全 文 :²±¨º¤¶·¤®¨ ± ¤¶·«¨ µ¨¶¨¤µ¦«²¥¨¦·q °°∏±²«¬¶·²¦«¨ °¬¶·µ¼ ¶·¤¬± ¤±§¬± ¶¬·∏«¼¥µ¬§¬½¤·¬²± ¶·¤¬± º µ¨¨ ³¨ µ©²µ° §¨·² ¬¨¤°¬±¤·¨·«¨ ∂ ∞ƒ
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³²¬±·¶¤©·¨µ²³¨ µ¤·¬²±q Χονχλυσιον: ×≤ ¦¤± ³µ²°²·¨ ·«¨ ∂ ∞ƒ ¤±§ ∂ ∞ƒ ° ¬¨³µ¨¶¶¬²± ¬± ·«¨ «¤¨ °¤·²°¤o ©¬¥µ²∏¶¦¤¯ ∏¯¶¤±§
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[ Κεψ ωορδσ] ©µ¤¦·∏µ¨~ ·«µ¨¨³¨ µ¬²§¶·µ¨¤·° ±¨·¬± ×≤ ~ ∂ ∞ƒ~ «¼¥µ¬§¬½¤·¬²± ¬± ¶¬·∏~ ¬°°∏±²«¬¶·²¦«¨ °¬¶·µ¼
≈责任编辑 刘
≈收稿日期 ussz2sy2ty
≈通讯作者 3 沈业寿 oר¯}ksxxtlxtszxzwo∞2°¤¬¯}¶«¼¶«
¤«∏q §¨∏q¦±
亮菌多糖 ×°≥2u对小鼠免疫性肝损伤的保护作用
李 峰 o沈业寿 3 o马金宝 o赵根海 o史新强 o朱巧云
k安徽大学 生命科学院 生化微生物研究所 安徽省中药研究与开发重点实验室 o安徽 合肥 uvssv|l
≈摘要 目的 }观察亮菌多糖 ×°≥2u对卡介苗加脂多糖 k
≤ n °≥l引起的小鼠免疫性肝损伤的影响 ∀方
法 }建立
≤ n °≥致小鼠免疫性肝损伤模型 o比色法测定血清中丙氨酸氨基转移酶 k×l!天门冬氨酸氨基转移
酶 k≥×l和一氧化氮 kl的水平 o肝脏中超氧化物歧化酶 k≥⁄l活力 !丙二醛 k ⁄l浓度 o酶联免疫法测定血清
׃2Αo2t的含量 o用 ××法测定脾 ×o
淋巴细胞增殖能力 o分别计算各组肝脏指数 !脾脏指数和胸腺指数 ∀结
果 }亮菌多糖 ×°≥2ukuxoxsotss °ª# ®ªpt l能明显降低小鼠血清中升高的 ×o≥×o水平以及 ׃2Αo2t的
含量 o抑制肝脏中上升的 ⁄水平和提高过低的 ≥⁄活性 o各用药组均能提升脾 ×o
淋巴细胞增殖能力 o且均不
同程度地提高了小鼠的脾脏指数和胸腺指数 o降低了小鼠的肝脏指数 ∀结论 }亮菌多糖 ×°≥2u对
≤ n °≥致小
鼠免疫性肝损伤具有显著的保护作用 ∀
≈关键词 亮菌 ~多糖 ~
≤ n °≥~肝损伤
≈中图分类号 u{xqx ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukusszluw2uywx2sw
亮菌 Αρµ ιλλαριελλα ταβεσχενσ属担子菌亚门 o层菌
纲 o伞菌目口蘑科 o假蜜环菌属 o是一种兼有食用和
药用价值的名贵食用菌 o目前 o亮菌临床上主要用于
急性胆囊炎 !慢性胆囊炎急性发作 o其他胆道疾病并
发急性感染 o慢性胃炎等疾病的治疗 ≈t ∀一般认为
亮菌的主要成分为亮菌甲素 o而对亮菌多糖 k×°≥l
这一生物大分子的功效研究甚少 ∀本所的前期研究
表明亮菌多糖 ×°≥2u对化学性肝损伤有很好的保
护作用 ≈u o为了更深入地研究 ×°≥2u的保肝作用
机制 o本实验采用了更加接近人体肝病发生机制的
≤ n°≥致小鼠免疫性肝损伤模型对 ×°≥2u进
行保肝作用研究 o报道如下 ∀
1 材料
1q1 试剂与药品 亮菌多糖 ×°≥2uk为均一组分 o
多糖量 |y1|h o本实验室自制 ≈u lo卡介苗 k
≤o安
徽省肺科医院 lo脂多糖 k°≥o≥¬ª°¤o{{{slo≤²±
k≥¬ª°¤o≤ustsl~×o≥×测试盒 k上海荣盛生物技
术有限公司 ousszsvtyoussytttwlo≥⁄o ⁄o
测试盒 k南京建成生物工程研究所 ousszsvvto
usszswsuousszswsvlo׃2Αo2t测试盒 k美国 ×°
公司 oszsws{toszsws{sl~ ×× k≥¬ª°¤lo ° tyws
培养粉 k¬¥¦²公司 lo胎牛血清 k杭州四季清公司 o
临用前热灭活 l∀
1q2 动物 昆明种健康小鼠 o雄性 o体重 kus ? ul
ªo由安徽医学研究所动物实验中心提供 o皖医动准
字第 sv号 ∀
#xwyu#
第 vu卷第 uw期
ussz年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ uw
⁄ ¦¨¨°¥¨ µo ussz
1q3 仪器 ∂ p |uss紫外 2可见分光光度计
k°«¤µ°¤¦¬¤lo×p ty 台式高速冷冻离心机 k上海
市离心机械研究所 lo⁄p {⁄型电热恒温水浴槽
k上海精宏实验设备有限公司 lo
≥uuw≥电子天平
k北京赛多利斯仪器系统有限公司 lo³«¤p u冷
冻干燥机 k德国 ≤«µ¬¶·公司 lo×快速分离纯化
系统 k°«¤µ°¤¦¬¤lo≤u培养箱 k¨ º
µ∏±¶º¬¦® ¶¦¬¨±2
·¬©¬¦公司 lo超净工作 k∞≥≤公司 lo酶联免疫检测
仪 k华东电子集团医疗装备有限公司 l∀
2 方法
2q1 动物模型的建立 ≈v2x 造模第 t天给昆明种小鼠
经尾 ¬√
≤ u1x °ªrs1u °r只 k约含 x1s ≅ tsz个活菌
数 lots §后再次尾 ¬√ °≥ z1x Λªrs1u °r只 ∀末次给
药后禁食 ty «o摘除眼球取血 o分离血清 o脱颈椎处死
小鼠 o摘取肝脏 !脾脏 !胸腺进行有关指标检测 ∀
2q2 动物分组与给药 小鼠正常饲养 u §o随机分
为 y组 o每组 ts只 o即正常对照组 !
≤ n °≥模型
组 ! ×°≥2u低 !中 !高剂量组 kuxoxsotss °ª#
®ªpt l!联苯双酯阳性对照组 ktss °ª# ®ªpt l∀给
药方案 }从造模第 t天起 o按 s1su °# ªpt分别 ¬ª
不同剂量 ×°≥2u和联苯双酯 o每天 t次 o末次给药
在 ¬√ °≥激发肝损伤前 o共 ts次 ∀
2q3 指标的检测及方法 ×o≥×o ⁄o≥⁄o
测定按试剂盒说明书进行 o׃2Α和 2t的测
定 o依其定量酶联检测试剂盒说明书进行 ∀脏器指
数 }肝脏 k脾脏 !胸腺 l指数 肝脏 k脾脏 !胸腺 l重
k°ªl r体重 kªl∀ ×o
淋巴细胞增殖反应的测定 ≈y
采用 ××参入法 }无菌摘取肝脏 o研磨过 uss目筛 o
t xss µ# °¬±pt o离心 ts °¬±o加入 ×µ¬¶2w ≤ 溶¯液
破坏红细胞 o先用不完全 ° 2tyws培养基洗细胞
u次 o再用完全 ° 2tyws培养基垂悬细胞 o显微镜
下计数 o调细胞至 x ≅ tsy个 r°o加入 |y孔细胞培
养板 ts Λr孔 o再分别加入 ≤²± tss Λr孔 o终浓
度为 y Λª# °pt o测 ×淋巴细胞转化率 ~或加入
°≥ tss Λr孔 o使其终浓度为 x Λª# °pt o设 v个
复孔 o测
淋巴细胞转化率 ∀将细胞培养板置 vz
ε oxh的 ≤u培养箱 w{ «o取出每孔吸出 {s Λo加
入 x °ª# °pt ×× ts Λr孔 o置培养箱内 w «o取
出 o加入 tsh ≥⁄≥2≤ 溶¯液 tss Λr孔 o振荡过夜 o
酶联免疫检测仪测 xzs ±°的吸光度 Αo以各样本 Α
代表其 ×o
淋巴细胞增殖能力 ∀
2q4 统计学处理 数据应用 ≥°≥≥ts1s软件包进行
处理 ∀各项数据以 cξ ? σ表示 o用方差分析及 τ检验
比较组间差异的显著性 ∀
3 结果
3q1 ×°≥2u对
≤ n°≥致小鼠免疫性肝损伤肝
脏 !脾脏 !胸腺指数的影响 ×°≥2u低 !中 !高剂量
均可使
≤ n°≥肝损伤的小鼠升高的肝脏指数降
低 ∀并能升高降低的脾脏 !胸腺指数 ∀与模型组比
较 o中剂量组肝脏和脾脏指数有显著差异 kΠ
s1sxlo高剂量组肝脏 !脾脏 !胸腺指数均有极显著
差异 kΠ s1stlk表 tl∀
表 t ×°≥2u对
≤ n °≥诱导小鼠免疫性肝损伤肝脏 !脾脏 !胸腺指数的影响 kcξ ? σ, ν tsl
组别 剂量 r°ª# ®ªpt 肝脏指数 rª# ®ªpt 脾脏指数 rª# ®ªpt 胸腺指数 rª# ®ªpt
正常 p ww1uv ? x1vu x1xt ? s1zw u1y{ ? s1yy
模型 p xz1uz ? {1zuvl w1ts ? s1yxvl t1v| ? s1x{vl
×°≥2u ux xx1wu ? y1{s w1zt ? s1xz t1xu ? s1ww
xs w|1yz ? w1wwul w1|v ? s1wwul t1|| ? s1vz
tss w{1y{ ? u1{ytl x1ux ? s1xstl u1xt ? s1zztl
联苯双酯 tss wz1xw ? z1yttl x1sv ? s1v|tl u1vx ? s1yytl
注 }与模型组比 tl Π s1stoul Π s1sxo与正常组比 vl Π s1stk表 u ∗ w同 l
3q2 ×°≥2u对
≤ n°≥致小鼠免疫性肝损伤血
清转氨酶和肝脏 ≥⁄o ⁄的影响 ×°≥2u低 !
中 !高剂量均可使
≤ n °≥致小鼠免疫性肝损伤
血清 ×o≥×升高的水平降低 o并能降低肝脏
⁄的水平 o提高 ≥⁄的活性 ∀与模型组比较 }低
剂量组显著性差异不十分明显 o≥×有极显著差异
kΠ s1stl~中剂量组 ≥×o≥⁄o ⁄有显著差异
kΠ s1stlo×有极显著差异 kΠ s1sxl~高剂量
组组均具有极显著差异 kΠ s1stl∀阳性药物组
×o≥×具有极显著差异 kΠ s1stl∀阳性药物组
≥⁄o ⁄具有显著差异 kΠ s1sxlk表 ul∀
3q3 ×°≥2u对
≤ n°≥致小鼠免疫性肝损伤血
清 ׃2Αo2to的影响 ×°≥2u低 !中 !高剂量
均可使小鼠肝损伤血清 ׃2Αo2to升高的水
平降低 ∀与模型组比较低剂量组 ׃2Αo有显著
差异 kΠ s1sxl~除中剂量组 2t有显著差异 kΠ
#ywyu#
第 vu卷第 uw期
ussz年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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⁄ ¦¨¨°¥¨ µo ussz
表 u ×°≥2u对
≤ n °≥诱导小鼠免疫性肝损伤的血清转氨酶及肝脏 ≥⁄o ⁄的影响 kcξ ? σ, ν tsl
组别 剂量 r°ª# ®ªpt × r# pt ≥× r# pt ≥⁄r# °ªpt ⁄ r±°²¯# °ªpt
正常 p xt1t| ? tw1yt uy1|| ? x1wy wty1tt ? us1ts u1ww ? s1wy
模型 p tvu1tz ? tu1zzvl |v1xx ? tv1u|vl twv1sw ? w{1xtvl x1{| ? s1u{vl
×°≥2u ux ts{1zw ? t|1z| xz1xy ? ts1tstl tyy1|w ? ww1uu x1v{ ? s1ys
xs tsv1tz ? tu1|wul xx1xs ? tv1xxtl v{s1{{ ? vv1xstl v1sx ? s1uttl
tss {y1zy ? y1wwtl xs1xt ? y1zstl v||1{y ? vv1xytl u1|z ? s1vttl
联苯双酯 tss {{1{w ? tt1wstl xx1u{ ? |1wstl uts1{v ? wt1u{ul x1ty ? s1vsul
s1sxl外 o中 !高剂量组和阳性药物组 ׃2Αoo2 t均具有极显著差异 kΠ s1stlk表 vl∀
表 v ×°≥2u对
≤ n °≥诱导小鼠免疫性肝损伤的血清 ׃2Αo2to水平的影响 kcξ ? σ, ν tsl
组别 剂量 r°ª# ®ªpt ׃2ΑrΛª# pt 2trΛª# pt rΛ°²¯# pt
正常 p t1yu ? s1tu w1sv ? s1xs uv1ss ? tx1{z
模型 p v1vy ? s1u|vl y1uy ? s1zyvl {|1yz ? uz1uvvl
×°≥2u ux u1|x ? 1tyul x1vz ? s1yw x|1vv ? tx1xvul
xs u1xt ? s1t{tl x1sv ? s1w|ul wv1ss ? t{1xutl
tss u1s| ? s1tztl w1yv ? s1wttl vu1vv ? tt1xstl
联苯双酯 tss u1uz ? s1uvtl w1ys ? s1vytl wu1vv ? ty1yxtl
3q4 ×°≥2u对
≤ n°≥致小鼠免疫性肝损伤 ×o
淋巴细胞增殖能力的影响 模型组 ×o
淋巴细
胞增殖能力与正常组相比 o有明显下降 ~×°≥2u各
剂量组和阳性药物组与模型组组相比 o均有明显上
升 o中剂量组有显著差异 kΠ s1sxlo高剂量组均具
有极显著差异 kΠ s1stl∀阳性药物组
淋巴细胞
转化率具有显著差异 kΠ s1sxlo阳性药物组 ×淋
巴细胞转化率具有极显著差异 kΠ s1stlk表 wl∀
表 w ×o
淋巴细胞增殖能力比较 kcξ ? σ, ν tsl
组别
剂量
r°ª# ®ªpt
淋巴细胞转化率
×
正常 p s1wxz ? s1sxx s1wuz ? s1sxz
模型 p s1uus ? s1swyvl s1usv ? s1svtvl
×°≥2u ux s1uyz ? s1sut s1u|z ? s1svu
xs s1u|z ? s1svtul s1vsz ? s1swxul
tss s1v|z ? s1sx{tl s1vvz ? s1sxttl
联苯双酯 tss s1v{v ? s1svttl s1vtz ? s1s{tul
4 讨论
研究发现在多种肝损伤动物模型中 o׃2Α是
介导肝损伤的主要和终末介质 o׃2Α参与了多种
肝损伤的病理生理过程 o׃2Α主要是由活化单核
巨噬细胞产生的细胞因子 o是参与特异性和非特异
性免疫的重要介质 o能够增强 ×o
淋巴细胞及单核
巨噬细胞的活性 o另外 o肝细胞坏死程度的轻重与
׃2Α的活性呈正相关关系 o而 ׃2Α单独并不引
起明显的肝脏损伤 o׃2Α作为肝损伤的第一介质
诱导肝细胞产生 o2to2y等第二介质 o而这些
第二介质又可刺激各种免疫细胞和炎症细胞产生细
胞因子 o介导肝脏的炎症免疫损伤 ≈y2{ ∀国内刘耕陶
等 ≈w 报道 o来源于肝枯否细胞的 ׃2Α在肝损伤中
起重要作用 ∀此外 o胸腺与脾脏为动物体内主要的
免疫器官 o细胞免疫在病毒性肝炎等肝病中发挥着
主导作用 o尤其是 ×淋巴细胞介导的特异性免疫应
答 o是造成免疫性肝损伤的重要机制 ∀
以往的研究表明 o×°≥2u kuxoxsotss °ª#
®ªpt l¬³预防给药对酒精或四氯化碳所致小鼠肝损
伤具有保护作用 ≈u ∀从表 t ∗ w可以看出 ×°≥2u对
≤加 °≥诱导的免疫性肝损伤的保护作用呈现
剂量效应关系 o×°≥2u高剂量与阳性对照药联苯双
酯对小鼠肝损伤的保护作用相当 o但在抗脂质过氧
化方面比联苯双酯组要好 ≈u o×°≥2u在对提高
淋
巴细胞增殖能力方面比联苯双酯组好 ∀
本研究在建立
≤ n°≥诱导的免疫性肝损伤
的基础上 o显示 ×°≥2u可使
≤ n°≥致小鼠免疫
性肝损伤中血清 ×o≥×升高的水平降低 o升高肝
脏中降低的 ≥⁄活力 o降低升高的 ⁄水平 o表明
×°≥2u对细胞膜的完整性也具有很好保护作用且
具有很强的抗脂质过氧化功能 ∀ ×°≥2u高剂量可
显著提高小鼠脾脏指数和胸腺指数 o提高 ×o
淋巴
细胞增殖能力 o另外 o亮菌多糖 ×°≥2u各剂量组均
可降低 ׃2Αo2to的水平 o且高剂量组与模型
组比较具有极显著差异 kΠ s1stlo表明亮菌多糖
×°≥2u小鼠免疫器官 ) ) ) 脾脏和胸腺具有很好的
保护作用 o其保肝机制可能是通过平衡细胞因子产
生 !调节机体免疫功能 o减少 ׃2Αo2to的产
#zwyu#
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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生等有关 o×°≥2u可降低肝损伤小鼠血清 ׃2Α水
平 o其是否可直接作用枯否细胞 o对免疫性肝损伤起
到保护作用有待进一步探究 ∀
≈参考文献
≈t 江苏省亮菌科研协作组临床肝炎小组 q亮菌治疗迁延性 !慢性
病毒性肝炎的疗效观察 ≈ q江苏医药 ot|zyokvl}t{q
≈u 李 峰 o沈业寿 q亮菌多糖 ×°≥2u对小鼠四氯化碳肝损伤和
酒精肝损伤的保护作用 ≈ q中国食用菌 ousszouykvlwwq
≈v 陈 明 o王英锋 q肝毒清复方对
≤ r°≥所致小鼠免疫性肝
损伤免疫功能的影响 ≈ q中国医药学报 ousswot|kxl}uzvq
≈w • ¤±ª ≥o ¬∏ ×q ²¯¨²©±¬·µ¬¦²¬¬§¨ ¬± ¬°°∏±²¯²ª¬¦¤¯ ¬¯√ µ¨
§¤°¤ª¨ ¬± °¬¦¨≈ q
¬²¦«¨ ° °«¤µ°¤¦²¯o t||xow|k|l}tuzzq
≈x 钱涯邻 o孙沛毅 o陈维名 q乙肝 号治疗慢性乙型病毒性肝炎
时的抗氧自由基作用 ≈ q中西医结合肝病杂志 ousstokwl}
ussq
≈y 王宇明 o丁 健 o顾长海 o等 q内毒素 r肿瘤坏死因子所致肝细
胞损害机制的体外研究 ≈ q中华传染病杂志 ot||yotwktl}tq
≈z ± ²¯ ≠ q ∞±«¤±¦¨§·∏°²µ± ¦¨µ¦∏¬¶©¤¦·²µ¤±§¬±·¨µ¯¨ ∏®¬±2t ¬± ©∏¯2
°¬±¤±·«¨ ³¤·¬¦©¤¬¯∏µ¨≈ q ¤±¦¨·o t|{{ou}zuq
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¶¬¶©¤¦·²µk׃l ¤±§¬±·¨µ¯¨ ∏®¬±2tk2tl ¬± ·«¨ ³¤·«²ª¨ ± ¶¨¬¶²©
©∏¯°¬±¤±·«¨ ³¤·¬·¬¶} ³²¶¶¬¥¯¨ ¬±√²¯√ °¨ ±¨·²© ¶¨µ¬±¨ ³µ²·¨¤¶¨ ¬±
׃2° §¨¬¤·¨§ ¬¯√ µ¨¬±∏µ¼≈ q ¤¶·µ²¨ ±·§µ²¯ ³±o t||touy}ww{q
Προτεχτιον οφ πολψσαχχηαριδε ΑΤΠΣ2u φροµ Αρµ ιλλαριελλα ταβεσχενσ ον
ιµ µ υνολογιχαλλιϖερ ινϕυρψ ιν µ ιχε ινδυχεδ βψ ΒΧΓ πλυσΛΠΣ
ƒ ±¨ªo ≥∞≠ 2¨¶«²∏o ¬±2¥¤²o ±¨2«¤¬o ≥÷¬±2´ ¬¤±ªo ±¬¤²2¼∏±
(Σχηοολοφ Λιφε Σχινχε, Ινστιτυτε οφ Βιοχηεµ ιστρψ ανδ Μιχροβιολογψ Ανηυι Υνιϖερσιτψ, Κεψ Λαβορατορψ οφ
Ρεσεαρχη ανδ ∆εϖελοπµ εντ οφ Χηινεσε Μεδιχινε Ανηυι Προϖινχε, Ηεφει uvssv|, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ²¥¶¨µ√¨·«¨ ©¨©¨¦·²©³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ×°≥2u ©µ²° Αρµ ιλλαριελλα ταβεσχενσ ²± ·«¨ ¬°°∏±²¯²ª¬¦¤¯ ¬¯√ µ¨
¬±∏µ¼ ¬± °¬¦¨ ¬±§∏¦¨§¥¼
≤ ³¯∏¶°≥q Μετηοδ :
≤ ¤±§°≥ º µ¨¨ ¤§²³·¨§·² ¶¨·¤¥¯¬¶«
≤ ³¯∏¶°≥ ¬¯√ µ¨¬±∏µ¼ °²§¨ ¯¬± °¬¦¨q
׫¨ ¦²±·¨±·²©¶¨µ∏° ¤¯¤±¬±¨¤°¬±²·µ¤±¶©¨µ¤¶¨ k×lo ¤¶³¤µ·¤·¨¤°¬±²·µ¤±¶©¨µ¤¶¨ k≥×l ¤±§o ·«¨ ¤¦·¬√¬·¼ ²©¶∏³¨ µ²¬¬§¨ §¬¶°∏·¤¶¨
k≥⁄l ¤±§°¤¯²±§¬¤§¨ «¼§¨ k ⁄l ¦²±·¨±·²© ¬¯√ µ¨«²°²ª¨ ±¤·¨¬± °¬¦¨ º µ¨¨ ° ¤¨¶∏µ¨§¥¼ ¦²¯²µ¬° ·¨µ¬¦° ·¨«²§q ׫¨ ¦²±·¨±·²©·∏°²µ
± ¦¨µ²¶¬¶©¤¦·²µ2Α k׃2Αlo ¬±·¨µ¯¨ ∏®¬±2t k2tlo ²± ¶¨µ∏° º µ¨¨ ° ¤¨¶∏µ¨§¥¼ ±¨½¼°¨ ¬¯±®¨ §¬°°∏±²¶²µ¥¨ ±·¤¶¶¤¼ k∞≥lo ¤±§×2
¤±§
2¯ ¼°³«²¦¼·¨³µ²¯¬©¨µ¤·¬²± º µ¨¨ ° ¤¨¶∏µ¨§¥¼ ××q ±§¨ ¬²© ¬¯√ µ¨o ¶³¯¨¨ ± ¤±§·«¼°∏¶º µ¨¨ ¦¤¯¦∏¯¤·¨§¤©·¨µ·µ¨¤·° ±¨·q Ρ εσυλτ: °²¯2
¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ×°≥2u ©µ²° Α. ταβεσχενσkuxo xso tss °ª# ®ªpt l ¦²∏¯§²¥√¬²∏¶¯¼ µ¨§∏¦¨ ·«¨ «¬ª«¯¨ √¨¯ ²©×o ≥×o ¤±§×ƒ2Αo
2t ²± ¶¨µ∏°o ¬±«¬¥¬··«¨ «¬ª« ¯¨ √¨¯ ²© ⁄o ¬±¦µ¨¤¶¨ ·«¨ ²¯º ¤¦·¬√¬·¼ ²©≥⁄ ¬± ¬¯√ µ¨«²°²ª¨ ±¤·¨ ¤±§ ±¨«¤±¦¨ ×2¤±§
2¯ ¼°³«²¦¼·¨
³µ²¯¬©¨µ¤·¬²±o ¨¯ √¨¤·¨ ·«¨ ¶³¯¨¨ ±o ·«¼°¬¦¬±§¨ ¬ ¤±§ §¨ ¦µ¨¤¶¨ ¬¯√ µ¨¬±§¨ ¬ ²©·«¨ °¬¦¨ ·² §¬©©¨µ¨±·¨ ¬·¨±·q Χονχλυσιον: °²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨
×°≥2u ©µ²° Α. ταβεσχεν󫤧¤³³¤µ¨±·¯¼ ³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨¦·¶¬± ·«¨ ¬°°∏±²¯²ª¬¦¤¯ ¬¯√ µ¨¬±∏µ¼ °¬¦¨ ¬±§∏¦¨§¥¼
≤ ³¯∏¶°≥q
[ Κεψ ωορδσ] Αρµ ιλλαριελλα ταβεσχενσ~ ³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ~
≤ n °≥~ ¬¯√ µ¨¬±∏µ¼
≈责任编辑 刘
本刊零售
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vxs1ss元 ∀欢迎大家踊跃购买 ∀
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第 vu卷第 uw期
ussz年 tu月
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