全 文 ：ｍｉｎ，纤维素酶用量为１７５％，酶解温度为６５℃。
２．５．３ 水提法与酶解法的比较 对比表３中２种
不同提取方法的结果可知，酶解法对红景天苷的提
取优于水提法。影响酶解法提取红景天苷的主要因
素为酶的用量和酶解温度。为了进一步考查工艺的
可行性和实用性，分别按上述酶解法和水提法筛选
出的最佳提取工艺条件提取红景天苷，重复进行３
次平行试验。结果表明，酶解法红景天苷提取量为
（２５５８±００１７）ｍｇ，与正交试验最大值２５３５ｍｇ
接近，证明酶解工艺稳定、可行；水提法红景天苷提
取量为（１５３６±００１３）ｍｇ，与正交试验最大值
１４６２ｍｇ接近，证明工艺优化成功；酶解法较水提
法对红景天苷的提取量提高了１６６５４％。
３ 讨论
酶解法提取红景天苷的最佳工艺条件为，酶解
时间４５ｍｉｎ，酶用量１７５％，酶解温度６５℃，酶解
后用水回流提取２次。优化后的提取工艺稳定、可
行，与水提法相比提取量提高了１６６５４％。
目前提取红景天苷多采用７０％乙醇回流，转移
率一般为８０％左右，按本研究优化工艺提取转移率
为７９７％，与醇提法接近。
［参考文献］
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３７．
［２］ ＤｉｎｇＳＬ，ＺｈｕＺＹ．ＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆＲｈｏｄｉｏ
ｌａｒｏｓｅｕＬ［Ｊ］．ＷｏｒｌｄＰｈｙｔｏｍｅｄ，１９９２，７（５）：１９８．
［３］ 曹 ．保健食品原料红景天的开发利用研究［Ｊ］．食品开发，
２００６，９（１）：８．
［４］ 傅博强，谢明勇，周 鹏，等．纤维素酶法提取茶多糖［Ｊ］．无锡
轻工大学学报，２００２，７（２１）：４．
［５］ 宋 波，邓晓皋，施雷霆．纤维素酶的研究进展［Ｊ］．上海环境
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［６］ 中国药典［Ｓ］．一部．２００５：１０６．
［７］ 张早华，林文翰，王小逸．高效液相色谱法测定红景天注射液
中红景天苷的含量［Ｊ］．中国中医药信息杂志，２００５，１２（１１）：
３４．
［８］ 卢永昌，林鹏程，鲍寿海．大花红景天中红景天苷的提取及含
量测定［Ｊ］．青海师范大学学报，２００５，１５（１）：３４．
［责任编辑 鲍 雷］
［收稿日期］ ２００７０５１３
［通讯作者］ 马红，Ｔｅｌ：（０１０）６６１８４２６１２１７０，Ｅｍａｉｌ：ｍａ
ｈｏｎｇ５３５＠ｓｉｎａｃｏｍ
扶正益肺巴布膏中延胡索乙素的含量测定
马 红
（北京中医药大学 附属护国寺中医医院，北京 １０００３５）
扶正益肺膏（三伏贴膏）系北京中医药大学附
属护国寺中医医院根据冬病夏治理论，经过２０多年
的临床研究而成的院内制剂，由延胡索，细辛，穿山
龙，地龙，白芥子，干姜等６味中药组成，功能化痰、
理气、祛风、活血，主治哮喘，在减少病人发病次数，
减轻发病症状，提高患者生存质量方面有显著疗效。
但原始剂型使用不便，剂量不易控制，易污染衣物，
易过敏，不利于药效发挥，因此决定将其进一步开
发，研制成用药更安全，使用更方便的经皮给药新剂
型———巴布贴膏。本实验用高效液相色谱法测定制
剂中延胡索乙素的含量［１４］，为该药的质量提供了保
证。
１ 仪器与试药
ＡｇｉｌｅｎｔＨＰ１１００高效液相色谱仪；瑞士 ＭＥＴ
ＴＬＥＲＡＥ－２４０电子天平；延胡索乙素对照品（批号
１１０８３１２００３０２）购于中国药品生物制品检定所。样
品自制（批号０３１００７，０３１０１２，０３１０１５）；甲醇为色谱
纯；水为超纯水；其他试剂均为分析纯。
２ 方法与结果
２．１ 供试品溶液制备 取本品适量，剪碎（０５
ｃｍ×０５ｃｍ），混匀，精密称取４ｇ，置圆底烧瓶中，
精密加入００５ｍｏｌ·Ｌ－１硫酸溶液 ５０ｍＬ，浸泡 ３０
ｍｉｎ，加热回流提取２ｈ，放冷，滤过，精密量取续滤液
２５ｍＬ，加入氨试液２ｍＬ，加氯仿振摇提取４次，每
次３０ｍＬ，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶
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第３２卷第１７期
２００７年９月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ １７
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００７
解并转移至５ｍＬ量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，
经０４５μｍ微孔滤膜滤过，即得。
２．２ 色谱条件 流动相甲醇水１０％ ＨＡＣ（６４∶３６∶
２），用１５％ ＮＨ３·Ｈ２Ｏ调ｐＨ至４８。ＺｏｒｂａｘＳＢＣ１８
色谱柱（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μＬ），流速 ０８ｍＬ·
ｍｉｎ－１，检测波长２８２ｎｍ，色谱柱的理论板数按延胡
索乙素峰计算，应不低于４０００，色谱图见图１。
图１ 空白溶液（Ａ）、延胡索乙素对照品溶液（Ｂ）、
样品溶液（Ｃ）中延胡索乙素ＨＰＬＣ图
２．３ 空白试验 空白溶液的制备是取除延胡索外
其余诸药按制备工艺加工，然后按供试品溶液制备
方法制备并测定，结果空白溶液在与延胡索乙素对
照品相同保留时间处未显色谱峰，故认为无干扰。
２．４ 线性关系考察 精密量取延胡索乙素对照品
甲醇溶液（００８２４ｍｇ·ｍＬ－１）２，４，６，８，１０ｍＬ，分
别置于１０ｍＬ量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，分
别精密吸取１０μＬ，注入高效液相色谱仪，记录峰面
积，以延胡索乙素对照品进样量为横坐标，峰面积为
纵坐标，绘制标准曲线，回归方程：Ｙ＝４３×１０３Ｘ－
２９５，ｒ＝０９９９９，说明延胡索乙素对照品在０１６～
０８２μｇ线性关系良好。
２．５ 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液（批
号０４０４１８）１０μＬ，分别于配制后０，２，４，６，８，１２，２４
ｈ进样测定，ＲＳＤ０３４％，证明供试品溶液在 ２４ｈ
内基本稳定。
２．６ 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液（批
号 ０４０４１８），进样 １０μＬ，连续进样 ６次，ＲＳＤ
０１４％，表明精密度良好。
２．７ 重复性试验 按供试品溶液制备方法，对同一
批样品（批号０４０４１８）６份进行测定，ＲＳＤ１１％，表
明重复性良好。
２．８ 加样回收率试验 精密称取已知含量（０１２０
８ｍｇ·ｇ－１）的同一批号的样品（批号０４０４１８）２ｇ，分
别精密加入延胡索乙素（００２０８ｍｇ·ｍＬ－１）１０
ｍＬ，００５ｍｏｌ·Ｌ－１硫酸溶液４０ｍＬ，按供试品溶液
的制备方法制备，并照上述色谱条件测定，计算回收
率，结果见表１。结果表明本方法的回收率良好。
表１ 扶正益肺贴中延胡索乙素回收率
取样量
／ｇ
样品中含量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
２０１２５ ０２４３１ ０４４３５ ９６３
２００４３ ０２４２１ ０４４０７ ９５５
２０４２１ ０２４６７ ０４５０５ ９８０ ９６４ １１
２０５７６ ０２４８６ ０４４９９ ９６８
２０６８７ ０２４９９ ０４４７７ ９５１
２０３５４ ０２４５９ ０４４７６ ９７０
注：加入量均为０２０８０ｍｇ
２．９ 样品测定 测定３批扶正益肺贴中试样品，结
果每贴扶正益肺贴中延胡索乙素含量分别为
０４８６，０４９５，０４９７ｍｇ。
３ 讨论
延胡索乙素在氯仿中易溶，在乙醇或乙醚中微
溶，在水中几乎不溶，利用其生物碱的特性，进行提
取和净化。根据文献报道，采用００５ｍｏｌ·Ｌ－１硫酸
溶液做溶剂，对其提取时间进行了比较，２ｈ和３ｈ
的峰面积／取样量分别为５２９１，５２９１，可见，提取２
ｈ即可提取完全。此外，试验中，还对氯仿萃取次数
进行了考察，将氯仿第５次萃取液单独蒸干后，定容
至５ｍＬ，进样观察，延胡索乙素色谱峰不显著，故只
需提取４次即可。
［参考文献］
［１］ 中国药典［Ｓ］．一部．２００５：９４．
［２］ 陈 旭，陆兔林，张先洪，等．ＨＰＬＣ测定延胡索不同炮制品中
延胡索乙素含量［Ｊ］．中成药，２００３，２５（９）：７２６．
［３］ 杨天晨．高效液相色谱法测定胃得康散中延胡索乙素含量
［Ｊ］．时珍国医国药，２０００，１１（１）：３１．
［４］ 龚 青，周 蒂，王碧娟，等．ＨＰＬＣ法测定延胡索中延胡索乙
素的含量［Ｊ］．中国现代应用药学杂志，２０００，１７（４）：３１５．
［责任编辑 李 禾］
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