全 文 ：·研究报告·
甘草活性成分和营养成分动态变化研究
冯 薇１，２，王文全１，赵平然３
（１．北京中医药大学 中药学院，北京 １００１０２；
２．北京协和医学院 药用植物研究所，北京 １０００９４；３．河北医科大学，河北 石家庄 ０５００１７）
［收稿日期］ ２００７０４１７
［基金项目］ 国家自然科学基金项目（３０５７２３２８）；高等学校博
士学科点专项研究基金（００２６００６）
［通讯作者］ 王文全，Ｔｅｌ：（０１０）８４７３８６２３，Ｅｍａｉｌ：ｗｗｑ５７＠１２６．
ｃｏｍ
豆科甘草属植物甘草ＧｌｙｃｙｒｈｉｚａｕｒａｌｅｎｓｉｓＦｉｓｃｈ．
是常用中药材，甘草中三萜和黄酮类是重要的活性成
分［１］，甘草酸和甘草苷又是其中最具代表性的指标性
成分，由于有极强生理活性而被广泛应用于临床，通
常被做为质量评价的依据［２］。然而甘草酸、甘草苷相
对含量较低，占药材质量多数的蛋白质、纤维、脂肪、
灰分等物质其含量变化及比例关系都对主要活性成
分含量有重要影响［３］，因此作者对栽培于内蒙古杭锦
旗、甘肃酒泉不同生长年限和不同采收期甘草中主要
活性成分和营养成分含量进行了测定，了解人工栽培
甘草中几类成分含量变化及相关性规律。由于在人
工培育中可通过改变水、肥、光照等因素调控营养成
分含量，而甘草中三萜、黄酮等次生代谢产物在植物
体内合成代谢过程复杂，涉及到酶的种类、活性等因
素，不易人为调控，因此，利用相关性规律调控初生代
谢产物以达到改变次生代谢产物含量的目的，以指导
人工栽培甘草的生产和采收加工。
１ 材料
１．１ 甘草药材
甘草生药样品由王文全教授提供和鉴定，为甘
草Ｇ．ｕｒａｌｅｎｓｉｓ根部。６０℃干燥过夜并粉碎。
１．２ 仪器及数据处理软件
Ａｇｉｌｅｎｔ１１００型高效液相色谱仪，Ａｇｉｌｅｎｔ１１００色谱
工作站，ＳＰＳＳ１００，ＵＶ－２１００型分光光度计（ＵＮＩＣＯ仪
器有限公司），ＣＸＣ－０６粗纤维测定仪、ＳＺＦ－０６粗脂
肪测定仪（上海新嘉电子有限公司）、ＫＤＹ－９８３０凯氏
定氮仪（北京市通润源机电技术有限公司）。
１．３ 试剂
供含量测定用甘草酸铵、甘草苷（中国药品生
物制品检定所，批号分别为１１０７３１，１１１６１０），ＣＡＬＥ
ＤＯＮ色谱纯乙腈，其余试剂均为分析纯。市售的娃
哈哈纯净水。
２ 方法
２．１ 甘草苷测定
２．１．１ 色谱条件 色谱柱ＤＩＫＭＡＤｉａｍｏｎｓｉｌ －Ｃ１８分
析柱（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）流动相 乙腈０５％冰
醋酸（１∶４）。柱温２５℃。检测波长２７６ｎｍ，按甘草苷
峰计算理论塔板数＞４０００。流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１。
２．１．２ 供试液制备 取０３ｇ甘草粉末，精密称定，
加６０％乙醇２５ｍＬ，称重，（２５０Ｗ，２０ｋＨｚ）超声提取
３０ｍｉｎ，称重，补足损失重，过滤，收集续滤液，取上述
样品溶液０８ｍＬ，用２０％乙腈稀释定容至１０ｍＬ，过
微孔滤膜。对照品和样品ＨＰＬＣ图见图１。
图１ 甘草苷ＨＰＬＣ图
Ａ．对照；Ｂ．样品；１．甘草苷
２．１．３ 方法学考察 以甘草苷对照品制备标准曲
线以峰面积为纵坐标，对照品的含量（μｇ）为横坐
标，得线性回归方程 Ｙ＝１５９８４Ｘ－２６３８５，Ｒ２＝
０９９９９，线性范围００３２８３～１０５０５６μｇ。以甘肃
酒泉三年生栽培甘草进行方法学考察，供试品溶液
１２ｈ内稳定，ＲＳＤ０１６％（ｎ＝６），重复性 ＲＳＤ
０８４％（ｎ＝６），精密度ＲＳＤ０５３％（ｎ＝６）；加样回
收率平均为９７９％，ＲＳＤ１６％（ｎ＝６）。
２．２ 甘草酸测定
２．２．１ 色谱条件 ＤＩＫＭＡＤｉａｍｏｎｓｉｌ －Ｃ１８分析柱
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第３３卷第１０期
２００８年５月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １０
Ｍａｙ，２００８
（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）流动相乙腈１％冰醋酸
（４２∶５８）。柱温２５℃。检测波长２５０ｎｍ，按甘草酸
峰计算理论塔板数＞４０００。流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１。
２．２．２ 供试液制备 取 ０３ｇ甘草粉末，精密称
定，加０３％氨水５０ｍＬ，称重，（２５０Ｗ，２０ｋＨｚ）超
声提取３０ｍｉｎ，称重，补足损失重，过滤，收集续滤
液，过微孔滤膜。对照品和样品ＨＰＬＣ图见图２。
图２ 甘草酸含量测定ＨＰＬＣ图
Ａ．对照；Ｂ．样品；１．甘草酸
２．２．３ 方法学考察 以甘草酸对照品制备标准曲
线以峰面积为纵坐标，对照品的含量（μｇ）为横坐
标，得线性回归方程 Ｙ＝７８１６１Ｘ－１５５１７，Ｒ２＝
０９９９９，线性范围０１１０６～３５３９２μｇ。以甘肃酒
泉三年生栽培甘草进行方法学考察，供试品溶液２４
ｈ内稳定，ＲＳＤ０４６％（ｎ＝６）；重复性ＲＳＤ０３９％；
精密度 ＲＳＤ１３８％；加样回收率平均为 ９８４％，
ＲＳＤ２０８％（ｎ＝６）。
２．３ 营养成分测定
２．３．１ 粗蛋白测定 采用凯氏定氮法通过 ＫＤＹ－
９８３０凯氏定氮仪测定甘草药材中粗蛋白的含量。
２．３．２ 粗脂肪测定 采用索氏抽提法通过 ＳＺＦ－
０６粗脂肪测定仪测定甘草药材中粗脂肪的含量。
２．３．３ 粗纤维测定 采用酸碱洗涤称重法通过
ＣＸＣ－０６粗纤维测定仪测定甘草药材中粗纤维的
含量。样品测定见表１，２。
表１ 不同生长年限样品质量分数（ｎ＝３） ％
样品 甘草酸 甘草苷 粗蛋白 粗脂肪 粗纤维
杭锦旗一年生 １００ ０７４ １２０１ ２７５ ２４６６
杭锦旗二年生 １７５ ０９６ １１１６ ３１９ ２５１６
杭锦旗三年生 １８４ ０６９ １０９３ ３９２ ２７３６
杭锦旗四年生 １９１ ０９６ １０７６ ３９５ ２８４２
杭锦旗五年生 １９０ ０８０ １０５５ ４０１ ２８６０
酒泉一年生 １５８ ０７２ １２０１ ３３２ １７７２
酒泉二年生 １５１ ０９４ １１１６ ３４７ １９６２
酒泉三年生 ２９７ １８９ ９４９ ４５５ ２３８７
酒泉四年生 ２０８ １２４ ８９０ ６５２ ２５８３
３ 结果与讨论
表２ 不同采收期样品质量分数（ｎ＝３） ％
采收期
甘草酸
一年生 二年生 四年生
甘草苷
一年生 二年生 四年生
粗蛋白
一年生 二年生 四年生
粗脂肪
一年生 二年生 四年生
粗纤维
一年生 二年生 四年生
５月 ２４９ ３１７ ２６０ １０３ １４３ ２００ １２５６ １３２０ ８９８ ４９７ ３６３ ３４４ ２２５０ １９０２ ２２４１
６月 １４６ ２６５ １９２ ０７３ ０５４ １４５ １１０２ ９６８ ５５７ ２９８ ３６４ ４３４ ２５８８ ２１２１ ２５０６
７月 １８０ ２８８ ２４３ １０１ ０８９ １７９ １２０４ １０５７ ８５７ ２２７ ３３６ ５１３ ２３５９ ２１５４ ２１８０
８月 １８１ ２２３ ２３５ ０６６ ０８０ １６８ １１６６ １０３２ ４８０ １６１ １３９ ４２９ １８９３ ２１４７ ２３４３
９月 ２３４ ２２８ ２２４ ０６０ ０６３ １６５ １１９８ １２０６ ６４２ ２０１ １７４ ４００ １７３４ １５５７ ２４６４
１０月 １８７ ２２４ ２３９ ０８５ １８０ １９３ １２３０ １３０１ ７４７ ２７６ ２６６ ５５７ １８２３ １８１５ ２８５７
不同栽培年龄甘草中甘草酸均是在三年生达到
最高，而后随生长年限升高含量略有降低。不同栽
培年龄甘草中甘草苷无明显变化规律，同一产地甘
草中甘草酸和甘草苷含量变化大致相同，说明甘草
酸与甘草苷的含量变化均与产地有一定关系。
２个产地不同栽培年龄３种营养成分变化趋势
分别相同，粗蛋白含量随生长年限增加而降低，粗脂
肪和纤维含量随生长年限增加而增加。
不同采收期甘草中，一、二、四年生甘草苷含量
变化趋势相同，在５，７，１０月较高，甘草酸含量在５
月份最高，随采收期变化无明显变化规律。
不同采收期甘草中，一、二、四年生甘草粗蛋白
含量和粗脂肪含量变化趋势相同，在５，７，０月较高，
而粗纤维含量无明显变化规律。
使用ＳＰＳＳ１００统计软件对实验中２７份样品５
类成分含量测定结果进行线性相关分析，其中甘草
苷与甘草酸（ｒ＝０４６４，Ｐ＝００１５）、粗脂肪呈正相
关（ｒ＝０５１２，Ｐ＝０００６），与粗蛋白呈负相关（ｒ＝
－０５３５，Ｐ＝０００４），粗蛋白与粗纤维（ｒ＝－０４５１，
Ｐ＝００１８）和粗脂肪呈负相关（ｒ＝－０５１０，Ｐ＝
０００７），粗纤维和粗脂肪间呈正相关（ｒ＝０５６２，
Ｐ＝０００２）。相关性规律可以作为指导生产的依据，
例如调节生产中的水、肥、光照达到通过调节营养成
分的含量，间接调控有效成分含量的目的。
［参考文献］
［１］ 沈凤嘉，胡金峰，虞亚川，等．乌拉尔甘草化学成分的研究［Ｊ］．
高等学校化学学报，１９９５，１６（４）：５７２．
［２］ 中国药典［Ｓ］．一部．２００５：５９．
［３］ 张 继，姚 健，郭守军．乌拉尔甘草营养成分的分析研究
［Ｊ］．西北植物学报，１９９９，１９（６）：１８１．
［责任编辑 张宁宁］
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第３３卷第１０期
２００８年５月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １０
Ｍａｙ，２００８