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Plant hydroponics and its application prospect in medicinal plants study

植物溶液培养及其在药用植物研究中的应用展望



全 文 :spheresandmicrocapsules.Recently,thisnewdrugdeliverysystemhasbeenappliedindevelopingnewdosageformsforthetraditional
Chinesemedicine(TCM).TCMmicroparticlescanperformseveralsoundcharacteristicsandfunctionswhicharecurentlyunavailable
inTCMpreparations,suchascontroledrelease,efectoftargeting,increasingbioavailabilityorlowtoxicity.Thismakesitpossible
thatTCMmayexertmuchhighertherapeuticeficacyandshowlowersideefectsaswel.AlthoughthestudiesonTCMmicroparticles
arestilinthebeginningstage,microparticlepreparationofTCMhasgivenrisetocomprehensiveatentionandwilhaveawonderful
prospect.Theprogressinthisfieldisreviewedinthisarticle.
[Keywords] traditionalChinesemedicinepreparation;microspheres;microcapsules [责任编辑 鲍 雷]
植物溶液培养及其在药用植物研究中的应用展望
曾 燕,郭兰萍,黄璐琦,孙宇章
(中国中医科学院 中药研究所,北京 100700)
[摘要] 介绍了植物溶液培养的原理、方法,列举了溶液培养在农业、林业领域的研究实例,分析了运用溶液
培养法研究元素及环境胁迫影响药用植物生理、药用植物激素生理效应及其快繁、化感作用方面的可行性与优势。
指出溶液培养法将在药用植物研究中得以广泛应用。
[关键词] 溶液培养;药用植物;应用展望
[中图分类号]S567 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2007)05037403
[收稿日期] 20060209
[基金项目] 国家自然科学基金项目(30672616);国家重点基础
研究发展计划(2006CB504700);国家科技支撑计划(2006038077028)
[通讯作者] 黄璐琦,Tel:(010)640144112955,Email:huan
gluqi@263.net
  溶液培养又称水培,即不用固体基质(介质),将植物直
接种在营养液中的一种无土栽培方式,是最早得到应用的一
种无土栽培。至今仍然是植物生理学研究的一种重要手段。
早在19世纪60年代,德国科学家萨克斯就进行了溶液培养
试验。20世纪30年代末,美国科学家杰瑞克将这一技术应
用到农作物生产中并且获得了成功,为这一技术在农业生产
上的应用奠定了基础。
目前世界上已有许多国家把溶液培养应用到生产上,我
国有些单位已将这些方法应用于水稻育苗、花卉栽培和蔬菜
生产[110]。同时,应用溶液培养法对植物生长、发育等生理
方面进行研究已成为一大热点。这对于引入新方法对药用
植物进行研究是一大借鉴。
1 溶液培养的原理
只要满足植物正常生长发育的要求(光、温、水、气、必需
元素),植物就可以在水中生长。溶液培养技术的关键是充
分提供植物的根系所需的氧和营养,溶液培养可以有效地控
制提供给植物的矿质元素的种类和数量,它可以使离子浓度
始终处于相对平衡状态,把必需矿质元素配制成培养液培养
植物,并以营养液循环流动、充氧等方法对植物进行供养。
2 溶液培养的方法
2.1 器材
培养罐、通气设备(鱼泵或无油气泵)、pH计、黑纸、贮
液瓶、量筒、移液管、海棉或棉花等。
2.2 营养液
营养液是无土栽培的核心部分,它是将含有各种植物必
需营养元素的化合物溶解于水中所配制而成的溶液。至今
为止已研究出了200多种营养液配方,其中以Hoagland研究
的营养液配方最为常用,以该配方为基础,稍加调整就可演
变形成许多的营养液配方。
2.3 方法与步骤
2.3.1 准备工作 幼苗准备:种子用漂白粉溶液灭菌05
h,用灭菌水洗数次,然后放在干净的湿石英砂中发芽,加以
蒸馏水培养长至一定高度。选择生长势相同的植株进行实
验。容器准备:选择相同的培养罐,培养罐的罐盖上要有孔,
大孔供插放植株,小孔供安放通气管,通气管头上装一大孔
针头,通气管要一一连接在连通气泵的气管上。开启气泵调
节通向每罐液体的气量,罐体和罐盖上要注标记。
2.3.2 培养和管理 培养罐中放满培养液,将培养好的幼
苗,茎基部用海绵或棉花包扎,固定在培养罐盖的孔中,根系
浸没在溶液中。置温室或塑料大棚或室内光照充足处培养。
培养期注意:①经常加蒸馏水或去离子水,以保持罐内培养
液的体积,注意调整 pH值,使所培养植株生长在合适的环
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境中。②定期更换培养液,苗小时可2~3周更换一次,苗长
大后1~2周更换一次。③每天通气数次,尤其是苗大根系
多时要多通气。④定期记录植株生长发育情况,实验结束
时,即各处理的差异明显时,对植物进行彩色照相,考苗等工
作,称取植株鲜重,烘干重,必要时可增加植株成分与含量分
析等指标。
3 溶液培养在药用植物研究中的应用展望
溶液培养在中药研究领域中虽然刚起步,但在农业、林
业等领域已开展了广泛的研究应用,这对中药的研究将是一
个很好的借鉴。运用溶液培养法开展药用植物栽培方面的
研究,如不同营养成分对药材化学成分的影响,药用植物化
感作用,逆境条件下药用植物的生理变化等都有广阔的应用
前景。
3.1 元素影响药用植物生理的研究
溶液培养是研究植物矿质营养最基本和最有用的方法。
它在阐明植物的必须元素以及奠定施肥的理论基础方面起
着重要的作用。在植物的生理研究中,当要了解某种元素是
否为植物必需时,只要有意识地配制缺乏该种元素的培养
液,根据植物在该培养液中所表现出来的症状,便可了解该
元素的作用以及对植物生长发育的必要性。
运用溶液培养可根据研究目的简便而精确地调节植物
生长所需的各种因子,如养分的形态和浓度、元素比例、溶液
的pH等,因而在研究植物根系对养分的吸收和运转、养分
间的相互关系、植物对养分缺乏或中毒的反应等领域得以广
泛应用。郜红建等[1]以水稻为材料,用溶液培养法研究了稀
土镧对水稻根系分泌物中氨基酸和有机酸含量的影响,以探
讨水稻在单一稀土镧处理条件下根系分泌氨基酸和有机酸
组分的变化,得出在水培条件下镧对水稻安全生长的临界质
量浓度为50μg·mL-1,这为稀土农用的安全性评价提供科
学依据。胡莹等[2]用水溶液培养法研究钒对水稻生长的影
响,得出不同浓度钒对水稻的生长变化以及其对磷吸收的变
化。王海华等[3]以水稻幼苗为材料,采用溶液培养法研究了
镍对水稻幼苗生长的影响,结果表明,一定浓度镍处理下,水
稻幼苗的生长表现出明显的抑制,处理浓度愈大,抑制愈明
显。严红等[4]用溶液培养方法研究不同水平硼与小麦体内
磷的积累关系。结果发现硼不足反而促进磷的积累。借鉴
溶液培养法在植物营养机理研究中的应用,可将其应用于药
用植物栽培的研究中。
3.2 环境胁迫影响药用植物生理的研究
应用溶液培养法研究环境胁迫对植物生理的影响已有
不少报道,农业上已有过很多相关的研究,这也是开展药用
植物研究的一条重要思路。
如夏云剑等[5]运用溶液培养法对“甜研3号”玉米进行
耐盐碱性研究,用含一定浓度梯度的 Na2CO3的完全营养溶
液培养“甜研3号”甜玉米幼苗,定时观察并记录幼苗生长
情况,60h后测定幼苗的叶片相对含水量、叶绿素含量、根系
活力、脯胺酸含量等生理指标,并恢复用不含Na2CO3的完全
营养溶液培养,统计玉米幼苗的存活率。结果显示,20mmol
·L-1以下的Na2CO3溶液对甜玉米幼苗的伤害很轻微,幼苗
存活率较高;30mmol·L-1以上的 Na2CO3溶液对玉米幼苗
的伤害严重,属不可逆胁变。安华明等[6]以野生川梨为材
料,采用溶液培养的方法,研究了缺铁胁迫对其生理的影响。
研究得出了铁营养生理指标。结果表明,缺铁使川梨叶绿素
a、叶绿素b和叶绿素总量明显降低;光合速率显著下降,而
且光合速率的降低先于叶绿素含量的减少。川梨在介质供
铁质量浓度低于25μg·L-1时才发生失绿症状。在缺铁胁
迫下,叶内POD和CAT活性降低,但降低幅度和时间不尽相
同,而且 CAT比 POD与叶绿素的相关性更显著。缺铁叶内
各营养元素含量高于正常供铁处理,并表现出不同的变化规
律;活性铁分别与叶绿素、光合速率呈极显著正相关,可作为
铁营养生理诊断指标。李延等[7]采用溶液培养方法研究了
缺镁胁迫对龙眼苗期氮代谢的影响。最后对结果做统计分
析表明,缺镁胁迫下,龙眼桉酸和蛋白质含量下降是其合成
受阻、分解加剧以及活性氧毒害综合作用的结果。黄小凤
等[8]借助溶液培养方法分别对甘蔗幼苗和愈伤组织进行缺
磷处理,研究不同基因型甘蔗保护酶系统对缺磷反应的差异
性和规律性,并探讨甘蔗保护酶系反应的差异性和规律性和
甘蔗保护酶系统对缺磷胁迫的反应在细胞水平和植株水平
是否具有一致性,为利用组织培养技术进行甘蔗的磷素营养
特性的研究提供依据。因此,应用溶液培养法研究环境胁迫
对药用植物代谢生理、尤其是胁迫时化学成份的积累规律是
个简捷有效的方法。
3.3 药用植物激素生理效应研究
植物激素是植物新陈代谢产生的一系列天然化合物,如
吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA)、细胞分裂素(CTK)、脱落酸
(ABA)、乙烯等,它能以极微量的浓度影响植物细胞的分化、
分裂、伸长、发育及植物整体形态的建立、生理生化活动等。
因此在药用植物的培养液中,加入某种一定浓度的外源
植物激素,将发芽的种子或幼苗移入培养液中,使根部同时
吸收养分和外源植物激素。外源植物激素的用量可以控制
得非常精确,观察也比较方便,是一种药用植物激素生理效
应研究的好方法。如黄羌维[9]研究了 PP333和 GA对龙眼
DimocarpuslonganaLour.成花的作用及其与内源激素的关
系。结果表明:PP333处理后,iPA含量明显高于 GA的处
理,而GA含量则呈现由高到低逐渐下降的趋势;GA处理正
好相反;PP333处理后芽中的ABA含量明显低于GA处理。
表明高含量的GA和 ABA不利于花芽分化,而高含量的细
胞分裂素则有利于花芽分化。外施 PP333可缩短花序长
度,提高着果率和增加产量。药材质量好坏与其次生代谢关
系密切,而植物激素对药用植物产生的代谢产物有着密切的
关系,因此如果用溶液培养法对药用植物进行激素水平研
究,这将是研究药用植物的一个好方法。
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3.4 药用植物的快繁研究
使用溶液培养法可在人工控制的环境里不断供给植物
正常生长发育所需的各种营养和各种所需的适宜条件,从而
缩短植物的生长发育周期,使植物快速生长。因此应用溶液
培养法对中药进行快繁,对于解决一些紧缺的中药是很好的
方式。林春等[10]用灯盏花种子,采用培养基培养和溶液培
养相结合的技术,在25℃的温度下进行发芽试验,幼苗经
01%Hg溶液灭菌3min后接种于 Ms培养基上培养20d,
再转植于1/8倍Hoagland营养液中进行培养,不仅有利于生
根,还有利于成苗,提高植株成活率,加快繁殖速度。
3.5 药用植物化感作用的研究
化感作用的英文为 alelopathy,源于希腊语 alelon(相
互)和pathos(损害、妨碍)。它是指植物或微生物的代谢分
泌物对环境中其他植物或微生物的有利或不利的作用。近
年来,随着药用植物栽培的大面积推广,药用植物连作障碍
日益突出,化感作用作为连作障碍产生的重要作用之一,已
引起人们的高度重视[11,12]。
溶液培养可根据需要来研究某些植物的直接化感作用。
对于研究植物分泌到根际土中的化感物质,首先要从土壤中
提取分离出化学物质进行进行化感鉴定,有人直接用土壤样
品进行提取分离,步骤繁琐且提取不完全,如将研究植株幼
苗置于溶液中培养,则植株根分泌的化学物质直接进入培养
液中,把培养液取出再进行化感物质的分离鉴定就相对简单
了;对化感物质进行化感活性鉴定时,可把植株的培液配成
含有不同浓度的化感物质,从而易于观测化感作用的影响。
刘秀芬等[13]利用溶液培养法研究了根际区化感物质对小
麦、玉米等作物种子萌发及幼苗生长抑制的作用,从分离鉴
定出的50多种化合物中,重点研究了有代表性的3种化合
物对植物的化感作用,得到了一些很有意义的结果。
4 小结
溶液培养法是当今流行的新趋势,世界上许多国家都在
研究和发展溶液培养技术。虽然溶液培养也有其自身的一
些缺点,如需营养液循环设备,投资及耗能较多,溶液的缓冲
性能较小,另外由于植物对养分的不平衡吸收,溶液的 pH
和养分浓度会发生急剧变化,使得对研究结果的解释更加复
杂,特别对微量元素的研究影响更大。但溶液培养的诸多优
势及其在农业、林业等领域的应用已取得很大的成功,将溶
液培养技术应用于珍稀贵重药材的快繁、药用植物的生理生
化研究将会有广阔的应用前景,可带来不可估量的科学价值
和巨大的经济效益。
[参考文献]
[1]  郜红建,常 江,张自立,等.镧对水稻根分泌物中氨基酸和
有机酸含量的影响[J].安徽农业大学学报,2004,31(1):58.
[2]  胡 莹,黄益宗,刘云霞,等.钒对水稻生长的影响———溶液
培养[J].研究环境化学,2003,22(5):507.
[3]  王海华,谭新中,康 健,等.钙对水稻幼苗镍毒害的缓解效
应[J].农业环境科学学报,2003,22(3):357.
[4]  严 红,李文雄,刘锦红,等.不同水平硼与小麦体内磷积累
的关系[J].东北农业大学学报,2001,32(3):209.
[5]  夏云剑,束永俊,叶思特,等.“甜研3号”玉米耐盐碱性研究
[J].农业与技术,2004,24(5):56.
[6]  安华明,樊卫国.缺铁胁迫对川梨的生理影响[J].中国农业
科学,2003,36(8):935.
[7]  李 延,刘星辉,庄卫民.缺镁胁迫对龙眼苗期氮代谢的影响
[J].植物营养与肥料学报,2001,7(2):218.
[8]  黄小凤,谭中文,梁计南,等.缺磷胁迫下甘蔗幼苗和愈伤组
织保护酶活性的变化[J].甘蔗糖业,2005,(2):15.
[9]  黄羌维.植物生长调节剂对龙眼内源激素及花芽分化的影响
[J].云南植物研究,1996,18(2):145.
[10] 林 春,刘鸿高,苏友波,等.灯盏花快速繁殖研究简报[J].
云南农业大学学报,2003,18(3):323.
[11] 郭兰萍,黄璐琦,蒋有绪.不同化学型苍术及根际区土壤提取
物生物活性的比较[J].中国药学杂志,2006,41(10):734.
[12] 郭兰萍,黄璐琦,蒋有绪.苍术根茎及根际土提取物生物活性
研究及化合物的分离鉴定[J].生态学报,2006,26(2):164.
[13] 刘秀芬,马瑞霞,袁光林,等.根际区他感化学物质的分离、鉴
定与生物活性的研究[J]生态学报,1996,16(1):1.
Planthydroponicsanditsapplicationprospectinmedicinalplantsstudy
ZENGYan,GUOLanping,HUANGLuqi,SUNYuzhang
(InstituteofChineseMateriaMedica,ChinaAcademyofChineseMedicalSciences,Beijing100700,China)
[Abstract] Thisarticleintroducedthetheoremandmethodofhydroponics.Someexamplesofstudiesinagricultureandforestry
werepresented,theefectsofelements,environmentalstressandhormonesonphysiologyofmedicinalplantsbyusinghydroponicswere
analyzed.Italsointroducedthefeasibilityandadvantageofhydroponicsinintermediatepropagationandalelopathyofmedicinalplant.
Andfinalyitmadetheconclusionthatthewayofhydroponicswouldbewidelyusedinmedicinalplantstudy.
[Keywords] hydroponics;medicinalplants;prospectofapplication
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