全 文 ：掉有机酸类。本实验建立测定鲜竹沥中愈创木酚的
方法简单可靠，易于操作，重复性好，可作为鲜竹沥
质量控制方法。
［参考文献］
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中愈创木酚的含量［Ｊ］．中成药，２００３，２５（６）：４８３．
［责任编辑 鲍 雷］
ＲＰＨＰＬＣ测定分心木中鞣质的水解物没食子酸
付文焕，徐璐扬，施孝金，钟明康
（复旦大学 华山医院 药剂科，上海 ２０００４０）
［收稿日期］ ２００６０６１２
［通讯作者］ 付文焕，Ｔｅｌ：（０２１）６２４８９９９９４３８１，Ｆａｘ：（０２１）
３２１２００５９，Ｅｍａｉｌ：ｗｅｎｈｕａｎｆ＠ｓｏｈｕ．ｃｏｍ
分心木为胡桃科植物胡桃 ＪｕｇｌａｎｓｒｅｇｉａＬ．果
核的干燥木质隔膜，功效固肾涩精，临床主要用于遗
精滑泄、遗溺尿频、崩中、带下［１］。目前对于该药材
的研究文献较少，其化学成分的研究一直未见报道。
初步研究表明，分心木中既有缩合鞣质，也有可水解
鞣质，干酪素法测定其药材总鞣质含量可达３％ ～
１０％［２］。但是干酪素法仅能测定总鞣质的含量，缺
乏专属性。本研究建立了 ＲＰＨＰＬＣ测定鞣质中鞣
质的水解产物没食子酸的含量的方法，可用于药材
质量控制。
１ 仪器与试药
Ｗａｔｅｒｓ２６９０高效液相色谱仪；Ｗａｔｅｒｓ２４８７双波
长紫外检测器；Ｍｉｌｅｎｎｉｕｍ３２色谱工作软件；ＤＥＬＴＡ
３２０ｐＨ计；ＢＰ２１１Ｄ型电子分析天平（德国 Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ
ＡＧ公司）；Ｍｉｌｉｐｏｒｅ超纯水系统（美国 Ｍｉｌｉｐｏｒｅ公
司）；ＳＢ５２００超声机。
没食子酸对照品（批号１１０８３１２００３０２，中国药
品生物制品检定所）；甲醇为色谱纯（Ｂ＆Ｊ，ＳＫＣｈｅｍ
ｉｃａｌｓ，批号１００７１７５３）；水为高纯水；其余试剂均为
分析纯。分心木药材购自上海虹桥饮片厂，经作者
鉴定为胡桃科植物胡桃Ｊｒｅｇｉａ果核的干燥木质隔
膜。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件［３］ ＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８色谱柱（４６ｍｍ×
２００ｍｍ，５μｍ）；流动相甲醇０２５ｍｏｌ·Ｌ－１磷酸溶
液（２０∶８０）；流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波长２７１ｎｍ；
柱温３５℃。在本实验条件下，样品中所含没食子酸
与杂质的色谱峰分离良好。没食子酸保留时间为
４４５ｍｉｎ，见图１。
２．２ 对照品溶液的制备 精密称取没食子酸对照
品１００ｍｇ，加甲醇定容至１０ｍＬ得储备液；再取上
述储备液１００μＬ，加甲醇定容至２５ｍＬ，制成４０μｇ
·ｍＬ－１的工作液，即得。
图１ 分心木中鞣质的水解产物没食子酸ＨＰＬＣ图
Ａ．对照品；Ｂ．样品；１．没食子酸
２．３ 供试品溶液的制备 精密称定分心木粉末
约０５ｇ，加３０％甲醇１０ｍＬ，超声２０ｍｉｎ，过滤，用
５ｍＬ水洗涤滤渣，合并滤液，加２５％ ＨＣｌ１０ｍＬ，
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第３２卷第８期
２００７年４月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ ８
Ａｐｒｉｌ，２００７
水浴回流２ｈ，冷却，加水定容至 １００ｍＬ量瓶中，
用０２２μｍ微孔滤膜过滤，弃去初滤液，收集续滤
液，即得。
２．４ 线性关系考察 精密吸取对照品溶液 １０，
３０，５０，７０，１００，１５０μＬ，进样，测定峰面积，以
峰面积（Ｙ）为纵坐标，没食子酸进样量（Ｘ，ｎｇ）为横
坐标，绘制标准曲线，计算回归方程得 Ｙ＝３２２６Ｘ－
４６１６，ｒ＝０９９９８，结果表明没食子酸在４０～６０２
ｎｇ进样量与峰面积的线性关系良好。
２．５ 精密度试验 精密吸取供试品溶液，连续进样
５次，每次１０μＬ，测定没食子酸的峰面积，计算ＲＳＤ
为０３％，表明仪器精密度良好。
２．６ 稳定性试验 精密吸取供试品溶液，每２ｈ进
样１次，每次进样１０μＬ，测定没食子酸的峰面积，
计算ＲＳＤ为 ２０％，表明供试品溶液在 １０ｈ内稳
定。
２．７ 重复性试验 取同批分心木粉末０５ｇ按供
试品溶液测定方法，平行制备５份供试品溶液，分别
注入高效液相色谱仪测定，测定没食子酸的峰面积，
计算ＲＳＤ为３２％，表明该方法重复性良好。
２．８ 回收率试验 精密称取已知含量分心木样品
５份，分别精密加入０２ｍＬ的没食子酸对照品溶液
（１０ｍｇ·ｍＬ－１），按供试品溶液的制备方法制备，
按上述色谱条件测定，计算加样回收率，见表１。
表１ 没食子酸回收率
称样量／ｍｇ 测得量／μｇ 回收率／％ 平均值／％ ＲＳＤ／％
２５００１ ３２３４ １０１４ １０２４ ３３
２５００２ ３１８８ ９９０
２５００１ ３３２８ １０６１
２５０００ ３３２８ １０６１
２５０００ ３２００ ９９７
注：样品中含量均为１２０７μｇ，加入量均为２０００μｇ
２．９ 样品测定 取市售３批分心木药材，按照２．３
项下方法制成供试品溶液，分别精密吸取供试品溶
液与没食子酸对照品溶液各１０μＬ，注入高效液相
色谱仪中，按上述色谱条件测定，测定峰面积，计算
样品中的没食子酸含量，结果分别为７４４０，５１３７，
４８１５μｇ·ｇ－１。
３ 讨论
３．１ 关于分心木中的游离没食子酸 应用 ＴＬＣ法
检测不到分心木中的游离没食子酸［２］，在 ＨＰＬＣ条
件下，曾取３份分心木粉末各１ｇ，分别加５０ｍＬ丙
酮、无水乙醇和乙醚，超声２０ｍｉｎ，过滤，滤液水浴蒸
干后，加甲醇定容至２５ｍＬ，作为样品溶液。精密吸
取此样品溶液与对照品溶液各１０μＬ，注入高效液
相色谱中，按文中色谱条件测定，结果证明用丙酮及
乙醚均可提取出较少量游离没食子酸，但含量极低，
约为水解没食子酸含量的０１％左右，对测定的影
响可以忽略。
３．２ 提取溶剂的选择 精密称定１ｇ分心木粉末３
份，分别加５０％甲醇、３０％甲醇、水３０ｍＬ，超声２０
ｍｉｎ，过滤，加２５％ ＨＣｌ１０ｍＬ，水浴回流２ｈ，冷却，
加水定容至２５ｍＬ容量瓶中，用０２２μｍ微孔滤膜
过滤，弃去初滤液，收集续滤液，测定其峰面积，结果
表明就提取率而言，水 ＞３０％甲醇 ＞５０％甲醇。虽
然水提取没食子酸的含量较高，但其杂质也多。综
合考虑，确定选取３０％甲醇提取。
３．３ 水解时间 精密称定分心木粉末约 ５ｇ，加
３０％甲醇１５０ｍＬ，超声２０ｍｉｎ，过滤，精密吸取 １５
ｍＬ３份，各加 ２５％ ＨＣｌ１０ｍＬ，分别水浴回流 １，
１５，２ｈ，冷却，加水定容至２５ｍＬ量瓶中，用０２２
μｍ微孔滤膜过滤，弃去初滤液，保留续滤液，测定
其峰面积，结果表明，水解２ｈ效果较好。
３．４ 加ＨＣｌ的量 精密称定分心木粉末约５ｇ，加
３０％ 甲醇１５０ｍＬ，超声２０ｍｉｎ，过滤，精密吸取１５
ｍＬ３份，分别加２５％ ＨＣｌ５，７５，１０ｍＬ，水浴回流２
ｈ，冷却，加水定容至２５ｍＬ量瓶中，用０２２μｍ微
孔滤膜过滤，弃去初滤液，保留续滤液，测定其峰面
积，结果表明，加１０ｍＬ２５％ ＨＣｌ水解效果较好。
３．５ 色谱条件的筛选 没食子酸 ＨＰＬＣ测定方法
较多，多是采用甲醇磷酸水溶液系统作为流动
相［４６］，本实验采用甲醇０２５ｍｏｌ·Ｌ－１磷酸溶液
（２０∶８０）为流动相，获得了较理想的保留时间（４５
ｍｉｎ），有利于缩短分析时间及保护色谱柱。
［参考文献］
［１］ 宋立人．现代中药学大词典［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，
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［２］ 付文焕，孙黎敏，朱 婷，等．分心木的质量标准研究［Ｊ］．中草
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［６］ 颜玉贞，唐婉清．ＨＰＬＣ法测定优克龙胶囊中没食子酸的含量
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［责任编辑 鲍 雷］
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Ａｐｒｉｌ，２００７