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Experimental study of estrogenic activities of five kinds of Chinese herbal medicines

卷柏等5种中药植物雌激素活性筛选的实验研究



全 文 :卷柏等 x种中药植物雌激素活性筛选的实验研究
郑晓珂t 3 o吕鹏飞t o王玲巧u o冯卫生t o王继峰u o牛建昭u
kt1 河南中医学院 o河南 郑州 wxsss{ ~u1北京中医药大学 o北京 tsssu|l
≈摘要  目的 }对几种中药进行了植物雌激素的活性筛选 ∀方法 }采用动物实验结合报告基因技术 o对 x种中
药进行了植物雌激素活性的研究 ∀在体动物实验 }采用出生 ut §刚断乳昆明种雌性小鼠 o随机分组 o分别给予卷
柏 !松针 !石胆草 !贯众 !益母草水提取物 o阳性药为尼尔雌醇 o持续给药 z §后处死小鼠 o子宫称重 o计算子宫系数 ~
以雌激素应答元件k∞• ∞l调控的报告基因瞬时表达检测 o用荧光素酶检测试剂盒检测细胞上清液荧光素酶的活性 o
筛选出对 Α亚型雌激素受体k∞•Αl或 Β亚型雌激素受体k∞•Βl有作用的中药 ∀结果 }卷柏提取物可使小鼠子宫重增
加k Π s1stl ~且 ∞• ∞调控的报告基因瞬时表达检测中 o不论由 ∞•Α或 ∞•Β介导均具有雌激素活性k Π s1stl ∀进
一步子宫增重实验 o对卷柏的有效部位进行了筛选 o确定卷柏的有效部位为水部位和正丁醇部位 ∀结论 }卷柏及其
水部位和正丁醇部位具有雌激素活性 o且卷柏与 ∞•Β的亲和力比与 ∞•Α的亲和力大 o说明卷柏激活基因转录主要
是通过 ∞•Β介导的 ∀
≈关键词  子宫增重实验 ~报告基因 ~雌激素活性
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussyltx2tuxw2sw
≈收稿日期  ussx2ts2s|
≈基金项目   国家自然科学基金资助项目 kvsvztzzx ~
vsxtswsvusul ~国家长江学者和创新团队发展计划资助项目
kŒ• ×swtvl
≈通讯作者  3 郑晓珂 oר¯ }ksvztlyxxzx|yv o ∞2°¤¬¯}½«¨ ±ª¬®ƒ
«¤¦·¦° q¨§∏q¦±
植物雌激素根据分子结构的不同主要包括 w
类 }黄酮类 !木脂素类 !香豆素类及二苯乙烯类≈t ou   ∀
通过整体动物子宫增重实验k∏·¨µ∏¶ªµ²º·«·¨¶·l≈v 检
测雌激素活性的经典方法及报告基因技术≈w ox 对卷
柏是否具有植物雌激素作用进行了研究 ∀
本实验应用的荧光素酶k¯ ∏¦¬©¨µ¤¶¨ o ∏¯¦l 报告基
因就是以体内的雌激素信号转导途径构建的作用于
∞•Α或 ∞•Β的细胞水平药物筛选模型 ∀当有三磷酸
腺苷k„×°l存在时 o此基因编码的荧光素酶以荧光
素为底物催化荧光素氧化反应产生荧光 o发光强度
在一定范围内与酶活性成正比 o以检测荧光的强弱
来判定荧光素酶活性的高低 ∀荧光素酶分析快速 !
方便 o而且具有很好的浓度线性范围 o所以是最常
用于哺乳细胞的报告基因 ∀
本实验用以 ∞• ∞调控的报告基因为瞬时转染 ∀
以 ∞• ∞调控的报告基因瞬时表达检测中 o不同的药
物干预后 o采用荧光素酶检测试剂盒检测细胞上清
液荧光素酶的活性 o筛选出对 ∞•Α或 ∞•Β有作用的
中药≈y  ∀
1 材料与方法
111 材料
11111 药物 卷柏 Σελαγινελλα ταµαρισχινα !松针 Πι2
νυσ µασσονιανα ¤°¥!石胆草 Χοραλλοδισχυσ φλαβελλατα !
贯众 ∆ρψοπτερισσυβλαετα ≤«¬±ª ·¨‹¶∏!益母草 Λεονυρυσ
ηετεροπηψλλυσ ≥º¨ ·¨采自河南省西峡县 ∀各药材分别
用 ts倍量水煮提 u次 o过滤 o合并滤液并减压浓缩 o
真空干燥即为各药材水提物 ∀
卷柏水提物滤液减压浓缩至相对密度为 t1t左
右 o依次用乙醚 !醋酸乙酯 !正丁醇萃取 o分别得到乙
醚部位 !醋酸乙酯部位 !正丁醇部位和水部位 o将各
部位低温减压回收溶剂 o浓缩 o真空干燥备用 ∀各药
材水提物用双蒸水溶解 o其剂量见表 t o卷柏各部位
的剂量按其得膏率进行换算 ∀
阳性药为尼尔雌醇片k上海华联制药有限公
司l o制成蒸馏水混悬液 o按 t1z °ª#®ªpt#§pt给药 ∀
表 t x种中药的动物给药量 ª#®ªp t#§pt
受试药物 大剂量 小剂量
卷柏 u qw t qu
松针 ty {
石胆草 w u qw
贯众 u qw t qu
益母草 { u qw
11112 动物与细胞株及质粒 昆明种小鼠 o雌性 o
#wxut#
第 vt卷第 tx期
ussy年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ tx
„∏ª∏¶·oussy
出生 ut §k刚断乳l o体重 | ∗ tu ªo购于河南省实验
动物中心 ∀ ‹∞Žu|v细胞株和 Β2半乳糖苷酶kΒ2ª¤¯l
对照质粒 ³Βª¤¯2≤²±·µ²¯ !重组报告基因载体 ³∞• ∞2
ׄ2¯ ∏¦由军事医学科学院生物工程研究所叶棋浓
博士惠赠 ~重组人 ∞•Αk «∞•Αl表达载体 ³≤÷‘u2
«∞•Α和重组人 ∞•Βk «∞•Βl表达载体 ³≤÷‘u2«∞•Β
由东京大学医学系 ≥¤·²¶«¬Œ±²∏¨ 博士惠赠 ∀
11113 试剂 • °Œtyws培养基 !无酚红 • °Œtyws
培养基及脂质体 ¬³²©¨¦·¤°¬±¨ א usss • ¤¨ª¨ ±·kŠ¬¥¦²
Œ±√¬·µ²ª¨±公司l o荧光素酶荧光检测试剂盒k°µ²°¨ ª¤
公司l o邻硝基苯2Β2∆2半乳吡喃糖苷k’‘°Š o军事医
学科学院生物工程研究所叶棋浓博士惠赠l otzΒ2雌
二醇k∞u o≥¬ª°¤公司 o报告基因检测法中的阳性对
照l o胎牛血清kƒ…≥ o北京鼎国生物技术有限公司l o
无雌激素胎牛血清k‹¼≤¯ ²±ª公司l o其余试剂均为国
产分析纯 ∀
11114 仪器 电子读数分析天平k日本 ≥«¬°¤§½∏公
司l o二氧化碳培养箱k日本 ≥„‘≠’公司l ~水浴振荡
器k哈尔滨市东联电子技术开发公司l o倒置显微镜
k日本 ’¯ ¼°³∏¶l ~台式高速低温冷冻离心机k北京四
环科学仪器厂l o˜∂ p zxsw°≤ 型紫外2可见分光光度
计k福州健洋科技仪器有限公司l otuxs荧光检测仪
k芬兰 • ¤¯ ¤¯¦公司l ∀
112 方法
11211 小鼠子宫增重法 将小鼠按体重均衡和随
机的原则分组 o给药持续 z §∀空白对照组每日蒸馏
水 s1sv °#ªpt灌胃 ~阳性对照组每日尼尔雌醇悬浊
液 s1sv °#ªpt灌胃 ~中药各组每日 s1sv °#ªpt灌
胃 ∀最后 t次给药后 uw «o脱颈处死小鼠 o立即切取
子宫称重 o计算子宫系数k h l €子宫湿重 Α体重 ≅
tss h ∀结果与空白组相比 o考察 Π有无统计学意
义 ∀
11212 ∞• ∞调控的报告基因瞬时表达检测 转染
前 uw «将 ‹∞Žu|v细胞用含 ts h无雌激素的 ƒ…≥ !
无庆大霉素和酚红的 • °Œtyws培养基接种于 tu孔
板 o细胞数为 { ≅ tsw#°ptr孔 ∀每块板均设置不同
浓度的中药孔 !同时设置阳性药k∞ul对照孔 !溶媒对
照孔 ∀转染当天用消毒 °…≥漂洗细胞 t次 o加入 {ss
ˏ含 ts h 无雌激素的 ƒ…≥ !无庆大霉素和酚红的
• °Œtyws 培养基 o用 ³≤÷‘u2«∞•Α或 ³≤÷‘u2«∞•Βo
³∞• ∞2ׄ2¯ ∏¦和 ³Βª¤¯2≤²±·µ²¯ 共转染 ‹∞Žu|v 细胞
株 oy «后用 ∞ukw ≅ tsp y °²¯#ptl !中药总提物k饱
和溶液l干预 ouw «后 o收集细胞裂解上清液 o加入荧
光素酶反应底物k荧光素l o置于暗处 o用 tuxs荧光
检测仪检测荧光强度 ∀另取细胞裂解上清液适量加
入反应底物 ’‘°Š ovz ε 孵育 vs °¬±直至淡黄色出
现 o用 ˜∂ p zxsw°≤ 型紫外2可见分光光度计检测
Αwus o计算标准化荧光素酶活性k荧光强度rΑwusl o从
而筛选出对 ∞•Α或 ∞•Β有作用的中药≈z  ∀
11213 统计处理 实验结果均用 cξ ? σ表示 o用
≥°≥≥ts1s统计软件数据包进行 τ检验处理 ∀
2 结果
211 卷柏 !益母草 !贯众 !石胆草 !松针对性未成熟
小鼠子宫湿重的影响
首先对选定的 x种中药进行小鼠子宫增重法实
验 o筛选具有雌激素作用的中药 ∀
结果显示 o大剂量和小剂量卷柏组小鼠子宫系
数与空白组相比均有特别显著性差异k Π s1stl o
但仍远远低于阳性组k Π s1stl ∀其余各组子宫系
数与空白对照组相比无统计学意义k表 ul ∀
表 u 卷柏 !益母草 !贯众 !石胆草 !松针对性未成熟小鼠
子宫湿重的影响kcξ ? σ, ν € tsl
组别
剂量
rª#®ªpt#§pt
体重

子宫湿重

子宫系数
r h
空白 p t|qs ? vqz sqstt x ? sqssu w sqsys ? sqss|
阳性 sqsst z uuq{ ? vqy sqttt z ? sqsty y sqw|t ? sqsxt
卷柏 uqw usqt ? vqt sqswv y ? sqssz t squtz ? sqsu{uovl
t qu utqu ? vqs sqsuz x ? sqssy x sqtvs ? sqsuvuovl
益母草 { uuqv ? wqx sqstw z ? sqssw y sqsyx ? sqstvvl
u qw t{q| ? uqy sqstu z ? sqssv u sqsy{ ? sqstyvl
贯众 uqw uuqw ? vqt sqstw x ? sqssy s sqsyw ? sqsutvl
t qu uvqv ? vqv sqsty x ? sqssx w sqszs ? sqsusvl
石胆草 w tsqv ? uqu sqssz t ? sqsst z sqszs ? sqstwvl
u qw uvqv ? uq{ sqstw v ? sqssw v sqsyu ? sqsutvl
松针 ty t{qx ? vqx sqstu y ? sqssz u sqsy{ ? sqsuyvl
{ t{qz ? wq| sqstt x ? sqssv v sqsyu ? sqss{vl
注 }与空白组比较tl Π  s1sx oul Π  s1st ~与阳性组比较vl Π 
s1stk表 v ow同l
212 卷柏对报告基因载体 ³∞• ∞2ׄ2¯ ∏¦瞬时表达
的诱导作用
通过小鼠子宫增重法实验筛选出的卷柏 o对其
∞• ∞调控的荧光素酶表达的影响进行研究 ∀结果显
示 o不论由 ∞•Α或 ∞•Β介导 o∞u孔标准化后的荧光
素酶活性都高于溶剂对照孔k Π s1stl o卷柏孔标
准化后的荧光素酶活性也都高于溶剂对照孔k Π
s1stl o但仍低于 ∞u孔k Π s1stlk表 vl ∀
#xxut#
第 vt卷第 tx期
ussy年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ tx
„∏ª∏¶·oussy
表 v 卷柏对报告基因载体 ³∞• ∞2ׄ2¯ ∏¦瞬时表达的诱导作用kcξ ? σ, ν € tsl
组别
∞•Α ∞•Β
荧光强度 Αwus ∏¯¦活性 荧光强度 Αwus ∏¯¦活性
溶剂对照 w{s ? xs s qtwu ? s qstx v v{s ? vu vs{ ? uz s qtuu ? s qstv u xuz ? ts
∞u t zsv ? tu| s qtuv ? s qssv tv {wx ? t sss t xuu ? uvv s qs{v ? s qssu t{ vvz ? u vst
卷柏 xyx ? uy s qs{w ? s qssv y zuv ? uyzu ovl t svu ? vy s qszz ? s qssx tv wsu ? |usu ovl
213 卷柏不同部位对性未成熟小鼠子宫湿重影响
采用动物实验 o对筛选出具有雌激素作用的卷
柏 o依次用乙醚 !醋酸乙酯 !正丁醇萃取 o分别得乙醚
部位 !醋酸乙酯部位 !正丁醇部位和水部位 o再采用
小鼠子宫增重法实验 o进行有效部位的确认 ∀
结果显示 o大剂量和小剂量卷柏水部位组小鼠
子宫系数与空白组相比均有特别显著性差异k Π
s1stl o大剂量和小剂量卷柏正丁醇部位组小鼠子宫
系数与空白组相比也均有显著性差异k Π s1sxl o
但仍远远低于阳性组k Π s1stl ∀其余各组与空白
组相比无统计学意义k表 wl ∀
表 w 卷柏不同部位对性未成熟小鼠
子宫湿重的影响kcξ ? σ, ν € vsl
组别 体重rª 子宫湿重rª 子宫系数r h
空白 tzqu ? tqx sqss{ x ? sqssu t sqsw| ? sqss|
阳性 txqz ? wqt sqszw u ? sqst| v sqwzz ? sqszt
水部位大剂量 t{qt ? tqz sqstz x ? sqssv u sqs|z ? sqst|uovl
小剂量 tzqx ? uqu sqstw x ? sqssy { sqs{v ? sqsu|uovl
正丁醇部位大剂量 tzq{ ? vqv sqstv z ? sqssx u sqszx ? sqstytovl
小剂量 t{qs ? tq| sqstw s ? sqssv x sqsz{ ? sqst|tovl
醋酸乙酯部位大剂量 twqz ? wqw sqss{ z ? sqssu v sqsyu ? sqstzvl
小剂量 txq| ? uq| sqss{ y ? sqssv y sqsxv ? sqstxvl
乙醚部位大剂量 txqv ? uqv sqss| | ? sqssv y sqsys ? sqsutvl
小剂量 tzqu ? tq{ sqstt v ? sqssu x sqsyu ? sqsttvl
3 讨论
子宫增重实验是第一级筛选程序中检测中药中
具有植物雌激素作用的一个重要实验 o在评价物质
的雌激素活性时 o子宫实验考虑了物质的吸收 !代
谢 !与血浆蛋白结合以及药代动力学等多方面因素 o
直接反映受试药物经体内代谢后的总体生物学效
应 o在本实验中 o筛选出卷柏具有植物雌激素作用 o
且水部位和正丁醇部位为有效部位 ∀
报告基因技术是根据体内的雌激素信号转导途
径构建的报告基因载体 o细胞水平的药物筛选模型
除具备整体动物所具有的活细胞的结构和功能上的
复杂性外 o同时在实验上比整体动物更易于操作 !易
于推断实验结果 o并且消耗样品量极少 o特异性强 ∀
在卷柏对报告基因载体 ³∞• ∞2ׄ2¯ ∏¦瞬时表达的
诱导作用实验研究中 o能大致推断出卷柏的活性成
分与何种雌激素受体结合 o并作用于雌激素应答元
件k∞• ∞l来调控基因的表达 ∀本实验结果显示卷柏
与 ∞•Β的亲和力比与 ∞•Α的亲和力大 o说明卷柏激
活基因转录主要是通过 ∞•Β介导的 o也验证了植物
雌激素主要作用于 ∞•Β的普遍倾向 ∀至于何种成
分具有植物雌激素作用 o需进一步进行化学成分的
研究 ∀
在用石胆草进行整体动物实验筛选过程中 o发
现其大剂量组小鼠与其他用药组相比 o体重偏小 o其
原因尚有待进一步探讨研究 ∀
有机体是一个复杂的体系 o体外实验结果最终
仍需整体动物实验加以验证 o所以本实验应用体外
细胞实验与整体动物实验相结合共同来验证受试药
物的雌激素活性 o结果更加准确可靠 ∀
≈参考文献 
≈t  臧 晶 o王继峰 o牛建昭 q大豆异黄酮类成分对去卵巢大鼠脂
质代谢的影响 q中国药科大学学报 oussw ovxkvl }uxw q
≈u  唐传核 o杨晓泉 o彭志英 q植物雌激素研究概况k) l ) ) ) 化学
结构 o分类以及在食品中的含量 q中国食品添加剂 o ussu o
kvl }wv q
≈v  • «¬·¨± ° o•∏¶¶¨¯¯ ∞o‘¤©·²¯¬± ƒ q∞©©¨¦·¶²©¤±²µ°¤¯ o«∏°¤±2¦²±2
¦¨±·µ¤·¬²±o³«¼·²¨ ¶·µ²ª¨ ± §¬¨·²± µ¤·∏·¨µ¬±¨ ªµ²º·«q≥·¨µ²¬§¶ot||u o
xz }|{ q
≈w  …¯¤¶¥¨µª • qŒ°¤ª¬±ª ª¨ ±¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²± ¤±§ ±¨§²ª¨ ±²∏¶ °²¯ ¦¨∏¯¤µ³µ²2
¦¨¶¶¨¶} °²¯ ¦¨∏¯¤µ¬°¤ª¬±ªq  ≤ µ¨¨¥ …¯²²§ ƒ¯ ²º  ·¨¤¥o ussu o uu
ktsl }ttxz q
≈x  …¯¤¶¥¨µª • Š o Š¨ ²¯√¤±¬×­∏√¤­¨√ q Ιν ϖιϖο °²¯ ¦¨∏¯¤µ2ª¨ ±¨ ·¬¦¬°¤ª2
¬±ªq≤¨¯¯ …¬²¦«¨ ° ≥∏³³¯ oussu ov| }tzu q
≈y  王玲巧 q基于检测报告基因的雌激素受体调节剂研究模型的
建立及应用 }≈学位论文  q北京 }北京中医药大学 oussv q
≈z  王玲巧 o吕秋军 o牛建昭 o等 q基于雌激素应答元件转录调节
的药物筛选模型的建立 q中国中药杂志 oussv ou{kyl }xvy q
#yxut#
第 vt卷第 tx期
ussy年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ tx
„∏ª∏¶·oussy
Εξπεριµενταλστυδψ οφ εστρογενιχ αχτιϖιτιεσ οφ φιϖε κινδσ
οφ Χηινεσε ηερβαλ µεδιχινεσ
‹∞‘Š ÷¬¤²2®¨ t o∂ °¨ ±ª2©¨¬t o • „‘Š ¬±ª2 ¬´¤²u oƒ∞‘Š • ¬¨2¶«¨ ±ªt o • „‘Š ¬2©¨ ±ªu o‘Œ˜ ¬¤±2½«¤²u
(t . Ηεναν Χολλεγε οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Ζηενγζηου wxsss{ , Χηινα ;
u . Βειϕινγ Υνιϖερσιτψ οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Βειϕινγ tsssu| , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ √¨¤¯∏¤·¨·«¨ ¶¨·µ²ª¨ ±¬¦¤¦·¬√¬·¼ ²©¶¨√ µ¨¤¯ ®¬±§¶²©≤«¬±¨ ¶¨ «¨µ¥¤¯ ° §¨¬¦¬±¨ ¶q Μετηοδ : ˜¶¨ ½²²³¨µ¼ ¤±§µ¨2
³²µ·¨µª¨ ±¨ ·¨¦«±¬´∏¨ ·²¶·∏§¼·«¨ ¶¨·µ²ª¨ ±¬¦¤¦·¬√¬·¼ ²©©¬√¨≤«¬±¨ ¶¨ «¨µ¥¤¯ ° §¨¬¦¬±¨ ¶q²²³¨µ¼}º ¤¨±¯¬±ª©¨ °¤¯¨Ž∏±°¬±ª°¬¦¨ º ¬¨ª«·|2tu ª
º µ¨¨ ¤§°¬±¬¶·µ¤·¨§¥²·¤±¬¦¤¯ ¬¨·µ¤¦·¶²© Σελαγινελλαταµαρισχινα , Πινυσ Μασσονιανα , Χοραλλοδισχυσφλαβελλατε , ∆ρψοπτερισσυβλαετα ¤±§ Λεονυρυσ
ηετεροπηψλλυσ,·«¨ ³²¶¬·¬√¨¦²±·µ²¯ ªµ²∏³ º¬·«‘¬¯¨ ¶·µ¬²¯ ·¤¥¯ ·¨¶¤±§¦²±·µ²¯ ªµ²∏³ º¬·« º¤·¨µoµ¨¶³¨¦·¬¨ ¼¯ q ’±·«¨ ¬¨ª«·«§¤¼o·«¨ ¤±¬°¤¯¶º µ¨¨
¶¤¦µ¬©¬¦¨§¤±§·«¨ ∏·¨µ¬º µ¨¨ ¶¨³¤µ¤·¨§¶²¯¨¯¼ ¤±§º ¬¨ª«¨ §q• ³¨²µ·¨µª¨ ±¨ ·¨¦«±¬´∏¨ }Œ±§∏¦¨ ·«¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²± ²©µ¨³²µ·¨µª¨ ±¨ ¦²±·µ²¯¯¨ §¥¼ ∞• ∞
¤±§ ° ¤¨¶∏µ¨ ·«¨ ¤¦·¬√¬·¼ ²© ∏¯¦¬©¨µ¤¶¨ ²± ¦¨¯¯ . ¶¦¯ ¤¨µ¶∏³¨µ±¤·¤±·q Ρεσυλτ : ׫¨ ¥²·¤±¬¦¤¯ ¬¨·µ¤¦·¶²© Σ . ταµαρισχινα ¦¤±¬±¦µ¨¤¶¨ ·«¨ ∏·¨µ¬±¨
º ¬¨ª«·¶²© °¬¦¨ k Π s1stl ~Œ±·«¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²± ²©µ¨³²µ·¨µª¨ ±¨ ¦²±·µ²¯¯¨ §¥¼ ∞• ∞o∞¬·«¨µ∞•Α²µ∞•Β. ¶«¤¶ ¶¨·µ²ª¨ ±¬¦¤¦·¬√¬·¼ k Π s1stl q
ƒ²¯ ²¯º ¬±·«¨ ½²²³¨µ¼ º¨©¬±§·«¨ º¤·¨µ³¤µ·¤±§·«¨ ±2¥∏·¤±²¯ ³¤µ·²© Σ . ταµαρισχινα ¤µ¨ ·«¨ ·º²¤¦·¬√¨³¤µ·¶q Χονχλυσιον : Σ . ταµαρισχινα
¤±§¬·. ¶º¤·¨µ³¤µ·¤±§ ν2¥∏·¤±²¯ ³¤µ·«¤√¨ ¶¨·µ²ª¨ ±¬¦¤¦·¬√¬·¬¨¶o ©¨©¨¦·²± ∞•Β¬¶ªµ¨¤·¨µ·«¤± ∞•Αq
[ Κεψ ωορδσ] ∏·¨µ∏¶ªµ²º·«·¨¶·~µ¨³²µ·¨µª¨ ±¨ ~ ¶¨·µ²ª¨ ±¬¦¤¦·¬√¬·¼
≈责任编辑 刘  
≈收稿日期  ussx2s|2tu
≈基金项目   国家科技部 {yv 计划新药博士基金项目
kussv„„uvxt{l
≈通讯作者  3陈子 oר¯ }ksutlxtvuuw|y o∞2°¤¬¯}½­¦«¨ ±ut ƒ ¼¤2
«²²q¦²° q¦±
蓝萼甲素对小鼠脾细胞 ׫tr׫u型 x种细胞
因子水平的影响
陈子 t 3 o李云森u o周吉燕t o王峥涛t
kt1 上海中医药大学 中药研究所 o上海 ustusv ~u1 中国科学院 上海药物研究所 o上海 ustusvl
≈摘要  目的 }探讨蓝萼甲素对小鼠脾细胞 ׫tr׫u型细胞因子水平的影响 ∀方法 }采用 ≤¼·²° ·¨µ¬¦…¨ ¤§ „µµ¤¼
k≤…„l法检测蓝萼甲素对小鼠脾细胞 ׫tr׫u型 x种细胞因子kŒ2u oŒƒ‘2Χoבƒ2ΑoŒ2w oŒ2xl水平的影响 ∀结果 }蓝
萼甲素对 ≤²±„诱导的 ׫t细胞来源的细胞因子kŒ2u oŒƒ‘2Χoבƒ2Αl 和 ׫u细胞来源的细胞因子kŒ2w oŒ2xl的产生
均有显著的抑制作用 o且蓝萼甲素对 ׫t细胞来源的细胞因子的抑制作用要强于 ׫u细胞来源的 ~对未经 ≤²±„活
化的小鼠脾细胞 o蓝萼甲素对 Œ2u oŒƒ‘2Χ和 בƒ2Α的产生有抑制作用 o而对 Œ2w oŒ2x则有促进作用 ∀结论 }蓝萼甲
素的免疫抑制作用可能与其对 ׫tr׫u型细胞因子的影响有关 ∀
≈关键词  蓝萼甲素 ~脾细胞 ~׫tr׫u ~细胞因子
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussyltx2tuxz2sw
蓝萼甲素kŠ„l是由唇形科香茶菜属植物香茶
菜 Ραβδοσια αµετηψστοιεδσ k…¨ ±·«1l ‹¤µ¤中分离提取
出的二萜化合物 ∀前期的实验研究表明 o香茶菜能
显著抑制细胞免疫反应而增强体液免疫反应 ∀应用
药理与化学密切合作的研究方法 o以活性评价为导
#zxut#
第 vt卷第 tx期
ussy年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ tx
„∏ª∏¶·oussy