁的量，方法简便易行，分离效果好，准确可靠。
1仪器与试药
LC10A高效液相色谱仪(日本岛津公司)，
sPD—IOA紫外榆测器；N2000双通道色谱工作站
(浙江大学智能信息工程有限公司)；uV265F紫
外分光光度计(日本岛津公司)；腺苷对照品(质量分
数：99％；百灵威化学技术有限公司)；苦碟子药材
(采自吉林和辽宁抚顺地区，后者包括不同采收期共
3批药材，分别为5月初、6月初和7月初采收；均经
沈阳药科大学药用植物研究宰孙启时教授鉴定)；甲
醇为色谱纯，水为二次重蒸水。
2方法与结果
2．1色谱条件：色谱柱：KromasilC1B柱(250mm×
4．6mm，5,um)(大连中汇达科学仪器有限公司)；
流动相：甲醇水(9：91)；体积流鼍：1．0mL／min；
检测波长：260nm}柱温：室温；进样量：20HI。。
2．2对照品溶液的制备：取腺苷对照品约5mg，精
密称定，置于50ml，量瓶中，用水溶解并定容至刻
度，摇匀，即得对照品溶液，置冰箱中冷藏备用。
2．3供试品溶液的制备：取苦碟子药材粉末约1．0
g，精密称定，置锥形瓶中，加水50mL，超声提取30
nfin，提取液滤过，滤液减压浓缩至适量，转移至lO
mI。量瓶中，定容，摇匀，以0．45“m微孔滤膜滤过，
取续滤液即得。
2．4检测波长的选择：将腺苷对照品的水溶液在波
长200～400nm进行UV扫描．在259．3Fin处有
最大吸收，选择260nm作为检测波长。
2．5色谱系统适用性试验：理论塔板数按腺苷计算
不低于13000；腺苷与相邻色谱峰之间的分离度大
于1．5；腺苷色谱峰的拖尾因子在0．95～1．05。
2．6线性关系考察：精密吸取对照品溶液0．1、
0．3、0．5、1．0、2．0、3．0mI，，置10ml。量瓶中，加水
稀释并定容至刻度，摇匀。在上述色谱条件下进行分
析，以腺苷色谱峰面积(y)对质量浓度(x)绘制标准
曲线。结果表明：腺苷在1．02～30．6pg／mL峰面积
与质量浓度呈良好的线性关系，回归方程为Y一
4．635×104X+1．829×104，r一0．9997(”=6)。
2．7精密度试验：精密吸取同一质量浓度对照品溶
液，在上述色谱条件下连续进样5次，测定腺苷峰面
积，结果RSD为1．3％。
2．8重现性试验：取同一生药样品5份，每份约
1．0g，精密称定，按“2．3”项下操作，按上述色谱条
件测定各峰面积，计算质量分数，RSD为1．9％。
2．9稳定性试验：取室温放置的同一供试品溶液，
分别于0、1．5、3、5、7、9h在上述色谱条件下进样分
析。腺苷峰面积的RSD为1．8％，结果表明供试品
溶液在9h内稳定。
2．10回收率试验：称取已知量的同一药材粉末9
份，每份约0．5g，精密称定，置锥形瓶中，分别精密
加入一定量的腙苷对照品，按“2．3”项下操作，配成
高、中、低3个质量浓度的供试品溶液，在上述色谱
条件下进样分析，计算回收率。腺苷的平均回收率为
98．9％，RSD为1．8％。
2．11样品测定：按上述方法分别对4批苦碟子药
材进行测定，进样量20“I。，以外标法计算腺苷的
量。结果见表1。色谱囹见图1。
3讨论
3．1苦碟子主产于东北及华北等地，本研究选择了．
东北两大产区吉林、辽宁的共4批苦碟子药材进行
箨薯品羿：雾05蒜08(j29579)．女。沈阳药科大学药物分析专业．硕士研究生。E—il=，。。，。。5@h。。m。m⋯
*通讯作者 毕开顺Tel：(024)23986296Emalt：ksbi@mailsyIncn
万方数据
·610· 中草茜ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第4期2006年4月
0 )1015 20 25 0 5 10 i5 20 25
，／rain
a腺苷
a—adenosl】1e
图1腺苷对照品(A)和样品(B)的HPLC图
Fig．1HPLCChromatogramsofadenosineref rence
substance(A)andsample(B)
测定。由表1可见，不同产地的苦碟子药材中腺苷的
量有一定差别，相同产地不同采收期的药材中腺苷
的量也不同。
3．2流动相的选择：本实验曾试过不同的流动相系
统，结果甲醇一水系统即可获得较好峰形；而甲醇比
例的微小变化就会明显影响分离效果，经过优化后
选定甲醇一水(9：91)作为流动相，得到了满意的分
离效果。
3．3提取溶剂的选择：本实验分别以水，甲醇，
30％、50％、70蹦、90％的甲醇和30％、50％、70％、
90％的乙醇作为提取溶剂提取腺苷，平行操作口幺}果
发现，水的提取效果明显优于其他溶剂，故选择水作
为提取溶剂，简单方便。
3．4提取方法的选择：本研究对回流、冷浸、超声波
提取法进行了比较，结果表明冷浸法的提取效率最
低，回流法和超声波法的提取率无显著差别，由于超
声法操作简便，快速，故本研究采用超声提取法。
3．5提取工艺的优化：本研究采用正交试验设计优
化腺苷的提取工艺。选择提取溶剂用量，提取次数，
提取时间3个因素，每个因素3个水平．按I。。(34)正
交表安排试验，以腺苷的量为考察指标。对正交试验
的结果进行直观和方差分析，最后选定最佳提取工
艺为50倍量水，超声提取1次，30rain。
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RP—HPLC法测定天葵子中东方唐松草苷
牛锋“2，张国恩1，崔征2，陈发奎2，屠鹏飞“2。
(1．北京大学药学院天然药物化学系，北京100088；2．沈阳药科大学中药学院生药教研室，辽宁沈阳110016)
天葵子为《中国药典22005版一部收载的中药
品种之一，是毛茛科植物天葵Semiaquilegia
adoxoides(DC．)Makino的干燥块根，具有清热解
毒、消肿散结、利水通淋等功效，用于痈肿疔疮、乳
痈、瘰疬、毒蛇咬伤、热淋、砂淋。天葵子主要含生物
碱、内酯、香豆素、酚酸及酚苷类化合物m“。东方唐
松草苷为硝基酚苷类成分，在一般植物中比较少
见”l，但在天葵子中的量较高。为了有效控制天葵子
的质量，本实验采用HPLC法建立了天葵子中东方
唐松草苷的定量分析方法。
1仪器和试剂
Agilent1100高效液相色谱仪：四元泵，在线脱
鉴量景留；眢装10}器．重大科技专项创新药物与中药现代化(2004AA223730)
作者简介：牛锋(1977)，内蒙古乌海人，博士研究生，主要从事天然药物化学和中药质量研究工作
。通讯作者E—m屠ai鹏l：飞niufeTnegl0：82(。81(茸。y)a8h2080。,2c705m。．。鼍_mal】：pe噌f叭u@bjmued小cn
万方数据
RP-HPLC法测定苦碟子中腺苷
作者： 尹然， 王凯， 陈晓辉， 毕开顺
作者单位： 沈阳药科大学药学院,辽宁,沈阳,110016
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(4)
被引用次数： 1次
参考文献(3条)
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10. 李艳丽.刘洁 苦碟子的临床应用[期刊论文]-中国医药导刊2008,10(8)
引证文献(1条)
1.秦汝兰.黄玉 抱茎苦荬菜中腺苷超声提取工艺研究[期刊论文]-安徽农业科学 2010(22)
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