全 文 ：ＨＰＬＣ测定板蓝根药材及其制剂中
表告依春的含量
安益强１，２，贾晓斌１，２，袁海建１，孙 娥１，许珍珍１
（１．江苏省中医药研究院 中药新型给药系统重点实验室 国家中医药管理局名医名方适宜剂型
重点实验室，江苏 南京 ２１００２８；２．江苏大学 药学院，江苏 镇江 ２１２０１３）
［摘要］ 目的：建立ＨＰＬＣ测定板蓝根药材及其制剂中表告依春含量的方法，为板蓝根药材及其制剂的质量
控制提供依据。方法：采用反相高效液相色谱法，色谱柱为 ＺＯＲＢＡＸＳＢＣ１８（４６ｍｍ×１５０ｍｍ，５μｍ）；流动相乙
腈水磷酸三乙胺（８５０∶９０７２∶０７３∶００５）；流速０７ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波长２４５ｎｍ，柱温３０℃。结果：表告依春
含量测定的线性范围００２０４～０３０６０μｇ（ｒ＝０９９９８），平均加样回收率９８９９％，ＲＳＤ１３１％。结论：建立了高效
液相色谱法测定板蓝根药材及其制剂中表告依春含量的方法，该方法准确、可靠，可用于板蓝根药材及其制剂的质
量评价。
［关键词］ 板蓝根；表告依春；高效液相色谱法；制剂；含量测定
［中图分类号］Ｒ２８４．１ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）１８２０７４０４
［收稿日期］ ２００８０３０４
［基金项目］ 江苏省中医药领军人才项目（２００６）；苏州市科技
计划（ＳＳＹ０６０６）
［通讯作者］ 贾晓斌，Ｔｅｌ：（０２５）８５６３７８０９，Ｅｍａｉｌ：ｊｘｉａｏｂｉｎ２００５＠
ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ
板蓝根为常用抗病毒中药，始载于《神农本草
经》，《中国药典》２００５年版一部收载为十字花科植
物菘蓝 ＩｓａｔｉｓｉｎｄｉｇｏｔｉｃａＦｏｒｔ．的干燥根［１］，表告依春
为板蓝根抗病毒的代表性有效成分之一［２］，是反映
板蓝根药材及其制剂质量的一个重要指标；虽有文
献报道过板蓝根提取物中表告依春在大鼠体内的药
代动力学研究［３］，但至今尚未有测定板蓝根药材及
其制剂中表告依春含量的方法报道。本研究采用反
相高效液相色谱法测定板蓝根药材及其制剂板蓝根
颗粒、复方板蓝根颗粒、板蓝根含片、板蓝根糖浆中
表告依春的含量。
１ 仪器与试药
Ａｇｉｌｅｎｔ１１００型高效液相色谱仪（包括四元泵，
自动进样器，ＤＡＤ二极管阵列检测器）；ＫＱ５２００型
超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；ＢＰ－
２１１Ｄ分析电子天平（德国Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ公司，１／１０万）。
表告依春对照品（中国药品生物制品检定所，
批号１１１７５３２００６０１）；板蓝根药材购于河北安国市
百合中药饮片有限公司（批号０７１２３０），为河北安国
产，由南京中医药大学生药学教研室吴德康教授鉴
定为十字花科植物菘蓝 Ｉ．ｓｉｎｄｉｇｏｔｉｃａ的干燥根；板
蓝根颗粒（哈药集团世一堂制药厂生产，批号
０７０７５３０）、复方板蓝根颗粒（江苏苏南药业实业有
限公司生产，批号０７０７０１）、板蓝根含片（洛阳新春
都生物制药有限公司生产，批号０７０９０１）、板蓝根糖
浆 （李 时 珍 医 药 集 团 有 限 公 司 生 产，批 号
２００７１００２２），均为市售品；乙腈、磷酸、三乙胺（Ｔｅｄｉａ
公司，色谱纯），甲醇、乙醇（南京化学试剂有限公
司，分析纯），水为超纯水。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件
ＺＯＲＢＡＸＳＢ－Ｃ１８色谱柱（４６ｍｍ×１５０ｍｍ，５
μｍ），流动相乙腈水磷酸三乙胺（８５０∶９０７２∶
０７３∶００５）；流速 ０７ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测波长 ２４５
ｎｍ［３］，进样量２０μＬ，柱温３０℃。高效液相色谱图
见图１。
２．２ 对照品溶液的制备
称取表告依春对照品约１０ｍｇ，精密称定，置
于１０ｍＬ的量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，制成质
量浓度为０１０２ｇ·Ｌ－１的对照品溶液。
２．３ 供试品溶液的制备
２．３．１ 板蓝根药材供试品溶液的制备 取本品粉
末（过４０目筛）约０２ｇ，精密称定，置５０ｍＬ具塞锥
·４７０２·
第３３卷第１８期
２００８年９月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １８
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００８
Ａ．对照品；Ｂ．药材；Ｃ．板蓝根颗粒；Ｄ．复方板蓝根颗粒；
Ｅ．板蓝根含片；Ｆ．板蓝根糖浆；１．表告依春
图１ 板蓝根药材及制剂ＨＰＬＣ图
形瓶中，加水２０ｍＬ，称重，超声提取６０ｍｉｎ，放冷，
再称重，用水补足损失质量，过滤，弃去初滤液，取续
滤液２ｍＬ，水浴蒸干，残渣加流动相适量溶解，并定
容于１０ｍＬ量瓶中，摇匀，０４５μｍ微孔滤膜滤过，
取续滤液即得供试品溶液。
２．３．２ 板蓝根颗粒供试品溶液的制备 取本品１０
袋，研细，取约２ｇ，精密称定，置５０ｍＬ具塞锥形瓶
中，加水２０ｍＬ，水浴加热并震摇使其溶解，摇匀，过
滤，弃去初滤液，取续滤液２ｍＬ，水浴蒸干，残渣加
流动相适量溶解，并定容于 １０ｍＬ量瓶中，摇匀，
０４５μｍ微孔滤膜滤过，取续滤液即得供试品溶液。
２．３．３ 复方板蓝根颗粒供试品溶液的制备 取本品
１０袋，研细，取约２ｇ，精密称定，置５０ｍＬ具塞锥形瓶
中，加水２０ｍＬ，水浴加热并震摇使其溶解，摇匀，过
滤弃去初滤液，取续滤液１０ｍＬ，水浴蒸干，残渣加流
动相适量溶解，并定容于１０ｍＬ量瓶中，摇匀，０４５
μｍ微孔滤膜滤过，取续滤液即得供试品溶液。
２．３．４ 板蓝根含片供试品溶液的制备 取本品１０
片，研细，取约０８ｇ，精密称定，置５０ｍＬ具塞锥形瓶
中，加水２０ｍＬ，水浴加热并震摇使其溶解，摇匀，过
滤，弃去初滤液，取续滤液２ｍＬ，水浴蒸干，残渣加流
动相适量溶解，并定容于１０ｍＬ量瓶中，摇匀，０４５
μｍ微孔滤膜滤过，取续滤液即得供试品溶液。
２．３．５ 板蓝根糖浆供试品溶液的制备 精密量取本
品５ｍＬ，置５０ｍＬ具塞锥形瓶中，加水２０ｍＬ，摇匀，
过滤，弃去初滤液，取续滤液２ｍＬ，水浴蒸干，残渣加
流动相适量溶解，并定容于１０ｍＬ量瓶中，摇匀，０４５
μｍ微孔滤膜滤过，取续滤液即得供试品溶液。
２．４ 线性关系考察
精密量取浓度为 ０１０２ｇ·Ｌ－１的对照品溶液
０１，０３，０５，０８，１０，１３，１５ｍＬ，分别置于 １０
ｍＬ的量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，得到质量浓度
分别为１０２，３０６，５１０，８１６，１０２，１３３，１５３ｍｇ
·Ｌ－１的对照品溶液，分别精密吸取上述７种不同浓
度的对照品溶液２０μＬ，按２．１色谱条件进行测定，
以峰面积（Ｙ）对照品质量（Ｘ）进行线性回归，回归
方程Ｙ＝１７１１２Ｘ＋４２４０５，ｒ＝０９９９８，表告依春在
００２０４～０３０６０μｇ与峰面积成良好的线性关系。
２．５ 精密度试验
精密吸取８１６ｍｇ·Ｌ－１的对照品溶液２０μＬ，
在同一条件下重复进样６次，以对照品峰面积进行
计算，结果得平均峰面积１４９７３５，ＲＳＤ０５７％，表
明精密度良好。
２．６ 稳定性试验
取待测板蓝根药材供试品溶液，按２．１项下色
谱条件操作，分别在０，２，４，８，１６，２０，２４ｈ进样，测
定峰面积，按峰面积计算得平均峰面积分别为
１５０７２５，ＲＳＤ１０１％。
２．７ 重复性试验
取同一批次的板蓝根药材约０２ｇ，平行称定６
份，按２．３．１项下方法操作，制备供试品溶液６份，每
份精密吸取２０μＬ按２．１项下色谱条件测定，测得表
告依春的质量分数为４２４３ｍｇ·ｇ－１，ＲＳＤ１４２％。
２．８ 加样回收率试验
取已知表告依春含量的板蓝根粉末约０１０ｇ，
精密称定９份，每３份加入相同量的表告依春对照
品，按２．３．１项下方法操作，制备供试品，测定。９
次测定平均回收率为９８９９％，ＲＳＤ１３１％。
２．９ 样品测定
分别精密称定板蓝根药材粉末０２ｇ、板蓝根颗
粒粉末２ｇ、复方板蓝根颗粒粉末２ｇ、板蓝根含片粉
末０８ｇ，精密量取板蓝根糖浆５ｍＬ，分别按各供试
品溶液制备项下方法操作，制成供试品溶液。精密
吸取对照品溶液２０μＬ、药材及各制剂供试品溶液
２０μＬ，按２．１项下色谱条件，用外标法测定，并计算
各样品中表告依春的含量，测定结果见表１。
３ 讨论
文献报道采用 ＨＰＬＣ测定了板蓝根中的靛蓝、
靛玉红等成分的含量，靛蓝、靛玉红为脂溶性成分，
用水提取几乎提取不出，而实际生产中板蓝根多为
·５７０２·
第３３卷第１８期
２００８年９月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １８
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００８
表１ 样品中表告依春的质量分数（ｎ＝３）
样品 表告依春／ｍｇ·ｇ－１ ＲＳＤ／％
板蓝根药材 ４２４３ １４２
板蓝根颗粒 ０４１２ １２５
复方板蓝根颗粒 ００７７ ０５９
板蓝根含片 １０５６ １３０
板蓝根糖浆 ０１８９（ｍｇ·ｍＬ－１） ０６１
水提取；再则，板蓝根在临床上的主要应用是作为抗
病毒药物，而靛蓝、靛玉红没有抗病毒活性，故靛蓝、
靛玉红含量不适合作为板蓝根药材及其制剂的含量
测定指标；本研究采用ＲＰＨＰＬＣ测定板蓝根药材及
其制剂中表告依春含量，该法重复性好，准确度高，
故选择表告依春作为板蓝根药材及其制剂的含量测
定指标比较合适。
本试验比较了甲醇水、甲醇含酸水、乙腈含酸
水流动相系统的洗脱情况，结果表明乙腈含酸水流
动相系统明显优于甲醇水和甲醇含酸水系统，因
甲醇水系统使表告依春和其他成分较难分开，甲
醇含酸水系统也不能实现较好的分离。进样供试
品必须保证所含表告依春分子以一种状态（分子型
或游离型）存在，如果直接以甲醇溶解样品进样，则
使表告依春对应的峰产生肩峰，可能是在此条件下，
表告依春存在分子型和游离型两种状态引起，故最
后选择酸性流动相配制供样品，以使表告依春以游
离状态存在；不同的ｐＨ条件下色谱图有显著差异，
通过比较不同的加酸量，最后确定５００ｍＬ水中加入
４ｍＬ磷酸，分离效果较好；三乙胺为峰形改良剂，同
时也起到了调节酸碱度的作用。
另外，本试验比较了６种不同提取溶媒（甲醇、
无水乙醇、７０％乙醇、５０％乙醇、３０％乙醇、水），结
果表明水提取效率明显高于其它５种溶媒；以水为
提取溶媒，比较了３种不同的提取方法，冷浸法、热
回流提取法、超声提取法，结果后者提取率明显高于
前２种提取方法；采用超声提取法，分别考察了加入
１０，２０，３０，４０，５０ｍＬ水的提取效率，结果表明 ２０，
３０，４０，５０ｍＬ提取率无明显差别，故选择２０ｍＬ水
进行提取；采用超声提取法，加入２０ｍＬ水，又分别
考察了提取２０，３０，４０，５０，６０，７０ｍｉｎ的提取效率，
结果表明提取６０，７０ｍｉｎ提取率无明显差别，故提
取时间选择６０ｍｉｎ。板蓝根的制剂水溶性强，故本
试验中选择水作为溶媒溶解板蓝根制剂，效果较好，
无需超声提取。
在超声提取过程中，超声池中水浴温度会不断
升高，为避免由于温度的变化，从而对提取效率的影
响，故在考察不同提取时间的提取效率时，不断向超
声池中加入冷水，放出热水，以使水温保持在室温。
［参考文献］
［１］ 中国药典．一部［Ｓ］．２００５，１４２．
［２］ 徐丽华，黄 芳，陈 婷，等．板蓝根中的抗病毒活性成分［Ｊ］．
中国天然药物，２００５，３（６）：３５９．
［３］ 黄 芳，熊雅婷，徐丽华，等．板蓝根不同提取物中抗病毒成分
表告依春在大鼠体内的药代动力学［Ｊ］．中国药科大学学报，
２００６，３７（６）：５１９．
ＣｏｎｔｅｎｔｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｅｐｉｇｏｉｔｒｉｎｉｎＲａｄｉｘＩｓａｔｉｄｉｓａｎｄ
ｉｔｓｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｂｙＲＰＨＰＬＣ
ＡＮＹｉｑｉａｎｇ１，２，ＪＩＡＸｉａｏｂｉｎ１，２，ＹＵＡＮＨａｉｊｉａｎ１，ＳＵＮＥ１，ＸＵＺｈｅｎｚｈｅｎ１
（１．ＪｉａｎｇｓｕＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＮｅｗＤｒｕｇＤｅｌｉｖｅｒｙＳｙｓｔｅｍｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ＆ＫｅｙＬａｂｏｒａｔａｒｙｏｆＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ
ＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎｆｏｒＣｌｉｎｉｃａｌＥｆｅｃｔｉｖｅＰｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｏｆＳｔａｔｅＡｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００２８，Ｃｈｉｎａ；
２．ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＪｉａｎｇｓｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｅｎｊｉａｎｇ２１２０１３，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｎＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｅｐｉｇｏｉｔｒｉｎｉｎＲａｄｉｘＩｓａｔｉｄｉｓａｎｄｉｔｓｐｒｅｐａ
ｒａｔｉｏｎ，ａｎｄｔｏｐｒｏｖｉｄｅｖａｌｕａｂｌｅｄａｔａｆｏｒｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｏｆＲａｄｉｘＩｓａｔｉｄｉｓａｎｄｉｔｓｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｓｅｐａｒａｔｅｄｏｎａ
ＺＯＲＢＡＸＳＢ－Ｃ１８（４６ｍｍ×１５０ｍｍ，５μｍ）ｃｏｌｕｍｎｗｉｔｈｔｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｏｆａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅｗａｔｅｒｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃａｃｉｄｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ
（８５０∶９０７２∶０７３∶００５）ｉｎｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｏｆ０７ｍＬ·ｍｉｎ－１．Ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓｓｅｔａｔ２４５ｎｍ．Ｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ
３０℃．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｏｆｅｐｉｇｏｉｔｒｉｎｗａｓ００２０４０３０６０μｇ（ｒ＝０９９９８），ａｎｄｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｙｗａｓ９８９９％ ｗｉｔｈｔｈｅ
ＲＳＤｗａｓ１３１％ （ｎ＝９）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＴｈｅｍｅｔｈｏｄｆｏｒｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎｏｆｅｐｉｇｏｉｔｒｉｎｉｎＲａｄｉｘＩｓａｔｉｄｉｓａｎｄｉｔｓｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｗａｓａｃｃｕｒａｔｅａｎｄ
ｒｅｌｉａｂｌｅ，ｗｈｉｃｈｃａｎｂｅｕｓｅｄｔｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆＲａｄｉｘＩｓａｔｉｄｉｓａｎｄｉｔｓｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ＲａｄｉｘＩｓａｔｉｄｉｓ；ｅｐｉｇｏｉｔｒｉｎ；ＲＰＨＰＬＣ；ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ；ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ［责任编辑 鲍 雷］
·６７０２·
第３３卷第１８期
２００８年９月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １８
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００８