全 文 ：长春碱纳米粒对神经胶质瘤细胞 ＢＴ３２５
生长的抑制作用
刘玉梅１，２，欧阳五庆１，张自强２，马淑燕１，杨宝平１
（１．西北农林科技大学 动物医学院，陕西 杨凌 ７１２１００；
２．河南科技大学 动物科技学院，河南 洛阳 ４７１００３）
［摘要］ 目的：比较长春碱纳米粒和长春碱水溶液对神经胶质瘤细胞ＢＴ３２５的生长抑制作用。方法：采用乳
化聚合法制备长春碱纳米粒，应用ＭＴＴ方法检测长春碱纳米粒和长春碱水溶液对神经胶质瘤细胞 ＢＴ３２５的生长
抑制率；通过倒置显微镜、透射电镜和扫描电镜观察长春碱纳米粒和长春碱水溶液对神经胶质瘤细胞 ＢＴ３２５形态
的影响。结果：长春碱浓度为５～５０００μｇ·Ｌ－１处理细胞４８ｈ后，长春碱纳米粒和长春碱水溶液对神经胶质瘤细
胞ＢＴ３２５的生长抑制率分别为４１％，４９％，７３％，８３％和２８％，３３％，５４％，６０％（Ｐ＜００５）；长春碱水溶液组细胞处
于凋亡早期、凋亡小体正在形成，长春碱纳米粒组细胞处于凋亡中、末期，细胞失去结构完整性。结论：长春碱水溶
液和长春碱纳米粒都具有抑制神经胶质瘤细胞ＢＴ３２５生长的作用，但在相同剂量下，长春碱纳米粒比长春碱水溶
液抑瘤效果显著。
［关键词］ 长春碱；纳米粒；神经胶质瘤
［中图分类号］Ｒ２８５５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）２０２３６５０５
［收稿日期］ ２００８０１１９
［基金项目］ 国家科技支撑计划（２００６ＢＡＤ０４Ａ１１）
［通讯作者］ 欧阳五庆，Ｅｍａｉｌ：ｏｙｗｑ５０６＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ
长春碱（ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ，ＶＬＢ）是从夹竹桃科植物
长春花中提取出来的一种生物碱，具有天然地抑
制微管蛋白组装的活性，属细胞周期特异性肿瘤
化疗药物［１］，主要用于治疗何杰金氏病、绒毛膜上
皮癌、乳腺癌、头颈部癌和子宫颈癌等［２３］。除药
理活性外，长春碱也存在严重的毒副作用，它可以
导致骨髓损耗、恶心，也可以引起脱发、腹泻、便
秘、手脚麻木、头痛等［２］。研究表明，长春花生物
碱类药物是耐药蛋白的作用底物，易使肿瘤细胞
产生多药耐药性［１］，致使肿瘤细胞内药物浓度过
低，难以维持药效。这些毒副作用严重限制了其
长期反复应用于肿瘤的治疗，因此提高药理活性，
降低使用剂量是缓解长春碱毒副作用的关键。有
资料表明［４］，抗肿瘤药物的纳米粒（ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ，
ＮＰ）制剂可延长药物半衰期，提高对肿瘤组织的靶
向性，降低毒副作用，逆转肿瘤细胞的多药耐药
性。本研究制备了 ＶＬＢ聚氰基丙烯酸丁酯（ｐｏｌｙ
ｂｕｔｙ１ｃｙａｎｏａｃｒｙｌａｔｅ，ＰＢＣＡ）纳米粒 （ＶＬＢＰＢＣＡ
ＮＰ），并作用于神经胶质瘤细胞 ＢＴ３２５，以期能增
强细胞毒性，降低使用剂量，减少长春碱的毒副
作用。
１ 材料
１．１ 细胞株
神经胶质瘤细胞 ＢＴ３２５购自北京神经外科研
究所。
１．２ 药物与试剂
ＶＬＢ购自广州环叶制药厂，批号 ０６０４０３，纯
度＞９８％。氰基丙烯酸丁酯购自瞬康医用胶有限公
司，批号０６１１０３；ＤＭＥＭ（高糖）培养基，ＧＩＢＣＯ；胎牛
血清，杭州四季青生物工程材料有限公司；胰蛋白酶
试剂盒，碧云天生物技术研究所。
１．３ 仪器
ＯｐｔｉｍａＬ－１００ＸＰ超速离心机（美国贝克曼库
尔特有限公司）；Ｈ－６００型透射电子显微镜（日本
日立）；２０００ＨＳＡ型激光粒度分析仪（英国马尔文仪
器有限公司）；ＣＫＸ４１倒置显微镜（日本Ｏｌｙｍｐｕｓ公
司）；ＭＣＯ－１５ＡＣＣＯ２培养箱（日本 Ｓａｎｙｏ公司）；
ＵＶ１１０２型紫外可见光分光光度计（上海天美科学
仪器有限公司）。
２ 方法
２．１ ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ的制备
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采用乳化聚合法，在２０ｍＬ００１ｍｏＬ·Ｌ－１盐酸
中加入１％右旋糖苷０２ｇ（相对分子质量７００００），
用磁力搅拌器以６００ｒ·ｍｉｎ－１的速度搅拌，加入１００
ｍｇＶＬＢ后缓慢滴加１％（０２ｍＬ）氰基丙烯酸丁酯，
室温下搅拌８ｈ后，用０１ｍｏＬ·Ｌ－１ＮａＯＨ调ｐＨ至
６０终止反应，同法制备空白纳米粒。１０μｍ滤膜
过滤后使用。
２．２ ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ的质量评价
２．２．１ ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ的粒度分析 取少量 ＶＬＢ
ＰＢＣＡＮＰ滴于覆有支持膜的铜网上，静置 １０ｍｉｎ
后，再滴加质量分数为３％的磷钨酸溶液于铜网上
负染 ５ｍｉｎ，自然挥干，透射电子显微镜拍照。将
ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ用蒸馏水稀释一定倍数，用激光粒度
测定仪测其粒径。
２．２．２ ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ的包封率和载药量测定
ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ低温超速离心（４℃，５万 ｒ·ｍｉｎ－１，
１５０ｍｉｎ）后，取上清液用紫外分光光度计在 ２１４５
ｎｍ波长处测定吸光度，根据标准曲线计算药物含
量。总药量为 Ｗ１，上清液中 ＶＬＢ含量为 Ｗ２，单体
ＢＣＡ加入量为ＷＢＣＡ，按下式计算包封率和载药量：
包封率（％）＝［（Ｗ１－Ｗ２）／Ｗ１］×１００％
载药量（％）＝［（Ｗ１－Ｗ２）／ＷＢＣＡ］×１００％
２．３ ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ的抗肿瘤活性研究
２．３．１ 细胞培养 神经胶质瘤细胞株 ＢＴ３２５用含
２０％胎牛血清的 ＤＭＥＭ培养基在３７℃，５％ＣＯ２条
件下常规培养。当细胞长到７０％ ～８０％融合时，用
０２５％胰蛋白酶１∶２消化传代。
２．３．２ ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ对ＢＴ３２５胶质瘤细胞增殖活
力的影响 选择对数生长期的 ＢＴ３２５胶质瘤细胞，
０２５％胰酶消化后，用含 ２０％胎牛血清的 ＤＭＥＭ
培养液调整细胞密度为１×１０５个／ｍＬ，接种于９６孔
板（每孔２００μＬ）。于３７℃，５％ＣＯ２条件下培养２４
ｈ后弃去培养液，分别更换为含不同质量浓度（０５，
５，５０，５００，５０００μｇ·Ｌ－１）的 ＶＬＢ生理盐水溶液和
ＶＬＢ载药纳米粒溶液的培养基。同时设调零孔（加
入２００μＬ完全培养基，不含细胞）和空白对照孔
（加入２００μＬ完全培养基）以及空白纳米粒组（与
５０００μｇ·Ｌ－１的载药纳米粒稀释相同的倍数），每
组浓度设３个复孔。４８ｈ后更换为无血清培养基，
每孔加新配制的５ｇ·Ｌ－１噻唑蓝（ＭＴＴ）液 ２０μＬ，
继续培养４ｈ后，弃去孔中上清液，每孔加入ＤＭＳＯ
１５０μＬ溶解甲沉淀，紫色结晶充分溶解后，在酶
标仪上测定４９０ｎｍ波长下的吸光值。
２．３．３ ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ对ＢＴ３２５胶质瘤细胞超微结
构的影响 将处于对数生长期的神经胶质瘤细胞
ＢＴ３２５接种到５０ｍＬ细胞培养瓶中，当细胞的融合
度达到７０％～８０％时，分别以５００μｇ·Ｌ－１的 ＶＬＢ
水溶液和 ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ作用于神经胶质瘤细胞
ＢＴ３２５，４８ｈ后用０２５％的胰酶消化液消化细胞，离
心弃上清夜，再加 ＰＢＳ洗涤细胞２次后，缓慢滴加
体积分数为２５％戊二醛固定细胞，使得细胞团凝
固后，进行锇酸后固定，脱水，Ｅｐｏｎ８１２环氧树脂包
埋，制作超薄切片，进行透射电镜观察，照相。
２．３．４ ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ对ＢＴ３２５胶质瘤细胞表面结
构的影响 各组细胞接种到含有盖玻片的６孔培养
板中，当细胞在盖玻片上长满７０％ ～８０％时，分别
以５００μｇ·Ｌ－１的 ＶＬＢ水溶液和 ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ作
用于神经胶质瘤细胞ＢＴ３２５４８ｈ后，用ＰＢＳ洗涤细
胞２次，按常规方法用体积分数为２５％戊二醛固
定２４ｈ，乙醇梯度脱水，醋酸异戊脂置换，ＣＯ２超临
界点干燥，喷金后，进行扫描电镜观察，照相。
２．４ 统计学处理
数据均用 珋ｘ±ｓ表示，采用统计软件 ＳＰＳＳ１３０
进行方差分析，Ｐ＜００５表示差异有显著性意义。
３ 结果
３．１ ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ的形态与粒径
ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ形态粒径均匀，分散性好。粒度
分析可知，其平均粒径为７４４ｎｍ，其中约８０％粒子
的粒径在６０～１００ｎｍ，０％的粒径小于５０ｎｍ，７％粒
子的粒径大于１００ｎｍ，粒径分布较窄。见图１。
图１ ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ的透射电镜照片（×１０万）
３．２ ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ的包封率和载药量
经计算 ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ的包封率为７８４７％、载
药量为 ３９２４％。
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３．３ ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ的抗肿瘤活性
３．３．１ ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ对神经胶质瘤细胞ＢＴ３２５增
殖活力的影响 空白纳米粒组的细胞增殖活力
０７９９±００１２，与正常神经胶质瘤细胞 ＢＴ３２５增殖
活力０８２０±００３０相比差异不显著。不同质量浓
度的ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ和ＶＬＢ作用于神经胶质瘤细胞
ＢＴ３２５４８ｈ后，细胞生长抑制率分别为２１％，４１％，
４９％，７３％，８３％和 １７％，２８％，３３％，５４％，６０％。
当ＶＬＢ在 ５～５０００μｇ·Ｌ－１时，差异显著（Ｐ＜
００５）。结果提示 ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ抑制神经胶质瘤
细胞ＢＴ３２５增殖效果显著高于ＶＬＢ水溶液组。
３．３．２ ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ对神经胶质瘤细胞ＢＴ３２５形
态结构的影响 正常神经胶质瘤细胞 ＢＴ３２５呈梭
形，核形态饱满，核质着色浅，密度均匀一致，两端突
起明显，呈典型成纤维样细胞形态，细胞之间界限清
晰，折光率高，活力旺盛。ＶＬＢ水溶液处理后，部分
细胞皱缩为圆形、折光率减弱。ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ组细
胞数量明显减少，细胞间距变大，贴壁能力下降，多
数脱落漂浮于培养液中，大多数细胞皱缩变圆，两端
突起消失，为典型的凋亡细胞形态。见图２。
Ａ．正常组；Ｂ．ＶＬＢ水溶液组；Ｃ．ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ组；箭头代表凋亡细胞
图２ ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ对神经胶质瘤细胞ＢＴ３２５形态的影响（×４００）
３．３．３ ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ对神经胶质瘤细胞 ＢＴ３２５
超微结构的影响 正常神经胶质瘤细胞 ＢＴ３２５
结构清晰完整，细胞核较大，核内染色质分布均
匀，微绒毛排列密集。ＶＬＢ水溶液处理组细胞染
色质边集，细胞内出现大量空泡，微绒毛消失，细
胞形态基本完整。ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ处理组细胞形
态不完整，微绒毛消失，有凋亡小体形成。见
图３。
Ａ．正常组（×４０００）；Ｂ．ＶＬＢ水溶液组（×７５００）；Ｃ．ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ组（×６０００）；箭头代表凋亡小体
图３ ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ对神经胶质瘤细胞ＢＴ３２５超微结构的影响
３．３．４ ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ对神经胶质瘤细胞ＢＴ３２５表
面结构的影响 正常神经胶质瘤细胞 ＢＴ３２５呈长
梭形和多角形，细胞扁平且贴壁紧密，细胞膜均匀完
整。ＶＬＢ水溶液处理组细胞表面形态基本完整，细
胞边缘部分的胞膜有少量皱缩和突起，凋亡小体正
在形成。ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ处理组细胞表面形态不完
整，细胞皱缩肿胀，与邻近细胞脱离，细胞膜大面积
受损，部分区域细胞膜出现穿孔破裂，部分凋亡小体
已脱离细胞。见图４。
４ 讨论
纳米载体粒子直径１０～１０００ｎｍ，药物可包埋
或溶解在纳米粒子的内部，也可吸附或偶合在其表
面［５］，与传统的微粒载药系统相比，其对肿瘤组织
的靶向性更强。本研究选用 ＰＢＣＡ为载体，右旋糖
苷为稳定剂，采用乳化聚合法制备的长春碱纳米粒
具有较理想的载药量和包封率，性质稳定，且制备方
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Ａ．正常组（×１０００）；Ｂ．ＶＬＢ水溶液组（×３０００）；Ｃ．ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ组（×３０００）；箭头代表凋亡小体
图４ ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ对神经胶质瘤细胞ＢＴ３２５表面结构的影响
法简单，适用于工业化生产。此外，ＰＢＣＡ降解产物
为水溶性的聚氰基丙烯酸，对人体组织基本无毒性，
ＭＴＴ试验结果进一步证实，空白载体组与正常组细
胞的增殖活力无明显差异，且本试验在制备过程中
不选用有机溶剂，不存在有机溶剂残留问题。
ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ作用于神经胶质瘤细胞 ＢＴ３２５
４８ｈ后，细胞生长抑制率明显高于 ＶＬＢ水溶液组。
当ＶＬＢ在５～５０００μｇ·Ｌ－１时，差异显著，且随剂
量增大抑制率增大。通过倒置显微镜、透射电镜和
扫描电镜观察可知，在同一浓度作用下，ＶＬＢ水溶
液处理组大部分神经胶质瘤细胞 ＢＴ３２５处于凋亡
早期，凋亡小体正在形成；ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ处理组神
经胶质瘤细胞ＢＴ３２５已经出现凋亡晚期特征，失去
结构完整性，包裹胞质、细胞器及核碎片的凋亡小体
在细胞基部断裂并脱落。经过 ＭＴＴ试验和形态学
观察表明，ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ对神经胶质瘤细胞 ＢＴ
３２５的生长抑制作用显著优于同一浓度的ＶＬＢ水溶
液组，其机制可能在以下２个方面。一方面，ＮＰ粒
径小，分布均匀、比表面积大、吸附能力强，且对肿瘤
细胞具有亲和力，同时由于纳米粒的粒径非常小，很
容易被癌细胞通过胞饮或吞噬所摄取，甚至可直接
进入癌细胞内发挥药效［６］。ＶＬＢ在ＮＰ载体的协助
下跨过细胞膜，并在肿瘤细胞内富集，提高了其抗肿
瘤活性。另一方面，以往研究证实，ＮＰ载药系统是
逆转肿瘤细胞多药耐药性（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，
ＭＤＲ）的最有效策略之一［７］。将阿霉素包裹在聚氰
基丙烯酸烷基酯中可抑制 Ｐ３８８耐药细胞产生
ＭＤＲ［８］；包裹在脂质纳米囊中的表鬼臼毒素增强了
对Ｃ６和 Ｆ９８神经胶质瘤细胞的敏感性，抑制了耐
药蛋白（Ｐｇｐ）的表达［９］；此外，阿霉素和环孢素 Ａ
共同包裹于聚氰基丙烯酸烷基酯纳米粒中可提高环
孢素Ａ逆转ＭＤＲ的活性［１０］。本实验选用的神经胶
质瘤细胞 ＢＴ３２５，相关资料表明［１１］，此神经胶质瘤
细胞 ＢＴ３２５Ｐｇｐ表达量高，已明确扩增出 ＭＤＲ基
因。ＶＬＢＰＢＣＡＮＰ可能通过躲避神经胶质瘤细胞
ＢＴ３２５膜上的耐药蛋白而使细胞内药物浓度升高，
药效增强。详细机制还有待进一步研究。
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Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ２０
Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００８
Ｅｆｅｃｔｏｆｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｏｎａｎｔｉｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｉｎ
ｈｕｍａｎｇｌｉｏｍａｃｅｌｌｉｎｅｓＢＴ３２５
ＬＩＵＹｕｍｅｉ１，２，ＯＵＹＡＮＧＷｕｑｉｎｇ１，ＺＨＡＮＧＺｉｑｉａｎｇ２，ＭＡＳｈｕｙａｎ１，ＹＡＮＧＢａｏｐｉｎｇ１
（１．ＣｏｌｅｇｅｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＮｏｒｔｈｗｅｓｔＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ７１２１００，Ｃｈｉｎａ；
２．ＣｏｌｅｇｅｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＨｅｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｌｕｏｙａｎｇ４７１００３，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｃｏｍｐａｒｅａｎｔｉｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｅｆｅｃｔｓｏｆｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅｎａｎｏｐｒａｔｉｃｌｅｓａｎｄｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅｗａｔｅｒｓｏｌｕｔｉｏｎｉｎｈｕｍａｎ
ｇｌｉｏｍａｃｅｌｌｉｎｅｓＢＴ３２５．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｗｅｒｅｐｒｅｐａｒｅｄｂｙｅｍｕｌｓｉｏｎｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓａｎｄｕｓｉｎｇｄｅｘｔｒａｎａｓａ
ｓｔａｂｉｌｉｚｉｎｇａｇｅｎｔ．Ｉｔｗａｓｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄｂｙｍｅａｎｓｏｆｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ，ｓｉｚｅ，ｄｒｕｇｅｎｔｒａｐｍｅｎｔｅｆｉｃｉｅｎｃｙａｎｄｌｏａｄｉｎｇｅｆｉｃｉｅｎｃｙ．Ｈｕｍａｎｇｌｉｏｍａ
ｃｅｌｌｉｎｅｓＢＴ３２５ｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｄｉｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓａｎｄｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅｗａｔｅｒｓｏｌｕｔｉｏｎｆｏｒ４８ｈ，Ａｎｔｉｐｒｏ
ｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｅｆｅｃｔｗａｓｍｅａｓｕｒｅｄｂｙＭＴＴｍｅｔｈｏｄ．Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙｉｎｖｅｒｔｅｄｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ，ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉ
ｃｒｏｓｃｏｐｅａｎｄｓｃａｎｎｉｎｇｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＭｅａｎｄｉａｍｅｔｅｒｏｆＶＬＢＰＢＣＡＮＰｗａｓａｂｏｕｔ７４４ｎｍ，ａｎｄｄｒｕｇｅｎｔｒａｐｍｅｎｔｅｆｉ
ｃｉｅｎｃｙａｎｄｌｏａｄｉｎｇｅｆｉｃｉｅｎｃｙｗａｓ７８４７％ ａｎｄ３９２４％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｅｌｇｒｏｗｔｈｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｇｒｏｕｐ
ａｎｄｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅｗａｔｅｒｓｏｌｕｔｉｏｎｇｒｏｕｐｉｎａｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｒａｎｇｅ（５５０００ｇ·Ｌ－１）ｆｏｒ４８ｈｗａｓ４１％，４９％，７３％，８３％ ａｎｄ２８％，
３３％，５４％，６０％ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＥｎｔｒａｐｍｅｎｔｏｆＶＬＢｉｎＮＰＳｍａｙｄｉｓｔｉｎｃｔｌｙｄｅｇｒａｄｅａｂｓｏｒｂｅｎｃｙａｓｃｏｍｐａｒｅｄｔｏｆｒｅｅｄｒｕｇｓ．Ｇｌｉｏｍａｃｅｌ
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ＢＴ３２５ｃｅｌｓｗｅｒｅｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｏｒｅｎｄｓｔａｇｅ，ａｎｄｍｉｓｓｅｄｓｔｒｕｃｔｕｒｅｉｎｔｅｇｒａｌｉｔｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＶＬＢＰＢＣＡＮＰａｎｄＶＬＢｗａｔｅｒｓｏｌｕｔｉｏｎ
ｃｏｕｌｄｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆｈｕｍａｎｇｌｉｏｍａｃｅｌｌｉｎｅｓＢＴ３２５，ａｎｄＶＬＢｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｈａｖｅｓｔｒｏｎｇｅｒｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｅｆｅｃｔｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＶＬＢ
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［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ；ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ；ｇｌｉｏｍａ
［责任编辑 古云侠］
［收稿日期］ ２００８０３２０
［通讯作者］ 武洁，Ｔｅｌ：（０２５）８５６０８６７５，Ｅｍａｉｌ：ｗｕｊｉｅ６１３＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ
ＨＰＬＣＭＳ／ＭＳ测定大鼠血浆中的芍药苷及
其药动学研究
武 洁，姚 楠，王大为
（江苏省中医药研究院，江苏 南京 ２１００２８）
［摘要］ 目的：建立ＨＰＬＣＭＳ／ＭＳ分析方法测定大鼠血浆中的芍药苷含量，并用于研究当归对赤芍主要有效
成分芍药苷的药动学影响。方法：质谱检测方式：多反应离子监测，选择监测的离子为ｍ／ｚ４５０～ｍ／ｚ３２７（芍药苷）
和ｍ／ｚ３８８～ｍ／ｚ２２５（栀子苷）。大鼠分别灌胃赤芍煎液和赤芍及当归煎液，芍药苷剂量均为２９４７８ｍｇ·ｋｇ－１。
ＨＰＬＣＭＳ／ＭＳ法测定芍药苷的血药浓度，并计算芍药苷药动学参数。结果：单独服用赤芍煎液时芍药苷的主要药
动学参数分别为Ｃｍａｘ（１５５±０５３）ｍｇ·Ｌ
－１，Ｔｍａｘ（０９±０３）ｈ，ｔ１／２（１５１±０６３）ｈ，ＭＲＴ（３０８±０７４）ｈ，ＡＵＣ０→τ
（４６８±０８５）ｍｇ·ｈ－１·Ｌ－１。同时服用当归煎液和赤芍煎液时芍药苷的 Ｃｍａｘ，Ｔｍａｘ，ｔ１／２，ＭＲＴ，ＡＵＣ０→τ分别为
（０９３±０４２）ｍｇ·Ｌ－１，（１５±０８）ｈ，（３０８±１７９）ｈ，（５１９±１９５）ｈ，（３３６±０５６）ｍｇ·ｈ－１·Ｌ－１。两组药
动学参数中，ＭＲＴ，Ｃｍａｘ和ＡＵＣ０→τ具有显著性差异（Ｐ＜００５）。结论：当归能显著影响赤芍主要有效成分芍药苷的
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第３３卷第２０期
２００８年１０月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ２０
Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００８