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Effect of Rongshi granule on renal stone formation and osteopontin expression in rat urolithiasis model

溶石颗粒剂对结石模型大鼠肾骨桥蛋白表达的影响



全 文 :溶石颗粒剂对结石模型大鼠肾骨桥蛋白表达的影响
黄 萍t 3 o杨肃文u o黄卫华t o孔繁智t o楼宜嘉v
kt1 浙江省立同德医院 o浙江 杭州 vtsstu ~u1 浙江大学 医学院 附属邵逸夫医院 o浙江 杭州 vtssty ~
v1 浙江大学 药学院 o浙江 杭州 vtssvtl
≈摘要  目的 }通过测定用药前后肾脏骨桥蛋白k²¶·¨²³²±·¬±o’°‘l的变化 o来阐明民间验方溶石颗粒剂防治肾
结石的作用机制 ∀方法 }采用乙二醇 !氯化胺法致大鼠肾结石 o同时每天 t次 ¬ª给予溶石颗粒剂 x1{ ott1y otz1w ª#
®ªp t o实验全程 ut §∀每 z §作以下测定 }尿标本以 ∞⁄ׄ法测定钙浓度 o比色法测定草酸浓度 ~肾组织 ‹∞染色 o以
免疫组化法检测大鼠肾骨桥蛋白的表达 ∀结果 }模型组大鼠肾 ’°‘的表达明显增加 o与溶剂对照组相比 Π s1st o
其中 ut §模型组 ’°‘的表达最高 o’°‘的表达为溶剂对照组的 t1w倍ks1u{t vrs1ust {l ~溶石颗粒剂各剂量组均能
明显抑制大鼠肾结石模型 ’°‘的表达k Π s1sxl o且呈现明显的量效关系 ~溶石颗粒剂各剂量组能减轻大鼠肾脏草
酸钙结晶程度 o显著降低大鼠尿钙和草酸浓度k Π s1stl ∀结论 }溶石颗粒剂可以抑制大鼠肾结石模型中 ’°‘的表
达 ∀
≈关键词  溶石颗粒剂 ~肾结石 ~骨桥蛋白 ~草酸钙
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussyltw2tt{{2sw
≈收稿日期  ussx2sz2ut
≈基金项目  浙江省分析测试基项目kswsvul
≈通讯作者  3黄萍 oר¯ }ksxztl{{|tvuy{2ys|x o∞2°¤¬¯}«∏¤±ª³º¯ ¼
ƒ ¶¬±¤q¦²°
溶石颗粒剂以祖国医学理论为指导 o根据民间
治疗泌尿系结石验方组成≈t ou  ∀溶石颗粒剂由连钱
草 !海金沙 !延胡索 !三七 !莪术 !地龙 !鸡内金等药味
组成 ∀该组方具有确切的临床疗效 ∀本课题以往研
究表明溶石颗粒剂对乙二酰胺所致大鼠泌尿系结石
具有明显的治疗和预防作用 o且同时又有一定的抗
炎 !镇痛 !利尿作用≈v ow  ∀
骨桥蛋白k²¶·¨²³²±·¬±o’°‘l是重要的尿大分子
抑制物 o是机体抵御结石形成的重要因素之一 ∀测
定了大鼠应用溶石冲剂前后肾脏 ’°‘的表达和尿
晶体成分的变化 o旨在进一步阐明溶石颗粒剂治疗
肾结石的作用机制 o为溶石颗粒剂的推广应用提供
科学依据 ∀
1 材料
111 动物 ≥⁄大鼠 o雌雄各半 o体重kuss ? usl ªo
由浙江省中医药研究院动物房提供 o清洁级 o合格证
医动字第 uus{tsstz号 ∀实验均在清洁级动物实验
室内进行 o饮用水为消毒水 ∀自由摄取食物和饮水 o
光照与黑暗为 tu «交替 o室温为 uu ∗ ux ε o相对湿
度 ys h ∀
112 药物 溶石颗粒剂k浙江省立同德医院制剂
室 o批号 stsyuxl ∀抗 ’°‘的单克隆抗体 °ŒŒŒ…ts
ktl k⁄¨ √¨ ²¯³°¨ ±·¤¯ ≥·∏§¬¨¶ ‹¼¥µ¬§²°¤ …¤±®oŒ²º¤l o
∞±∂¬¶¬²±二步法免疫组化试剂盒k⁄„Ž„公司l ∀
113 仪器 ¨¬¦¤ ⁄…荧光显微摄影系统 o¨¬¦¤
±º¬±图像分析系统 ∀
2 方法
211 模型制备 ≥⁄大鼠在代谢笼中适应环境 z §
后开始实验 o造模方法为饮用含诱石剂 ts ª#pt乙
二醇和 ts ª#pt氯化铵的自来水≈x oy  ∀
212 分组及给药方法 取健康 ≥⁄大鼠 tsw只 o体
重为kuss ? usl ªo在代谢笼中适应环境 z §后开始
实验 ∀随机分成 tv组 o每组 {只 o雌雄各半 o喂饲普
通饲料 ∀设定溶石颗粒剂 x1{ ott1y otz1w ª#®ªpt组
k其中低剂量按照体表面积折算接近临床人用量l o
临用前将溶石颗粒剂分别配成 s1x{ ot1ty ot1zw ª#
°pt的混悬液 o每日 t次大鼠¬ª上述溶液 s1st °#
ªpt ∀第 t ou ov 组分别为 t 周溶石颗粒剂 tz1w o
tt1y ox1{ ª#®ªpt组 o饮用诱石剂 t周同时¬ª给予溶
石颗粒剂高 !中 !低剂量 ~第 w组为造模 t周组 o饮用
诱石剂 t周 ~第 x oy oz组为 u周溶石颗粒剂 tz1w o
tt1y ox1{ ª#®ªpt组 o饮用诱石剂 u周同时¬ª给予溶
石颗粒剂高 !中 !低剂量 ~第 {组为造模 u周组 o饮用
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第 vt卷第 tw期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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诱石剂 u周 ~第 | ots ott为 v周溶石颗粒剂 tz1w o
tt1y ox1{ ª#®ªpt组 o饮用诱石剂 v周同时¬ª给予溶
石颗粒剂高 !中 !低剂量 ~第 tu组为造模 v周组 o饮
用诱石剂 v周 ~第 tv组为未处理组 o饮用自来水 o¬ª
给予等量生理盐水 ∀于用药第 z otw out §用代谢笼
收集各组 uw «的尿 op zs ε 冻存 ∀用 ∞⁄ׄ法测尿
钙的含量 o比色法测定尿草酸含量 ∀
213 肾组织的固定 !取材及切片 将剪取的肾脏立
刻放入 w h多聚甲醛中固定 ouw «后取出 o在肾脏中
段横取 u °°厚的组织块 o进行梯度乙醇脱水kzs h
u «o{s h u «o|x hŒu «o|x hŒŒw «otss hŒt «otss h
ŒŒv «l !用二甲苯透明 !浸蜡k于 ys ε 的烘箱内软蜡
t «o硬蜡 v «l !包埋 o¨¬·½ txtu切片机作连续切片 w
张 o厚度为 x Λ°∀
214 常规 ‹∞染色 切片以二甲苯脱蜡 o梯度乙醇
水化 ∀入苏木素染液 x °¬±ot h盐酸乙醇溶液分化 x
¶o自来水蓝化 vs °¬±ot h伊红染液 t °¬±o各级乙醇
脱水 o二甲苯透明 o中性树脂封片 ∀
215 免疫组化步骤 先将组织切片放入 ys ε 烘
箱内烘片 w «后 o再进行如下步骤 }≠切片以二甲苯
脱蜡 o梯度乙醇水化 ~用 v h ‹u ’u室温孵育 x ∗ ts
°¬±o以消除内源性过氧化物酶的活性 ~ 磷酸盐缓
冲液k°…≥l洗 ox °¬± ≅ v次 ~入 s1st °²¯#pt柠檬酸
缓冲液k³‹ y1sl o煮沸 us °¬±o冷却 us °¬±o做抗原修
复 ~°…≥洗 ox °¬± ≅ v次 ~滴加正常兔血清 o室温孵育
us °¬±~≈吸取多余血清 o滴加一抗 °ŒŒŒ…tst为 tΒ
t sss稀释 ok每次实验均设 u张阴性对照 o以 °…≥代
替一抗l ~w ε 过夜 ~…°…≥冲洗 ox °¬± ≅ v次 ~ 滴加
∞±∂¬¶¬²±液 o室温 vs °¬±~¡°…≥冲冼 ox °¬± ≅ v次 ~
¢每片滴加二氨基联苯胺k⁄„…l溶液 xs ˏo镜下观
察 v ∗ x °¬±显色 !自来水冲洗 u次 ~£苏木素复染
vs ¶o自来水蓝化 vs °¬±o各级乙醇脱水kzs h o{s h o
|x h ´ o|x h µ otss h ´ otss h µl o二甲苯透明k二
甲苯 ´ x °¬± !二甲苯 µ x °¬±l o中性树胶封片 ∀
216 显微镜观察 用 ’¯ ¼°³∏¶光学显微镜观察 tv
个组别的常规 ‹∞切片及免疫组化切片 ∀重点观察
各组免疫组化染色阳性着色分布及阳性着色的强度
变化等 o观察肾脏病理改变及草酸钙结晶情况 ∀
217 图像分析 对各组切片免疫组化的表达情
况 o先在 ¨¬¦¤ ⁄…显微镜下观察 o然后随机选取 x
个视野 o经摄像头传入电脑后 o利用 ¨¬¦¤ ±º¬±系统
进行图像分析 o测量肾组织 ’°‘的吸光度 ∀
218 统计学分析 全部数据采用 ≥°≥≥ ts1s统计软
件 o组间比较采用 ’±¨ 2 • ¤¼ „‘’∂ „ ∀检查结果以
cξ ? σ表示 o均以 Π s1sx为显著性 ∀
3 结果
311 乙二醇法造模 u周后肉眼观察大鼠肾切面情
况 u周后模型组大鼠肉眼可见肾脏明显肿大 o作
矢状切口肾切面肉眼可见肾盂 !肾盏内有米粒般大
小结石 o输尿管 !膀胱均可见大量细沙状结石和由于
膀胱结石造成两侧输尿管严重积水 ~在造模同时使
用溶石颗粒剂各剂量组 u周后 o肉眼观察大鼠肾 !输
尿管和膀胱的情况 o低剂量组大鼠可见肾皮质 !髓质
均有细沙状结石及输尿管积水 ~中剂量组大鼠可见
肾的皮质 !髓质有小量细沙状结石以及结石造成一
侧输尿管严重积水 ∀
312 uw «尿钙 !草酸含量 造模 t周后模型组 !溶
石颗粒剂各剂量组尿钙 !草酸含量明显增加 o与溶剂
对照组相比具有极显著性差异k Π  s1stl ∀各周
内 o溶石颗粒剂各剂量组尿钙 !草酸含量明显低于模
型组 o且呈明显量效关系k表 tl ∀
表 t 对大鼠尿液中钙 !草酸的影响kcξ ? σ, ν € {l
组别
剂量r
ª#®ªpt
草酸r
°°²¯#pt
钙r
°°²¯#pt
未处理 p s q|z ? s qty t qzz ? s qtz
t周溶石颗粒剂 tz qw u q|v ? s qxwtl u qxz ? s qyytl
tt qy v qs| ? s qv{tl v qyy ? s qzztl
x q{ v qu{ ? s qvytl w qwy ? s q{{tl
造模 t周 p v qvv ? t qsytl y quz ? s qyytl
u周溶石颗粒剂 tz qw v qsy ? s qwztl v qty ? s qzxtl
tt qy v qus ? s qxxtl w qut ? s qy|tl
x q{ v qxy ? s qxwtl x qx{ ? t qsutl
造模 u周 p v qzu ? s qxytl z q{v ? t qs{tl
v周溶石颗粒剂 tz qw v qtu ? s qwwtl v q|v ? s qy|tl
tt qy v quz ? s qwttl x qv| ? s q{|tl
x q{ v qw{ ? s qvytl y qwy ? t qs{tl
造模 v周 p w qsz ? s qwwtl { qx{ ? t qustl
注 }与未处理组比较tl Π s qst
313 常规 ‹∞染色光学显微镜检查 溶剂对照组
肾组织结构正常 o未见草酸钙结晶 ∀模型组肾小管
上皮肿胀 !变性 o管腔内可见伊红染色坏死物质及部
分脱落上皮细胞 ~远曲小管 !集合管和肾盂内均可见
较多透明不规则小块状的草酸钙晶体 o部分近曲小
管和间质内亦可见晶体 o多数肾脏结晶成堆分布相
互连接 o甚至连接成片 o少数散在不连接 ∀溶石颗粒
剂各剂量组与模型组相比 o肾脏组织病理改变轻微 o
大多数肾脏有散在的结晶 o部分呈广泛的不成堆分
#|{tt#
第 vt卷第 tw期
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布或形成局限结晶 o个别肾脏有散在不连接的成堆
结晶 ∀溶石颗粒剂各剂量组大鼠肾脏草酸钙结晶程
度比模型组明显减轻 ∀
314 免疫组化技术检测溶石颗粒剂对结石模型大
鼠肾 ’°‘表达的影响 实验各组 ’°‘的表达均显
著高于溶剂对照组k Π s1stl o其中 v周模型组的
表达最高 o为溶剂对照组的 t1w 倍ks1u{t vrs1ust
{l ~溶剂对照组 ’°‘在髓攀降支细段和远曲小管上
皮细胞表面表达成弱阳性 ~模型组 ’°‘在髓攀降支
细段 !近曲小管 !远曲小管和集合管都有一定量的表
达 ~肾皮质球状带表达为阴性 ∀溶石颗粒剂的各剂
量组能明显抑制结石模型大鼠肾 ’°‘的表达 o与模
型组相比具极显著性差异k Π s1stl o且溶石颗粒
剂 x1{ ª#®ªpt组 ’°‘高于 tt1y ª#®ªpt组 k Π 
s1stl ott1y ª#®ªpt组 ’°‘高于 tz1w ª#®ªpt组k Π
s1stl o呈明显的量效关系k表 u o图 tl ∀
表 u 免疫组化技术检测溶石颗粒剂对结石模型
大鼠肾 ’°‘表达的影响kcξ ? σ, ν € {l
组别 剂量rª#®ªpt 平均吸光度
未处理 p s qust { ? s qstw w
t周溶石颗粒剂 tz qw s quus | ? s qssx st oul
tt qy s quvv z ? s qssu zt ou ov owl
x q{ s quwu v ? s qssu wt ow o|l
造模 t周 s quxy u ? s qssy |tl
u周溶石颗粒剂 tz qw s quux t ? s qssv {t ox oyl
tt qy s quvw | ? s qssu vt ox oy oz ottl
x q{ s quwv z ? s qssu wt ox o|l
造模 u周 s quyy x ? s qstu {tl
v周溶石颗粒剂 tz qw s quuz t ? s qssv {t o{ o|l
tt qy s quvz v ? s qssu st o{ o| otsl
x q{ s quwy t ? s qssu {t o{l
造模 v周 s qu{t v ? s qstx xt oul
注 }与未处理组比较tl Π s qst ~与造模 t周组比较ul Π s qst ~
与 t周溶石颗粒剂 x1{ ª#®ªpt组比较vl Π s1st ~与 t周溶石颗粒剂
tz1w ª#®ªpt组比较wl Π s1st ~与造模 u周组比较xl Π s1st ~与 u周
溶石颗粒剂 x1{ ª#®ªpt组比较yl Π s1st ~与 u周溶石颗粒剂 tz1w ª#
®ªpt组比较zl Π s1st ~与造模 v周组比较{l Π s1st ~与 v周溶石颗
粒剂 x1{ ª#®ªpt组比较|l Π s1st ~与 v周溶石颗粒剂 tz1w ª#®ªpt组
比较tsl Π s1st ~与 v周溶石颗粒剂 tt1y ª#®ªpt组比较ttl Π s1sx
4 讨论
肾结石以草酸钙和磷酸钙结石为主 o占全部尿
路结 石 的 {s h ∗ {w h o其 中 草 酸 钙 结 石 占
x{1{ h ≈z  ∀草酸钙结石的形成过程复杂 o尿中草酸
{x h来源于肝脏的内源性代谢 otx h来源于肠道吸
收 ∀尿中钙和草酸盐经常处于过饱和状态 o为肾结
石的主要成分 ∀非肾结石患者由于尿中还存在着足

图 t 免疫组化染色检测溶石颗粒剂¬ª给药对结石
模型大鼠肾骨桥蛋白表达的影响k ≅ tssl
„1v周模型组 ~ …1v周溶石颗粒剂 x1{ ª#®ªpt组 ~ ≤1v周溶石颗
粒剂 tt1y ª#®ªpt组 ~⁄1v周溶石颗粒剂 tz1w ª#®ªpt组 ~∞1 溶剂
对照组 ~ƒ1t周模型组 ~棕色为阳性表达
够的抑制物 o它们可减缓晶体的生长和聚集 o提高晶
体自发形成所需的草酸钙浓度≈{  ∀低分子的抑制物
包括焦磷酸盐 !镁和柠檬酸 o大分子抑制物主要是葡
胺聚糖 !׋蛋白 !肾钙素 !尿凝血酶原片段 t !间Α胰
蛋白酶抑制因子及 ’°‘≈|  ∀正常成年人尿 ’°‘浓
度约 y ≅ tsp { °²¯ #pt o足以抑制尿中草酸盐的结
晶 ∀尽管 ’°‘确切的作用机制尚不完全清楚 o但它
在尿液中分泌和分子特征信息 o为探讨其在肾结石
形成中的作用奠定理论基础 ∀
肾脏 ’°‘由亨利氏襻 !近曲小管和肾乳头表面
上皮分泌 o因这些部位是与尿石形成有关矿物质的
高浓缩区 o’°‘于此高表达有肯定的意义 ∀ ’°‘主
要通过 Α√Βv整合素起作用 o正常情况下 Α√Βv整合素不
与 ’°‘结合 o因它存在于肾小管上皮细胞的基底膜
面≈ts  ∀但是 o在肾结石模型中 o草酸钙结晶可诱发
肾小管上皮细胞的损伤 o扰乱细胞的极性 o使整合素
取向到小管腔内表面≈tt  o这为蛋白质的固定奠定了
基础 o损伤上皮上有与 ’°‘黏附的草酸钙晶体 ∀而
草酸钙结石中 ’°‘的含量很高 o平均为 {ss ª结石
中含 tss °ª∀这一点非常支持富含天冬氨酸的 ’°‘
与草酸钙晶体之间的特异性相互作用 o及其在草酸
钙晶体结石形成中起重要作用 ∀结石中存在 ’°‘
主要反映它在液相中的保护性作用 o它抑制草酸钙
晶体生长 o但同时也被极度过饱和的草酸钙晶体包
裹进去 o成为晶体潜在的成核位点 o促进草酸钙结石
的形成 ∀本研究结果表明实验各组 ’°‘的表达均
显著高于溶剂对照组 o其中 v周模型组的表达最高 ~
溶剂对照组 ’°‘在髓攀降支细段和远曲小管上皮
细胞表面表达成弱阳性 ~模型组 ’°‘在髓攀降支细
#s|tt#
第 vt卷第 tw期
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ tw
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段 !近曲小管 !远曲小管和集合管都有一定量的表
达 ~肾皮质球状带表达为阴性 ∀溶石颗粒剂的各剂
量组能明显抑制结石模型大鼠肾 ’°‘的表达 o呈明
显的量效关系 ~且溶石颗粒剂各剂量组能显著降低
尿钙与尿草酸的含量 ~而以往研究已表明溶石颗粒
剂组能明显降低湿肾组织中草酸和钙含量及结晶面
积比 ∀提示溶石颗粒剂可有效地抑制乙二醇诱石过
程所引起的肾损害 o在体内有保护肾组织细胞的作
用 o表现为肾组织细胞器结构稳定 o肾小管腔内渗出
物减少 o肾中草酸钙结晶程度和小管上皮损伤程度
的减轻等 ∀因此推测溶石颗粒剂通过减轻草酸钙结
晶对肾小管上皮损伤的程度 o从而减少 ’°‘黏附于
受损的上皮细胞表面的机会 o减少晶体成核的位点 ∀
≈参考文献 
≈t  上海中医学院方剂学教研室 q中药临床手册 q上海 }上海人民
出版社 ot|zz }ty| q
≈u  王浴生 q中药药理与应用 q上海 }上海人民出版社 ot|{v }y|{ q
≈v  黄 萍 o黄卫华 o王贵发 o等 q溶石冲剂对大鼠泌尿系结石形
成的影响 q中国现代应用药学 oussv ouskwl }uzt q
≈w  黄 萍 o黄卫华 o孔繁智 o等 q溶石冲剂抗炎 !镇痛 !利尿作用
的药效学研究 q中国现代应用药学 oussw outkul }tsy q
≈x  中华人民共和国卫生部药政局 q新药k西药l临床前研究指导
原则汇编k药学 !药理学 !毒理学l qt||v }tst q
≈y  常连胜 o冯 陶 o李菊香 o等 q维生素 ⁄v和维生素 Žv对实验
性肾结石的影响 q中华泌尿外科杂志 ousst ouuktl }us q
≈z  吴阶平 q泌尿外科 q济南 }山东科技出版社 ot||v }ysz q
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Εφφεχτ οφ Ρονγσηι γρανυλε ον ρεναλστονεφορµατιον ανδ οστεοποντιν
εξπρεσσιον ιν ρατ υρολιτηιασισ µ οδελ
‹˜„‘Š °¬±ªt o ≠„‘Š ≥∏2º ±¨u o ‹˜„‘Š • ¬¨2«∏¤t oŽ’‘Š ƒ¤±2½«¬t o’˜ ≠¬2­¬¤u
(t . Τονγ2∆ε Ηοσπιταλ οφ Ζηεϕιανγ Προϖινιχε , Ηανγζηου vtsstu , Χηινα ;
u . Σιρ Ρυν Ρυν Σηαω Ηοσπιταλ, Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ, Ηανγζηου vtssty Χηινα ;
v . Πηαρµαχψ Χολλεγε , Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ, Ηανγζηου vtssvt Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨·«¨ ©¨©¨¦·²© •²±ª¶«¬ªµ¤±∏¯¨²± ²¶·¨²³²±·¬±k’°‘l ¬¨³µ¨¶¶¬²±q Μετηοδ : ׫¨ ∏µ¯¬¶·«¬¤¶¬¶µ¤·¶
º µ¨¨ ¬±§∏¦¨§¥¼ ·¨«¼¯ ±¨¨ ª¯¼¦²¯ k∞Šl ¤±§¤°°²±¬∏° ¦«¯²µ¬§¨ o·«¨ ¦²±·µ²¯ ªµ²∏³µ¤·¶º µ¨¨ ±²±2·µ¨¤·¨§o¤±§·«¨ •²±ª¶«¬ªµ¤±∏¯¨ªµ²∏³¶k¯ ²º2
§²¶¨ ªµ²∏³o°¬§§¯ 2¨§²¶¨ ªµ²∏³¤±§«¬ª«2§²¶¨ ªµ²∏³l º µ¨¨ ¤§°¬±¬¶·¨µ¨§•²±ª¶«¬ªµ¤±∏¯¨¬± ¤§§¬·¬²±·² ∞Š ¤±§¤°°²±¬∏° ¦«¯²µ¬§¨ ¬± ut §¤¼¶q
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¤¦¬§º µ¨¨ µ¨¶³¨¦·¬√¨¯¼ ° ¤¨¶∏µ¨§¥¼ ∞⁄ׄ ¤±§³«²·²¨ ¯¨ ¦·µ¬¦¦²¯²µ¬° ·¨µ¬¦° ·¨«²§q∞¬ª«·¤±¬°¤¯¶©µ²° ¤¨¦«ªµ²∏³º µ¨¨ ®¬¯¯ §¨¤·s oz otw o¤±§
ut §¤¼¶o®¬§±¨ ¼¶º µ¨¨ «¬¶·²¯²ª¬¦ ¬¨¤°¬±¤¨ §¤±§¬°°∏±²«¬¶·²¦«¨ °¬¦¤¯ ¶·¤¬±¬±ªq Ρεσυλτ : ׫¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²± ²©®¬§±¨ ¼ ²¶·¨²³²±·¬±¬± °²§¨¯ ªµ²∏³
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≈责任编辑 刘  
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第 vt卷第 tw期
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中 国 中 药 杂 志
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