全 文 ：三叶半夏的２种病毒检测
申屠苏苏１，２，王海丽１，３，陈集双２，何煜波４，高必达４
（１．浙江大学，浙江 杭州 ３１００２９；
２．浙江理工大学 生物工程研究所，浙江 杭州 ３１００１８；
３．浙江万里学院，浙江 宁波 ３１５１００；
４．湖南农业大学 生物安全科技学院，湖南 长沙 ４１０１２８）
［摘要］ 目的：研究我国主产地栽培及野生三叶半夏的２种病毒病害发生情况和病毒种类。方法：症状观察
法，ＤＡＳＥＬＩＳＡ及ＲＴＰＣＲ。结果与结论：侵染我国半夏的病毒主要为黄瓜花叶病毒 ＣＭＶ（ｃｕｃｕｍｂｅｒｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ）
的天南星科株系和大豆花叶病毒ＳＭＶ（ｓｏｙｂｅｅｎｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ）的天南星科株系，后者与以前报道的芋花叶病毒ＤｓＭＶ
（ｄａｓｈｅｅｎｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ）和ＳＭＶ都有血清学阳性反应。人工栽培的三叶半夏普遍受到这２种病毒的侵染。其中，在
早春检测的浙江宁波栽培半夏２１个样品中ＣＭＶ与ＳＭＶ的检出率分别为７１４％和１４３％，浙江萧山栽培半夏１８
个样品中的检出率分别为１００％和４４４％；河北栽培半夏２１个样品中的检出率分别为６１９％和３３３％；安徽栽培
半夏１２个样品中的检出率分别为５００％和４１７％；四川栽培半夏１２个样品中２种病毒的检出率均为１６７％；北
京栽培半夏１６个样品中 ＳＭＶ的检出率为３１３％，未检测到 ＣＭＶ。２５个来自全国各地的野生三叶半夏样品中
ＣＭＶ和ＳＭＶ的平均检出率为２００％。
［关键词］ 三叶半夏；黄瓜花叶病毒；大豆花叶病；ＤＡＳＥＬＩＳＡ；ＲＴＰＣＲ
［中图分类号］Ｓ５６７ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００７）０８０６６４０４
［收稿日期］ ２００６０３２８
［基金项目］ 国家“８６３”项目资助（２００２ＡＡ２４１１２Ａ）
［通讯作者］ 陈集双，Ｔｅｌ：（０５７１）８６８４３１９５，Ｅｍａｉｌ：ｃｈｅｎｊｓ＠
ｚｉｓｔ．ｅｄｕ．ｃｎ
无性繁殖作物感染病毒后，由于其通过营养体
连续传代，病毒会不断积累，因而对植物生长的影响
不断加重，造成品质衰退。三叶半夏 Ｐｉｎｅｌｉａｔｅｒｎａｔａ
（Ｔｈｕｎｂ．）Ｂｒｅｉｔ．为多年生宿根草本植物，主要以块
茎和珠芽方式进行无性繁殖。之前相关报道，根据
血清学反应，认为侵然半夏的主要病毒为黄瓜花叶
病毒（ｃｕｃｕｍｂｅｒｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ，ＣＭＶ）和芋花叶病毒
（ｄａｓｈｅｅｎｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ，ＤｓＭＶ）［１］。但作者在实验中
进一步发现：用ＤＡＳＥＬＩＳＡ检测样品时，ＤｓＭＶ呈阳
性的样品，大豆花叶病毒（ｓｏｙｂｅａｎｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ，
ＳＭＶ）均为阳性。为了进一步确定该线状病毒，用
Ｐｏｔｙｖｉｒｕｓ通用引物和 ＣＭＶ基因组 ＲＮＡ３全长序列
扩增引物，通过 ＲＴＰＣＲ方法扩增出了 ＣＭＶ及 Ｐｏ
ｔｙｖｉｒｕｓ的相应片段。通过测序和序列比对进一步确
定其分别为 ＣＭＶ与 ＳＭＶ，而后者不是之前报道的
ＤｓＭＶ。本研究通过使用多种检测手段对我国几个
半夏主产区进行了病毒病害检测、分析，以期确定以
上主要病毒病的发生以及对半夏的影响。
１ 材料与方法
１．１ 材料收集与保存
２００３年１２月分别收集北京、河北、安徽、浙江宁
波等地的人工栽培三叶半夏（均为旱半夏），２００４年
１２月分别收集浙江萧山、四川等地的人工栽培半夏
及全国各地的野生三叶半夏种球（均为旱半夏），种植
于防虫温室，分别于２００４年３月与２００５年４月，半夏
生长早期进行抽样观察和病毒检测。２００５年９月对
当年检测半夏样品进行再次进行ＤＡＳＥＬＩＳＡ检测。
１．２ 人工栽培三叶半夏植株发病情况统计
在三叶半夏的生长早期对各来源地的人工栽培
半夏随机取样，对表现花叶、皱缩等典型病毒病症状
的植株进行统计，并划分５个症状等级，见表１。按
照以下公式计算病情指数（ｄｉｓｅａｓｅｉｎｄｅｘ，ＤＩ）。
病情指数＝ ∑（症状等级×代表数值）株数总和×发病最重级的代表数×１００
１．３ ＤＡＳＥＬＩＳＡ检测
病毒检测采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定方
法进行。ＤｓＭＶ，ＳＭＶ及 ＣＭＶ抗体试剂盒购自美国
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表１ 症状等级划分
病级 发病程度 代表数值
１ 无明显症状 ０
２ 叶斑驳或轻花叶 １
３ 典型花叶、沿脉变色 ２
４ 重花叶、皱缩、小叶、畸叶 ３
５ 重花叶，植株明显矮化或伴随严重畸形 ４
ａｇｄｉａ公司。取新鲜样品０１ｇ加１ｍＬＰＢＳＴ，充分
研磨，然后５０００ｒ·ｍｉｎ－１离心５ｍｉｎ。每个样品设
３个重复。反应结果用连续波长生物测读仪（Ａｍｅｒ
ｓｈａｍＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｅｖｉｃｅｓｓｐｅｃｔｒａｍａｘｐｌｕｓ３８４，ＵＳＡ）于
４０５ｎｍ波长读取 Ａ值。阳性对照采用接种 ＤｓＭＶ
和ＣＭＶ的水半夏 Ｔｙｐｈｏｎｉｕｍｆｌａｇｅｌｉｆｏｒｍｅ（Ｌｏｄｄ．）
Ｂｌｕｍｅ及接种ＳＭＶ的大豆；阴性对照采用脱病毒半
夏或健康烟草；空白对照采用 ＰＢＳＴ缓冲液。具体
操作方法参照试剂盒说明书。
１．４ 病毒基因克隆
１．４．１ ＲＮＡ模板制备 病毒 ＲＮＡ制备采用常规
Ｔｒｉｚｏｌ方法制备［２］。
１．４．２ 引物设计 ＳＭＶ参照已发表 Ｐｏｔｙｖｉｒｕｓ的通
用 引 物［３］：５′端 上 游 引 物 Ｓｐｒｉｍｅｒ：５′
ＧＧＸＡＡＹＡＡＹＡＧＹＧＧＸＣＡＺＣＣ３′（Ｘ＝Ａ，Ｔ，ＣｏｒＧ；
Ｙ＝ＴｏｒＣ；Ｚ＝ＡｏｒＧ）；３′端反向引物 Ｍ１３：５′
ＧＴＴＴＴＣＣＣＡＧＴＣＡＣＧＡＣ３′。
１．４．３ ｃＤＮＡ合成与 ＰＣＲ扩增 以提取的病毒
ＲＮＡ为模板，在Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）引导下，参照试剂盒说明
合成ｃＤＮＡ第一链。取１０μＬ逆转录产物为模板，
用引物ＺＦ和ＺＲ进行常规ＰＣＲ扩增。
１．４．４ ＰＣＲ产物克隆 扩增产物经ＰＣＲ回收试剂
盒纯化后，按 ＰｒｏｍｅｇａＴｅａｓｙ载体试剂盒说明进行
连接反应，转化到 Ｅ．ｃｏｌｉＴＧ１感受态细胞。在 ＬＢ
培养基上３７℃培养１６ｈ，挑取白色菌落，碱法提取
质粒ＤＮＡ，经ＰＣＲ扩增及ＥｃｏＲⅠ鉴定重组质粒。
１．５ 序列分析
采用 ＢｉｇＤｙｅｔｅｒｍｉｎａｔｏｒｖ２０测序试剂在 ＡＢＩ
ＰＲＩＳＭ３７７－９６型 ＤＮＡ自动测序仪上进行序列测
定。
１．６ 同源性比较
采用ＤＮＡｓｔａｒ序列分析软件对所测序列与已经
报道的１４个ＳＭＶ分离物和２个ＤｓＭＶ分离物（Ｇｅｎ
Ｂａｎｋ序 列 号：ＡＨ００８４４８，ＡＨ００８４４７，ＡＨ００８４５０，
ＡＨ００８４４９， ＡＢ１８１４９２， ＡＨ００８４０８， ＡＦ２４１７３９，
ＡＨ００８４０２， ＡＨ００８４０３， ＡＢ１８１４９３， ＡＪ６２８７５５，
ＡＪ６２８７５２，ＡＪ６２８７５４，ＡＪ６２８７５３，ＡＦ１６９８３２，Ｕ０８１２４）在
ＣＰ氨基酸水平进行同源性比较。
２ 结果与分析
２．１ 人工栽培三叶半夏发病情况统计
３月底，在杭州地区栽培的大部分三叶半夏样
品均长出２～３片叶片，许多已出现病毒侵染的典型
症状，如花叶、皱缩等。对来自不同地区的栽培三叶
半夏进行发病情况统计的结果见表２，３。
表２ 不同地区来源栽培三叶半夏自然发病情况
来源地 统计株数 发病株数 发病率／％
宁波（浙江） ２４ １７ ７０８３
萧山（浙江） ４３ ２３ ５３４９
河北 ２１ １３ ６１９０
北京 ３１ １２ ３８７１
安徽 １８ １３ ７２２２
四川 ４７ ８ １７０２
表３ 不同地区来源栽培三叶半夏病情指数
来源地 调查株数 １ ２ ３ ４ ５ 病情指数
宁波（浙江） ３５ ３ １２ １５ ５ ０ ５４２９
萧山（浙江） ６５ ２４ １０ １５１６ ５ ４１５４
河北 ２３ １ ６ ７ ９ １ ５５４３
北京 １４ ３ ６ ３ ２ ０ ４２８６
安徽 １８ ０ １６ ２ ０ １ ３３３３
四川 ４７ ３９ ８ ０ ０ ０ １７０２
由表２和表３可知，各地区来源的栽培三叶半
夏均受到不同程度的病毒感染，其中萧山（浙江）、
宁波（浙江）、河北省、安徽省等地区的栽培半夏发
病率及病情指数均较高，发病较为严重。另外，病毒
侵染的植株出现花叶症状包括叶斑驳、花叶或沿着
脉褪绿，有的出现叶表面皱缩，并伴随叶片变小或形
成畸形叶，部分植株出现明显畸形、矮化等症状。
２．２ 不同地区的栽培三叶半夏病毒检测
２００５年３月用ＤｓＭＶ和 ＣＭＶ抗血清对不同地
区的栽培半夏进行病毒检测，结果见表４。
表４ 不同地区自然发病的栽培三叶半夏病毒检测
来源地 样品数 ＤｓＭＶ ＣＭＶ
ＤｓＭＶ＋
ＣＭＶ
ＤｓＭＶ
／％
ＣＭＶ
／％
ＤｓＭＶ＋
ＣＭＶ／％
宁波（浙江） ２１ ７ １５ ７ １４３ ７１４ １４３
萧山（浙江） １８ ６ １８ ６ ４４４ １００ ４４４
河北 ２１ ７ １３ ７ ３３３ ６１９ ３３３
安徽 １２ ５ ６ ５ ４１７ ５００ ４１７
四川 １２ ２ ２ ２ １６７ １６７ １６７
北京 １６ ５ ０ ０ ３１３ ０ ０
２００５年９月，用ＳＭＶ抗血清对当年３月检测的
样品进行检验，发现 ＤｓＭＶ检测结果呈阳性的样品
在ＳＭＶ的检验中均呈阳性。但是，也没有从 ＤｓＭＶ
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检测为阴性的样品中检测到ＳＭＶ。
根据以上ＥＬＩＳＡ检测结果，所有来源地的栽培
半夏样品中均检测到病毒的存在。来自于表４中前
５个地区的栽培半夏均有ＤｓＭＶ（ＳＭＶ）与ＣＭＶ同时
检出的样品，而来自于北京的１６个栽培半夏样品中
有５个样品检测到ＤｓＭＶ（ＳＭＶ），检出率为３１３％，
但是未检测到 ＣＭＶ。ＤＡＳＥＬＩＳＡ检测结果无法确
定侵然半夏的线状病毒是 ＤｓＭＶ还是 ＳＭＶ或者是
两者复合侵然。
２．３ 不同地区的野生三叶半夏病毒检测
２００５年３月用ＤｓＭＶ与 ＣＭＶ抗血清对随机采
取的全国各地的２５个野生半夏样品 ＤＡＳＥＬＩＳＡ病
毒检测，结果见表５。
表５ 不同地区自然发病的野生三叶半夏ＤＡＳＥＬＩＳＡ
来源 ＤｓＭＶ ＣＭＶ 来源 ＤｓＭＶ ＣＭＶ
四川重庆 ＋ ＋ 湖南岳阳 － －
云南昭通 ＋ ＋ 贵州六盘水 － －
湖南张家界 ＋ ＋ 贵州息烽 － －
浙江杭州 ＋ ＋ 湖南长沙 － －
湖南桃源 ＋ － 湖南新化 － －
四川达州 － － 江西萍乡 － －
浙江宁波 － － 贵州安顺 － －
湖北神农架 － － 湖北武昌 － －
湖北十堰 － － 湖南石门 － －
湖南湘潭 － － 湖南怀化 － －
江西鹰潭 － － 浙江杭州 ＋ －
陕西安康 － ＋ 湖南永州 － －
江西弋阳 － ＋－
注：＋．阳性结果；－．阴性结果；＋－．接近于阳性结果
２００５年９月用ＳＭＶ抗血清对２００５年３月检测
的样品进行检验，发现 ＤｓＭＶ检测结果成阳性的样
品在 ＳＭＶ的检验中均成阳性。但是，也没有从
ＤｓＭＶ检测为阴性的样品中检测到ＳＭＶ。
由以上结果可知：２５个野生半夏样品中，来自
于四川重庆、云南昭通、湖南张家界、浙江杭州、湖南
桃源等地的野生半夏样品中ＤｓＭＶ（ＳＭＶ）检出率为
２００％；来自于四川重庆、云南昭通、湖南张家界、浙
江杭州、陕西安康、江西弋阳等地的野生半夏样品
ＣＭＶ检出率为２００％；四川重庆、云南昭通、湖南张
家界、浙江杭州等地来源的野生半夏样品同时检测
到２种病毒存在，复合感染率１６０％。２００５年９月
ＳＭＶ的检测结果表明，ＤＡＳＥＬＩＳＡ检测结果无法表
明侵染半夏是 ＤｓＭＶ还是 ＳＭＶ或者是两者复合侵
然。
２．４ 克隆和序列分析结果
对ＳＭＶ阳性重组质粒的插入片断进行序列测
定，获得一个１７５４ｂｐ片断。确认其包括部分 ＮＩＢ
基因，完整的 ＳＭＶＣＰ基因和３′末端非编码区。利
用ＤＮＡｓｔａｒ序列分析软件进行序列同源性分析，结
果与其文献报道的 ＳＭＶ３′末端序列吻合。序列的
ＧｅｎＢａｎｋ登录号为ＤＱ３６０８２０。
将ＤＱ３６０８２０序列与文献报道的１４个 ＳＭＶ分
离物的ＣＰ氨基酸序列进行比较的结果表明：１５个
ＳＭＶ分离物根据其序列同源性分在了２个不同的
组中。其中，１０个大豆 ＳＭＶ分离物为一组，包括
ＤＱ３６０８２０在内的５个ＳＭＶ半夏分离物为一组。相
对来说，ＤＱ３６０８２０与 ＳＭＶ大豆分离物有较大的差
异，氨基酸同源性在８０１％ ～８１３％；而１０个大豆
分离物的同源性较高，氨基酸同源性为 ９５５％ ～
１００％。ＤＱ３６０８２０与半夏分离物的同源较高，核苷
酸氨基酸同源性为９４３％ ～９５７％。ＤＱ３６０８２０与
ＤｓＭＶ的 ２个分离物 ＡＦ１６９８３２，Ｕ０８１２４的比较表
明：ＤＱ３６０８２０与 ＤｓＭＶ的同源性较低，分别为
６３７％，６４３％。１５个ＳＭＶ分离物和２个ＤｓＭＶ分
离物的ＣＰ基因氨基酸序列同源性聚类分析结果见
图１。
图１ １５个ＳＭＶ分离物及２个ＤｓＭＶ的外
基酸序列同源性聚类分析
３ 小结与讨论
本研究采用不同的检测方法检验自然侵染半夏
的病毒，ＤＡＳＥＬＩＳＡ检测时，ＤｓＭＶ阳性的样品，
ＳＭＶ检测也呈阳性，通过 ＲＴＰＣＲ克隆测序的结果
为ＳＭＶ，这和陈炯的报道也基本一致［４］。以上结果
说明 ＤｓＭＶ和 ＳＭＶ可能有相同的抗原决定簇，
ＤｓＭＶ和 ＳＭＶ同属 Ｐｏｔｙｖｉｒｕｓ，其外壳蛋白的同源性
较高，因此有相同的抗原决定簇也有可能。这同时
也说明 ＤＡＳＥＬＩＳＡ检测具有局限性。在检测一种
病毒的时候，要运用多种检测手段，才能明确病毒的
种类。本试验选择半夏生长早期，在２００４年３月与
２００５年３月，对不同来源地的三叶半夏人工栽培品
种与野生样品病毒病害调查的结果表明：不同来源
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地的栽培品种样品与野生品种样品均受到不同程度
的病毒侵染，在栽培品种样品中三叶半夏病毒的感
染率呈很明显的区域性分布。在一些病毒病害严重
的地区如萧山（浙江），病毒检出率高达１００％，且通
常是ＣＭＶ与ＳＭＶ复合侵染。这说明在三叶半夏规
模化种植过程中，一旦发生病毒侵染，就可能导致大
面积扩散，危及整个种植地。而三叶半夏以无性繁
殖为主，病毒侵染会逐代累积导致严重减产。这是
在一些三叶半夏主产地产量逐年减低的主要原因。
对野生三叶半夏的病毒检测结果可知：２种病毒在
各地的野生半夏中也普遍存在。
三叶半夏作为我国特有的一种传统药用植物，
需求量较大，能产生巨大的经济效益。由于三叶半
夏一直采用无性繁殖方式栽培繁殖，其病毒感染后
会大量积累，病害日趋严重，导致产量和品质下降，
因此有必要建立三叶半夏的脱毒及快速繁殖体系，
并通过病毒发生的生态学研究，建立避免病毒扩散
的技术体系，为提高药材生产质量服务。
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染后的叶片组织病变研究［Ｊ］．电子显微镜学报，１９９４，１３（３）：
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ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｔｗｏｖｉｒｕｓｅｓｉｎｆｅｃｔｉｎｇＰｉｎｅｌｉａｔｅｒｎａｔａｉｎＣｈｉｎａ
ＳＨＥＮＴＵＳｕｓｕ１，２，ＷＡＮＧＨａｉｌｉ１，３，ＣＨＥＮＪｉｓｈｕａｎｇ２，ＨＥＹｕｂｏ４，ＧＡＯＢｉｄａ４
（１．ＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１００２９３，Ｃｈｉｎａ；
２．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＺｈｅｊｉａｎｇＳｃｉＴｅｃｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１００１８，Ｃｈｉｎａ；
３．ＺｈｅｊｉａｎｇＷａｎｌｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎｉｎｇｂｏ３１５１００，Ｃｈｉｎａ；
４．ＣｏｌｅｇｅｏｆＢｉｏＳａｆｅｔｙＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＨｕｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０１２８，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙｖｉｒｕｓｅｓｉｎｆｅｃｔｉｎｇＰｉｎｅｌｉａｔｅｒｎａｔａｉｎＣｈｉｎａ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｓｙｍｐｔｏｍｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ，ＤＡＳＥＬＩＳＡａｎｄ
ＲＴＰＣＲｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗｅｒｅａｐｐｌｉｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔａｎｄｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｄｕｒｉｎｇａｓｕｒｖｅｙｉｎｅａｒｌｙｓｐｒｉｎｇ，ＳＭＶａｎｄＣＭＶｗｅｒｅｂｏｔｈｃｏｍｍｏｎｌｙｄｉｓｔｒｉｂ
ｕｔｅｄａｓｍａｉｎｖｉｒｕｓｅｓｉｎｆｅｃｔｉｎｇＰ．ｔｅｒｎａｔａｃｏｌｅｃｔｅｄｆｒｏｍｄｉｆｅｒｅｎｔａｒｅａｓｉｎＣｈｉｎａ．ＢｕｔＤｓＭＶｗａｓｔｈｅｖｉｒｕｓｗｈｉｃｈｉｎｆｅｃｔｅｄＰ．ｔｅｒｎａｔｅｉｎ
ｎａｔｕｒａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎ．ＴｈｅｉｎｆｅｃｔｉｏｎｒａｔｉｏｏｆｃｕｌｔｉｖａｔｅｄＰ．ｔｅｒｎａｔｅｂｙＳＭＶａｎｄＣＭＶｗｅｒｅ７１４％ ａｎｄ１４３％ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｆｏｒ２１ｓａｍｐｌｅｓ
ｃｏｌｅｃｔｅｄｆｒｏｍＮｉｎｇｂｏ，Ｚｈｅｊｉａｎｇｐｒｏｖｉｎｃｅ；１００％ ａｎｄ４４４％ ｆｏｒ１８ｓａｍｐｌｅｓｆｒｏｍＸｉａｏｓｈａｎ，Ｚｈｅｊｉａｎｇｐｒｏｖｉｎｃｅ；６１９％ ａｎｄ３３３％
ｆｏｒ２１ｓａｍｐｌｅｓｆｒｏｍＨｅｂｅｉｐｒｏｖｉｎｃｅ；５００％ ａｎｄ４１７％ ｆｏｒ１２ｓａｍｐｌｅｓｆｒｏｍＡｎｈｕｉｐｒｏｖｉｎｃｅ；１６７％ ａｎｄ１６７％ ｆｏｒ１２ｓａｍｐｌｅｓｆｒｏｍ
Ｓｉｃｈｕａｎｐｒｏｖｉｎｃｅ；３１３％ ａｎｄｎｏｎｅｆｏｒ１６ｓａｍｐｌｅｓｆｒｏｍＢｅｉｊｉｎｇ．Ａｎｄｔｈｅｉｎｆｅｃｔｉｏｎｒａｔｉｏｏｆ２５ｗｉｌｄｓａｍｐｌｅｓｆｒｏｍｄｉｆｅｒｅｎｔａｒｅａｓｏｆＣｈｉ
ｎａｉｎｆｅｃｔｅｄｂｙＳＭＶａｎｄＣＭＶｗｅｒｅｂｏｔｈ２００％．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｐｉｎｅｌｉａｔｅｒｎａｔａ；ｃｕｃｕｍｂｅｒｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ；ｓｏｙｂｅａｎｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ；ＤＡＳＥＬＩＳＡ；ＲＴＰＣＲ
［责任编辑 张宁宁
櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗
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毉
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第３２卷第８期
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