全 文 ：
图 v 有机酸的滴定法测试结果 kh o横坐标 l与
‘Œ• 交叉验证测试结果 kh o纵坐标 l的相关图
预处理及试剂消耗等特点 o可用于小儿消食片的含
量测定 o为探索小儿消食片生产过程的在线无损定
量检测方法奠定了基础 ∀
表 t 校正模型对外部验正集样品的分析结果 kν € {l
批号 化学值 rh 测试值 rh 绝对误差 相对误差 rh
sxs{sst u1u{w u1u{z | s1ssv | s1tz
sxs{swt u1vtv u1vsu w p s1sts y p s1wy
sxs{sww u1yyv u1x{s s p s1s{v p v1t
sxs{swx u1vzs u1wu{ | s1sx{ | u1x
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sxs{st{ t1|vy t1{x| z p s1szy v p v1|
≈参考文献  
≈t  相秉仁 o李 睿 o吴拥军 o等 q近红外光谱技术在药学领域中的
应用 ≈ q计算机与应用化学 ot|||otykxl}vuzq
≈u  胡钢亮 o吕秀阳 o等 q近红外漫反射光谱直接测定银杏叶提取
物粉末中总黄铜的含量 ≈ q药物分析杂志 ousswouwktl}t{q
≈v  中华人民共和国卫生部药品标准 ≈≥ q中药成方制剂 1
第 x册 q• ≥v2…2s{|w2|tkussslq
≈责任编辑 鲍 雷  
≈收稿日期   ussy2sz2tu
≈通讯作者   3 谈锋 oר¯}ksuvl y{vyzs|to∞2°¤¬¯}·¤±©¨±ªƒ
¶º∏q §¨∏q¦±
高速逆流色谱分离喜树叶中喜树碱
闫晓慧 o胡晓宇 o谈 锋 3 o祝顺琴 o李连强 o张莲莲 o谢 峻
k西南大学 生命科学学院 三峡库区生态环境教育部重点实验室 o重庆 wssztxl
喜树碱 k¦¤°³·²·«¨ ¦¬±o≤°×l是我国特有树种喜
树 Χαµ ποτηεχα αχυµ ινατα ⁄ ¦¨¤¬¶¤¬¶± 中¨所含的一种
生物碱 o具有显著的抗肿瘤活性 o其抗癌机制独特 o
是迄今为止发现的唯一专门通过抑制拓扑异构酶 ´
发挥细胞毒性的天然植物活性成分 ≈t  o目前已有
×°×o≤°×2tt等喜树碱类药物获得美国 ƒ⁄„批准用
于临床治疗癌症 ∀喜树中的喜树碱含量很低 o一般
仅为 s1sth ∗ s1th o目前关于喜树碱制备的报道 o
多采用大孔吸附树脂纯化的方法 ≈uov  o所获得的喜
树碱纯度较低 ∀
高速逆流色谱 k‹≥≤≤≤l是 us世纪 {s年代发展起
来的一种连续高效的液 2液分配色谱分离技术 ∀ ‹≥≤2
≤≤不需要固体载体 o避免了因不可逆吸附而引起的样
品损失 !变性 !失活等 o具有回收率高 o制备量大等优
点 o是一种理想的制备分离手段 ≈w  ∀ ‹≥≤≤≤用于喜树
碱的纯化尚未见报道 ∀本研究采用 ‹≥≤≤≤的方法对
经过大孔吸附树脂预处理过的喜树叶提取物进行了分
离纯化 o得到了高纯度喜树碱 o为喜树叶中喜树碱分离
制备提供了一条新的技术路线 ∀
1 仪器与材料
喜树嫩叶 oussx年七月采自西南大学校园 ~
ׅ∞vss„高速逆流色谱仪 k中国上海同田生化技术有
限公司 l~≤ pus„×高效液相色谱仪 k日本岛津色谱仪
器公司 l~喜树碱对照品 k购自 ≥¬ª°¤公司 o纯度 |xh l~
„… p{大孔吸附树脂 k南开大学化工厂 l~提取用酒精
为食用酒精 o氯仿 !甲醇 !正己烷均为国产分析纯 o用于
‹°≤分析用的甲醇为色谱级 o水为重蒸水 ∀
2 方法
2q1 ‹°≤条件 • ¤·¨µ¶≤t{色谱柱 kw1y °° ≅ txs
°°ox Λ°lo流动相甲醇 2水 kysΒwsl≈x  ~流速 s1{ °
# °¬±pt ~检测波长 uxw ±°o柱温为室温 o进样量 us
ˏ∀外标法定量 ∀
2q2 ‹≥≤≤≤分离过程 以 ts °# °¬±pt流速泵入
#{|xt#
第 vu卷第 tx期
ussz年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ tx
„∏ª∏¶·o ussz
固定相氯仿 2正己烷 k系统 toyΒw~系统 uo{Βulo待固
定相充满管道后 o打开主机调整转速为 {ss µ#
°¬±pt o使螺旋管顺时针旋转 ∀当达到设定转速 k{ss
µ# °¬±pt l时 o以 u °# °¬±pt的流速泵入流动相
≈k系统 t}甲醇 2水 kyΒwl~系统 u}甲醇 2³‹ {1s的
‘¤’‹水溶液 kyΒwl ∀当流动相从主机出口流出
时 o开始进样 o进样量 us °∀检测波长 uxw ±°o主
机温度控制在 us ε 以内 ∀
3 结果及分析
3q1 样品的制备及预处理 将采集到的新鲜喜树
嫩叶 ys ε 烘干 o将 t sss ª干叶磨碎过 us目筛 o粉
末用 v倍量 {sh乙醇超声提取 v次 o每次 ys °¬±∀
抽滤 o合并滤液减压蒸馏回收乙醇 o浓缩液用氯仿萃
取 v次合并氯仿萃取液减压蒸馏至干 o用甲醇溶解
沉淀 ys ε 烘干得喜树碱浸膏 ∀经 ‹°≤检测 o纯度
约为 uh ∀用 „… p{大孔吸附树脂进一步纯化提取
浸膏 o采用湿法装柱 o静态吸附 o依次用水和不同浓
度甲醇 ktsh oush ovsh owsh oxsh oysh ozsh o
{sh和 |xh l梯度洗脱 o分别收集洗脱液 o对各洗脱
液进行 ‹°≤ 检测 o结果表明 }水和 tsh oush o
vsh owsh oxsh甲醇洗脱液中未检出喜树碱 o喜树
碱主要存在于 ysh和 zsh的甲醇洗脱液中 ∀由此
确定用 xsh甲醇洗杂质 o用 zsh 甲醇洗脱目标成
分 ∀收集 zsh甲醇洗脱液 o浓缩干燥 o最终制得 u1z
ª经树脂纯化的浸膏 o‹°≤ 检测其纯度已达到
vsh k图 tl∀
图 t 各阶段提取产物的 ‹ °≤图
k¤q喜树碱对照品 o¥q喜树碱粗提物 o¦q大孔吸附树脂纯化浸膏 l
3q2 ‹≥≤≤≤溶剂系统选择 根据喜树碱的溶解
性 ≈y 初步选择氯仿 2正己烷 2甲醇 2水的溶剂系统 ∀
按照各种比例混合 o总体积为 w °o每次取 ts °ª
经大孔吸附树脂纯化的浸膏溶于溶剂体系 o充分溶
解后分层 o上相经 s1us Λ°微孔滤膜过滤上 ‹°≤
分析 o通过预调整喜树碱在上下相的分配系数试验
最终选出 u个系统 }ktl氯仿 2正己烷 2甲醇 2水 kyΒwΒ
yΒwl~kul氯仿 2正己烷 2甲醇 2³‹ {1s的 ‘¤’‹水溶
液 k{ΒuΒyΒwl∀
3q3 ‹≥≤≤≤分离结果 本实验采用了两步高速逆
流色谱的分离纯化方法 o通过逐渐调整溶剂体系的
配比 o达到理想的分离效果 o最终分离到高纯度的喜
树碱单体 ∀首先在第 t次 ‹≥≤≤≤中 o采用氯仿 2正
己烷 2甲醇 2水 kyΒwΒyΒwl溶剂体系进行分离 k图 ul∀
进样量 uss °ªo试验过程中对色谱峰采用分步收集
的方法 o每 x °¬±收集 t管 ∀ ‹°≤分析表明 o其中
峰 ´中包含大量目标组分 o共收集到 y管纯度高的
洗脱液 ∀结晶后得到 xs °ª喜树碱粗品 o‹°≤分
析喜树碱含量已达到 zth ∀但同时仍有其他的杂
质成分存在 ∀为此 o调节溶剂体系配比 o以氯仿 2正
己烷 2甲醇 2 ³‹ {1s的 ‘¤’‹水溶液 k{ΒuΒyΒwl为溶
剂体系对目标组分 k峰 ´ l进一步纯化 k图 vl∀
‹°≤分析表明 k图 wlo峰 ´ χ组分为高纯度的喜树
碱成分 o最终收集到 w管高纯度 k图 xl的喜树碱 o最
高纯度已达到 |z1||h ∀
#||xt#
第 vu卷第 tx期
ussz年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ tx
„∏ª∏¶·o ussz
图 x 第 u次 ‹ ≥≤≤≤色谱峰 ´ χ各管纯度
k¤q纯度 o¥q制备量 l
4 小结
本研究结合大孔吸附树脂预处理 o经过 u次高
速逆流色谱分离从喜树叶粗提物中分离制备出纯度
达到 |z1||h的喜树碱单体 ∀为喜树叶中喜树碱分
离制备提供了一条新的技术路线 ∀
≈参考文献  
≈t  • ¤¯¯ ∞o• ¤±¬ ≤o ≤²²® ≤ ∞o ·¨¤¯q ° ¤¯±·¤±·¬·∏°²µ¤ª¨ ±·¶q Œq
׫¨ ¬¶²¯¤·¬²± ¤±§¶·µ∏¦·∏µ¨ ²©¦¤°³²·«¨ ¦¬±o ¤±²√¨¯ ¤¯®¤¯²¬§¤¯ ¯¨ ∏2
®¨ °¬¤¤±§·∏°²µ¬±«¬¥¬·²µ©µ²° Χαµ πτοτηεχα αχυµ ινατα≈ q „2
° µ¨≤«¨ ° ≥²¦o t|yyo{{ktyl}v{{{q
≈u  王瑞芳 o欧来良 o孔德领 o等 q大孔吸附树脂对喜树果中喜树碱
和喜果苷的分离纯化研究 ≈ q中草药 oussxovykyl}{w|q
≈v  王 萍 o王博文 o王 倩 o等 q大孔吸附树脂分离喜树碱的研究
≈ q林业科技 oussxovskyl}xuq
≈w  祝顺琴 o谈 锋 q高速逆流色谱在天然产物分离中的应用 ≈ q
中国医药工业杂志 qussxovyktul}z{{q
≈x  张丽艳 o杨玉琴 o反相高效液相色谱法测定喜树果实中喜树碱
的含量 ≈ q中国中药杂志 ot||zouukwl}uvwq
≈y  ²±ª ¨ ¬±o Š ²¨©©µ¨¼ „o ≤²µ⁄¨¯ q¯ ± ∏¬±²¯¬±¨ ¤¯®¤¯²¬§¶©µ²°
Χαµ πτοτηεχα αχυµ ινατα≈ q °«¼·²¦«¨ °¬¶·µ¼o t|{|ou{kwl}tu|xq
≈责任编辑 鲍 雷  
千里光化学成分研究
史 辑 t o张 芳 uov o马鸿雁 t o王长虹 uov3 o侴桂新 uov o
张 勉 t o张朝凤 t o王峥涛 touov
ktq中国药科大学 中药学院 o江苏 南京 utsss|~
uq上海中医药大学 中药标准化教育部重点实验室 o上海 ustusv~
vq上海中药标准化研究中心 o上海 ustusvl
≈收稿日期   ussy2tu2tv
≈基金项目   国家自然科学基金重点项目 kvsxvs{wsl~国家自
然科 学 基 金 项 目 k vsxzuuuu l~国 家 科 技 攻 关 计 划 项 目
kussw…„zuµ„tul~上海市重点学科建设项目 k≠svstl
≈通讯作者   3 王长虹 oר¯}ksutlxtvuuxtvoƒ¤¬}ksutlxtvuux
t|o∞2°¤¬¯}º¦«¦¬°ƒ tyvq¦²°
千里光 Σενεχιο σχανδενσ …∏¦«q2‹¤°q为菊科千
里光属植物 ∀我国约有 tss多种 o广泛分布于全国
各地 ∀千里光为常用草药 o其味苦 o性寒 o具有清热
解毒 o杀虫明目之功效 ≈t  ∀药理研究表明千里光全
草具有抗菌消炎的作用 ∀目前国内学者对千里光的
化学成分研究较少 ∀作者对千里光全草进行了系统
的化学成分研究 o从乙醇提取物的醋酸乙酯萃取部
分分离得到了 y个化合物 o鉴定其结构分别为齐墩
果醇 k1lo对羟基苯乙酸 k2lo槲皮素 k3low2k吡咯
烷 2u2酮基 l2x2甲氧基 2苯基乙酸 k4lo消旋丁香脂素
k5lo大黄素 k6l∀其中化合物 4为新天然产物 o化
合物 3o5为首次从该植物中分离得到 o化合物 6为
首次自该属中分离得到 ∀
1 仪器和材料
…µ∏®¨ µ„ xss型核磁共振仪 oא ≥为内标物 ~
ƒ¬±±¬ª¤± p ≤±⁄∞≤„型质谱仪 ~÷w显微熔点测定仪
k未校正 l∀柱色谱用硅胶 ktss ∗ uss目 ouss ∗ vss
目 ovss ∗ wss目 l均为烟台汇友硅胶开发有限公司
出品 ~≥ ³¨«¤§¨ ¬‹ p us为 °«¤µ°¤¦¬¤公司产品进口
分装 ~其余试剂均为分析纯 ∀
样品于 ussx年 w月采自广西省荣安县 o原植物
经吴立宏博士鉴定为 Σ. σχανδενσ∀凭证标本保存于
上海中药标准化中心标本室 ∀
2 提取分离
千里光全草 y ®ªo{sh乙醇回流提取 v次 o提取
液合并 o减压浓缩得浸膏 o以少量水混悬后 o依次用
石油醚 !醋酸乙酯 !正丁醇萃取 o得到相应萃取物 ∀
醋酸乙酯萃取物 uxs ª经硅胶柱色谱分离 o氯仿 2甲
#ssyt#
第 vu卷第 tx期
ussz年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ tx
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