全 文 :卷丹化学成分研究
胡文彦1,3,段金廒2,钱大玮1,王大为1
(1.江苏省中医药研究院,江苏 南京 210028;
2.南京中医药大学,江苏 南京 210029;3.江苏大学药学院,江苏 镇江 212000)
[摘要] 目的:研究卷丹Liliumlancifolium鳞茎中的化学成分。方法:用色谱法分离卷丹的化学成分,用波谱
法鉴定其结构。结果:从卷丹中分离并鉴定了10个化合物,分别为王百合苷A(1),王百合苷C(2),甲基αD吡喃
甘露糖苷(3),甲基αD吡喃葡萄糖苷(4),(25R,26R)26甲氧基螺甾烷5烯3βOαL吡喃鼠李糖(1→2)[β
D吡喃葡萄糖(1→6)]βD吡喃葡萄糖苷(5),(25R)螺甾烷5烯3βOαL吡喃鼠李糖(1→2)[βD吡喃葡萄
糖(1→6)]βD吡喃葡萄糖苷(6),(25R,26R)17α羟基26甲氧基螺甾烷5烯3βOαL吡喃鼠李糖(1→2)
[βD吡喃葡萄糖(1→6)]βD吡喃葡萄糖苷(7),胡萝卜苷(8),腺嘌呤核苷(9),小檗碱(10)。结论:除化合物
1,3外均为首次从该植物中分离得到,其中10为首次从百合属植物中发现。
[关键词] 卷丹;化学成分
[中图分类号]R2841 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2007)16165604
[收稿日期] 20070111
[基金项目] 江苏省自然基金项目(BK2003112);江苏省公益
项目(BM2004525)
[通讯作者] 段金廒,Tel:(025)85811116
卷丹 LiliumlancifoilumThunb.为百合科植物,
主产于江苏宜兴,素有“太湖人参”的美称。其性味
甘寒,具有养阴清肺、清心安神之功效,用于治疗阴
虚久咳、虚烦、失眠等症[1]。卷丹自古即为百合的
主要来源。明代农书《花蔬》中有“百合宜兴最多,
人取其根馈客”的记述。明《沈氏农书》中有吴兴栽
种卷丹的记载,说明明末在太湖流域已有大面积卷
丹栽培。国内外对百合有许多研究报道,其鳞茎含
有皂苷、生物碱、酚性甘油苷、多糖、氨基酸、磷脂以
及微量元素等成分[2]。本研究报道从卷丹的新鲜
鳞茎中分离到10个化合物,除化合物1,3外其余化
合物均为首次从该植物中分离得到,其中10为首次
从百合属植物中发现。
1 仪器与材料
XT-4型显微熔点测定仪;FTIR8900型红外光
谱仪;BruckACF500MHz型核磁共振测定仪;Quat
troMicroMass串联四级杆,离子源ESI源,正离子模
式。硅胶为青岛海洋化工厂生产;ODS填料为
YMCGELS-50μm;凝胶填料 PharmadexLH-
20;大孔树脂 D101,天津化学试剂二厂出品。所有
化学试剂均为分析纯。
药材于 2003年 10月采自江苏省宜兴市新庄
镇。经南京中医药大学段金廒教授鉴定为百合科植
物卷丹Llancifolium的新鲜肉质鳞叶。
2 提取分离
卷丹新鲜鳞茎30kg,70%乙醇加热回流提取2
次,每次3h,减压浓缩得浸膏约3kg。分别以石油
醚,氯仿,醋酸乙酯和正丁醇萃取,减压回收溶剂,得
到正丁醇部位102g。经 D101大孔树脂吸附,水、
10%~95%浓度乙醇梯度洗脱,20%乙醇洗脱部位
48g经硅胶柱色谱,经氯仿甲醇水(9∶1∶02)洗
脱及重结晶得化合物8(90mg);30%乙醇洗脱部
位 57g经 硅 胶 柱 色 谱,采 用 氯 仿甲 醇水
(9∶1∶01)洗脱及重结晶得化合物9(45mg);50%
乙醇洗脱部位81g经硅胶柱色谱,采用氯仿甲醇
水(9∶1∶01~6∶4∶1)梯度洗脱及 PharmadexLH-
20反复纯化得化合物 1(125mg)、3(280mg);
60%乙醇洗脱部位112g经硅胶柱色谱,采用氯仿
甲醇(9∶1~7∶3)梯度洗脱及 PharmadexLH-20反
复纯化得化合物10(25mg);70% ~80%乙醇洗脱
部位浸膏 232g,经硅胶色谱柱色谱氯仿甲醇
(9∶1~7∶3)梯度洗脱,结合反相 ODS色谱及 Phar
madexLH-20反复纯化,分别得到化合物 2(293
mg),4(173mg),5(12mg),6(9mg),7(17mg)。
3 结构鉴定
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化合物1 无定型淡黄色粉末,mp94~95℃。
LiebermannBurchard和Molish反应均呈阳性,酸水
解检出葡萄糖。ESIMSm/z:401[M+H]+,IR
(KBr)cm-1:3340(OH),1725(C=O),1640(C=
C),1600,1500(苯环);1HNMR(300MHzCD3OD)
δ:745(2H,d,J=80Hz,H2′,6′),683(2H,d,
J=80Hz,H3′,5′),768(1H,d,J=160Hz,H
7′),640(1H,d,J=160Hz,H8′),338~429
(H1~3,andH1″~6″);13CNMR(1004MHz,CD3
OD)δ:663(C1),692(C2),719(C3);1264
(C1′),1307(C2′),1169(C3′),1600(C4′),
1165(C5′),1307(C6′),1466(C7′),1149(C
8′),1688(C9′);1043(C1″),748(C2″),776
(C3″),712(C4″),775(C5″),625(C6″)。以
上数据与文献[3]对照结果基本一致,确认其为
(2S)1Op香豆酰基3OβD吡喃葡萄糖甘油苷,
即王百合苷A(regalosideA)。
化合物2 无定型淡黄色粉末,mp95~97℃,
LiebermannBurchard和Molish反应均呈阳性,酸水
解检出葡萄糖。IR(KBr)cm-1:3390(OH),2920
(CH),1700(C=O),1640(C=C),1610,1510
(苯环);ESIMSm/z:417[M+H]+,1HNMR(300
MHz,CD3OD)δ:745(1H,d,J=159Hz,H7′),
704(1H,d,J=20Hz,H2′),689(1H,dd,J=
82,20Hz,H6′),673(1H,d,J=82Hz,H5′),
616(1H,d,J=159Hz,H8′),317~425(H1~
3,andH1″~6″);13CNMR(1004MHz,CD3OD)δ:
669(C1),697(C2),721(C3);1280(C1′),
1149(C2′),1466(C3′),1493(C4′),1164(C
5′),1233(C6′),1469(C7′),1150(C8′),
1695(C9′);1044(C1″),748(C2″),781(C
3″),720(C4″),779(C5″),628(C6″)以上数据
与文献[4]对照结果基本一致,确认其为(2S)1O
咖啡酰基3OβD吡喃葡萄糖甘油苷,即王百合苷
C(regalosideC)。
化合物3 白色针晶(乙醇),mp192~193℃,
10%硫酸乙醇溶液105℃显紫红色。ESIMSm/z:
217[M+Na]+,IR(KBr)cm-1:3463,3292,2936,1
448,1399,1218。1HNMR(500MHz,C5D5N)δ:512
(d,1H,J=37Hz,H1),408(dd,1H,J=365,
453Hz,H2),415(m,1H,H3),410(t,1H,J=
879Hz,H4),422(m,1H,H5),445(dd,1H,J=
243,1155Hz,H6a),433(dd,1H,J=530,
1154Hz,H6b),648(brs,1H,OH2),652(brs,
1H,OH3),621(brs,1H,OH4),618(brs,1H,
OH6),342(s,3H,OMe);13CNMR(125MHz,C5D5
N)δ:1014(C1),739(C2),741(C3),721(C
4),7542(C5),628(C6),549(C7)。经与文献
[5]对照,化合物3与甲基αD吡喃甘露糖苷的光
谱及理化特征一致,故该化合物被鉴定为甲基αD
吡喃甘露糖苷(methylαDmannopyranoside)。
化合物4 白色针晶(乙醇),mp166~167℃,
ESIMSm/z:412[2M+Na]+ IR(KBr)cm-1:3648,
3290,2913,1460,1103。1HNMR(500MHz,DM
SOd6)δ:452(d,1H,J=36Hz,H1),318(m,
1H,H2),338(m,1H,H3),304(m,1H,H4),
330(m,1H,H5),344(m,1H,H6a),363(m,
1H,H6b),465(d,1H,J=65Hz,OH2),469(d,
1H,J=48Hz,OH3),480(d,1H,J=55Hz,OH
4),442(t,1H,J=65Hz,OH6),330(s,3H,
OMe);13CNMR(125MHz,DMSOd6)δ:996(C1),
719(C2),733(C3),703(C4),725(C5),
609(C6),542(C7)。经与文献[5]对照,化合物
4与甲基αD吡喃葡萄糖苷的光谱及理化特征一
致,故该化合物被鉴定为甲基αD吡喃葡萄糖苷
(methylαDglucopyranoside)。
化合物5 白色无定型粉末,mp224~226℃,
LiebermannBurchard和Molish反应均呈阳性,酸水解
检出葡萄糖和鼠李糖,ESIMSm/z:937[M+Na]+。
IR(KBr)cm-1:3410(OH),2935(CH),1010。
1HNMR(500MHz,C5D5N)δ:083(3H,s,Me18),
104(3H,s,Me19),115(3H,d,J=70Hz,Me21),
097(3H,d,J=61Hz,Me27),为螺甾烷型皂苷特
征性4个甲基信号;δ:491(1H,d,J=69Hz),637
(1H,brs),502(1H,d,J=78Hz)为3个糖环端基
氢信号;δ:353(3H,s)显示为26位甲氧基取代;δ:
179(3H,d,J=62Hz)为鼠李糖甲基信号,529
(1H,brd,J=50Hz)为6位烯氢信号。13CNMR数
据见表1和表2。1HNMR及13CNMR数据与文献[6]
报道结果基本一致,该化合物被鉴定为(25R,26R)
26甲氧基螺甾烷5烯3βOαL吡喃鼠李糖(1→
2)[βD吡喃葡萄糖(1→6)]βD吡喃葡萄糖苷
(25R,26R)26methoxyspirost5ene3βylOαLrh
amnopyranosyl(1→2)[βDglucopyranosyl(1→6)]
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表1 化合物5~7皂苷母核部分13CNMR数据
No 5 6 7
1 378 377 378
2 301 303 302
3 781 782 783
4 395 395 394
5 1416 1415 1413
6 1220 1219 1221
7 319 320 324
8 317 318 323
9 497 496 496
10 369 369 369
11 207 209 209
12 397 398 318
13 402 405 449
14 530 566 566
15 317 315 313
16 808 812 911
17 625 625 905
18 158 163 171
19 197 197 197
20 424 423 451
21 145 151 89
22 1114 1093 1119
23 312 312 310
24 279 293 284
25 343 311 345
26 1028 655 1029
27 164 173 164
OMe 556 560
表2 化合物5~7糖部分13CNMR数据
No 5 6 7
glc1′ 1001 1003 1004
2′ 769 771 769
3′ 795 795 795
4′ 714 713 714
5′ 764 765 766
6′ 697 696 697
rha1″ 1018 1019 1018
2″ 727 727 727
3″ 730 730 730
4″ 741 741 741
5″ 696 696 695
6″ 184 185 184
glc1 1054 1055 1054
2 749 748 749
3 783 783 783
4 718 719 719
5 784 784 784
6 625 624 624
βDglucopyranoside。
化合物6 白色无定型粉末,mp235~237℃,
LiebermannBurchard和Molish反应均呈阳性,酸水
解检出葡萄糖和鼠李糖,ESIMSm/z885[M+
H]+。IR(KBr)cm-1:3410(OH),2920(CH),1
010。1HNMR(500MHz,C5D5N)δ:490(1H,d,J=
74Hz,H1′),635(1H,brs,H1″),503(1H,d,
J=78Hz,H1)为糖环 3个端基氢信号,δ:529
(1H,brd,J=50Hz)为 6位烯氢信号,δ:085
(3H,s,Me18),106(3H,s,Me19),113(3H,d,
J=70Hz,Me21),071(3H,d,J=56Hz,Me27)
为皂苷4个特征性甲基信号;13CNMR数据与化合
物5大致相同,区别在于失去 C26甲氧基的影响,
C25、C26均向高场位移(δ311,C25),(δ655,
C26),其余谱图信息见表1和表2。1HNMR及13C
NMR数据与文献[6]报道结果基本一致,故该化合
物被鉴定为(25R)螺甾烷5烯3βOαL吡喃鼠李
糖(1→2)[βD吡喃葡萄糖(1→6)]βD吡喃葡
萄糖苷(25R)spirost5ene3βylOαLrhamnopyr
anosyl(1→2)[βDglucopyranosyl(1→6)]βD
glucopyranoside。
化合物7 白色无定型粉末,mp241~242℃。
LiebermannBurchard和Molish反应均呈阳性,酸水解
检出葡萄糖和鼠李糖,ESIMSm/z:953[M+Na]+。
IR(KBr)cm-1:3415(OH),2940(CH),1020。
1HNMR(500MHz,C5D5N)δ:094(3H,s,Me18),
109(3H,s,Me19),124(3H,d,J=72Hz,Me21),
096(3H,d,J=62Hz,Me27)为螺甾烷型皂苷特征
性4个甲基信号;δ:491(1H,d,J=74Hz,H1′),
633(1H,brs,H1″),505(1H,d,J=78Hz,H1)
为3个糖环端基氢信号;339(3H,s)显示为26位甲
氧基取代;13CNMR(125MHz,C5D5N)谱图信息与化
合物5大致相同,区别在于由于17位羟基的存在,导
致C17向低场位移(δ905),伴随 C13,C16,C20
均向低场位移。详细谱图信息见表 1和表 2。1H
NMR及13CNMR数据与文献[6]报道结果基本一致,
故该化合物被鉴定为(25R,26R)17α羟基26甲氧
基螺甾烷5烯3βOαL吡喃鼠李糖(1→2)[βD
吡喃葡萄糖(1→6)]βD吡喃葡萄糖苷(25R,26R)
17αhydroxy26methoxyspirost5ene3βylOαLrh
amnopyranosyl(1→2)[βDglucopyranosyl(1→6)]
βDglucopyranoside。
化合物8 白色结晶性粉末(甲醇),mp290~
293℃,LiebermannBurchard和 Molish反应均呈阳
性,酸水解检出葡萄糖。IR(KBr)cm-1:3403
(OH),3394,2958,2933(CH),1642(C=C),
1465,1379,1333,1165,1105,1074,1023(C
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O)。IR谱与胡萝卜苷一致,在 TLC上的 Rf值及显
色行为与对照品一致,故该化合物被鉴定为胡萝卜
苷(daucosterol)。
化合物9 无色针晶(乙醇),mp236~238℃,
ESIMSm/z:268[M+H]+。1HNMR(500MHz,
C5D5N)δ:863(s,1H,H2),856(s,1H,H8),804
(brs,2H,NH2),665(d,1H,J=60Hz,H1′),
543(d,1H,J=60Hz,H2′),501(s,1H,H3′),
471(brs,1H,H4′),427(d,1H,J=120Hz,Hb
5′)413(d,1H,J=120Hz,Ha5′)。经与文献[6]
对照,化合物7与腺嘌呤核苷的光谱及理化特征一
致,故该化合物被鉴定为腺嘌呤核苷(adenoside)。
化合物10 黄色针晶(乙醇),mp220~221℃,N
ESIMSm/z:337[M+H]+,1HNMR(500MHz,DMSO
d6)δ:321(2H,t,J=64Hz,H4),407,410(3Heach,
s,2×OCH3),493(2H,t,J=64Hz,H3),618(2H,s,
OCH2O),709(1H,s,H5),780(1H,s,H8),801
(1H,d,J=92Hz,H14),821(1H,d,J=92Hz,H
13),894(1,s,H15),989(1H,s,H16);13CNMR(125
MHz,DMSOd6)δ:10543(C1),13062(C2),13291
(C3),10845(C4),12144(C5),2625(C6),5517
(C7),14546(C8),12046(C9),14988(C10),
15031(C11),12678(C12),12376(C13),14362(C
14),12017(C15),14773(C16),13751(C17),
10202(COCH2O),6185(COCH3),5694(C
OCH3);
1HNMR及13CNMR数据与小檗碱的基本一
致,TLC的Rf值与显色行为与对照品一致,故该化合
物被鉴定为小檗碱(berberine)[5]。
[参考文献]
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StudiesonchemicalconstituentsinfreshfleshyscaleleafofLiliumlancifolium
HUWenyan1,3,DUANJinao2,QIANDawei1,WANGDawei1
(1.JiangsuAcademyofChineseTraditionalMedicine,Nanjing210028,China;
2.NanjingUniversityofTraditionalChineseMedicine,Nanjing210046,China;
3.SchoolofPharmaceuticalscienceJiangsuUnversity,Zhenjiang201200,China)
[Abstract] Objective:TostudythechemicalconstituentsinfreshfleshyscaleafofLiliumlancifolium.Method:Theconstitu
entswereseparated.byvariouskindsofchromatographyandtheirstructureswereidentifiedonthebasisofspectralanalysis.Result:
TencompoundswereidentifiedregalosideA(1),regalosideC(2),methylαDmannopyranosid(3),methylαDglucopyranoside
(4),(25R,26R)26methoxyspirost5ene3βylOαLrhamnopyranosyl(1→2)[βDglucopyranosyl(1→6)]βDglucopyrano
side(5),(25R)spirost5ene3βylOαLrhamnopyranosyl(1→2)[βDglucopyranosyl(1→6)]βDglucopyranoside(6),
(25R,26R)17αhydroxy26methoxyspirost5ene3βylOαLrhamnopyranosyl(1→2)[βDglucopyranosyl(1→6)]βDgluco
pyranoside(7),daucosterol(8),adenoside(9),berberine(10).Conclusion:Alcompoundsexcept1and3wereisolatedfrom
thisspeciesforthefirsttime,andberberinewasfirstreportedingenusLilium.
[Keywords] Liliumlancifolium;chemicalconstituents
[责任编辑 戴 畅]
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