全 文 ：荆芥挥发油对大鼠胸腔白细胞５脂氧酶活性的影响
赵 璐，曾 南，唐永鑫，刘晓帅，杨 旋，瞿礼萍
（成都中医药大学 药理教研室，四川 成都 ６１１１３７）
［摘要］ 目的：探讨荆芥挥发油对５脂氧酶（５ＬＯ）活性的影响，以期进一步阐明其干预花生四烯酸代谢的抗
炎机制。方法：以角叉菜胶急性胸膜炎模型大鼠的胸腔白细胞为基本反应体系，分别加入外源性花生四烯酸（ＡＡ）
与不同质量浓度的荆芥挥发油（００１１，００２２，００４３，００８７，０１７９，０２５５，０３６４ｇ·Ｌ－１）、齐留通（０６２５×１０－３ｇ·
Ｌ－１），在钙离子载体Ａ２３１８７诱导下，提取完整白细胞的５ＬＯ代谢产物白三烯 Ｂ４（ＬＴＢ４）和５羟基二十碳四烯酸（５
ＨＥＴＥ），运用反相高效液相色谱（ＲＰＨＰＬＣ）紫外检测分离测定ＬＴＢ４和５ＨＥＴＥ水平。结果：荆芥挥发油在００２２～
０３６４ｇ·Ｌ－１内，对大鼠胸腔白细胞 ＬＴＢ４与 ５ＨＥＴＥ的生物合成均呈现显著性的抑制作用（Ｐ＜００５或 Ｐ＜
０００１），并表现出剂量依赖性，其对ＬＴＢ４与５ＨＥＴＥ生成的ＩＣ５０分别为０１２４ｇ·Ｌ
－１和０１４２ｇ·Ｌ－１。结论：荆芥
挥发油体外可剂量依赖性地抑制大鼠胸腔白细胞花生四烯酸代谢酶５ＬＯ的活性，表明其良好的抗炎作用与抑制
５ＬＯ活性，减少致炎物质ＬＴＢ４的生成有关。
［关键词］ 荆芥挥发油；５脂氧酶；白三烯Ｂ４；５羟基二十碳四烯酸；反相高效液相色谱
［中图分类号］Ｒ２８５５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）１７２１５４０４
［收稿日期］ ２００７１０２５
［基金项目］ 四川省２００４年度杰出青年基金（２００４ＱＮ１３）；
２００５年度人事部留学归国人员课题
［通讯作者］ 曾南，Ｆａｘ：（０２８）６１８００２３１，Ｅｍａｉｌ：ｚｅｎｇｎａｎ９６６
＠１２６ｃｏｍ
荆芥来源于唇形科植物裂叶荆芥 Ｓｃｈｉｚｏｎｅｐｅｔａ
ｔｅｎｕｉｆｏｌｉａＢｒｉｑ的干燥地上部分，其味辛、微苦，性微
温，归肺、肝经，在功效上既能散风寒，又能疏风热，
广泛用于解表药的复方配伍，为临床常用辛温解表
药。荆芥挥发油含量丰富，是其主要有效成分之一。
本室前期研究结果表明［１３］，荆芥挥发油具有明显的
抗炎作用，作用机制与影响花生四烯酸代谢有关，因
此，本研究基于荆芥挥发油可抑制炎症模型动物白
三烯生成的前期研究基础，观察其体外对５脂氧酶
（５ＬＯ）活性的影响，以进一步阐明其抗炎机制。
１ 材料
１１ 动物 Ｗｉｓｔａｒ大鼠，雄性，体重 ２５０～３００ｇ，
ＳＰＦ级，四川省医学科学院动物研究所提供，合格证
号ｓｃｘｋ（川）２００４１６。
１２ 药物 荆芥购自成都市五块石中药材市场，由
本校中药鉴定教研室严铸云教授鉴定符合药用，按
《中国药典》２００５年版一部附录挥发油提取中甲法
提取荆芥挥发油，提取时间５ｈ，得淡黄色、透明油状
液体，脱水后避光、密闭贮存于棕色瓶中，４℃保存
备用。药材挥发油含量０８０％，气质联用（ＧＣＭＳ）
测得挥发油中主要含薄荷酮 ４７３６％，胡薄荷酮
２７１２％，柠檬烯４８３％。实验时，荆芥挥发油（ｈｅｒ
ｂａｓｃｈｉｚｏｎｅｐｅｔａｅｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌ，ＳＴＯ）用二甲基亚砜
（ＤＭＳＯ）配制，终质量浓度分别为 ００１１，００２２，
００４３，００８７，０１７９，０２５５，０３６４ｇ·Ｌ－１。
齐留通（ｚｉｌｅｕｔｏｎ），ＣａｙｍａｎＣｈｅｍｉｃａｌ产品，产品
号１０００６９６７。ＤＭＳＯ溶解，配制成 １３０ｍｇ·Ｌ－１的
溶液，分装后于－２０℃保存，实验时终浓度为０６２５
ｍｇ·Ｌ－１。
１３ 试剂 角叉菜胶，批号１７Ｈ１１４８；花生四烯酸
（ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃａｃｉｄ，ＡＡ），批号 １３０２９８３；钙离子载体
Ａ２３１８７，批号 １０５Ｋ４０８２，均为 ＳｉｇｍａＣｏｍｐａｎｙ产品。
白三烯 Ｂ４（ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅｓＢ４，ＬＴＢ４），批号 １５８４１６
１５８６６１；５羟基二十碳四烯酸（５ｈｙｄｒｏｘｙ６，８，１１，１４
ｅｉｃｏｓａｔｅｔｒａｅｎｏｉｃａｃｉｄ，５ＨＥＴＥ），批号１５９９３０１６２４１３，
均为ＣａｙｍａｎＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｍｐａｎｙ产品。
１４ 仪器 ＬＣ－１０Ａｖｐ高效液相色谱仪，ＳＰＤ－
１０Ａｖ紫外检测器（日本岛津公司）；分析柱为 Ｄｉａ
ｍｏｎｉｌＴＭＣ８，４６ｍｍ×１５０ｍｍ，５μｍ（迪马公司）；Ｃ８
保护柱，柱号６１０２（迪马公司）；Ｎ－２０１０色谱数据
工作站（浙江大学智达信息有限公司）。ＴＧＬ－１６Ｇ
－Ａ型高速低温离心机（上海安亭科学仪器厂）。
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德国Ｌｅｉｃａ倒置相差显微镜。ＸＷ－８０型涡旋混合
器（上海医科大学仪器厂）。
２ 方法
２１ 大鼠胸腔白细胞悬液的制备 乙醚浅麻醉大
鼠，于右胸腔注射１％角叉菜胶０２ｍＬ致炎，５ｈ后
股动脉放血处死，剪开右侧胸腔，吸出胸腔渗出液，
加入２ｍＬＰＢＳ溶液（含肝素１２５Ｕ·ｍＬ－１），冰浴
保存，再吸取含肝素的ＰＢＳ溶液２ｍＬ冲洗胸腔，合
并冲洗液，２０００ｒ·ｍｉｎ－１离心１０ｍｉｎ，沉淀细胞加
入２ｍＬ冷冻蒸馏水溶解红细胞，１ｍｉｎ后立即加入
１８％ ＮａＣｌ（含肝素 １２５Ｕ·ｍＬ－１）溶液 ２ｍＬ，
２０００ｒ·ｍｉｎ－１离心５ｍｉｎ，白细胞沉淀液用 ＰＢＳ溶
液洗涤并配制成悬浮液，台盼蓝染色，白细胞计数。
２２ 完整白细胞中５ＬＯ产物（ＬＴＢ４和５ＨＥＴＥ）提
取与纯化 参照文献［４，５］方法，作适当修改。白
细胞用 ＰＢＳ溶液配成细胞悬液，调整密度 ２×１０７
个／ｍＬ。取细胞悬液 ０４ｍＬ，加入正常大鼠血清
１００μＬ，然后分别加入不同浓度的ＳＴＯ、齐留通或空
白溶剂ＤＭＳＯ，每个药物浓度设６个复管。３７℃水
浴温孵 ２０ｍｉｎ，依次加入 ＣａＣｌ２（终浓度 ２ｍｍｏｌ·
Ｌ－１），ＭｇＣｌ２（终浓度０５ｍｍｏｌ·Ｌ
－１），ＡＡ（终浓度
２００μｍｏｌ·Ｌ－１），Ａ２３１８７（５μｍｏｌ·Ｌ
－１），混匀。置于
３７℃水浴温孵３０ｍｉｎ，加入０７ｍＬ甲醇（含醋酸，
ｐＨ４～４５）终止反应，９０００ｒ·ｍｉｎ－１离心１０ｍｉｎ（４
℃），取上清液，氮气吹干，用１００μＬ甲醇溶解残渣，
冰浴中超声２ｍｉｎ，旋涡振荡，９０００ｒ·ｍｉｎ－１离心１０
ｍｉｎ（４℃），取上清液过微孔滤器，－２０℃保存，供
ＲＰＨＰＬＣ紫外检测。
２３ 反相高效液相色谱（ＲＰＨＰＬＣ）紫外检测 ＬＴＢ４
和５ＨＥＴＥ 流动相为乙腈甲醇水３６％醋酸（３３∶
３５∶３２∶０１），流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１，柱温３０℃，进样量
２０μＬ，分析过程３０ｍｉｎ，不同时段用不同波长进行检
测，１～１３ｍｉｎ时２７０ｎｍ；１３～３０ｍｉｎ时２３６ｎｍ。外
标两点法计算ＬＴＢ４和５ＨＥＴＥ的生物合成量。
２４ 数据处理 各组数据以 珋ｘ±ｓ表示。计量资料
符合正态分布，采用 ＳＰＳＳ１１５单因素方差分析
（ＯｎｅＷａｙＡＮＯＶＡ），不符合者采用ＤＰＳ３１非参数
检验 ＫｒｕｓｋａｌＷａｌｉｓ法分析。
３ 结果
本实验条件下，荆芥挥发油在００１１ｇ·Ｌ－１时，
对大鼠胸腔渗出液中白细胞的５ＬＯ产物ＬＴＢ４和５
ＨＥＴＥ的生物合成无明显抑制作用，而在 ００２２～
０２５５ｇ·Ｌ－１可明显抑制大鼠胸腔渗出液中的白细
胞５ＬＯ产物ＬＴＢ４和５ＨＥＴＥ的生物合成（Ｐ＜００５
或Ｐ＜０００１），各剂量组两两比较，亦有统计学差
异，但当荆芥挥发油浓度提高到０３６４ｇ·Ｌ－１时，
ＬＴＢ４与５ＨＥＴＥ的含量则低于检测限，提示荆芥挥
发油可剂量依赖性地抑制５ＬＯ活性，对 ＬＴＢ４和５
ＨＥＴＥ生物合成的 ＩＣ５０分别为 ０１２４ｇ·Ｌ
－１和
０１４２ｇ·Ｌ－１。见表１。
表１ 荆芥挥发油对大鼠胸腔白细胞ＬＴＢ４和５ＨＥＴＥ生物合成的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
药物
剂量
／ｇ·Ｌ－１
ＬＴＢ４
相对合成量／ｎｇ·（２０μＬ）－１ 抑制率／％
５ＨＥＴＥ
相对合成量／ｎｇ·（２０μＬ）－１ 抑制率／％
对照 － ３７７０±１６４ － １９２９３±１４４９ －
ＳＴＯ ００１１ ３７７５±１０４ －０１３ １８１７０±７２６ ６０７
００２２ ３３０１±１０７１） １２４５ １５９７０±３６０ １７２３
００４３ ２５７８±１９４３） ３１６２ １２６５０±１１７７３） ３４４３
００８７ ２１０８±０７１３） ４４０９ １０４７３±６９１３） ４５７２
０１７９ １７２６±１２７３） ５４２２ ９２２２±８３３３） ５２２０
０２５５ １２３６±０８２３） ６７２３ ８４７９±４１４３） ５６０５
齐留通 ０６２５×１０－３ ２１７７±５７２３） ４２２６ １０８９７±３６３２） ４３５２
注：与对照组比较１）Ｐ＜００５，２）Ｐ＜００１，３）Ｐ＜０００１
４ 讨论
炎症的病理过程比较复杂，其中花生四烯酸
（ＡＡ）代谢产物的作用不容忽视。正常生理情况下，
细胞内无游离ＡＡ存在，但当细胞受到化学或物理等
因素刺激时，细胞磷脂酶Ａ２被激活，在Ｃａ
２＋参与下水
解细胞膜磷脂，释放ＡＡ。释放出来的ＡＡ主要有两
条代谢通路：经环氧酶（ＣＯＸ）途径生成前列腺素（
ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｓ，ＰＧｓ）和血栓素（ｔｈｒｏｍｂｏｘａｎｅ，ＴＸ）；经
脂氧酶（ＬＯ）途径生成白三烯（ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅ，ＬＴｓ）等产
物。其中脂氧酶途径中的白三烯产物是一类重要炎
症介质，在炎症反应中发挥促进炎症细胞渗出与趋
化、收缩支气管平滑肌等作用，参与多种炎症性疾病
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的病理过程。由于５ＬＯ是白三烯类化合物生成的关
键酶，因此目前在抗炎、抗过敏药物机制的研究中，不
单纯局限于减少致炎物质前列腺素类、白三烯类的生
成，研究影响白三烯生成的关键酶５ＬＯ亦受到重视。
正常情况下，５ＬＯ存在于细胞浆中，当细胞受到刺激
活化后，５ＬＯ借助Ｃａ２＋转移至细胞核膜上，氧化与５
ＬＯ启动蛋白（ＦＬＡＰ）结合的 ＡＡ，生成５氢过氧化二
十碳四烯酸（５ＨＰＥＴＥ），５ＨＰＥＴＥ进一步被转化成５
羟基二十碳四烯酸（５ＨＥＴＥ），或在同一酶作用下进
一步氧化成ＬＴＡ４，ＬＴＡ４不稳定，很快被 ＬＴＡ４水解酶
（ＬＴＡ４Ｈ）水解成ＬＴＢ４，或在谷胱甘肽ｓ转移酶作用
下与谷胱甘肽结合生成ＬＴＣ４等白三烯产物
［６７］，其中
ＬＴＢ４和５ＨＥＴＥ是白细胞的强趋化剂和启动剂。因
此，在观察药物干预花生四烯酸５ＬＯ代谢途径作用
的研究中，不仅可以利用炎症模型动物，直接观察药
物对炎症区域白三烯生成的影响，同时还可以在体外
加入过量外源性花生四烯酸，观察药物影响 ＬＴＢ４和
５ＨＥＴＥ的生物合成来反映药物影响５ＬＯ活性的作
用。体内与体外实验的结合才能较全面反映药物干
预５ＬＯ活性的作用。
本研究结果提示，荆芥挥发油体外能剂量依赖
性地抑制急性炎症模型大鼠胸腔白细胞５ＬＯ的活
性，减少其主要代谢产物 ＬＴＢ４和 ５ＨＥＴＥ的生成，
表明其良好的抗炎作用与抑制５ＬＯ活性有关，该结
果与前期动物整体试验结果相吻合［２３］。为进一步
阐述荆芥挥发油在体内的作用，利用该方法进行荆
芥挥发油含药血清的研究有待进一步摸索、开展。
［参考文献］
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ｗｉｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ［Ｊ］ＮｅｗＥｎｇｌＪＭｅｄ，２０００，３４３：１５２０
Ｅｆｅｃｔｏｆｈｅｒｂａｓｃｈｉｚｏｎｅｐｅｔａｅｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌ（ＳＴＯ）ｏｎａｃｔｉｖｉｔｙｏｆ
５ｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｓｅｉｎｒａｔｔｈｏｒａｃｉｃｃａｖｉｔｙｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ
ＺＨＡＯＬｕ，ＺＥＮＧＮａｎ，ＴＡＮＧＹｏｎｇｘｉｎ，ＬＩＵＸｉａｏｓｈｕａｉ，ＹＡＮＧＸｕａｎ，ＱＵＬｉｐｉｎｇ
（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，ＣｈｅｎｇｄｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｃｈｅｎｇｄｕ６１１１３７，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｈｅｒｂａｓｃｈｉｚｏｎｅｐｅｔａｅｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌ（ＳＴＯ）ｏｎｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆ５ｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｓｅ（５
ＬＯ），ｓｏａｓｔｏｅｌｕｃｉｄａｔｅｉｔｓｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆａｎｔｉｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙａｃｔｉｏｎｗｈｉｃｈｉｓｒｅｌａｔｅｄｔｏｔｈｅａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃａｃｉｄ（ＡＡ）ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍＭｅｔｈｏｄ：
Ｔｈｏｒａｃｉｃｃａｖｉｔｙｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓｆｒｏｍｔｈｅｐｌｅｕｒｉｓｙｍｏｄｅｌｒａｔｉｎｄｕｃｅｄｂｙｉｎｊｅｃｔｉｎｇ１％ｃａｒａｇｅｅｎａｎｉｎｔｏｔｈｅｐｌｅｕｒａｌｃａｖｉｔｙｗｅｒｅｃｏｌｅｃｔｅｄＴｈｅｎ
０４ｍＬｃｅｌｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｉｎｃｌｕｄｉｎｇ２×１０７ｃｅｌｓｐｅｒｍｉｌｉｌｉｔｒｅｗｅｒｅｕｓｅｄａｓｔｈｅｒｅａｃｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｉｎｖｉｔｒｏＳＴＯｉｎｄｉｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ（ｆｉ
ｎａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ００１１，００２２，００４３，００８７，０１７９，０２５５，０３６４ｇ·Ｌ－１），ｚｉｌｅｕｔｏｎ（ｆｉｎａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ０６２５×１０－３ｇ·Ｌ－１），
ａｎｄＤＭＳＯｉｎｔｈｅｓａｍｅｖｏｌｕｍｅｗｅｒｅａｄｄｅｄｉｎｔｏｔｈｅｒｅａｃｔｉｏｎｔｕｂｅｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙＴｈｅｒｅａｃｔｉｏｎｔｕｂｅｓｗｅｒｅｉｎｃｕｂａｔｅｄａｔ３７℃ ｆｏｒ２０ｍｉｎａｎｄ
ＣａＣｌ２（ｆｉｎａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ２ｍｍｏｌ·Ｌ
－１），ＭｇＣｌ２（ｆｉｎａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ０５ｍｍｏｌ·Ｌ
－１），ｅｘｏｇｅｎｏｕｓＡＡ（ｆｉｎａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ２００μｍｏｌ·
Ｌ－１）ａｎｄＡ２３１８７（ｆｉｎａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ５μｍｏｌ·Ｌ
－１）ｗｅｒｅａｄｄｅｄｉｎｔｕｒｎｓｄｕｒｉｎｇｔｈｉｓｐｅｒｉｏｄＴｈｅｒｅａｃｔｉｏｎｔｕｂｅｓｗｅｒｅｍｉｘｅｄａｎｄｃｏｎｔｉｎｕ
ｏｕｓｌｙｉｎｃｕｂａｔｅｄａｔ３７℃ ｆｏｒ３０ｍｉｎＡｆｔｅｒｔｅｒｍｉｎａｔｉｎｇｒｅａｃｔｉｏｎｂｙａｄｄｉｎｇｍｅｔｈａｎｏｌ，ｔｈｅｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓｏｆ５ＬＯ，ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅＢ４（ＬＴＢ４）ａｎｄ
５ｈｙｄｒｏｘｙ６，８，１１，１４ｅｉｃｏｓａｔｅｔｒａｅｎｏｉｃａｃｉｄ（５ＨＥＴＥ），ｗｅｒｅｅｘｔｒａｃｔｅｄ，ｓｅｐａｒａｔｅｄａｎｄｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｍｅａｎｓｏｆＲＰＨＰＬＣＲｅｓｕｌｔ：Ｃｏｍ
ｐａｒｅｄｗｉｔｈｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ＳＴＯｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｈｉｂｉｔｅｄｔｈｅｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆＬＴＢ４ａｎｄ５ＨＥＴＥａｔｆｉｎａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎ００２２ｇ·Ｌ
－１
ａｎｄ０３６４ｇ·Ｌ－１（Ｐ＜００５ｏｒ０００１）ｉｎｄｏｓｅｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅｍａｎｎｅｒ，ａｎｄｉｔｓＩＣ５０ｖａｌｕｅｗａｓ０１２４ｇ·Ｌ
－１ａｎｄ０１４２ｇ·Ｌ－１ｆｏｒＬＴＢ４
ａｎｄ５ＨＥＴＥ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＳＴＯｃａｎｉｎｈｉｂｉｔｅｄｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆ５ＬＯ，ｗｈｉｃｈｉｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｅｎｚｙｍｅｏｆＡＡｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，ｉｎｒａｔ
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第３３卷第１７期
２００８年９月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １７
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００８
ｔｈｏｒａｃｉｃｃａｖｉｔｙｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓｉｎａｄｏｓｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔｍａｎｎｅｒｉｎｖｉｔｒｏＩｔｉｓｓｕｇｇｅｓｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆａｎｔｉｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙａｃｔｉｏｎｏｆＳＴＯｉｓ
ｒｅｌａｔｅｄｔｏｉｔｓｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆ５ＬＯａｎｄｄｅｃｒｅａｓｉｎｇｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆｍａｊｏｒｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｍｅｄｉａｔｏｒｓＬＴＢ４
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｈｅｒｂａｓｃｈｉｚｏｎｅｐｅｔａｅｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌ；５ｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｓｅ；ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅＢ４；５ｈｙｄｒｏｘｙ６，８，１１，１４ｅｉｃｏｓａｔｅｔｒａｅｎｏｉｃａｃｉｄ；
ＲＰＨＰＬＣ
［责任编辑 古云侠］
［收稿日期］ ２００８０２１５
［基金项目］ 北京市自然科学基金项目（７０５３０７５）
［通讯作者］ 梁日欣，Ｔｅｌ：（０１０）６４０１４４１１２９４８，Ｅｍａｉｌ：ＲＸ
Ｌｉａｎｇ＠ｙａｈｏｏｃｏｍ
升麻苷和５Ｏ甲基维斯阿米醇苷对 ＴＮＦα所致
大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响
王 岚，梁日欣，曹 莹，叶锦霞
（中国中医科学院 中药研究所，北京 １００７００）
［摘要］ 目的：观察升麻苷和５Ｏ甲基维斯阿米醇苷对血管平滑肌细胞增殖及细胞周期的影响。方法：建立
大鼠胸主动脉平滑肌细胞原代培养方法，将细胞分为空白组、模型组、升麻苷组、５Ｏ甲基维斯阿米醇苷组，并采用
细胞计数法和免疫化学方法分别对平滑肌细胞的生长特性和纯度进行测定。用ＭＴＴ法观察升麻苷与５Ｏ甲基维
斯阿米醇苷各剂量组拮抗肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）诱导平滑肌细胞增殖的作用，用流式细胞技术测定升麻苷与５Ｏ
甲基维斯阿米醇苷对平滑肌细胞周期的影响。结果：升麻苷（５０，１００，２００ｍｇ·Ｌ－１）和５Ｏ甲基维斯阿米醇苷（５０，
１００，２００ｍｇ·Ｌ－１）均能明显抑制ＴＮＦα引起的平滑肌细胞增殖，与ＴＮＦα组相比有极显著差异（Ｐ＜００１）。升麻
苷（５０，１００，２００ｍｇ·Ｌ－１）和５Ｏ甲基维斯阿米醇苷（５０，１００，２００ｍｇ·Ｌ－１）均使Ｇ１／Ｇ０期细胞比例增加，Ｓ期、Ｇ２／
Ｍ期细胞比例减少，与ＴＮＦα组相比差异极显著（Ｐ＜００１）。结论：升麻苷与５Ｏ甲基维斯阿米醇苷对 ＴＮＦα引
起的平滑肌细胞增殖有明显的抑制作用。
［关键词］ 升麻苷；５Ｏ甲基维斯阿米醇苷；动脉硬化；平滑肌细胞；炎性因子
［中图分类号］Ｒ２８５５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）１７２１５７０４
在动脉粥样硬化（ＡＳ）发生、发展过程中，血管
平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）的移行和过度增殖起着极其重
要的作用［１２］。血管内皮细胞受损时，释放大量的炎
性因子如肿瘤坏死因子（ＴＮＦα），白介素６（ＩＬ６）
等［３］，在这些炎性因子的刺激下，内皮细胞、巨噬细
胞及血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）可合成并分泌大量的
生长因子，如血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）、纤维母
细胞生长因子（ＦＧＦ）等，使内膜 ＳＭＣ增生，中膜
ＳＭＣ迁移至内皮下间隙，并通过其膜表面表达的脂
蛋白受体摄取脂质，形成肌源性泡沫细胞，产生胶
原、弹性纤维及蛋白多糖，致细胞外基质成分增多，
最终形成动脉粥样硬化［４］。
现代药理研究［５］表明，防风具有显著的抗炎活
性，进一步研究发现，升麻苷和 ５Ｏ甲基维斯阿米
醇苷是防风主要的抗炎成分。本项实验在以往工作
的基础上，观察升麻苷与５Ｏ甲基维斯阿米醇苷对
炎性因子刺激血管平滑肌细胞增殖及细胞周期的影
响，并探讨其对ＡＳ炎性反应的影响。
１ 材料
１１ 药物 升麻苷和５Ｏ甲基维斯阿米醇苷为防
风药材中提取分离得到，纯度＞９８％，由中国中医科
学院中药研究所化学室肖永庆研究员提供。
１２ 动物 健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠，雌雄不拘，体重１５０～
１８０ｇ。由维通利华实验动物技术有限公司提供，合
格证号ＳＣＸＫ（京）２００２０００３。
１３ 试剂 ＤＭＥＭ培养基干粉（Ｈｙｃｌｏｎｅ，批号
ＡＰＨ２１７２４ＦＣ），优级新生牛血清（中美合资兰州民
海生物工程有限公司，批号 ２００６０５１６），青链霉素
（Ｈｙｃｌｏｎｅ，批号ＪＲＨ２７１７２），谷氨酰胺（Ｓｉｇｍａ公司，
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第３３卷第１７期
２００８年９月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １７
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００８