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Protection of polysaccharides-2b from mudan cortex of Paeonia suffruticosa andr on diabetic cataract in rats

丹皮多糖-2b对大鼠糖尿病性白内障防治作用研究



全 文 :±∏§¨ °²∏¶¨ º¤¶∏¶¨§¤¶·«¨ ¤±¬°¤¯ °²§¨ q¯ ׫¨ °¬¦¨ º µ¨¨ §¬√¬§¨ §¬±·² v ªµ²∏³¶o ²±¨¦²±·µ²¯ ¤±§·«¨ ·º² µ¨³µ¨¶¨±·¬±ª ¬¨³¨ µ¬° ±¨·¤¯
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¦²°³¤µ¨§º¬·«·«¨ ¦²±·µ²¯ ªµ²∏³ µ¨¶³¨ ¦·¬√¨¯¼q Χονχλυσιον: ≤«¬± ¶¨¨ ­¬¤±³¬«¨ µ¥¤¯ µ¨¦¬³¨ • ≤„ ¦²∏¯§¬±«¬¥¬·ª¤¶·µ¬¦¦¤±¦¨µ¦¨¯¯ ≥Š≤ 2
z|st ªµ²º·« ιν ϖιϖοq • ≤„ ¦²∏¯§¬±§∏¦¨ ª¤¶·µ¬¦¦¤±¦¨µ¦¨¯¯ ¤³²³·²¶¬¶¤±§¶∏³³µ¨¶¶³µ²¯¬©¨µ¤·¬²±q Œ·¶° ¦¨«¤±¬¶°¶°¬ª«·¥¨ ¬±√²¯√ §¨¬±
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[ Κεψ ωορδσ] ª¤¶·µ¬¦¦¤µ¦¬±²°¤~ ≤«¬± ¶¨¨ ­¬¤±³¬«¨ µ¥¶~ ª¨ ±¨ ¬¨³µ¨¶¶~ ¦⁄‘„ ¤µµ¤¼~ µ¨¤¯2·¬°¨ ∏´¤±·¬·¤·¬√¨°≤•
≈责任编辑 刘  
≈收稿日期   ussz2sw2tt
≈基金项目   安徽省 /十五 0重大科技专项基金 kst{svsttl
≈通讯作者   3 沈业寿 oר¯}ksxxtlxtszxzwoƒ¤¬}ksxxtlxtszvwto∞2°¤¬¯}¶«¼¶«ƒ ¤«∏q §¨∏q¦±
丹皮多糖 2u¥对大鼠糖尿病性白内障防治作用研究
赵根海 o沈业寿 3 o马金宝 o李 峰 o史新强
k安徽大学 生化微生物研究所 安徽省中药研究与开发重点实验室 o安徽 合肥 uvssv|l
≈摘要   目的 }观察丹皮多糖 2u¥对大鼠糖尿病性白内障的防治作用 ∀方法 }采用链尿佐菌素 k≥םl联合完全
弗氏佐剂 k≤ƒ„l诱导大鼠糖尿病性白内障 o裂隙灯观察各组晶体出现初次混浊的时间 o比较晶体的混浊程度 ∀比
色法测定各组血清及晶体中超氧化物歧化酶 k≥’⁄l!谷胱甘肽过氧化物酶 kŠ≥‹ 2³÷ l!过氧化氢酶 k≤„×l活力和丙
二醛 k ⁄„l含量以及晶体中 ‘¤n 2Žn 2„×°酶活力 !高分子质量蛋白和不溶性蛋白含量 ∀结果 }裂隙灯检查结果显
示 °≥ u¥有明显的延缓糖尿病性白内障的发生 o减轻晶体混浊程度的作用 ∀与模型组比 o°≥ u¥各剂量组均能明
显降低大鼠血清及晶体中升高的  ⁄„水平 o中 !高剂量组可升高血清及晶体中 ≥’⁄oŠ≥‹ 2³÷ o≤„×水平 o上调晶体
‘¤n 2Žn 2„×°酶活力 o且剂量与效果呈正相关 ∀ °≥ u¥中 !高剂量组对高分子质量蛋白及不溶性蛋白含量亦有较
好调控作用 ∀结论 }°≥ u¥对大鼠糖尿病性白内障具有显著的防治作用 ∀
#yvsu#
第 vu卷第 t|期
ussz年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ t|
’¦·²¥¨ µo ussz
≈关键词   丹皮 ~多糖 ~链尿佐菌素 ~完全弗氏佐剂 ~糖尿病性白内障
≈中图分类号   • u{xqx ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlt|2usvy2sw
白内障已成为世界上首位致盲眼病 ∀随着生活
水平不断提高和人口老年化 o全球糖尿病患者日渐
增多 o糖尿病性白内障患者数也在增加 ∀因此对糖
尿病性白内障进行深入研究 o具有重要的现实意义 ∀
丹皮多糖是从毛茛科 • ¤±∏±¦∏¯¤¦¨¤¨植物牡丹 Παεο2
νια συφφρυτιχοασ ¤±§µ的干燥根皮中提取的天然活性
多糖 o此前本室曾报道丹皮多糖具有明显的降血糖 o
免疫调节和抗氧化作用 ≈tou  ~同时对丹皮多糖的有
效部位 °≥ u¥的一级结构及其构效关系作了较为
深入的研究 ∀本实验主要对 °≥ u¥进一步进行药
理学研究 o探讨 °≥ u¥对糖尿病性白内障的防治作
用及机制 ∀现就 °≥ u¥对糖尿病性白内障的防治
作用研究报道如下 ∀
1 材料与方法
1q1 材料
1q1q1 药品与试剂 °≥ u¥k多糖含量为 {s1|vh o
由安徽大学糖复合物与糖工程实验室分离纯化制
备 l~障眼明 k批号 ussystuxo广州中药一厂 l~链尿佐
菌素 k¶·µ¨³·²½²·²¦¬± ≥ם批号 ≥stvslo完全弗氏佐剂
k©µ¨∏±§. ¶¤§­∏√¤±·o¦²°³¯ ·¨¨ ≤ƒ„批号 ƒx{{tl为美国
≥¬ª°¤公司产品 ~≥’⁄k批号 ussytstuloŠ≥‹ 2³÷k批号
ussytstslo ≤„× k批号 ussys|uzlo‘¤n 2Žn 2„×°¤¶¨
k批号 ussytstulo ⁄„k批号 ussytuvslo总蛋白 k批
号 ussyttszl检测试剂盒为南京建成生物工程研究所
产品 ~其他均为国产分析纯 ∀
1q1q2 动物 健康 z周龄 ≥³µ¤ª∏¨ 2⁄¤º¯¨ ¼k≥⁄l雄
性大鼠 xx只 o体重 kuus ? tsl ªo由安徽省医研所实
验动物中心提供 k皖医动准字第 st号 l∀
1q1q3 仪器 ˜∂ p |uss紫外 2可见分光光度计
k°«¤µ°¤¦¬¤产品 l~⁄Žp {⁄型电热恒温水浴槽 k上
海精宏实验设备有限公司产品 l~…≥uuw≥电子天平
k北京赛多利斯仪器系统有限公司产品 l~׏p ty•
台式高速冷冻离心机 k上海市离心机械研究所产
品 l~‹∞Œ‘∞手持式裂隙灯 k北京欣明仁医疗器械技
术有限公司产品 l∀
1q2 方法
1q2q1 糖尿病性白内障大鼠的造模与分组 大鼠适
应性饲养 v §后 o随机分为实验组和正常对照组 ∀实
验组 ¬³≤ƒ„ks1x °# ®ªpt lo第 u天 ¬³≥םkvs °ª#
®ªpt lo正常组均注射相应体积的柠檬酸缓冲液 ks1t
°²¯# pt ³‹ w1ulo每周 t次 o连续 u周重复上述步
骤 ∀第 u周 ¬³≥ם zu «后测空腹血糖值 o挑选血糖值
稳定并高于 ty1z °°²¯# pt的大鼠随机分为模型组 !
°≥ u¥低 !中 !高剂量组 kvsoysotus °ª# ®ªpt l及阳
性对照组 kt1ux片 r®ªo按人与动物用药剂量换算 lo
每组 {只 o¬ª给药 ∀正常对照组给予同体积的生理盐
水 o每日 t次 o连续 ys §∀给药期间每 u天托吡卡胺
滴眼液散瞳 o裂隙灯检查各组大鼠双侧眼晶体 t次 o
并对晶体拍照 ∀
按照何守志和尹素云 ≈v 报道的方法对晶体混浊
程度进行分期 os期 }晶体裂隙灯观察清晰透明 ∀ 期´ }
k囊泡初期 l晶体周边部皮质出现细小囊泡或细小囊
泡群 ∀µ期 }k囊泡期 l皮质区呈现细小囊泡 o中等囊泡
自赤道部向前皮质扩展逐渐形成环状 o环带逐渐加宽
达 tru ∗ urv半径 ∀ ¶期 }k皮质期 l皮质呈现不规则
条纹状或剑竹状向前极放射的混浊灶 o逐渐形成弥漫
性灰色至灰白色混浊 o晶体核心尚透明 ∀ ·期 }k核混
浊期 l晶体除皮质混浊外晶体核密度增高 o色灰或灰
白或白色 ∀ ∏期 }k白内障成熟期 l晶体皮质及核全面
混浊 ∀
1q2q2 °≥ u¥对大鼠糖尿病性白内障的防治作用
末次给药后 o禁食 w «otsh水合氯醛腹腔注射麻
醉 o心室取血 o分离血清检测各项指标 ~迅速摘取双
侧眼球 o快速分离晶体 o电子天平准确称重 o置玻璃
匀浆器中 o加冷 kw ε l双蒸水 o研磨制成晶体蛋白匀
浆液 o低温离心 o弃沉淀 o收集离心上清液 o进行酶活
性测定 o按文献 ≈w 方法测定晶体中高分子质量蛋
白和不溶性蛋白含量 ∀
1q2q3 统计学处理 数据应用 ≥°≥≥ts1s软件包进
行处理 o各项数据以 cξ ? σ表示 o用方差分析及 τ检验
比较组间差异的显著性 ∀
2 结果
2q1 °≥ u¥对大鼠糖尿病性白内障的影响
2q1q1 °≥ u¥对大鼠糖尿病性白内障发生时间的
影响 实验期间 o正常组无一例晶体混浊 o造模大鼠
均发生不同程度的晶体混浊 o且模型组白内障发生
时间明显早于 °≥ u¥中 !高剂量组和阳性组 kΠ 
s1stlk表 tl∀
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中 国 中 药 杂 志
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表 t 对糖尿病性白内障大鼠晶体混浊发生时间
的影响 kcξ ? σ, ν € {l
组别 剂量 r°ª# ®ªpt 眼数 r只 混浊发生时间 r§
正常 p ty p
模型 p twul tu1{vv ? u1yv|
°≥ u¥ vs twul tv1vvv ? t1yvv
ys ty ty1xss ? u1wu|tl
tus ty tz1{vv ? u1w{vtl
障眼明 p ty ty1yyy ? t1zxttl
注 }与模型组比较 tl Π  s1st~ul实验期间 t只大鼠死亡
2q1q2 °≥ u¥对大鼠糖尿病性白内障混浊程度的
影响 各组大鼠进入白内障各期的比例依次为 }正
常组 o晶体完全透明 ~模型组 osΒsΒsΒtw1vΒtw1vΒ
zt1w~低剂量组 osΒsΒtw1vΒxzΒu{1zΒs~中剂量组 osΒ
uxΒuxΒxsΒsΒs~高剂量组 osΒvz1xΒvz1xΒuxΒsΒs~阳
性对照组 osΒuxΒuxΒxsΒsΒs~可见 °≥ u¥高中低剂
量组可缓解晶体混浊度 o且剂量与效果呈正相关
k表 ul∀
表 u 对糖尿病性白内障大鼠晶体混浊程度的影响
组别
剂量
r°ª# ®ªpt
眼数
r只
晶体混浊程度
s ´ µ ¶ · ∏
正常 p ty ty s s s s s
模型 p tw s s s u u ts
°≥ u¥ vs tw s s u { w s
ys ty s w w { s s
tus ty s y y w s s
障眼明 p ty s w w { s s
2q2 °≥ u¥对糖尿病性白内障大鼠血清及晶体相
关指标的影响
2q2q1 °≥ u¥对糖尿病性白内障大鼠血清相关指
标的影响 °≥ u¥高剂量组在降低血清  ⁄„水
平 o上调血清 ≥’⁄oŠ≥‹ 2³÷活力等方面均明显优于
模型组 kΠ s1stl∀中剂量组对上述指标亦有较好
作用 kΠ  s1st或 Π s1sxlk表 vl∀
表 v 对糖尿病性白内障大鼠血清相关指标影响 kcξ ? σ, ν € {l
组别 剂量 r°ª# ®ªpt  ⁄„ r±°²¯# °pt ≥’⁄r˜# °ªpt Š≥‹ 2³÷ r≅ tsΛ°²¯# °pt ≤„× r˜# °pt
正常 p v1yss ? s1xy{ uvt1zts ? t|1twt wuw1syv ? v{1stt z1vx| ? s1|wt
模型 p ts1{su ? t1|v{ul tyt1yyv ? w1{uxul u|w1wxw ? uw1vtsul x1wyx ? s1wz|ul
°≥ u¥ vs z1|tz ? t1vsvwl tzy1{yu ? tu1tztvl vut1|wu ? uv1uty x1wtu ? s1vxx
ys w1zt{ ? s1zvzwl t{w1{|v ? v1z|{wl vwv1vxw ? vz1ytwvl x1{{| ? s1zvu
tus w1tyz ? s1{txwl t{{1wzx ? {1xzwwl v{{1{vy ? z1tv{wl y1xws ? s1wwyvl
障眼明 p x1y|u ? s1wtswl tzx1tvz ? {1{zvvl vv|1{zw ? v{1|zuvl y1y{s ? s1zytvl
注 }与正常组比 tl Π  s1sxoul Π  s1st~与模型组比 vl Π  s1sxowl Π  s1stk表 wox同 l
2q2q2 °≥ u¥对糖尿病性白内障大鼠晶体相关指标
的影响 °≥ u¥高剂量组在降低晶体  ⁄„水平 o提高
晶体 ≥’⁄oŠ≥‹ 2³÷o≤„×活力上明显优于模型组 kΠ 
s1stl∀其中  ⁄„oŠ≥‹ 2³÷o≤„× v项指标优于阳性对
照组 ∀与模型组比 °≥ u¥中 !高剂量组对 ‘¤n 2Žn 2
„×°¤¶¨活力提高有极显著作用 kΠs1stlk表 wl∀
表 w 对糖尿病性白内障大鼠晶体相关指标影响 kcξ ? σ, ν € {l
组别
剂量
r°ª# ®ªpt
 ⁄„
r±°²¯# °pt
≥’⁄
r˜# °ª³µ²·pt
Š≥‹ 2³÷
rts Λ°²¯# °pt
≤„×
r˜# °pt
‘¤n 2Žn 2„×°¤¶¨
r˜# °ªpt
正常 p x1vuw ? s1x{z tv1zss ? u1ttz {x1tx| ? u1zwu u1tvw ? s1vsu s1v|t ? s1svt
模型 p {1xs{ ? s1||{ul {1t|x ? s1ytvul xx1sws ? w1uutul t1uwu ? s1t{uul s1uwx ? s1svxul
°≥ u¥ vs z1zsz ? s1v{wvl {1{|z ? t1txt xy1v{u ? v1wuw t1wss ? s1sux s1u|x ? s1s|{
ys z1xwt ? s1wvvvl ts1www ? t1tvswl yw1x|| ? v1yytwl t1z|z ? s1tsswl s1vvu ? s1st|wl
tus y1yw{ ? s1xwswl tt1xts ? t1vy|wl zy1wtz ? x1{yswl t1|tw ? s1tvuwl s1v{s ? s1st{wl
障眼明 p z1wx{ ? s1{vxvl tt1tyz ? t1suvwl ys1xx{ ? w1zxuvl t1x{y ? s1tvtwl s1vxz ? s1sx|wl
2q3 °≥ u¥对大鼠糖尿病性白内障晶体蛋白含量
的影响
与模型组相比 °≥ u¥各剂量组均能显著降低
糖尿病性白内障大鼠晶体高分子质量蛋白及不溶性
蛋白的含量 kΠ  s1st或 Π  s1sxlo且高中剂量组
优于阳性对照组 k表 xl∀
3 讨论
本实验结果显示 o第 u次腹腔注射 ≥ם后 o大鼠
血糖含量明显升高 o体重减轻 o出现 /三多一少 0 !乏
表 x 对糖尿病性白内障大鼠晶体蛋白含量的影响
kcξ ? σ, ν € {l
组别
剂量
r°ª# ®ªpt
高分子质量蛋白
r°ª# °pt
不溶性蛋白
r°ª# °pt
正常 p s1wxu ? s1sxx s1usw ? s1svu
模型 p s1zty ? s1swvul s1wuw ? s1sxvul
°≥ u¥ vs s1ytx ? s1s|uvl s1v{s ? s1sy{
ys s1xu| ? s1szvwl s1vsz ? s1sutwl
tus s1xsv ? s1s{swl s1uyv ? s1svywl
障眼明 p s1ysz ? s1stzvl s1wy{ ? s1syswl
力 !毛发干枯 !发黄等糖尿病的典型表现 ~晶体出现
#{vsu#
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混浊 o说明糖尿病性白内障的造模是成功的 ∀
很多的研究证明 o氧化损伤与晶体抗氧化防御
系统的紊乱在糖尿病性白内障发生和发展中起着重
要作用 ≈xoy  ∀实验中血清及晶体中丙二醛和抗氧化
酶含量的测定结果表明 o °≥ u¥对机体的氧化损伤
起到明显的保护作用 o在清除  ⁄„o提高 Š≥‹ 2³÷
活力方面甚至优于阳性对照组 ∀ „×°酶活力的大小
是细胞能量代谢及功能有无损伤的重要标志 o本实
验中 °≥ u¥高剂量组的 ‘¤n 2Žn 2„×°¤¶¨已接近正
常组水平 ∀可见 °≥ u¥对高糖引起的晶体上皮细
胞的损伤亦有较好的保护作用 ∀另有研究表明 o蛋
白质的不规则分布会使晶体的折光系数改变 o可能
成为晶体混浊的基础 ≈z  o晶体水不溶性蛋白和高分
子质量蛋白含量的增加影响晶体蛋白的正常排列分
布 o有研究表明高浓度葡萄糖可以对晶体蛋白直接
作用引起蛋白形态学改变和蛋白凝聚 o诱导晶体蛋
白的不溶化 ≈{  ∀给予 °≥ u¥后 o可明显降低水不溶
性蛋白和高分子质量蛋白含量 o缓和晶体混浊程度 ∀
据此作者推测 °≥ u¥延缓糖尿病性白内障的发生 o

减轻晶体混浊度可能与提高机体的抗氧化损伤能
力 o保护晶体上皮细胞 o调节晶体蛋白含量有关 o所
以作者认为 °≥ u¥不失为一种值得深入研究的天
然植物多糖 o其确切作用机制有待进一步研究 ∀
≈参考文献  
≈t  戴 玲 o赵帜平 o沈业寿 o等 q丹皮多糖 °≥ u¥体外对小鼠免疫
细胞功能的影响 ≈ q激光生物学报 ousstotsktl}w|q
≈u  赵帜平 o沈业寿 o葛盛芳 o等 q丹皮多糖分离纯化和降血糖作用
研究 ≈ q安徽大学学报 k自然科学版 lot|||ouvkul}|tq
≈v  何守志 o尹素云 o宋 琛 o等 q半乳糖性白内障形成及逆转的实
验研究 ≈ q中华眼科杂志 ot|{zouv}v|uq
≈w  张殷建 o阮雯洁 o刘 莺 o等 q中药祛障灵滴眼液抗白内障的实
验研究 ≈ q中国实用眼科杂志 oussxouvk{l}{zxq
≈x  商 福 q国外医学 #眼科学分册 ot|{|otv}u|zq
≈y  • ¤°¤±¤Ž∂ o ≤«¤±§µ¤ ⁄o • ¬¯¯¶‘Žq ’¬¬§¤·¬√¨¶·µ¨¶¶2¬±§∏¦¨§
∏³2µ¨ª∏¯¤·¬²± ²© ·«¨ ¦«¯²µ¬§¨ ¦«¤±±¨¯ ¤±§ ‘¤n r≤¤n ¬¨¦«¤±ª¨ µ
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usswot{kvl}tzzq
≈z  赵惠仁 o胡书群 o任孝衡 q糖性白内障大鼠晶体水溶性蛋白的
改变 ≈ q徐州医学院学报 ot|{|o|kvl}tztq
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≈责任编辑 刘  
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第 vu卷第 t|期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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