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≈责任编辑 李 禾
绿茎槲寄生的化学成分及其促
°≤tu细胞的分化作用
朱海燕 o余正文 o杨小生 3 o郝小江
k贵州省 中国科学院 天然产物化学重点实验室 o贵州 贵阳 xxsssul
≈摘要 目的 }研究绿茎槲寄生的活性化学成分 ∀方法 }对绿茎槲寄生的乙醇提取物的有效部位 o即醋酸乙酯
溶解部分中主要化学成分进行分离鉴定 o并经体外活性筛选 o寻找促 °≤tu细胞分化的活性物质 ∀结果 }获得了 x
个主要化学成分 o即北美圣草素k1l ox oz2二羟基2vχ owχ2二甲氧基2二氢黄酮k2l o齐墩果酸k3l ox oz2二羟基色原酮
k4l o高北美圣草素k5l ∀经活性筛选试验发现 o化合物高北美圣草素k5l具有促 °≤tu细胞分化作用 ∀结论 }成分
1 ∗ 5均为首次从该植物中分离得到 o并找到了活性单体成分高北美圣草素 ∀
≈关键词 绿茎槲寄生 ~化学成分 ~°≤tu细胞 ~高北美圣草素
≈中图分类号 u{w qt ~ u{x1x ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussylty2tvws2sv
≈收稿日期 ussx2tt2sx
≈基金项目 科技部重大基础研究前期研究项目kussw≤≤sv{2
ssl ~贵州省优秀科技人才培养项目≈黔科合人字kussulsusx号
≈通讯作者 3杨小生 oר¯ }ks{xtlv{sxwx| o∞2°¤¬¯}¼¤±ªp¬¬¤²¶«¨ ±ª
¼¤«²²q¦²° q¦±
绿茎槲寄生 ςισχυµ νυδυµ ⁄¤±¶¨µ为桑寄生科槲
寄生属植物 o分布于云南 !四川 !贵州等地 o主要寄生
于杨属 !柳属或花香树 !桦 !梨 !桃等植物≈t ∀民间用
以清热 !利尿≈t o有祛风湿 !安胎和降压作用≈u o也有
用于治疗鼻窦炎 ∀在追踪贵州民族药中活性物质时
发现 o黔产k毕节l绿茎槲寄生的乙醇提取物的醋酸
乙酯溶解部分具有一定的促 °≤tu细胞生长和分化
作用 ∀绿茎槲寄生的化学成分和药理研究未见报
道 ∀作者通过对贵州毕节产的绿茎槲寄生的乙醇提
取物 o采用不同的溶剂处理 o得到石油醚 !醋酸乙脂 !
正丁醇 !水溶解部位 o并进行了大鼠嗜铬细胞瘤
°≤tu细胞的生长 !分化作用试验 o发现乙醇浸膏和
醋酸乙酯部位对 °≤tu细胞有一定的促 °≤tu细胞生
长和分化作用 o正丁醇部分和剩余水部分 o只有轻微
的促 °≤tu细胞生长和分化作用 ∀利用反复硅胶柱
色谱等方法对醋酸乙酯溶解部位进行分离纯化 o并
通过理化常数和光谱分析鉴定该部分中的主要化合
物 x个 o即 }北美圣草素k1l ox oz2二羟基2vχ owχ2二甲
氧基2二氢黄酮k2l o齐墩果酸k3l ox oz2二羟基色原
酮k4l和高北美圣草素k5l ∀经活性定向筛选试验发
现 ous Λª#°pt高北美圣草素k5l对 °≤tu细胞有明
显的促生长 !分化作用 o而 x oz2二羟基色原酮k4l只
有轻微的促分化作用 ∀
1 仪器与材料
熔点用 ÷ p w型熔点测定仪测定k未经校正l ~
红外光谱用
µ压片法 o
∞ p ∂∞≤× uu型
红外光谱仪测定 ~核磁共振谱用 ∂ p wss ½
型超导核磁共振谱仪测定 o×≥内标 ~质谱用 ° p
x|zv型质谱仪测定 ~柱色谱用硅胶kuss ∗ vss目l !
硅胶 和薄层色谱用硅胶 ƒuxw均为青岛海洋化
工厂生产 ~≥¨ ³«¤§¨¬ p us为 ≥¬ª°¤产品 ~所用溶剂
如石油醚 !氯仿 !醋酸乙酯 !丙酮 !甲醇 !乙醇 !正丁醇
等均为工业试剂经重蒸处理 o其余试剂均为分析纯 ∀
样品采自贵州毕节 o经贵阳中医学院陈德媛教授鉴
定为绿茎槲寄生 ς1 νυδυµk标本保存于贵州省 中
国科学院天然产物化学重点实验室l ∀
2 提取与分离
绿茎槲寄生鲜品 tw ®ª粉碎后 o经 zx h乙醇冷
浸 u次k每次 z §l o减压回收乙醇后 o所得提取物加
#swvt#
第 vt卷第 ty期
ussy年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ ty
∏ª∏¶·oussy
适量水进行分配后 o依次用石油醚 !醋酸乙酯 !正丁
醇萃取 o回收溶剂 o得各部分提取物 ∀取醋酸乙酯萃
取部分 ws ª进行硅胶柱色谱 o先用氯仿2甲醇梯度洗
脱进行分段处理得到不同部位 o不同部位继续反复
柱色谱并结合 ×≤ 薄层及重结晶等方法 o纯化得化
合物 1kt1{u ªl o2kvv °ªl o3kvts °ªl o4kwx °ªl和 5
ku{ °ªl ∀
3 结构鉴定
化合物 1 白色无定形粉末k丙酮l ∀ ∞2≥ µ/
ζ }u{{≈ n ouzt ot|z otyy otxv otvy otuv otts ~t2
kwss ½o⁄≥2 δyl∆}tu1tkt o¶o2xl o|1szku o
¶o2vχ owχl oy1{{kt o¶o2uχl oy1zwku o¶o2xχ o
yχl ox1{{ku o° o2y o{l ox1vxkt o§§oϑ u1{ otu1w
½ o2ul ov1tykt o§§oϑ w1w o|1y ½o2v¤l ou1yx
kt o§§oϑ u oty1{ ½o2v l¨ ~tv ≤2 ktss ½o
⁄≥2 δyl t|y1wk≤2wl otyy1zk≤2zl otyv1yk≤2xl o
tyv1sk≤2|l otwx1{k≤2wχl otwx1vk≤2vχl otu|1yk≤2tχl o
tt{1tk≤2yχl ottx1wk≤2uχl ottw1wk≤2xχl otst1|k≤2
tsl o|x1|k≤2yl o|x1tk≤2{l oz{1yk≤2ul owu1uk≤2vl ∀
经以上光谱数据分析并对照文献≈v ow 报道的光谱
数据 o确认该化合物为北美圣草素 ∀
化合物 2 白色针晶k石油醚2醋酸乙酯l ∀ ∞2
≥ µ/ ζ }vty≈ n ot|v ot{s otyz otxs otvz otuw otsz o
|x ozz oxx owv ∀t2 kwss ½o≤⁄≤¯ vl∆}tu1svkt o
¶ox2l oy1|xkv o° o2uχ oxχ oyχl oy1sxku o§oϑ
y1w ½o2y o{l ox1vvkt o§§oϑ u otu1{ ½o2ul o
v1|vkv o¶o≤vl ov1{skv o¶o≤vl ov1s|kt o§§o
ϑ tv1u otz1u ½o2v¤l ou1z{kt o§§oϑ u oty1{
½o2v l¨ ~tv ≤2 ktss ½o≤⁄≤¯ vl t|x1|k≤2wl o
tyz1|k≤2zl otyw1tk≤2xl otyu1{k≤2|l otwy1{k≤2vχl o
twy1uk≤2wχl otvs1uk≤2tχl ott|1xk≤2yχl ottw1xk≤2
xχl ots{1{k≤2uχl otsv1tk≤2tsl o|x1tk≤2yl o|w1uk≤2
{l oz|1vk≤2ul oxx1|k≤vl oxx1yk≤vl owv1vk≤2
vl ∀根据以上光谱数据分析并与文献≈x 报道的光
谱数进行比较 o确定该化合物为 x oz2二羟基2vχ owχ2
二甲氧基2二氢黄酮 ∀
化合物 3 白色粉末k甲醇l ∀ k
µl ¦°pt }
v wws o u |u{ ou {xv ot y|x ot wyu ot v{{ ot uzt ot svs o
||{ ~∞2≥ µ/ ζ }wxy≈ n owwt owv{ owtt ouv{ ouvv o
usz ot{| otvv ~t 2 kwss ½o≤x⁄xl∆}s1{{kv o
¶o≤vl os1|wkv o¶o≤vl os1||kv o¶o≤vl ot1su
ky o¶ou≤vl ot1uvkv o¶o≤vl ot1uzkv o¶o≤vl o
v1tskt o§§oϑ v1| otv ½o 2vΑl ox1w|kt o° o2
tul ∀以上光谱数据与文献≈y 报道的齐墩果酸的
光谱和t2 谱数据相符 o×≤检测k氯仿2甲醇
zΒv展开 ox h硫酸乙醇溶液显色 o©s1zyl显示该化
合物与对照品齐墩果酸的 ©及显色相一致 o故该化
合物为齐墩果酸 ∀
化合物 4 黄色针状晶体k丙酮l o°³ uy| ∗
uzs1x ε ∀ ∞2≥ µ/ ζ }tz{≈ n otyt otxs otvz otuw o
ttt o|y oy| ~t2 kwss ½o≤x⁄xl∆}tv1vxk¥µ¶o
2xl oz1|skt o§oϑ y1s ½o2ul oy1y{kt o§oϑ
u1s ½o2{l oy1x|kt o§oϑ u1s ½o2yl oy1uz
kt o§oϑ y1s ½o2v l ~tv≤2 ktss ½o≤x⁄xl
t{u1tyk≤2wl otyy1tk≤2zl otyv1uk≤2xl otx{1|k≤2|l o
txy1zk≤2ul ottt1uk≤2vl otsx1tk≤2tsl otss1uk≤2yl o
|w1|k≤2{l ∀经过对以上光谱数据分析并对照文献
≈z 报道数据 o确认该化合物为 x oz2二羟基色原酮 ∀
化合物 5 黄色粒晶k丙酮l ∀ ∞2≥ µ/ ζkzs
∂¨l }vsu≈ n ou{x otz| otyy otxs otvz otuw otsz oxx o
uz otx ~t2 kwss ½o≤⁄v≤≤⁄vl∆}tu1uskt o¶o
2xl oz1t{kt o§oϑ u1s ½o2uχl oy1||kt o§§o
ϑ u1s o{1s ½o2yχl oy1{ykt o§oϑ {1s ½o2
xχl ox1|xku o° oϑ x1y ou1s ½o2y o{l ox1wwkt o
§§oϑ u1{ otv1u ½o2ul ov1{zkv o¶o≤v2vχl o
v1uukt o§§oϑ tv1u otz1u ½o2v¤l ou1zukt o§§o
ϑ u1{ otz1u ½o 2v¨l ~tv ≤2 ktss ½o
≤⁄v≤≤⁄vl t|z1uk≤2wl otyz1vk≤2zl otyx1uk≤2xl o
tyw1vk≤2|l otw{1wk≤2vχl otwz1|k≤2wχl otvt1uk≤2tχl o
tus1xk≤2yχl ottx1yk≤2xχl ottt1tk≤2uχl otsv1tk≤2
tsl o|y1{k≤2yl o|x1{k≤2{l o{s1uk≤2ul oxy1uk≤vl o
wu1uk≤2vl ∀经过对以上光谱数据进行分析并与文
献≈{ 数据对照 o确认化合物 5为高北美圣草素 ∀
4 生物活性
411 材料 大鼠嗜铬细胞瘤 °≤tu细胞株k中国典
型培养物中心提供l ~神经生长因子kƒ购于美国
≥¬ª°¤公司l ~马血清和小牛血清k美国 ¼¦¯²±¨ 公
司l ∀
412 方法 取适量生长良好的大鼠嗜铬细胞瘤
°≤tu细胞 o接种于盛有 ts °的定性培养液k{x h
°tyws ots h马血清 n x h的胎牛血清l的培养瓶
中 o分别加入样品k经 ⁄≥ 溶解l或对照的生理盐
水 ovz ε 培养 ov ∗ w §换 t次培养液 ts §后对照组
细胞仍呈球形 o有活性的实验组 °≤tu细胞分化出神
#twvt#
第 vt卷第 ty期
ussy年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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经样的突触 ∀
413 结果 zx h乙醇提取物 !醋酸乙酯溶解部分
和正丁醇溶解部分对大鼠嗜铬细胞瘤 °≤tu细胞株
有一定的活性 o但正丁醇溶解部分的活性较醋酸乙
酯溶解部分的活性弱k见表 tl ∀在从醋酸乙酯溶解
部分获得的单体化合物中 ous Λª#°pt的化合物 5
k高北美圣草素l对 °≤tu细胞生长具有明显作用 ~化
合物 4只具有轻微的促分化作用 ∀
表 t 对大鼠嗜铬细胞瘤 °≤tu细胞株的
神经营养活性影响
样品 生物活性 化合物ul 生物活性
ƒtl 7 t p
zx h乙醇提取物 ? u p
石油醚溶解部分 p v p
醋酸乙酯溶解部分 ? w ?
正丁醇溶解部分 ? x n
水溶解部分 p
注 }p o? on o7 分别代表无活性 o有一定活性 o有明显活性 o有
很强活性 ~tl阳性对照 o质量浓度 xs Λª#°pt ~ul质量浓度 us Λª#°pt
5 讨论
511 本研究涉及到的化合物主要为黄酮类化合物 o
此类化合物为槲寄生属植物主要成分类型 ∀
512 从化学结构的角度来看 o化合物 2 和 5 的唯一
区别在于前者的 wχ位为甲氧基 o后者为羟基 o但后者
显现了明显的促 °≤tu细胞的生长 !分化作用 o而化
合物 2无活性 o其作用机制或途径有待进一步探讨 ∀
513 黄酮类化合物有消炎 !抑菌 !抗氧化 !抗肿瘤等
作用 o但未见有关促 °≤tu细胞生长 !分化作用的报
道 ∀本研究结果为黄酮类化合物的神经营养作用提
供了一定的基础数据 ∀
≈致谢 核磁共振和质谱波谱数据由贵州省 中国科学
院天然产物化学重点实验室仪器组测试 ∀
≈参考文献
≈t 龚祝南 o王铮涛 o徐珞珊 o等 1 中国桑寄生科 ²µ¤±·«¤¦¨¤¨ 药用
植物研究 1中国野生植物资源 ot||y oktl }tx1
≈u 国家中医药管理局中华本草编委会 1 中华本草 1 第 u卷 1 上
海 }上海科学技术出版社 ot||| }yt|1
≈v ׬¤± ≠ o • ∏o«¤±ª≥1 ƒ¯ ¤√²±²¬§¶©µ²° ¯¨ ¤√ ¶¨²© Ηεριτιερα λιττοραλισ
⁄1 ≤«¬± °«¤µ° ≥¦¬oussw otvkvl }utw1
≈w 任冬梅 o袁永荣 1 岩青兰化学成分研究 1 中草药 ot||z ou{kul }
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≈x eµ¬² ¨ µ¤¯§² §¨ ≤¤µ√¤¯«²o °¤·µ¬¦¬¤ ¬µ¤±§¤ §¤ ≤²¶·¤¤o ¥¨¨µ§²¶
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≈y 梁光义 o武孔云 o徐任生 o等 1 尖叶清风藤化学成分研究 1 药学
学报 ot||x ovskxl }vyz1
≈z 杨燕军 1枫香寄生化学成分的研究 1 中药材 ot||{ ou{ktl }uu1
≈{ 张光浓 o张朝凤 o王峥涛 o等 1 球花石斛的化学成分研究k ´ l1
中国天然药物 oussw oukul }z{1
Χηεµιχαλ χονστιτυεντσφροµ ςισχυµ νυδυµ
ανδ τηειρ αχχελερατινγ ΠΧtu χελλ διφφερεντιατιον
¤¬2¼¤±o ≠ «¨ ±ª2º ±¨ o ≠ ÷¬¤²2¶«¨ ±ªo ÷¬¤²2¬¤±ª
( Τηε Κεψ Λαβορατορψ οφ Χηεµιστρψφορ Νατυραλ Προδυχτσ οφ Γυιζηου Προϖινχε ανδ Χηινεσε Αχαδεµψ οφ Σχιενχεσ , Γυιψανγ xxsssu , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨ ¦«¨ °¬¦¤¯ ¦²±¶·¬·∏¨±·¶²©·«¨ ¶·¨° ²© ςισχυµ νυδυµ ¤±§·«¨¬µ¥¬²¤¦¼¬√¬·¼1 Μετηοδ : ׫¨ °¤²µ
¦«¨ °¬¦¤¯ ¦²±¶·¬·∏¨±·¶º µ¨¨ ¬¶²¯¤·¨§©µ²°·«¨ ¦∞·2¶²¯√ §¨³¤µ·²© ·¨«¤±²¯2 ¬¨·µ¤¦·²©·«¨ ³¯¤±·¥¼ ¦²¯∏°± ¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¼ ¤±§·«¨ ¤¦·¬√¨¶¦µ¨ ±¨2
¬±ª·¨¶·¬± √¬·µ² º µ¨¨ ·¤®¨ ± ²∏·©²µ¯²²®¬±ª©²µ¦²°³²∏±§¶·²¤¦¦¦¨¯¨µ¤·¨ °≤tu ¦¨¯¯ §¬©©¨µ¨±·¬¤·¬²±1 Ρεσυλτ : x ¦²°³²∏±§¶º µ¨¨ ¬§¨±·¬©¬¨§¤¶ µ¨¬²2
§¬¦·¼²¯ k1l ox oz2§¬«¼§µ²¬¼2vχ owχ2§¬° ·¨«²¬¼©¯¤√¤±²±¨ k2l o²¯ ¤¨±²¯¬¦k3l ox oz2§¬«¼§µ²¬¼¦«µ²°²±¨ k4l ¤±§«²° µ¨¬²§¬¦·¼²¯ k5l ¥¼¶³¨¦·µ¤¯
√¨¬§¨ ±¦¨¶o¬± º«¬¦««²° µ¨¬²§¬¦·¼²¯ k5l «¤§¤¦¦¨¯¨µ¤·¬²± §¬©©¨µ¨±·¬¤·¬²± ·² °≤tu ¦¨¯¯1 Χονχλυσιον : ¯ ¯ ¦²°³²∏±§¶º µ¨¨ ²¥·¤¬±¨ §©µ²° ·«¬¶
³¯¤±·©²µ·«¨ ©¬µ¶··¬°¨o¤±§¥¬²¤¦·¬√¨¦²±¶·¬·∏¨±·º¤¶²¥¶¨µ√ §¨¬±·«¨ ¦∞·2¶²¯√ §¨³¤µ·1
[ Κεψ ωορδσ] ςισχυµ νυδυµ ~¦«¨ °¬¦¤¯ ¦²±¶·¬·∏¨±·¶~°≤tu ¦¨¯¯ ~«²° µ¨¬²§¬¦·¼²¯
≈责任编辑 李 禾
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