全 文 ：野山楂根含药血清对弱精子症患者精子运动
参数影响的体外研究
胡 廉，熊承良
（华中科技大学 同济医学院 计划生育研究所，湖北 武汉 ４３００３０）
［摘要］ 目的：研究野山楂根含药血清体外对弱精子症患者精子运动能力的影响。方法：将１６例弱精子症患
者精子与野山楂根含药血清共同孵育，在５，１５，３０，６０，１２０ｍｉｎ采用计算机辅助精子分析系统（ＣＡＳＡ）检测精子活
动率和精子运动参数。结果：含药血清在５，１５ｍｉｎ即能显著提高弱精子症患者精子前向运动百分率（Ｐ＜００５），在
６０ｍｉｎ和１２０ｍｉｎ时使精子活动率和前向运动百分率有极显著的增加（Ｐ＜００１），其刺激作用呈现出一定的时效关
系。结论：野山楂根在体外能改善弱精子症患者精子运动功能，可能对弱精子症有一定的治疗功效。
［关键词］ 野山楂根；含药血清；弱精子症；精子运动
［中图分类号］Ｒ２８５６ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００６）０４０３３３０４
［收稿日期］ ２００５０１１０
［基金项目］ 湖北省计划生育委员会资助项目（ＪＳ２００３０１）
［通讯作者］ 熊承良，Ｔｅｌ：（０２７）８３６９２６５１，Ｆａｘ：（０２７）８３６３４３７４，
Ｅｍａｉｌ：ｃｌｘｉｏｎｇ＠ｍａｉｌｓ．ｔｊｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
弱精子症是男性不育症的常见病因之一，体外
添加化学药物改善此类患者精子质量的研究一直为
生殖领域所关注。目前，有学者发现中医药也具有
提高精子体外运动能力的功效，一些传统方剂和生
药的体外研究逐渐成为热点。
野山楂为蔷薇科山楂属植物，民间验方及现代
研究均表明其具有消食化积、行气散瘀、止泻止痢、
镇痛、降压降脂等多种功效［１，２］。但就野山楂对生
殖系统的药理作用，尚未见文献报道。本实验采用
血清药理学方法，通过弱精子症患者的精子与中药
野山楂根的含药血清共同孵育，运用计算机辅助精
子分析系统（ＣＡＳＡ）在不同的时间段观察含药血清
对精子运动参数的影响，对野山楂根的药效学做初
步探讨。
１ 材料与方法
１１ 动物 成年雄性 Ｗｉｓｔａｒ大鼠，１０～１２周龄，体
重２５０～３００ｇ，合格证号：ＳＣＸＫ（鄂）２００４０００７，由华
中科技大学同济医学院实验动物中心提供。
１２ 野山楂根水煎剂的制备 取野山楂 Ｃｒａｔａｅｇｕｓ
ｃｕｎｅａｔａＳｉｅｂｅｔＺｕｃｃ根洗净晾干，切片，称取 １００ｇ，
加双蒸水常压下煎煮２次，每次约２ｈ，用纱布过滤
收集滤液，将２次滤液合并，浓缩至５０ｍＬ制成每毫
升含生药２ｇ的水煎剂。
１３ 含药血清的制备 根据体表面积折算，给予大
鼠相当于５倍临床等效剂量（９ｇ·ｋｇ－１）药物灌胃。
空腹给药，每日２次，连续３ｄ，末次给药后２ｈ股动
脉取血。室温下静置２ｈ，２５００ｒ·ｍｉｎ－１×１０ｍｉｎ，离
心分离血清。于５６℃水浴灭活３０ｍｉｎ，分装后－２０
℃保存。对照组每日蒸馏水灌胃，血清同上处理。
１４ 精液标本及处理 ２００４年５～７月在本所生殖
医学门诊就诊的不育症患者，年龄２５～３５岁，不育年
限＞１年，禁欲３～５ｄ，手淫法采集精液于清洁玻璃容
器内，３０ｍｉｎ液化后立即测定，按照ＷＨＯ推荐的实验
方法及标准［３，４］选取弱精子症精液标本１６例。
１５ 方法 将精液标本分为 ３组，每组 １００μＬ，置
于细胞培养板中。分别加入１０μＬ空白血清和含药
血清，原精液组作为对照。３７℃水浴箱孵育，分别
于５，１５，３０，６０，１２０ｍｉｎ用ＣＡＳＡ分析仪进行精子
运动参数分析。
１６ 观察指标 精子活动率（ｍｏｔｉｌｉｔｙ）、前向运动百
分率（ａ＋ｂ级精子百分率）、直线速度、曲线速度、平
均路径速度、头部侧摆幅度。
１７ 统计学分析 所有数据均用珋ｘ±ｓ表示，采用
ＳＡＳ８１软件包对各组数据进行方差分析（ＡＮＯ
ＶＡ），组间比较采用ＳＮＫ检验。
２ 结果
２１ 精子活动率 弱精子症患者精子与血清共孵
育后，精子活动率均高于原精液组，但空白血清组在
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各时间段上与原精液组差异无统计学意义（Ｐ＞
００５），而含药血清组在３０，６０，１２０ｍｉｎ活动率分别
提高 ６１７４％，９３４８％和 １００５４％，显著高于原精
液组 （Ｐ＜００５或 Ｐ＜００１），且在６０ｍｉｎ和１２０ｍｉｎ
时间段上，含药血清组与空白血清组也存在显著性
差异（Ｐ＜００５）。
２２ 精子前向运动百分率 血清组精子前向运动
百分率明显高于原精液组。其中，含药血清组在各
时间点差异均有统计学意义（Ｐ＜００５）。而空白血
清组仅在 １５ｍｉｎ有统计学差异。含药血清组与空
白血清组比较，５ｍｉｎ和１２０ｍｉｎ差异有显著性（Ｐ＜
００５），６０ｍｉｎ差异为极显著性（Ｐ＜００１）。
２３ 其他精子运动参数 各组直线速度、曲线速
度、平均路径速度、头部侧摆幅度在各时间点上均无
统计学差异。
２４ 时效性 随着孵育时间的延长，含药血清作用
渐趋明显。５ｍｉｎ和１５ｍｉｎ时，含药血清组精子活动
率与原精液组无统计学差异（Ｐ＞００５）；３０ｍｉｎ时，
两者有显著性差异（Ｐ＜００５），而６０ｍｉｎ和１２０ｍｉｎ
时，差异具有极显著性（Ｐ＜００１）。两组前向运动
百分率在 ５ｍｉｎ和 １５ｍｉｎ出现显著性差异（Ｐ＜
００５），３０，６０，１２０ｍｉｎ时为极显著差异（Ｐ＜００１）。
不同时间段野山楂根含药血清对弱精子症患者精子
运动参数的影响见表１。
表１ 不同时间段野山楂根含药血清对精子运动功能的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝１６）
时间
／ｍｉｎ
组别
精子活动率
／％
直线速度
／μｍ·ｓ
－１
曲线速度
／μｍ·ｓ
－１
平均路径速度
／μｍ·ｓ
－１
头部侧摆幅度
／μｍ·ｓ
－１
前向运动率（ａ＋ｂ）
／％
５ 原精液组 ２８．１１４±１２．２７５ ２３．３３０±５．９９１ ３６．６８８±６．３４８ ２５．７１７±５．８４６ ３．１２３±１．０２２ ２２．９２３±８．６８９
空白血清组 ２８．７２９±８．６５１ ２５．０９３±５．４３３ ３８．４０５±７．２０１ ２７．４２３±５．４３７ ３．１３４±１．１７８ ２３．９１１±６．３０１
含药血清组 ３６．０３４±１０．９１１ ２４．６４８±５．２４１ ３７．９４４±６．４４８ ２７．０１３±５．１４１ ２．９５４±０．９８９ ３０．６９９±８．８５６１，３）
１５ 原精液组 ２２．４５３±１１．２０８ ２１．０２１±６．２８６ ３４．５３６±６．７４３ ２３．５３４±５．８８６ ３．３２１±１．３５９ １７．１９０±６．８３９
空白血清组 ２７．５０４±８．８４３ ２３．５４９±４．９９３ ３７．３６９±６．６２２ ２６．０２６±５．０８５ ３．０３６±１．０８８ ２２．３８８±６．１８１１）
含药血清组 ３０．０４３±１０．３８４ ２４．２８６±４．５４８ ３７．９７８±６．１７４ ２６．６７４±４．５６９ ３．１１０±０．９９６ ２４．９４１±８．３６３１）
３０ 原精液组 １８．９７６±９．８６４ １９．０３２±６．４９９ ３２．７５６±７．９７９ ２１．７１４±６．３６３ ３．４９３±１．０５５ １４．６５６±７．７５８
空白血清组 ２４．９７６±８．５１０ ２１．９０４±６．５８６ ３５．１４６±７．６４９ ２４．１２６±６．３５５ ３．２４５±０．７９６ ２０．４３６±７．６２４
含药血清组 ３０．６９２±１４．０５４１） ２２．５８０±５．６６１ ３６．４３７±６．１８１ ２５．０５４±５．２５４ ３．４２０±０．８０２ ２５．８２４±１１．７５７２）
６０ 原精液组 １４．４０１±９．４９２ １７．６２７±４．１６１ ３０．２８０±５．７７１ １９．７８６±４．１６０ ３．３９４±１．０４３ １１．０７３±６．７１３
空白血清组 １８．３９４±９．１３９ １９．６３３±５．６９３ ３２．７０１±５．９８６ ２１．７８８±５．３０９ ３．３４６±０．８７１ １４．９０７±６．７３３
含药血清组 ２７．８６３±１１．４９７２，３）２０．５８８±５．８６８ ３３．８７０±６．９１８ ２２．８８９±５．６４５ ３．３３６±０．９０８ ２２．８４４±１０．３４７２，４）
１２０ 原精液组 ９．０１０±４．６２０ １４．１５２±３．８２１ ２６．９１４±５．６４０ １６．７５０±３．６２５ ３．４５３±１．０４２ ５．７３０±４．１５５
空白血清组 １３．０１５±６．０６８ １５．６５４±２．８２７ ２８．５８１±４．２６９ １８．０９１±２．８３４ ３．３２７±０．７５８ ９．６４４±５．３７９
含药血清组 １８．０６９±９．１４１２，３） １７．４１４±４．４８４ ３０．５３２±５．８４２ １９．６０９±４．１６３ ３．８１２±０．８９８ １４．１６５±７．９９６２，３）
注：与原精液组比较１）Ｐ＜００５，２）Ｐ＜００１；与空白血清组比较３）Ｐ＜００５，４）Ｐ＜００１
３ 讨论
中医药治疗男性弱精子症在我国有着悠久的传
统。应用中药提取物研究体外精子运动也具有一定
的临床意义。但是中药的成分复杂多样，粗提物中
的杂质能非特异性的干扰精子运动，另一方面，机体
对中药诸成分有选择性的吸收代谢作用，粗提物并
不能完全代表中药在体内起作用的成分。用含药血
清进行体外实验可以避免中药粗制剂中干扰因子的
影响，接近于中药在体内环境中产生生理效应的过
程，因而能更好地体现中药药理研究的科学性和可
信性［５］。
由实验结果可见，血清组各运动参数值普遍高
于原精液组。考虑灭活血清中某些成分有营养精
子、增强代谢和刺激精子运动的功能。但是随着孵
育时间的延长，空白血清与含药血清的区别逐渐明
显。空白血清改善精子运动参数呈一过性，维持时
间短暂。而含药血清能在较长时间维持精子活动率
和前向运动百分率，这就体现了药物本身对精子的
影响作用。
近来研究表明，某些弱精子症患者精子活力低
下与精浆中抗氧化酶水平低于正常有关［６］。Ｖｅｒｍａ
等发现正常精子在体外培养过程中，精子活动率和
存活率逐步下降，精浆中丙二醛（ＭＤＡ）含量相应增
高，而在培养体系中加入维生素Ｅ孵育６ｈ后，精子
活动率、存活率均较对照组明显提高，培养体系中
ＭＤＡ含量也相应有所下降［７］。这表明抗氧化物在
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维持精子体外运动能力方面具有十分重要的意义。
目前对山楂属植物的研究表明，山楂的果实、
根、茎、叶中都含有寡聚花色素原（ＯＰＣ），ＯＰＣ属于
黄酮类，是一种天然的抗氧化物，具有捕获氧自由基
的功能［８］。通过对几种山楂的比较研究发现，野山
楂的黄酮含量较商品山楂（北山楂）高［９］，因而其可
能具有更高的抗氧化功效。本实验结果显示，野山
楂根含药血清对弱精子症患者精子运动参数有明显
的改善作用，这一作用很可能是通过野山楂根中的
黄酮清除自由基、调节精液氧化抗氧化体系平衡来
实现的。当然，也不排除其他有效成分促进精子运
动的作用。各运动参数中，以最能表现精子运动功
能的前向运动百分率影响最大，而其他表现运动轨
迹的参数则无明显改变。这一现象还有待药物体内
实验做进一步研究。
总之，野山楂根影响精子运动功能的研究在国
内外尚属首次。其改善精子运动功能的作用机制还
有待深入探讨。如果能够从其原药中分离出有效成
分，鉴定其结构和有效部位用于男性不育症的治疗，
将有广泛和深远的意义。
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ｏｎｈｕｍａｎｓｐｅｒｍｍｏｔｉｌｉｔｙｐａｒａｍｅｔｅｒｓｉｎｖｉｔｒｏ
ＨＵＬｉａｎ，ＸＩＯＮＧＣｈｅｎｇｌｉａｎｇ
（ＦａｍｉｌｙＰｌａｎｎｉｎｇＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＴｏｎｇｊｉＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｅｇｅ，ＨｕａｚｈｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｗｕｈａｎ４３００３０，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｒｏｏｔｏｆｍｅｄｉｃａｔｅｄｓｅｒｕｍｗｉｔｈｔｈｅｒｏｏｔｏｆＣｒａｔａｅｇｕｓｃｕｎｅａｔａｏｎｈｕｍａｎｓｐｅｒｍｍｏｔｉｌｉｔｙ
ｉｎｖｉｔｒｏ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｓｐｅｒｍｓｐｅｃｉｍｅｎｓｏｆ１６ａｓｔｈｅｎｏｓｐｅｒｍｉａｐａｔｉｅｎｔｓｗｅｒｅｃｏｉｎｃｕｂａｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｍｅｄｉｃａｔｅｄｓｅｒｕｍｉｎｖｉｔｒｏ．Ｔｈｅｓｐｅｒｍｍｏｔｉｌｉｔｙ
ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｗｅｒｅｅｖａｌｕａｔｅｄｂｙｃｏｍｐｕｔｅｒａｓｓｉｓｔｅｄｓｅｍｅｎａｎａｌｙｓｉｓ（ＣＡＳＡ）ａｔ５，１５，３０，６０ｍｉｎａｎｄ１２０ｍｉｎ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅ
ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｍｅｄｉｃａｔｅｄｓｅｒｕｍｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｓｐｅｒｍｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅｍｏｔｉｌｉｔｙｉｎ５ａｎｄ１５ｍｉｎ（Ｐ＜００５），ａｎｄｔｈｅｍｏｔｉｌｉｔｙａｎｄ
ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅｍｏｔｉｌｉｔｙｗｅｒｅｂｏｔｈｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎ６０ａｎｄ１２０ｍｉｎ（Ｐ＜００１）．Ｔｈｅｅｘｃｉｔａｔｏｒｙｅｆｅｃｔｏｆｔｈｅｍｅｄｉｃａｔｅｄｓｅｒｕｍｏｎｔｈｅｓｐｅｒｍ
ｍｏｔｉｌｉｔｙｅｘｈｉｂｉｔｅｄｉｎａｔｉｍｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔｍａｎｎｅｒ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＲｏｏｔｏｆＣ．ｃｕｎｅａｔａｍｅｄｉｃａｔｅｄｓｅｒｕｍｃａｎｉｍｐｒｏｖｅｓｐｅｒｍｍｏｔｉｌｉｔｙｏｆａｓｔｈｅｎｏｓｐｅｒ
ｍｉａｐａｔｉｅｎｔｓｉｎｖｉｔｒｏ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｒｏｏｔｏｆＣｒａｔａｅｇｕｓｃｕｎｅａｔａ；ｍｅｄｉｃａｔｅｓｅｒｕｍ；ａｓｔｈｅｎｏｓｐｅｒｍｉａ；ｓｐｅｒｍｍｏｔｉｌｉｔｙ
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殺
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［责任编辑 古云侠］
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