全 文 ：≈收稿日期  ussy2st2ts
≈基金项目  湖北省教育厅重点项目k||„szxl
≈通讯作者  3杨胜兰 oר¯ }tv||xyszs||
疏肝和胃汤对功能性消化不良模型大鼠胃窦¬‘’≥及 ≥°表达的影响
杨胜兰t 3 o刘松林u
kt1 华中科技大学 同济医学院 附属协和医院 o湖北 武汉 wvssuu ~
u1 湖北中医学院 经方应用研究所 o湖北 武汉 wvssytl
前期研究证实≈t2v  o疏肝和胃汤对功能性消化不
良kƒ⁄l大鼠胃肠动力的排空具有促进作用 ∀进一
步的研究发现 o该方对胃肠肽及神经递质调节作用
是其作用机制之一 ∀一氧化氮k‘’l是胃肠道主要
的非胆碱能非肾上腺素能抑制性神经递质 o它广泛
分布于胃肠道且含量较高 o对胃肠道运动具有抑制
作用 ∀作为一氧化氮合成酶 o一氧化氮合酶k‘’≥l
广泛存在于胃肠道中 ∀ °物质k≥°l广泛分布于中
枢 !肠神经系统以及胃肠壁内 o主要作用在于促进胃
肠平滑肌收缩 o促进胃肠蠕动 ∀本实验应用免疫组
织化学方法观察疏肝和胃汤对肝胃不和型 ƒ⁄大鼠
胃窦¬‘’≥及 ≥°表达的影响 o以阐释疏肝和胃汤促
胃动力作用机制 ∀
1 材料
111 动物 健康 •¬¶·¤µ大鼠 o体重kt{s ? usl ªo雌
雄各半 o购于华中科技大学同济医学院实验动物学
部 o合格证号 }医动字第 t|2sxs号 ∀
112 药物 疏肝和胃汤主要由柴胡 !枳实 !广木
香 !砂仁 !焦白术 !黄连等药物组成k全方生药 tss
ªl o购自湖北中医学院附属门诊部 ∀药物制备方法 }
先提取挥发油 o容器另存 ~然后用水煮醇沉法 o将药
物煎煮 v次 o滤液初步浓缩后醇沉 o静置 o过滤 o回收
乙醇 o水浴浓缩滤液至 wss h ∀取挥发油 !药液和少
量山梨醇甲酯共同研磨 o分别用蒸馏水配制成
tss h ouss h owss h的药液 o分装 !灭菌 ow ε 保存 ∀
阳性对照药莫沙比利k鲁南制药股份有限公
司l o批号 susys{ o使用前用生理盐水配成 s1v °ª#
°pt混悬液 ∀
113 试剂 兔抗鼠¬‘’≥抗体 !°物质抗体k武汉博
士德生物工程有限公司提供l ∀即用型羊抗鼠 ≥„…≤
试剂盒 o⁄„…显色试剂盒 o°²¯¼22¼¶¬±¨ o⁄∞°≤ 均购
自 ≥¬ª°¤公司 o其余为国产分析纯 ∀
114 主要仪器 …÷ p ys型 ’¯ ¼°³∏¶光学显微镜k日
本l o‹°Œ„≥ p tsss型医学彩色图像分析系统k同济
医科大学千屏影像工程公司l ∀
2 方法
211 模型制备及分组 取大鼠 ys只 o随机分成空
白对照组 !模型组 !疏肝和胃汤大 !中 !小剂量组和莫
沙比利组 o每组 ts只 ∀除对照组外 o其余大鼠参照
文献报道的方法用夹尾激怒法制作肝胃不和型 ƒ⁄
大鼠模型 o至第 z天 o大鼠出现紧张 !焦虑反应 o进食
量明显减少 o与文献报道一致≈u2w  o即造模成功 ∀
212 给药方法及样本处理 依照体表面积法≈x  o疏
肝和胃汤大 !中 !小剂量组分别为 vy ot{ o| ª#®ªpt ~
莫沙比利组给已配制的莫沙比利 t1{ °#uss ªpt
ks1xw °ªl ~空白对照组及模型组以等体积生理盐水
灌胃 ∀每天给药 t次 o连续 v §∀第 w天给药前禁食
tu «o给药 ys °¬±后 o用 us h乌拉坦 s1ssx °#ªpt麻
醉 o迅速取大小约 v °°u的胃窦组织 ow h的多聚甲
醛中固定 wx ∗ |s °¬±os1t °°²¯ #pt°…≥换液 t次
后 o常规酒精脱水 o石蜡包埋 o切片厚约 y ∗ { Λ°∀
213 ¬‘’≥及 ≥°检测 免疫组化法制备的玻片在
’¯ ¼°³∏¶显微镜下观察 o照相 ∀染色结果判定标准 }
¬‘’≥ o°物质阳性产物呈深黄色或棕黄色者为强阳
性 o黄色为阳性 o浅黄色为弱阳性 o与背景同色者为
阴性 ∀每组随机选取 x张切片 o在高倍镜下k ≅ ussl
随机选取 x个视野 o将 x个视野的图像应用医学彩
色图像分析系统 o进行灰度分析 o测定其平均灰度
值 o代表免疫反应产物含量 ∀
214 统计学处理 ≥°≥≥ ts1s统计 o数据以 cξ ? σ表
示 o采用单因素方差分析 o组间采用 θ检验 ∀
3 结果
结果表明 o大剂量疏肝和胃汤及莫沙比利均可
不同程度地降低模型大鼠胃窦组织中¬‘’≥的表达 o
与模型组比较有显著性差异 k Π  s1sx 或 Π 
#uutt#
第 vt卷第 tv期
ussy年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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s1stl o且二组间无显著性差异 o而中 !小剂量较莫沙
比利差异不显著 ∀疏肝和胃汤各剂量组均可不同程
度地增加模型大鼠胃窦组织中 ≥°的表达k Π s1sx
或 Π s1stl o且大 !中剂量组与莫沙比利组作用相
近 ∀见表 t ∀
表 t 疏肝和胃汤对肝胃不和型大鼠胃窦¬‘’≥ o
≥°表达的影响kcξ ? σ, ν € tsl
组别
剂量
rª#®ªpt
¬‘’≥ ≥°
生理盐水 p tst q{t ? uv qt| zt qwv ? ts q||
模型 p tvx quw ? us quxul xw qzz ? z q|sul
疏肝和胃汤 vy ttw qz{ ? tz qutvl {s q{x ? ts qvvwl
t{ tt{ quv ? uv qu{xl zx q|z ? | q{uwl
| tux qyv ? uu qywyl y| qvx ? tu qxtv oxl
莫沙比利 s qssu z |z q{z ? tz qv|wl {w qw| ? tt qu{wl
注 }与空白对照组比较tl Π  s1sx oul Π  s1st ~与模型组比较
vl Π s1sx owl Π s1st ~与莫沙比利组比较xl Π s1sx oyl Π s1st
4 讨论
411 疏肝和胃汤对¬‘’≥表达的影响 ‘’≥在胃肠
道广泛存在 o对胃肠运动调节起着重要作用≈w2y  ∀胃
肠组织中 ‘’的过多或过少分泌 !以及平滑肌对 ‘’
敏感性的改变都将使胃肠功能发生障碍 ∀本实验观
察了疏肝和胃汤对 ƒ⁄模型大鼠胃窦 ¬‘’≥表达的
影响 ∀研究结果显示 o肝胃不和型 ƒ⁄模型大鼠胃
窦组织中¬‘’≥的分布明显增加 o经疏肝和胃汤治疗
后 o其表达可明显降低 o且大剂量组与莫沙比利作用
相当 ∀因此 o疏肝和胃汤的促胃动力作用的机制 o可
能与其降低胃窦组织¬‘’≥的表达 o进而抑制了 ‘’
的合成有关 ∀
412 疏肝和胃汤对 ≥°表达的影响 ≥°作为一种
重要的胃肠肽广泛地分布于肠神经系统和整个胃肠
道 o既可以激素的形式亦可作为神经递质参与胃肠
运动的调控 ∀实验研究证明 o≥°是胃肠运动调节中
主要的兴奋性神经递质≈z o{  o≥°还能刺激胃肠壁内
神经元的去极化 o增强胃肠平滑肌的收缩 ∀李氏≈| 
等研究也发现 oƒ⁄大鼠 ≥°在胃及十二指肠中的表
达降低 o同时使用促胃肠动力中药可增加其表达 ∀
本实验显示 o疏肝和胃汤可明显增加 ƒ⁄模型大鼠
胃窦组织中 ≥°的表达 o可能是疏肝和胃汤促胃动力
作用的机制之一 ∀
莫沙比利是选择性 x2羟色胺 wkx2‹×wl受体激
动剂 o通过兴奋胃肠道胆碱能中间神经元及肌间神
经丛的 x2‹×w受体 o促进乙酰胆碱的释放 o从而增强
胃肠道运动 o改善功能性消化不良病人的胃肠道症
状≈ts  ∀前期的研究表明 o疏肝和胃汤与莫沙比利有
相类似的促胃肠动力作用机制≈u  ∀本研究则表明 o
疏肝和胃汤除上述作用外 o还可能与其降低胃窦
¬‘’≥的表达 o增加 ≥°的表达等作用有关 ∀
≈参考文献 
≈t  刘松林 o梅国强 o赵映前 o等 q疏肝和胃汤对小鼠胃排空作用
的影响 q中药药理与临床 oussw oktl }vy q
≈u  刘松林 o梅国强 o赵映前 o等 q疏肝和胃汤对大鼠神经递质影
响的实验研究 q中国中医药科技 oussw okyl }vvw q
≈v  刘松林 o梅国强 o赵映前 o等 q疏肝和胃汤对消化不良大鼠血
中 ×oŠ„≥影响的实验研究 q中国中西医结合消化杂志 o
ussw otukwl }t|{ q
≈w  郭海军 o林 洁 o李国成 o等 q功能性消化不良的动物模型研
究 q中国中西医结合消化杂志 ousst o|kvl }twt q
≈x  徐叔云 q药理实验方法学 qu版 q北京 }人民卫生出版社 o
t||t }ttvy q
≈y  ‘¨ ° ·¨« o °∏µ¬° q ׫µ¨ 2¨¶¬°¨ ±¶¬²±¤¯ °²µ³«²¯²ª¼ ²© ¦2®¬·³²¶¬·¬√¨
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±¬·µ¬¦²¬¬§¨ qŠ¤¶·µ²¨ ±·¨µ²¯²ª¼ot||y ottsktl }tut q
≈{  周 吕 o柯美云 q胃肠动力学 q北京 }科学出版社 ot||| }u o
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≈|  李 蕙 o李国成 q肝胃不和型功能性消化不良大鼠胃动素和
°物质的表达及中药情志舒的干预作用 q中国中西医结合消
化杂志 oussv ottktl }t
≈ts  ≥¤®∏°¬oפ®¨ °∏µ¤Žo≠¤°¤¶«¬®¤ Žo ·¨¤¯ q „¥¬¯¬·¼·² °²¶¤³µ¬§¨ ·²
¥¬±§·²x2‹×w µ¨¦¨³·²µ¬±·«¨ «∏°¤± ¶·²°¤¦« q¤³¤± °«¤µ°²¦²¯ o
t||| oz|kwl }w|v q ≈责任编辑 古云侠 
k上接第 ttut页l
实验结果表明 o小儿乐食片有增进食欲 !增加体重的
作用 ∀并能促进胃液分泌 o提高胃蛋白酶含量 o增加
肠蠕动和肠吸收 ∀这些作用与该药健脾开胃 o主治
脾失健运型小儿厌食功效相一致 ∀本实验为该药临
床应用提供了药理学基础 o为该药的进一步开发提
供了依据 ∀
≈参考文献 
≈t  汪受传 o张月萍 o陶 勇 o等 q特制饲料喂养幼龄大鼠建立小
儿厌食症模型 q南京中医药大学学报 ot||| otxkvl }tw{ q
≈u  陈 奇 q中药药理研究方法学 q北京 }人民卫生出版社 ot||v}wysq
≈v  李仪奎 q中药药理实验方法学 q北京 }人民卫生出版社 ot||v }
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≈责任编辑 古云侠 
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第 vt卷第 tv期
ussy年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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