全 文 ：合体内试验一同评价。
体内转运试验中挑选的是健康志愿者，与溃疡
性结肠炎患者的胃肠道环境与健康状态是不同的，
应考虑到差异性。
但目前使用的酶依赖靶向辅料研究比较有限。
其中果胶使用最广，但果胶的亲水性是最大问题。
试验中通过加入一定比例的ＨＰＭＣ，改善了亲水性，
但是ＨＰＭＣ改变果胶亲水性的机制尚不清楚，有待
进一步研究。
［参考文献］
［１］ 中国药典［Ｓ］．一部．２０００：附录ＸＣ６２．
［２］ ＭＴｕｒｋｏｇｌｕ，ＴＵｇｕｒｌｕ．ＩｎｖｉｔｒｏｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｐｅｃｔｉｎＨＰＭＣｃｏｍ
ｐｒｅｓｓｉｏｎｃｏａｔｅｄ５ａｍｉｎｏｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｔａｂｌｅｔｓｆｏｒｃｏｌｏｎｉｃｄｅｌｉｖｅｒｙ
［Ｊ］．ＥｕｒＪＰｈａｒｍＢｉｏｐｈａｒｍ，２００２，５３（１）：６５．
［３］ 闫惠俊，龙致贤，王玉蓉，等．肠安康微丸结肠靶向验证实验
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Ｉｎｖｉｖｏ／ｉｎｖｉｔｒｏｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆＫａｎｇｆｕｘｉｎｃｏｌｏｎｔａｒｇｅｔｉｎｇｃａｐｓｕｌｅｓ
ＱＩＵＸｕｅｌａｎ１，ＹＡＮＧＭｉｎｇ２，ＸＩＥＸｉｎｇｌｉａｎｇ２，ＬＡＩＪｕａｎ２，ＣＨＥＮｓｉｗｅｉ２
（１．ＣｈｅｎｇｄｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎａｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｃｈｅｎｇｄｕ６１１７３０，Ｃｈｉｎａ；
２．ＷｅｓｔＣｈｉｎａＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙＳｉｃｈｕａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ６１００４１，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｒｅｌｅａｓｅｉｎｆｉｘｅｄｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆｐＨｄｅｐｅｎｄｅｎｔａｎｄｅｎｚｙｍｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔＫａｎｇｆｕｘｉｎｃｏｌｏｎｔａｒｇｅ
ｔｉｎｇｃａｐｓｕｌｅｓｉｎｖｉｖｏａｎｄｉｎｖｉｔｒｏ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＴｈｅｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎｗａｓｔｅｓｔｅｄｉｎｖｉｔｒｏａｎｄＸｒａｙｒａｄｉｏｇｒａｐｈｙｗａｓｕｓｅｄｆｏｒｔｈｅｅｖａｌｕａｔｉｏｎｉｎｖｉ
ｖｏ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＡｆｔｅｒｔｗｏｈｏｕｒｓｐＨｄｅｐｅｎｄｅｎｔｃｏｌｏｎｔａｒｇｅｔｉｎｇｉｎｍａｎｍａｄｅｃｏｌｏｎｆｌｕｉｄ，ｍｅｄｉｃｉｎｅｒｅｌｅａｓｅｉｎｆｉｘｅｄｐｏｓｉｔｉｏｎｏｎｔｈｅｗｈｏｌｅ，
ｃｏｌｏｎｌｏｃｒｅｌｅａｓｅ．Ａｄｄｅｎｚｙｍｅｉｎｔｏｍａｎｍａｄｅｃｏｌｏｎ，ｗｈｅｎｅｎｚｙｍｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔｃｏｌｏｎｔａｒｇｅｔｉｎｇｉｎｉｔ，ｔｈｅｎｍｅｄｉｃｉｎｅｒｅｌｅａｓｅｑｕｉｃｋｌｙ，
ｍａｉｎｌｙｒｅｌｅａｓｅｉｎｆｉｘｅｄｐｏｓｉｔｉｏｎ；ＴｈｅｃｏｎｖｅｙｉｎｇｔｉｍｅｉｎｖｉｖｏｏｆｐＨｄｅｐｅｎｄｅｎｔａｎｄｅｎｚｙｍｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔｃａｐｓｕｌｅｓｈａｖｅｂｉｇｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｉｔｙ
ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ．Ｉｎｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ｄｉｓｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎｉｓｓｔａｂｉｌｉｚｅａｍｏｎｇｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｅｓ，ｂｅｔｗｅｅｎ２０～３５ｈｏｕｒｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｋａｎｇｆｕｘｉｎｃｏｌｏｎ
ｔａｒｇｅｔｉｎｇｃａｐｓｕｌｅｓｏｆｔｗｏｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓａｌｒｅｌｅａｓｅｉｎｆｉｘｅｄｐｏｓｉｔｉｏｎｔｏａｃｈｉｅｖｅｔｈｅｇｏａｌ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｋａｎｇｆｕｘｉｎ；ｃｏｌｏｎｔａｒｇｅｔｉｎｇ；ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ；Ｘｒａｙｒａｄｉｏｇｒａｐｈｙ ［责任编辑 鲍 雷］
［收稿日期］ ２００７０１２０
［通讯作者］ 董晓兵，Ｔｅｌ：（００８５２）２３５８７３１８，Ｅｍａｉｌ：ｄｘｂａａ＠
ｕｓｔ．ｈｋ
测定天王补心丸和归脾丸中细叶远志皂苷的含量
董晓兵１，２，李 军２，姜 勇３，董婷霞２，屠鹏飞３，詹华强２
（１．澳门大学 中华医药研究院，澳门；２．香港科技大学 中药研发中心暨生物系，香港；
３．北京大学 药学院 天然药物学系，北京 １０００８３）
［摘要］ 目的： 建立含远志中成药中细叶远志皂苷的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法，Ａｌｔｉｍａ
Ｃ１８色谱柱 （４．６ｍｍ ×２５０ｍｍ，５μｍ），流动相甲醇０．０５％磷酸溶液（６５∶３５），检测波长２０２ｎｍ，流速１．０ｍＬ·
ｍｉｎ－１。结果：细叶远志皂苷的理论塔板数为２５００。回归方程Ｙ＝５．２３９×１０６Ｘ－６．２４７×１０５（ｒ２＝０．９９９４），线
性范围１０～５００μｇ·ｍＬ－１，平均回收率为９７．５％ （ＲＳＤ均小于３．０％），最低检出浓度为５．５０μｇ·ｍＬ－１。结论：检
测含远志中成药中细叶远志皂苷含量方法简便，结果准确，重现性好，可作为含远志的复方制剂质量控制标准。
［关键词］ ＨＰＬＣ；天王补心丸；归脾丸；远志；细叶远志皂苷；含量测定
［中图分类号］Ｒ２８４ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００６）１６１６４７０３
天王补心丸和归脾丸均收载于中华人民共和国
药典２００５年版一部，天王补心丸由丹参、当归、五味
子、远志等１６味制成蜜丸，功能滋阴养血，补心安
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第３２卷第１６期
２００７年８月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ １６
Ａｕｇｕｓｔ，２００７
神，用于心阴不足，心悸健忘，失眠多梦，大便干
燥［１］；归脾丸由党参、白术、远志等１１味制成蜜丸，
功能益气健脾，养血安神，用于心脾两虚，气短心悸，
失眠多梦，头昏头痛，肢倦乏力，食欲不振，崩漏便
血［１］。中国药典没有记载这２种中药的含量测定方
法。远志具有安神益智的功效，在这２种中成药中
都是重要的成分，皂苷类成分是远志的主要活性成
分［１４］。２００５年版药典中以远志酸作为对照品对远
志药材进行含量测定［１］，但是远志酸是远志总皂苷
酸水解的产物之一［５］，测定其含量不能代替远志中
总皂苷的含量。细叶远志皂苷是远志总皂苷碱水解
生成的次级皂苷，远志总皂苷经碱水解均能转化为
细叶远志皂苷［６，７］。因此本课题组建立以细叶远志
皂苷作为指标成分来检测远志总皂苷的含量，并对
不同厂家生产的天王补心丸和归脾丸进行了细叶远
志皂苷的含量测定。
１ 仪器与试药
Ｗａｔｅｒｓ高相液相色谱仪（Ｗａｔｅｒｓ６００Ｃｏｎｔｒｏｌｅｒ，
ＡＦ在线脱气机，Ｗａｔｅｒｓ７１７自动进样器）；Ｗａｔｅｒｓ
９９６二极管阵列检测器，Ｅｍｐｏｗｅｒ色谱工作站，超声
清洗仪（ＢＲＡＮＳＯＮＩＣ，２４０Ｗ，５０Ｈｚ），ＣＨ９２０旋转
蒸发仪（ＢＵＣＨＩ）。
细叶远志皂苷自制［７］（采用 ＨＰＬＣ，ＩＲ，ＭＳ，１３Ｃ
ＮＭＲ和１ＨＮＭＲ鉴定，纯度
９８％），天王补心丸和
归脾丸购于市场上不同药店，水（ｍｉｌｉＱ，Ｍｉｌｉｐｏｒｅ
Ｓ．Ａ．Ｍｏｌｓｈｅｉｍ，Ｆｒａｎｃｅ），甲醇（色谱纯，ＰＲＯＬＡ
ＢＯ），８５％磷酸（分析纯，ＶＷＲ）。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件和系统适应性试验 ＡｌｔｉｍａＣ１８色
谱柱（４．６ｍｍ ×２５０ｍｍ，５μｍ）；流动相甲醇
０．０５％磷酸溶液（６５∶３５）；检测波长２０２ｎｍ；流速
１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１；进样量１０μＬ；柱温为室温；采集时
间３０ｍｉｎ。见图１。在色谱图中，细叶远志皂苷的
保留时间为１７．２ｍｉｎ，与相邻峰的分离度均大于１．
５，理论塔板数为２５００。
２．２ 对照品溶液制备 精密称取细叶远志皂苷５
ｍｇ，置５ｍＬ量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得
对照品储备液。
２．３ 供试品溶液的制备 取样品粉末（３号筛）２．０
ｇ，精密称定，置１００ｍＬ磨口锥形瓶中，加甲醇２５ｍＬ，
超声处理３０ｍｉｎ×２，滤过，合并滤液，蒸干，加１０％
ＮａＯＨ溶液５０ｍＬ，加热回流２ｈ，冷却，加浓 ＨＣｌ调
图１ 对照品与样品的 ＨＰＬＣ图
Ａ．对照品；Ｂ．归脾丸；Ｃ．天王补心丸；Ｄ．归脾丸缺远志阴性对
照；Ｅ．天王补心丸缺远志阴性对照
ｐＨ４～５，用正丁醇萃取３次，每次５０ｍＬ，合并正丁
醇萃取液，回收溶剂，残渣用甲醇溶解并定容至２５
ｍＬ量瓶中，０．４５μｍ滤膜滤过，即得供试品溶液。
２．４ 阴性对照样品溶液的制备 按照药典中归脾
丸和天王补心丸的处方和制备工艺制备缺远志的阴
性对照丸，再按上述供试品溶液的制备方法制备阴
性对照液。
２．５ 线性关系考察和最低检出浓度 精密量取细
叶远志皂苷对照品储备液适量，用甲醇稀释成系列
浓度（ｎ＝６）分别进样１０μＬ，记录色谱峰面积，以
对照品进样浓度Ｘ（μｇ·ｍＬ－１）对峰面积均值 Ｙ进
行线性回归，得回归方程Ｙ＝５２３９×１０６Ｘ－６２４７
×１０５（ｒ２＝０９９９４），细叶远志皂苷在１０～５００μｇ
·ｍＬ－１与峰面积呈良好线性关系。
将细叶远志皂苷对照品溶液适当稀释后，进样，
以峰高为基线噪音３倍计算，最低检出浓度为５．５０
μｇ·ｍＬ－１。
２．６ 精密度试验 精密吸取同一浓度对照品溶液，
连续进样５次，记录细叶远志皂苷保留时间和色谱
峰面积值，ＲＳＤ分别为０．４５％和１．０７％。
２．７ 重复性试验 精密称取同一样品５份，分别按
供试品溶液制备方法制备供试品溶液，进样１０μＬ，
记录细叶远志皂苷的色谱峰面积值，计算细叶远志
皂苷的含量，ＲＳＤ为２．７５％。
２．８ 稳定性试验 取同一个样品供试液，室温放置，
在上述色谱条件下于０，２，４，６，８，１２，分别进样，记录细
叶远志皂苷的色谱峰面积值，ＲＳＤ为１４５％。
２．９ 空白干扰试验 精取阴性对照液按上述色谱
条件测定，在细叶远志皂苷处无吸收峰，表明归脾丸
和天王补心丸中的其他组分不干扰细叶远志皂苷的
测定，见图１。
２．１０ 加样回收率 精密称取已知含量天王补心丸
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细粉各２．０ｇ，共５份，分别精密加入细叶远志皂苷
适量（加入量约为样品含量得１００％）。按供试品溶
液制备方法制备供试液，依法测定含量，计算回收
率，结果平均回收率为９７．５％，ＲＳＤ为２．４６％。
２１１ 样品含量测定 取各个批号的样品各３份，
按供试品溶液制备方法处理，照上述色谱条件测定。
测定结果见表１。
表１ 不同厂家２种中成药中细叶远志皂苷含量
编号 中成药名称 生产厂家 批号 细叶远志皂苷／％
１ 天王补心丸 广州敬修堂 Ｅ０３０２０ ０．０９４
２ 天王补心丸 广东华天宝 ０５０７１１０ ０．０２２
３ 天王补心丸 河南宛西 ０５０６０７
４ 天王补心丸 北京同仁堂 ６０１５３８２ ０．０９１
５ 天王补心丸 佛山冯了性 ０６０７００２ ０．０９０
６ 归脾丸 广东华天宝 ０５０５１０９ ０．１５５
７ 归脾丸 李时珍医药 ２００６０９０１９ ０．３３２
８ 归脾丸 兰州佛慈 ２００５０６１８ ０．０６８
３ 讨论
分别考察了甲醇水、乙腈水、甲醇０．０５％磷酸
水和乙腈０．０５％磷酸水等４个溶剂系统，结果发现
甲醇０．０５％磷酸水作为流动相对照品分离度和峰
形最好。同时考察过用 ＥＬＳＤ作为检测器，结果其
灵敏度很低，远不如ＵＶ２０２ｎｍ。在 ＵＶ２０２ｎｍ，细
叶远志皂苷的最低检出浓度为５．５０μｇ·ｍＬ－１，由
此可以看出，其灵敏度较高。
天王补心丸和归脾丸为常用中成药，但是其含
量测定方法未见报道。远志具有安神益智的作用，
为天王补心丸和归脾丸中不可或缺的一味中药。远
志总皂苷是远志中的主要活性成分，因此选择远志
总皂苷来控制这２种中成药的质量十分必要。细叶
远志皂苷是远志总皂苷碱水解的产物，远志总皂苷
通过碱水解均能转化为细叶远志皂苷，作者通过碱
水解处理样品，采用 ＨＰＬＣ法测定两种含远志的中
成药中细叶远志皂苷的含量，具有方法简便、准确、
重现性好的优点，细叶远志皂苷可作为远志复方制
剂中远志质量控制的指标。
［参考文献］
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ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｅｎｕｉｆｏｌｉｎｉｎＴｉａｎｗａｎｇＢｕｘｉｎｗａｎａｎｄＧｕｉｐｉｗａｎｂｙＨＰＬＣ
ＤＯＮＧＸｉａｏｂｉｎｇ１，２，ＬＩＪｕｎ２，ＪＩＡＮＧＹｏｎｇ３，ＺＨＥＮＧＹｉｎｇ１，ＤＯＮＧＴ．Ｘ．Ｔｉｎａ２，ＴＵＰｅｎｇｆｅｉ３，ＴＳＩＭＷ．Ｋ．Ｋａｒｌ２
（１．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓｏｆＭａｃａｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｍａｃａｕ，Ｃｈｉｎａ；
２．ＣｅｎｔｅｒｆｏｒＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅＲ＆ＤａｎｄＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢｉｏｌｏｇｙ，ＴｈｅＨｏｎｇＫｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
ｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＨｏｎｇＫｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ；
３．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮａｔｕｒａｌＭｅｄｉｃｉｎｅｓ，ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＰｅｋｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＨｅａｌｔｈ
Ｓｃｉｅｎｃｅｃｅｎｔｅｒ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００８３，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＡｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｍｅｔｈｏｄｗａｓｄｅｖｅｌｏｐｅｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｅｎｕｉｆｏｌｉｎｉｎＴｉａｎｗａｎｇＢｕｘｉｎｗａｎａｎｄＧｕｉｐｉ
ｗａｎｂｙＨＰＬＣ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＴｈｅｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｓｅｐａｒａｔｅｄｂｙＡｌｔｉｍａＣ１８ｃｏｌｕｍｎ（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）ｕｓｉｎｇｍｅｔｈａｎｏｌ０．０５％
ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃａｃｉｄ（６５∶３５）ａｓａｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅ，ｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓ１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１ａｎｄｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓｓｅｔａｔ２０２ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｅｎｕｉｆｏｌｉｎｗａｓ
ｄｅｔｅｃｔｅｄｉｎｂｏｔｈＣｈｉｎｅｓｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ．Ｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌｐｌａｔｅｓｃａｌｃｕｌａｔｅｄｂｙｔｅｎｕｉｆｏｌｉｎｐｅａｋｗａｓ２５００．Ｔｈｅｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎｅｑｕａ
ｔｉｏｎｏｆｔｅｎｕｉｆｏｌｉｎｗａｓＹ＝５．２３９×１０６Ｘ６．２４７×１０５（ｒ２＝０．９９９４）ａｎｄｔｈｅｌｉｎｅｒｒａｎｇｅｗａｓ１０５００ｇ·ｍＬ－１．Ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｙ
ｏｆｔｅｎｕｉｆｏｌｉｎｗａｓ９７．５％ （ＲＳＤｌｅｓｓｔｈａｎ３．０％）．ＴｈｅＬＯＤｏｆｔｅｎｕｉｆｏｌｉｎｗａｓ５．５０ｇ·ｍＬ－１．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｉｓｓｅｎｓｉｔｉｖｅ，
ｒａｐｉｄａｎｄａｃｃｕｒａｔｅ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ＨＰＬＣ；ＴｉａｎｗａｎｇＢｕｘｉｎｗａｎ；Ｇｕｉｐｉｗａｎ；ＲａｄｉｘＰｏｌｙｇａｌａｅ，ｔｅｎｕｉｆｏｌｉｎ，ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
［责任编辑 鲍 雷］
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Ａｕｇｕｓｔ，２００７