全 文 :v. Τηε Κεψ Λαβορατορψ οφ Χηεµ ιστρψ φορΝατυραλΠροδυχτσ οφ Χηινεσε Αχαδεµ ψ οφ Σχιενχε οφ Γυιζηου Προϖινχε,
Γυιψανγ xxssst, Χηινα)
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Χονχλυσιον: ≤«¤¶¦¨µ·¤¬± ¼¯ ¤±·¬¦¤±¦¨µ ©¨©¨¦·¶ιν ϖιϖο ¤±§ ιν ϖιτροq ±·¬¦¤±¦¨µ ©¨©¨¦·²©≤ιν ϖιϖο º¤¶¬± µ¨ ¤¯·¬²± ·² ±¨«¤±¦¬±ª¬°2
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[ Κεψ ωορδσ] Ροσα ροξβυργηιι~ ¤·¬¦¤±¦¨µ~ ∞«µ¯¬¦«. ¶¤¶¦¬·¨¶¦¤µ¦¬±²°¤~ «∏°¤± ±¨§²° ·¨µ¬¤¯ ¤§¨ ±²¦¤µ¦¬±²°¤
≈责任编辑 刘
劳损康复片活血消肿 !行气止痛功效的机制研究
程嘉艺 3 o阎醒予 o杨金玲
k辽宁中医药大学 o辽宁 沈阳 ttssvul
≈摘要 目的 }探讨劳损康复片活血消肿 o行气止痛功效的药理学基础 ∀方法 }应用医学图象分析系统观察劳
损康复片对大鼠肠系膜微循环的影响 !测定劳损康复片对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响 !观察劳损康复片
对自由落体损伤模型大鼠损伤组织 ≥⁄的活性及 ⁄含量的影响 !采用放射免疫法测定小鼠血清中皮质醇含量 ∀
结果 }劳损康复片显著改善大鼠肠系膜微循环状态 !改善血瘀模型大鼠血液流变性 !提高损伤模型大鼠 ≥⁄活性 !
降低 ⁄含量 o显著提高肾虚小鼠血清中皮质醇的含量 ∀结论 }劳损康复片活血消肿 o行气止痛功效基于其改善
微循环 !抗氧化及调节内分泌的作用 ∀
≈关键词 劳损康复片 ~中药药理 ~活血消肿 ~行气止痛
≈中图分类号 u{xqx ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukusszltw2twxz2sx
≈收稿日期 ussz2su2ts
≈通讯作者 3 程嘉艺 oר¯}ksuwlvtuszt|wo∞2°¤¬¯}¦¼qyt
tyvq¦²°
劳损康复片由黄瓜子 !三七 !骨碎补 !元胡 !鸡血
藤 !土鳖虫 !何首乌组成 o具有活血消肿 !行气止痛的
功效 o用于气滞血瘀所致局部肿胀 !刺痛 !青紫瘀血
斑 o关节活动受限 o舌质紫暗或有瘀斑 o脉弦涩 o即软
组织损伤的治疗 ∀本研究探讨劳损康复片活血消
肿 !行气止痛功效的药理学基础 ∀
1 材料
1q1 药物 劳损康复片浸膏粉由辽宁中医学院剂
型研究室提供 o为棕黄色极细粉末 o每克浸膏粉相当
于 w1w ª生药 o批号为 swswt{~红药胶囊 k沈阳中药
制药有限公司 o批号 sxsustl~金匮肾气丸 k北京同
仁堂科技发展有限公司制药厂 o批号 wstwuwyl~盐
酸肾上腺素注射液 k上海禾丰制药有限公司 o批号
#zxwt#
第 vu卷第 tw期
ussz年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ tw
∏¯¼o ussz
ws|sttl~氢化可的松注射液 k赤峰蒙欣药业有限
公司 o批号 swsvs|l∀
1q2 试剂 ⁄试剂盒 !≥⁄试剂盒 !考马斯亮蓝
蛋白测定试剂盒由南京建成生物工程研究所生产 o
批号分别为 usswtusxousswtutuousswttsx~皮质醇
试剂盒 !睾酮试剂盒 !雌二醇试剂盒由北京原子高科
核技 术 应 用 股 份 公 司 生 产 o批 号 分 别 为
ussxsw w{woussxsw wxzoussxsw w{t∀
1q3 动物 昆明种小白鼠 !• ¬¶·¤µ大鼠均由沈阳市
东陵区龙元经济动物养殖场提供 ∀许可证号 ≥≤÷
k辽 lussv2sstv∀
1q4 仪器 ∞pyvt{型全自动血液分析仪 k日
本光电 lo
pusss型医学图象分析系统 k成都泰盟
科技有限公司 lo≥ysss型自动血流变测试仪 k北
京赛科希德有限公司 loƒ p uss{型全自动 Χ放射
免疫计数器 k西安检测仪器厂 lo ⁄ƒ p v{u∞型超低
温冰箱 k日本 ≥≠lo⁄≠{| p 型电动玻璃匀浆机
k宁波新芝科器研究所 lo≠|u p µ型超声波细胞粉
碎机 k宁波新芝科器研究所 lo
ƒ∞u{ ≥型低
温高速离心机 k德国 ∞ ∞≥l~zuu≥型分光光度
计 k上海凌光仪器厂 lo ¬¯¯¬p ±型超纯水机 k美国
° ∞lo1• ut1≤ yss型恒温水浴箱 k河北
黄骅航天仪器厂 l∀
2 方法
2q1 劳损康复片对大鼠肠系膜微循环的影响 ≈t 选
择无异常行为体征 o外观活泼健康 o体重 t{s ∗ uus ª
• ¬¶·¤µ大鼠 xs只 o雌雄各半 o按体重 o性别随机分成生
理盐水组 o劳损康复片 k生药 lu1uoz1xouu1s ª# ®ªpt剂
量组 o红药胶囊 s1v ª# ®ªpt阳性对照组 o每组 ts只大
鼠 ∀灌胃给药 ts °# ®ªpt o每天 t次 o连续 ts §o于末
次给药后 t «o将各组动物以 th的戊巴比妥钠腹腔注
射 kv °# ®ªpt体重 l麻醉 o仰位固定于手术台上 o沿下
腹正中切开腹壁约 t ∗ u ¦°牵出盲部附近的小肠平铺
于有机玻璃灌流小池中固定 ovz ε 生理盐水保持肠系
膜湿润 o平衡 ts °¬±后 o于肠系膜表面滴加 s1ssth肾
上腺素 s1u °r只 ov °¬±后在
pusss型医学图象分
析系统 ts倍物镜的显微镜下测各组动物肠系膜微动
脉和微静脉的直径 o取 v次平均值作为微血管的直径 ∀
同时在固定视野内观察大鼠肠系膜微循环流速 !毛细
血管网交叉点数 ∀
2q2 劳损康复片对急性血瘀模型大鼠血液流变学
的影响 ≈u 选择无异常行为体征 o外观活泼健康 o
体重 t{s ∗ uus ª• ¬¶·¤µ大鼠 ys只 o雌雄各半 o分组
及给药除正常组外 o其他同 2q1 ∀于末次给药后 t
«o除空白组外 o其余各组皮下注射 s1ssth肾上腺
素 s1{ °# ®ªpt共 u次 ou次间隔 w «o在 u次注射
肾上腺素之间将大鼠浸入冰水内共 x °¬±o禁食不禁
水 tx «后 o经颈总动脉采血 o测定血液流变学指标
和全血血小板数 ∀
2q3 劳损康复片对自由落体损伤大鼠抗氧化能力的
影响试验 选择无异常行为体征 o外观活泼健康 o体重
t{s ∗ uus ª• ¬¶·¤µ大鼠 ys只 o雌雄各半 o分组及给药同
2q2 ∀于第 z次给药后 t «o乙醚轻度麻醉大鼠 o电动剃
须刀给大鼠将要损伤造模部位右大腿外侧去毛 o然后
将大鼠固定在鼠台 o将 uss ª打击锤从高度为 vs ¦°处
自然垂直下落打击大鼠右大腿外侧 o连续 v次造成大
鼠急性软组织损伤 o继续灌胃给药 o于第 {次给药后 u
«o大鼠颈动脉取血 w °ow ε ov xss µ# °¬±pt o离心 ts
°¬±o测血清总 ≥⁄的活力 o ⁄含量 ~同时取大鼠右
腿损伤部位肌肉组织 xs °ªo用生理盐水制备成 tsh的
组织匀浆 ov xss µ# °¬±pt o离心 ts °¬±o然后取肌肉组
织匀浆上清再用生理盐水按 tΒ|稀释成 th组织匀浆 o
测组织中总 ≥⁄的活力 o ⁄含量 ∀操作步骤按试剂
盒说明 ∀
2q4 劳损康复片对肾虚小鼠血清中皮质醇 !睾酮 !
雌二醇含量及脏器系数的影响试验 ≈v 选择无异
常行为体征 o外观活泼健康 o体重 t{ ∗ uu ª昆明种
小鼠 vss只雌雄各半 o按体重 !性别随机分成正常
组 o生理盐水组 o劳损康复片 k生药 lv1sots1sovs1s
ª# ®ªpt剂量组 o金匮肾气丸阳性药 v1x ª# ®ªpt剂
量组 o每组 xs只小鼠 o灌胃给药 ∀除正常组 o其他各
组小鼠同时给醋酸氢化可的松 s1zx °ªr只 o灌胃给
予 ∀连续 { §o每天观察各组小鼠活动生存状态 o计
算各组小鼠的存活率 ∀小鼠存活率进行 ≤«¬2¶´∏¤µ¨
× ¶¨·¶∀于末次给药 t «o各组随机取小鼠雌雄性各
ts只 o眼眶采血 ov sss µ# °¬±pt ox °¬±离心 o取血
清 o用试剂盒测量分别其血清中雌二醇 !睾酮的含
量 o然后处死小鼠 o取肾上腺 !睾丸 o卵巢连子宫并称
重计算脏器系数 o各组再随机取 ts只小鼠 o雌雄各
半 o眼眶采血 ov sss µ# °¬±pt ox °¬±离心 o取血清 o
用试剂盒测量小鼠血清中皮质醇的含量 ∀
2q5 数据处理 除特殊标明外 o文中数据均用 cξ ? σ
表示 o用 ≥°≥≥tt1s软件包行单因素方差分析 ∀
3 结果
#{xwt#
第 vu卷第 tw期
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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3q1 劳损康复片对大鼠肠系膜微循环的影响 与生
理盐水组相比 o劳损康复片高 !中剂量组具有显著对
抗滴加盐酸肾上腺素后 v °¬±时引起的大鼠肠系膜
微血管口径的变小 o同时显著的抑制滴加盐酸肾上腺
素后 voxots °¬±血流速度的下降 o作用呈量效关系 o
此外大剂量组具有明显抵抗滴加盐酸肾上腺素后 v
°¬±时引起的毛细血管网交点数的减少 o可以改善肾
上腺素所致的大鼠肠系膜微循环障碍 k表 toul∀
表 t 劳损康复片对滴加肾上腺素 v °¬±致大鼠微循环的影响 kcξ ? σ, ν tsl
组别
剂量
rª# ®ªpt
微血管口径 rΛ°
细动脉 细静脉
每视野
毛细血管网点数
生理盐水 p z1vz ? s1|x us1{t ? t1|{ u1ws ? s1xu
劳损康复片 u1u z1|{ ? t1vv ut1yx ? u1t{ u1xs ? s1xv
z1x {1xy ? t1sttl uv1{| ? u1|stl u1{s ? s1yv
uu1s |1{t ? t1sstoul uw1w| ? u1uttl v1us ? s1z|tl
红药 s1v {1yt ? t1sstl uv1tt ? t1{stl v1ts ? s1xztl
注 }与生理盐水组比较 tl Π s1sx~与红药组比较 ul Π s1sxk表 u ∗ {同 l
表 u 劳损康复片对肾上腺素所致大鼠肠系膜血流速度的影响 kcξ ? σ, ν tsl
组别
剂量
rª# ®ªpt
给肾上腺素后血流速度 rΛ°# ¶pt
v °¬± x °¬± ts °¬±
生理盐水 p uus1v ? {1t uvu1t ? {1v uwy1x ? |1y
劳损康复片 u1u uut1u ? {1t uvx1z ? {1v uw|1x ? ts1{
z1x uu{1| ? y1stl uwt1t ? z1ttl ux|1w ? y1wtl
uu1s uw{1{ ? x1{toul uyy1y ? ts1{toul u{z1z ? z1ytoul
红药 s1v uvu1z ? |1vtl uwx1v ? |1vtl uys1x ? {1ztl
3q2 劳损康复片对急性血瘀模型大鼠血液流变学
的影响 生理盐水组大鼠切变率 tox的全血黏度 o
全血低切还原黏度与空白对照组比较显著性增大 o
说明生理盐水组的造模方法使大鼠的血液黏度明显
增高 ∀劳损康复片大剂量组明显降低急性血瘀大鼠
切变率 toxovs的全血黏度 o全血低切还原黏度 o使
急性血瘀大鼠血液流变性得到改善 ∀其作用明显优
于红药 k表 vl∀
生理盐水组大鼠血小板数显著低于空白组 ∀劳
损康复片高剂量可明显提高急性血瘀大鼠血液血小
板数 ∀说明具有抗血小板的聚集作用 o降低血液黏
度 k表 wl∀
表 v 劳损康复片对急性血瘀大鼠血液黏度 !血浆黏度的影响 kcξ ? σ, ν tsl
组别
剂量
rª# ®ªpt
血浆黏度
r°³¤# ¶
全血黏度 r°³¤# ¶
t# ¶pt x# ¶pt vs# ¶pt
空白 p t1ts ? s1wy vw1w| ? ty1s| tv1ut ? x1zs y1xt ? v1sz
生理盐水 p t1uw ? s1ut yu1wx ? uy1wxvl t|1{z ? y1tvvl z1|z ? t1vt
劳损康复片 u1u t1tt ? s1tu yt1wx ? t{1xy t|1wx ? w1uv z1{t ? t1z{
z1x t1tt ? s1sw yt1t| ? vv1xz t|1uv ? {1sz z1ys ? t1{
uu1s t1ts ? s1s| u|1vs ? y1szuovl tt1wz ? t1|xuovl x1z| ? s1{vtl
红药 s1v t1tw ? s1vu yv1tz ? vy1tzvl us1sv ? {1ztvl {1sw ? u1tv
注 }与空白照组比较 vl Π s1sxk表 w ∗ {同 l
表 w 劳损康复片对急性血瘀大鼠血液血小板数的影响
kcξ ? σ, ν tsl
组别 剂量 rª# ®ªpt 血小板 r≅ ts|个 r
空白 p vus1xs ? {v1sy
生理盐水 p uss1xz ? |w1zvvl
劳损康复片 u1u uxs1wx ? zx1yt
z1x u|z1ss ? tuy1|s
uu1s u|{1zx ? y|1zztl
红药 s1v v|w1ss ? zy1svtl
3q3 劳损康复片对自由落体损伤大鼠抗氧化能力
的影响 生理盐水组 ≥⁄总活力明显低于正常组 o
同时生理盐水组 ⁄含量明显高于正常组 ∀劳损
康复片高 !中剂量组对损伤大鼠的血清 o损伤肌肉组
织中的 ≥⁄总活力 o有不同程度提高作用 o同时对
损伤大鼠的血清 o损伤肌肉组织中 ⁄含量有不
同程度降低作用 ∀作用显著优于红药 k表 xl∀
#|xwt#
第 vu卷第 tw期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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表 x 急性软组织损伤大鼠血清 ≥⁄o ⁄含量 kcξ ? σ, ν tsl
组别
剂量
rª# ®ªpt
血清 肌肉
≥⁄r# °pt ⁄ r±°²¯# °pt ≥⁄r# °ªpt ⁄ r±°²¯# °ªpt
正常 p usv1wx ? tv1yt ts1tx ? u1tz t|v1vt ? tu1uu x|1z{ ? z1t{
生理盐水 p tu{1ts ? tv1zxvl uw1uz ? u1uuv ttz1ty ? tv1uxvl {y1su ? w1|wvl
劳损康复片 u1u tvw1wt ? ts1yz uu1{w ? u1x| tuv1{v ? tt1vx {w1|v ? w1w|
z1x twx1wz ? tt1tytl ut1vw ? u1w{tl tu{1|y ? ts1zytl zz1vs ? z1tstl
uu1x txs1{{ ? tv1{|toul t|1s{ ? u1z|toul tvw1{x ? tt1|utl zu1sz ? z1s|toul
红药 s1v tvx1zz ? |1ty uu1sv ? u1xt tux1tv ? tt1uv {u1{s ? y1xv
3q4 劳损康复片对肾虚小鼠血清中皮质醇 !睾酮 !
雌二醇含量及脏器系数的影响 各组小鼠给予氢化
可的松后 o均出现体重减轻 !活动减少 !反应迟钝 !卷
曲拱背 !毛松 !甚至部分动物死亡等阳虚症状 o以生
理盐水组上述表现显著 ∀
生理盐水组肾上腺 !睾丸 !子宫 !卵巢的脏器系
数低于正常组 ∀劳损康复片高剂量组能明显提高肾
虚雄性小鼠肾上腺脏器系数 k表 yl∀
劳损康复片对雌性肾虚小鼠的血清雌二醇 !雄
性肾虚小鼠的血清睾酮的含量无显著提高作用 o但
有提高的倾向 ∀劳损康复片对肾虚小鼠血清中皮质
醇的含量有显著提高作用 k表 zl∀
劳损康复片高剂量组可明显提高肾虚小鼠的存
活率 k表 {l∀
表 y 劳损康复片对肾虚小鼠脏器系数的影响 kcξ ? σl
组别
剂量
rª# ®ªpt
脏器系数 rh
子宫加卵巢 kν tsl 肾上腺 kν usl 睾丸 kν tsl
正常 p s1u{t ? s1swy s1svw ? s1ssy s1xvu ? s1szx
生理盐水 p s1uu{ ? s1swuvl s1sux ? s1ssxvl s1wzt ? s1swsvl
劳损康复片 v1s s1uvs ? s1su| s1suy ? s1ssx s1w{t ? s1svy
ts1s s1uwu ? s1svu s1suz ? s1ss| s1xty ? s1szy
vs1s s1uxy ? s1sv| s1svt ? s1ssxtl s1xuw ? s1swt
金匮肾气丸 v1x s1uzv ? s1swytl s1svu ? s1ssytl s1xvs ? s1syztl
表 z 劳损康复片对肾虚小鼠血清中皮质醇 !睾酮 !雌二醇含量的影响 kcξ ? σl
组别
剂量
rª# ®ªpt
皮质醇 r±ª# °pt
kν usl
睾酮 r±ª# §pt
kν tsl
雌二醇 r³ª# °pt
kν tsl
空白 p tzt1su ? vs1w| uu{1xs ? yw1tu t|v1u| ? x{1y|
生理盐水 p tsu1w| ? u{1|{vl tst1|v ? ux1wzvl tsu1vv ? uy1x|vl
劳损康复片 v1s tsw1xy ? us1zz tsx1wx ? uz1|{ tst1xy ? vu1xy
ts1s tuy1{| ? ut1|v tts1uv ? vs1wx tsv1|t ? ux1zw
vs1s twv1vs ? v{1yttl tuz1wv ? vu1xv tvs1yy ? yu1yu
金匮肾气丸 v1x txs1ws ? u|1z|tl txw1sx ? w|1wvtl tyt1zz ? x|1sxtl
表 { 劳损康复片对肾虚小鼠存活率的影响 kν xsl
组别 剂量 rª# ®ªpt 存活率 rh
空白 p |{1ss
生理盐水 p ys1ssvl
劳损康复片 v1s zw1ss
ts1s {u1ss
vs1s {y1sstl
金匮肾气丸 v1x |u1sstl
4 讨论
劳损康复片具有显著对抗滴加盐酸肾上腺素后
引起的大鼠肠系膜微血管口径的变小 !毛细血管网
交点数减少 !血流速度下降的作用 ∀说明劳损康复
片可显著改善大鼠肠系膜微循环 ∀全血表观黏度反
映血液流变性的总体变化 o包括血液中有形及可溶
性成分的变化 ∀全血低切黏度主要反映红细胞聚集
程度 ∀劳损康复片可使低切全血黏度减低 o说明其
可能通过减低红细胞聚集程度而改善血液流变性 o
降低血液黏度 ∀全血还原黏度为红细胞比积为 th
时的全血黏度 ∀由于红细胞比积不同 o相同切变率
下的表观黏度不同 o为了方便比较 o通常用全血还原
黏度表示全血黏度 ∀劳损康复片可以减低全血低切
还原黏度 o说明其可以降低在排除红细胞压积的影
响下的血液黏度 ∀劳损康复片可提高急性血瘀模型
大鼠血液的血小板数 o有抗血小板凝聚 o减低血液黏
#sywt#
第 vu卷第 tw期
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∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ tw
∏¯¼o ussz
度的作用 o具有良好的活血功效 ∀
自由落体造成大鼠软组织急性损伤时 o会导致
大鼠血清 !损伤肌肉组织内 ≥⁄总活力的明显下
降 o伴随脂质过氧化的主要代谢物 ⁄体内含量
增高 ∀劳损康复片可提高损伤模型大鼠 ≥⁄活性 !
减低 ⁄含量 o说明其具有抗氧化作用 o可使自由
基引发的损伤降低 ≈w ∀
近年来对肾实质的研究进展表明 ≈x o中医的肾
是对下丘脑 2垂体 2靶腺 k肾上腺 !甲状腺 !性腺 l等内
分泌生理功能 !病理变化全部或部分的概括 o肾虚者
内分泌功能低下 ∀肾虚模型小鼠下丘脑 2垂体 2肾上
腺轴 !性腺轴和甲状腺轴功能低下 o可观察到造模肾
虚小鼠出现日益消瘦 o体重减轻 o活动减少 o反应迟
钝 o肢尾冷 o卷曲拱背 o毛松等形寒肢冷的等现象 o随
着造型天数增加 o日益严重 o甚至部分动物死亡 ∀血
中睾酮 o雌二醇 o×v o×w o皮质醇含量降低 o肾组织中
与糖 !脂肪 !蛋白质代谢有关酶活性减弱 o垂体 o肾上
腺 o生殖腺组织发生退行性变化 o细胞免疫 !体液免
疫功能低下 ∀金匮肾气丸具有补肾功能可抵抗上述
变化 ≈y ∀劳损康复片对肾虚小鼠子宫 !卵巢 o睾丸
脏器系数没有显著影响 o对雌性肾虚小鼠的血清雌
二醇 o雄性肾虚小鼠的血清睾酮的含量也无显著提
高作用 o表明劳损康复片对肾虚模型小鼠性腺功能
没有显著影响 ∀皮质醇是由肾上腺分泌产生的 o肾
虚模型小鼠下丘脑 2垂体 2肾上腺轴功能低下 o劳损
康复片可以提高肾虚小鼠的血清皮质醇含量 o说明
劳损康复片具有改善氢化可的松引起的下丘脑 2垂
体 2肾上腺轴功能低下状态 ∀同时劳损康复片明显
提高肾虚小鼠的存活率 o也对劳损康复片补肾作用
提供了佐证 ∀
综上所述 o劳损康复片活血消肿 !行气止痛功效
基于其改善微循环 !抗氧化及调节内分泌的作用 ∀
≈参考文献
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≈责任编辑 刘
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第 vu卷第 tw期
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中 国 中 药 杂 志
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