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Studies on chemical constituents in fresh fleshy scaleleaf of Lilium lancifolium

卷丹化学成分研究



全 文 :卷丹化学成分研究
胡文彦1,3,段金廒2,钱大玮1,王大为1
(1.江苏省中医药研究院,江苏 南京 210028;
2.南京中医药大学,江苏 南京 210029;3.江苏大学药学院,江苏 镇江 212000)
[摘要] 目的:研究卷丹Liliumlancifolium鳞茎中的化学成分。方法:用色谱法分离卷丹的化学成分,用波谱
法鉴定其结构。结果:从卷丹中分离并鉴定了10个化合物,分别为王百合苷A(1),王百合苷C(2),甲基αD吡喃
甘露糖苷(3),甲基αD吡喃葡萄糖苷(4),(25R,26R)26甲氧基螺甾烷5烯3βOαL吡喃鼠李糖(1→2)[β
D吡喃葡萄糖(1→6)]βD吡喃葡萄糖苷(5),(25R)螺甾烷5烯3βOαL吡喃鼠李糖(1→2)[βD吡喃葡萄
糖(1→6)]βD吡喃葡萄糖苷(6),(25R,26R)17α羟基26甲氧基螺甾烷5烯3βOαL吡喃鼠李糖(1→2)
[βD吡喃葡萄糖(1→6)]βD吡喃葡萄糖苷(7),胡萝卜苷(8),腺嘌呤核苷(9),小檗碱(10)。结论:除化合物
1,3外均为首次从该植物中分离得到,其中10为首次从百合属植物中发现。
[关键词] 卷丹;化学成分
[中图分类号]R2841 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2007)16165604
[收稿日期] 20070111
[基金项目] 江苏省自然基金项目(BK2003112);江苏省公益
项目(BM2004525)
[通讯作者] 段金廒,Tel:(025)85811116
  卷丹 LiliumlancifoilumThunb.为百合科植物,
主产于江苏宜兴,素有“太湖人参”的美称。其性味
甘寒,具有养阴清肺、清心安神之功效,用于治疗阴
虚久咳、虚烦、失眠等症[1]。卷丹自古即为百合的
主要来源。明代农书《花蔬》中有“百合宜兴最多,
人取其根馈客”的记述。明《沈氏农书》中有吴兴栽
种卷丹的记载,说明明末在太湖流域已有大面积卷
丹栽培。国内外对百合有许多研究报道,其鳞茎含
有皂苷、生物碱、酚性甘油苷、多糖、氨基酸、磷脂以
及微量元素等成分[2]。本研究报道从卷丹的新鲜
鳞茎中分离到10个化合物,除化合物1,3外其余化
合物均为首次从该植物中分离得到,其中10为首次
从百合属植物中发现。
1 仪器与材料
XT-4型显微熔点测定仪;FTIR8900型红外光
谱仪;BruckACF500MHz型核磁共振测定仪;Quat
troMicroMass串联四级杆,离子源ESI源,正离子模
式。硅胶为青岛海洋化工厂生产;ODS填料为
YMCGELS-50μm;凝胶填料 PharmadexLH-
20;大孔树脂 D101,天津化学试剂二厂出品。所有
化学试剂均为分析纯。
药材于 2003年 10月采自江苏省宜兴市新庄
镇。经南京中医药大学段金廒教授鉴定为百合科植
物卷丹Llancifolium的新鲜肉质鳞叶。
2 提取分离
卷丹新鲜鳞茎30kg,70%乙醇加热回流提取2
次,每次3h,减压浓缩得浸膏约3kg。分别以石油
醚,氯仿,醋酸乙酯和正丁醇萃取,减压回收溶剂,得
到正丁醇部位102g。经 D101大孔树脂吸附,水、
10%~95%浓度乙醇梯度洗脱,20%乙醇洗脱部位
48g经硅胶柱色谱,经氯仿甲醇水(9∶1∶02)洗
脱及重结晶得化合物8(90mg);30%乙醇洗脱部
位 57g经 硅 胶 柱 色 谱,采 用 氯 仿甲 醇水
(9∶1∶01)洗脱及重结晶得化合物9(45mg);50%
乙醇洗脱部位81g经硅胶柱色谱,采用氯仿甲醇
水(9∶1∶01~6∶4∶1)梯度洗脱及 PharmadexLH-
20反复纯化得化合物 1(125mg)、3(280mg);
60%乙醇洗脱部位112g经硅胶柱色谱,采用氯仿
甲醇(9∶1~7∶3)梯度洗脱及 PharmadexLH-20反
复纯化得化合物10(25mg);70% ~80%乙醇洗脱
部位浸膏 232g,经硅胶色谱柱色谱氯仿甲醇
(9∶1~7∶3)梯度洗脱,结合反相 ODS色谱及 Phar
madexLH-20反复纯化,分别得到化合物 2(293
mg),4(173mg),5(12mg),6(9mg),7(17mg)。
3 结构鉴定
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第32卷第16期
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    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol.32,Issue 16
August,2007
化合物1 无定型淡黄色粉末,mp94~95℃。
LiebermannBurchard和Molish反应均呈阳性,酸水
解检出葡萄糖。ESIMSm/z:401[M+H]+,IR
(KBr)cm-1:3340(OH),1725(C=O),1640(C=
C),1600,1500(苯环);1HNMR(300MHzCD3OD)
δ:745(2H,d,J=80Hz,H2′,6′),683(2H,d,
J=80Hz,H3′,5′),768(1H,d,J=160Hz,H
7′),640(1H,d,J=160Hz,H8′),338~429
(H1~3,andH1″~6″);13CNMR(1004MHz,CD3
OD)δ:663(C1),692(C2),719(C3);1264
(C1′),1307(C2′),1169(C3′),1600(C4′),
1165(C5′),1307(C6′),1466(C7′),1149(C
8′),1688(C9′);1043(C1″),748(C2″),776
(C3″),712(C4″),775(C5″),625(C6″)。以
上数据与文献[3]对照结果基本一致,确认其为
(2S)1Op香豆酰基3OβD吡喃葡萄糖甘油苷,
即王百合苷A(regalosideA)。
化合物2 无定型淡黄色粉末,mp95~97℃,
LiebermannBurchard和Molish反应均呈阳性,酸水
解检出葡萄糖。IR(KBr)cm-1:3390(OH),2920
(CH),1700(C=O),1640(C=C),1610,1510
(苯环);ESIMSm/z:417[M+H]+,1HNMR(300
MHz,CD3OD)δ:745(1H,d,J=159Hz,H7′),
704(1H,d,J=20Hz,H2′),689(1H,dd,J=
82,20Hz,H6′),673(1H,d,J=82Hz,H5′),
616(1H,d,J=159Hz,H8′),317~425(H1~
3,andH1″~6″);13CNMR(1004MHz,CD3OD)δ:
669(C1),697(C2),721(C3);1280(C1′),
1149(C2′),1466(C3′),1493(C4′),1164(C
5′),1233(C6′),1469(C7′),1150(C8′),
1695(C9′);1044(C1″),748(C2″),781(C
3″),720(C4″),779(C5″),628(C6″)以上数据
与文献[4]对照结果基本一致,确认其为(2S)1O
咖啡酰基3OβD吡喃葡萄糖甘油苷,即王百合苷
C(regalosideC)。
化合物3 白色针晶(乙醇),mp192~193℃,
10%硫酸乙醇溶液105℃显紫红色。ESIMSm/z:
217[M+Na]+,IR(KBr)cm-1:3463,3292,2936,1
448,1399,1218。1HNMR(500MHz,C5D5N)δ:512
(d,1H,J=37Hz,H1),408(dd,1H,J=365,
453Hz,H2),415(m,1H,H3),410(t,1H,J=
879Hz,H4),422(m,1H,H5),445(dd,1H,J=
243,1155Hz,H6a),433(dd,1H,J=530,
1154Hz,H6b),648(brs,1H,OH2),652(brs,
1H,OH3),621(brs,1H,OH4),618(brs,1H,
OH6),342(s,3H,OMe);13CNMR(125MHz,C5D5
N)δ:1014(C1),739(C2),741(C3),721(C
4),7542(C5),628(C6),549(C7)。经与文献
[5]对照,化合物3与甲基αD吡喃甘露糖苷的光
谱及理化特征一致,故该化合物被鉴定为甲基αD
吡喃甘露糖苷(methylαDmannopyranoside)。
化合物4 白色针晶(乙醇),mp166~167℃,
ESIMSm/z:412[2M+Na]+ IR(KBr)cm-1:3648,
3290,2913,1460,1103。1HNMR(500MHz,DM
SOd6)δ:452(d,1H,J=36Hz,H1),318(m,
1H,H2),338(m,1H,H3),304(m,1H,H4),
330(m,1H,H5),344(m,1H,H6a),363(m,
1H,H6b),465(d,1H,J=65Hz,OH2),469(d,
1H,J=48Hz,OH3),480(d,1H,J=55Hz,OH
4),442(t,1H,J=65Hz,OH6),330(s,3H,
OMe);13CNMR(125MHz,DMSOd6)δ:996(C1),
719(C2),733(C3),703(C4),725(C5),
609(C6),542(C7)。经与文献[5]对照,化合物
4与甲基αD吡喃葡萄糖苷的光谱及理化特征一
致,故该化合物被鉴定为甲基αD吡喃葡萄糖苷
(methylαDglucopyranoside)。
化合物5 白色无定型粉末,mp224~226℃,
LiebermannBurchard和Molish反应均呈阳性,酸水解
检出葡萄糖和鼠李糖,ESIMSm/z:937[M+Na]+。
IR(KBr)cm-1:3410(OH),2935(CH),1010。
1HNMR(500MHz,C5D5N)δ:083(3H,s,Me18),
104(3H,s,Me19),115(3H,d,J=70Hz,Me21),
097(3H,d,J=61Hz,Me27),为螺甾烷型皂苷特
征性4个甲基信号;δ:491(1H,d,J=69Hz),637
(1H,brs),502(1H,d,J=78Hz)为3个糖环端基
氢信号;δ:353(3H,s)显示为26位甲氧基取代;δ:
179(3H,d,J=62Hz)为鼠李糖甲基信号,529
(1H,brd,J=50Hz)为6位烯氢信号。13CNMR数
据见表1和表2。1HNMR及13CNMR数据与文献[6]
报道结果基本一致,该化合物被鉴定为(25R,26R)
26甲氧基螺甾烷5烯3βOαL吡喃鼠李糖(1→
2)[βD吡喃葡萄糖(1→6)]βD吡喃葡萄糖苷
(25R,26R)26methoxyspirost5ene3βylOαLrh
amnopyranosyl(1→2)[βDglucopyranosyl(1→6)]
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   表1 化合物5~7皂苷母核部分13CNMR数据
No 5 6 7
1 378 377 378
2 301 303 302
3 781 782 783
4 395 395 394
5 1416 1415 1413
6 1220 1219 1221
7 319 320 324
8 317 318 323
9 497 496 496
10 369 369 369
11 207 209 209
12 397 398 318
13 402 405 449
14 530 566 566
15 317 315 313
16 808 812 911
17 625 625 905
18 158 163 171
19 197 197 197
20 424 423 451
21 145 151 89
22 1114 1093 1119
23 312 312 310
24 279 293 284
25 343 311 345
26 1028 655 1029
27 164 173 164
OMe 556   560
表2 化合物5~7糖部分13CNMR数据
No 5 6 7
glc1′ 1001 1003 1004
2′ 769 771 769
3′ 795 795 795
4′ 714 713 714
5′ 764 765 766
6′ 697 696 697
rha1″ 1018 1019 1018
2″ 727 727 727
3″ 730 730 730
4″ 741 741 741
5″ 696 696 695
6″ 184 185 184
glc1 1054 1055 1054
2 749 748 749
3 783 783 783
4 718 719 719
5 784 784 784
6 625 624 624
βDglucopyranoside。
化合物6 白色无定型粉末,mp235~237℃,
LiebermannBurchard和Molish反应均呈阳性,酸水
解检出葡萄糖和鼠李糖,ESIMSm/z885[M+
H]+。IR(KBr)cm-1:3410(OH),2920(CH),1
010。1HNMR(500MHz,C5D5N)δ:490(1H,d,J=
74Hz,H1′),635(1H,brs,H1″),503(1H,d,
J=78Hz,H1)为糖环 3个端基氢信号,δ:529
(1H,brd,J=50Hz)为 6位烯氢信号,δ:085
(3H,s,Me18),106(3H,s,Me19),113(3H,d,
J=70Hz,Me21),071(3H,d,J=56Hz,Me27)
为皂苷4个特征性甲基信号;13CNMR数据与化合
物5大致相同,区别在于失去 C26甲氧基的影响,
C25、C26均向高场位移(δ311,C25),(δ655,
C26),其余谱图信息见表1和表2。1HNMR及13C
NMR数据与文献[6]报道结果基本一致,故该化合
物被鉴定为(25R)螺甾烷5烯3βOαL吡喃鼠李
糖(1→2)[βD吡喃葡萄糖(1→6)]βD吡喃葡
萄糖苷(25R)spirost5ene3βylOαLrhamnopyr
anosyl(1→2)[βDglucopyranosyl(1→6)]βD
glucopyranoside。
化合物7 白色无定型粉末,mp241~242℃。
LiebermannBurchard和Molish反应均呈阳性,酸水解
检出葡萄糖和鼠李糖,ESIMSm/z:953[M+Na]+。
IR(KBr)cm-1:3415(OH),2940(CH),1020。
1HNMR(500MHz,C5D5N)δ:094(3H,s,Me18),
109(3H,s,Me19),124(3H,d,J=72Hz,Me21),
096(3H,d,J=62Hz,Me27)为螺甾烷型皂苷特征
性4个甲基信号;δ:491(1H,d,J=74Hz,H1′),
633(1H,brs,H1″),505(1H,d,J=78Hz,H1)
为3个糖环端基氢信号;339(3H,s)显示为26位甲
氧基取代;13CNMR(125MHz,C5D5N)谱图信息与化
合物5大致相同,区别在于由于17位羟基的存在,导
致C17向低场位移(δ905),伴随 C13,C16,C20
均向低场位移。详细谱图信息见表 1和表 2。1H
NMR及13CNMR数据与文献[6]报道结果基本一致,
故该化合物被鉴定为(25R,26R)17α羟基26甲氧
基螺甾烷5烯3βOαL吡喃鼠李糖(1→2)[βD
吡喃葡萄糖(1→6)]βD吡喃葡萄糖苷(25R,26R)
17αhydroxy26methoxyspirost5ene3βylOαLrh
amnopyranosyl(1→2)[βDglucopyranosyl(1→6)]
βDglucopyranoside。
化合物8 白色结晶性粉末(甲醇),mp290~
293℃,LiebermannBurchard和 Molish反应均呈阳
性,酸水解检出葡萄糖。IR(KBr)cm-1:3403
(OH),3394,2958,2933(CH),1642(C=C),
1465,1379,1333,1165,1105,1074,1023(C
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O)。IR谱与胡萝卜苷一致,在 TLC上的 Rf值及显
色行为与对照品一致,故该化合物被鉴定为胡萝卜
苷(daucosterol)。
化合物9 无色针晶(乙醇),mp236~238℃,
ESIMSm/z:268[M+H]+。1HNMR(500MHz,
C5D5N)δ:863(s,1H,H2),856(s,1H,H8),804
(brs,2H,NH2),665(d,1H,J=60Hz,H1′),
543(d,1H,J=60Hz,H2′),501(s,1H,H3′),
471(brs,1H,H4′),427(d,1H,J=120Hz,Hb
5′)413(d,1H,J=120Hz,Ha5′)。经与文献[6]
对照,化合物7与腺嘌呤核苷的光谱及理化特征一
致,故该化合物被鉴定为腺嘌呤核苷(adenoside)。
化合物10 黄色针晶(乙醇),mp220~221℃,N
ESIMSm/z:337[M+H]+,1HNMR(500MHz,DMSO
d6)δ:321(2H,t,J=64Hz,H4),407,410(3Heach,
s,2×OCH3),493(2H,t,J=64Hz,H3),618(2H,s,
OCH2O),709(1H,s,H5),780(1H,s,H8),801
(1H,d,J=92Hz,H14),821(1H,d,J=92Hz,H
13),894(1,s,H15),989(1H,s,H16);13CNMR(125
MHz,DMSOd6)δ:10543(C1),13062(C2),13291
(C3),10845(C4),12144(C5),2625(C6),5517
(C7),14546(C8),12046(C9),14988(C10),
15031(C11),12678(C12),12376(C13),14362(C
14),12017(C15),14773(C16),13751(C17),
10202(COCH2O),6185(COCH3),5694(C
OCH3);
1HNMR及13CNMR数据与小檗碱的基本一
致,TLC的Rf值与显色行为与对照品一致,故该化合
物被鉴定为小檗碱(berberine)[5]。
[参考文献]
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StudiesonchemicalconstituentsinfreshfleshyscaleleafofLiliumlancifolium
HUWenyan1,3,DUANJinao2,QIANDawei1,WANGDawei1
(1.JiangsuAcademyofChineseTraditionalMedicine,Nanjing210028,China;
2.NanjingUniversityofTraditionalChineseMedicine,Nanjing210046,China;
3.SchoolofPharmaceuticalscienceJiangsuUnversity,Zhenjiang201200,China)
[Abstract] Objective:TostudythechemicalconstituentsinfreshfleshyscaleafofLiliumlancifolium.Method:Theconstitu
entswereseparated.byvariouskindsofchromatographyandtheirstructureswereidentifiedonthebasisofspectralanalysis.Result:
TencompoundswereidentifiedregalosideA(1),regalosideC(2),methylαDmannopyranosid(3),methylαDglucopyranoside
(4),(25R,26R)26methoxyspirost5ene3βylOαLrhamnopyranosyl(1→2)[βDglucopyranosyl(1→6)]βDglucopyrano
side(5),(25R)spirost5ene3βylOαLrhamnopyranosyl(1→2)[βDglucopyranosyl(1→6)]βDglucopyranoside(6),
(25R,26R)17αhydroxy26methoxyspirost5ene3βylOαLrhamnopyranosyl(1→2)[βDglucopyranosyl(1→6)]βDgluco
pyranoside(7),daucosterol(8),adenoside(9),berberine(10).Conclusion:Alcompoundsexcept1and3wereisolatedfrom
thisspeciesforthefirsttime,andberberinewasfirstreportedingenusLilium.
[Keywords] Liliumlancifolium;chemicalconstituents
[责任编辑 戴 畅]
·9561·
第32卷第16期
2007年8月
         
    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol.32,Issue 16
August,2007