全 文 ：不同来源黄芪药材中黄芪甲苷的定量分析
姜 勇t o金 芳u o鲍 忠t o石子仪t o屠鹏飞t 3
kt1 北京大学 药学院 天然药物化学系 o北京 tsss{v ~
u1国家食品药品监督管理局 药品审评中心 o北京 tsssv{ l
≈收稿日期 ussx2tt2tw
≈通讯作者 3屠鹏飞 oר¯ }kstsl{u{suzxs
黄芪为豆科植物蒙古黄芪 Αστραγαλυσ µεµ2
βραναχευσkƒ¬¶¦«1l
ª¨ 1 √¤µ1 µονγηολιχυσk
ª¨ 1l ¶¬¤²
或膜荚黄芪 Α1 µεµβραναχευσkƒ¬¶¦«1l
ª¨ 1 的干燥
根≈t ∀黄芪中的主要化学成分包括皂苷类 !黄酮类
及多糖类等≈u ∀黄芪中黄芪甲苷的含量测定已有较
多的文献报道 o包括薄层扫描 !比色法和 °≤
法≈v2x o但以往文献测定的样品数量和考察范围有
限 ∀本研究采用 °≤2∞≥⁄方法 o对不同来源的 x|
批黄芪药材进行了黄芪甲苷的含量测定 o并比较了
不同产地 !不同来源k栽培或野生l !不同生长年限和
不同等级的黄芪药材的质量 o为今后黄芪药材的栽
培和合理标准的制定提供科学 !可靠的依据 ∀
1 仪器与试药
ª¬¯¨ ±·ttss °≤ 色谱仪 o二极管阵列检测器
k⁄⁄l o四元低压梯度泵 o真空脱气机 o柱温箱 o自动
进样器 o法国 ≥∞⁄∞÷ zx蒸发光散射检测器 ∀乙腈为
色谱纯 o水为二次重蒸水 ∀
黄芪甲苷对照品购于中国药品生物制品检定所
k批号 sz{t2ussvttl o药材采集或采购于我国 {个省
共 x|批样品 o其中包括野生样品 !栽培样品及半野
生样品k直播品种l ∀这些样品均由本院屠鹏飞教授
鉴定为蒙古黄芪 Α1 µεµβραναχευσ √¤µ1 µονγηολιχυσ
或膜荚黄芪 Α1 µεµβραναχευ的干燥根 ∀
2 方法和结果
211 对照品溶液的制备 精密称取黄芪甲苷对照
品 w °ªo加 xs h乙腈溶解并定容至 ts °量瓶中 o摇
匀 o即得 ∀
212 供试品溶液的制备 取黄芪药材粉末 u1s ªk过
ys目筛l o精密称定 o用石油醚 ys °于索氏提取器中
脱脂 vs °¬±∀取出药材于通风处挥干溶剂 o置索氏提
取器中 o加甲醇 ys °o提取 u1x «∀提取液减压浓缩
至干 o残渣用甲醇 ts °溶解 o加入氨试液 ts °o静
置 vs °¬±o减压浓缩至干 ∀残渣用 us h乙腈溶解并定
容至 ts °o得 s1u ª# °pt的供试品溶液 ∀
213 色谱条件及系统适用性考察 • ¤·¨µ¶¶¼°°¨ ·µ¼
色谱柱 ≤t{kw1y °° ≅ uxs °° ox Λ°l o流动相乙腈2
水kvvΒzzl o流速 t1s °# °¬±pt o柱温 vs ε ∀蒸发光
散射检测器 }漂移管温度为 ws ε o灵敏度为 { o载气
为氮气 ∀理论塔板数按黄芪甲苷计不低于 v sss ∀
分离度 t1x ∀色谱图见图 t ∀
图 t 黄芪甲苷及黄芪药材高效液相色谱图
1 对照品 ~
1 黄芪药材 ~t1 黄芪甲苷
214 线性关系考察 精密吸取对照品溶液ks1sy
°ª# °ptl w oty ovu oyw otss Λo分别注入液相色谱
仪 o以进样量的对数为横坐标 o以黄芪甲苷峰面积的
对数为纵坐标 o得线性回归方程为 ª¯Ψ t1wxt t ª¯Ξ
n u1{xw u , ρ s1||| u o结果表明黄芪甲苷在 s1uw ∗
y1ss Λªo其对数值与峰面积的对数值呈良好的线性
关系 ∀
215 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液连续
进样 x次 o测定黄芪甲苷峰面积 o测定结果的 ≥⁄
为 s1xy h o说明仪器精密度良好 ∀
216 稳定性试验 取同一供试品溶液 o分别在 s o
u ow o{ oty ouw «检测 ∀结果黄芪甲苷峰面积 ≥⁄为
u1| h o说明样品稳定性良好 ∀
217 重复性试验 取同一产地药材 o精密称取平行
样品 x份 o按供试品溶液制备方法操作 ∀结果黄芪
甲苷含量 ≥⁄为 u1| h o说明方法重复性良好 ∀
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第 vt卷第 tt期
ussy年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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∏±¨ oussy
218 回收率试验 采取加样回收法 o精密称取已知
含量的同一批样品 x份 o每份样品 t ªo精密加入黄
芪甲苷对照品溶液 ts °ks1sy ª#ptl o按供试品溶
液制备方法制备 o按上述方法测定 ∀结果样品的平
均回收率为 ||1y h o ≥⁄为 u1| h ∀
219 样品测定 精密吸取对照品溶液 t ous Λo供
试品溶液 us Λo注入液相色谱仪 o测定 o以外标两点
法对数方程计算黄芪甲苷的含量 o即得 ∀x|个黄芪
样品的测定结果见表 t ∀
2110 不同产地黄芪样品黄芪甲苷的聚类分析
表 t 黄芪药材样品及黄芪甲苷含量测定
药材号 产地或来源 等级 !品种 收集日期 含量r°ª#ªpt
t 内蒙古巴盟朝阳乡 二等品 t|||2sz s qux
u 内蒙古巴盟朝阳乡 三等品 t|||2sz s qyz
v 内蒙古巴盟朝阳乡 四等品 t|||2sz t qtt
w 内蒙古巴盟朝阳乡 五等品 t|||2sz t qvw
x 内蒙古巴盟朝阳乡 小节子 t|||2sz s q|t
y 内蒙古巴盟朝阳乡 中节子 t|||2sz s qxz
z 内蒙古包头固阳下湿壕乡 饮片 t|||2sz t qws
{ 山西浑源 p tl t|||2sz s q|z
| 甘肃陇西 栽培 ussu2sx t qwy
ts 甘肃陇西 栽培 ussu2sx t qwv
tt 甘肃陇西 栽培 ussu2sx t qzs
tu 内蒙古 三九万荣提供 ussu2s| s qxx
tv 内蒙古 栽培 ussv2tt s qz|
tw 内蒙古 无锡山禾提供 ussu2ts s qyz
tx 内蒙古包头固阳 晋新双鹤提供 ussu2sz t qvv
ty 内蒙古包头固阳 一年生 usst2tu t qyy
tz 内蒙古包头固阳 二年生 usst2tu t qyx
t{ 辽宁省抚顺清源乡 野生膜荚黄芪 o饮片 ussu2s| s qyz
t| 河北k辽宁沈阳通顺药材批发站lul 栽培 o饮片 ussu2s| t qsu
us 内蒙古k黑龙江哈尔滨三棵树药材市场lul 野生 ussu2s| s qzu
ut 黑龙江伊春市上甘岭林区 栽培 ussu2s| s q|u
uu 辽宁省朝阳市 栽培 o饮片 ussu2s| s qvt
uv 内蒙古k辽宁省营口药材公司lul 野生 o饮片 ussu2s| s qy|
uw 不详k辽宁抚顺中药材市场lul 膜荚黄芪 o栽培 o饮片 ussu2s| t qvt
ux 辽宁k辽宁抚顺中药材市场lul 野生 o饮片 ussu2s| s qxs
uy 辽宁k辽宁抚顺中药材市场lul 栽培 o饮片 ussu2s| t qst
uz 辽宁抚顺市小东乡康西村 膜荚黄芪 o野生 ussu2s| s qyz
u{ 甘肃省k陕西省西安市东郊药市lul 栽培 ussu2ts s qzz
u| 陕西彬县永络镇秋沟村 栽培 ussu2ts t q{s
vs 甘肃陇西k陕西省宝鸡市药材公司lul 栽培 ussu2ts s qvx
vt 山西省应县 野生 ussu2ts t qws
vu 山西大同浑源县 野生 ussu2ts s qtu
vv 山西绛县古绛镇二里半 野生 ussu2ts s qwx
vw 甘肃陇西 成都地奥提供 ussu2tt t qzt
vx 吉林 吉林修正提供 ussu2ts s q{u
vy 山西浑源县 三九邦而康提供 ussv2st s q|{
vz 山西浑源 正大青春宝提供 !饮片 ussv2sw t qww
v{ 陕西宝鸡 p tl p tl t qz{
v| 山西浑源恒山 t f p tl p tl t qsw
ws 山西浑源恒山 u f p tl p tl s qzu
wt 内蒙巴盟前旗朝阳榆树 p tl p tl s qxv
wu 山西浑源青磁窑乡西泥沟刘地 直播二年生 ussv2ts s q|v
wv 山西浑源青磁窑乡西泥沟北沟 直播四年生 ussv2ts t qty
ww 山西浑源青磁窑乡西泥沟北沟 直播五年生 ussv2ts s qyv
wx 山西浑源青磁窑乡英沟前地 人工栽培四年生 ussv2ts t qts
wy 山西浑源青磁窑乡英沟南坡 直播三年生 ussv2ts s q|x
wz 山西浑源青磁窑乡破兑白白草沟 人工栽培三年生 ussv2ts t quy
w{ 山西浑源青磁窑乡破兑白上麻地 直播四年生 ussv2ts s q{s
w| 山西浑源青磁窑乡桥乔沟余地 直播二年生 ussv2ts t qtw
xs 山西浑源官儿乡官儿村 直播二年生 ussv2ts t qtv
xt 山西浑源官儿乡官儿村 直播三年生 ussv2ts s q{t
#tv|#
第 vt卷第 tt期
ussy年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ tt
∏±¨ oussy
续表 t
药材号 产地或来源 等级 !品种 收集日期 含量r°ª#ªpt
xu 山西浑源官儿乡官儿村 直播四年生 ussv2ts s qyw
xv 山西浑源官儿乡官儿村 直播五年生 ussv2ts s qxs
xw 山西浑源官儿乡官儿村 人工栽培二年生 ussv2ts s q|s
xx 山西浑源官儿乡官儿村 人工栽培三年生 ussv2ts s q{w
xy 山西浑源官儿乡厂沟村 直播二年生 ussv2ts u qux
xz 山西浑源官儿乡厂沟村 直播三年生 ussv2ts t qus
x{ 山西浑源官儿乡厂沟村 直播四年生 ussv2ts s q{u
x| 山西浑源官儿乡穆庄村 人工栽培二年生 ussv2ts t qw{
注 }tl情况不祥 ~ul括号外注明的是药材的产地 o括号内是药材的购买地
不同产地黄芪样品的黄芪甲苷含量聚类分析结果见
图 u ∀从图中可以看出 o不同产地黄芪药材根据黄
芪甲苷含量的不同 o分为两大类 o一类黄芪甲苷的含
量 t °ª#ªpt o另一类黄芪甲苷的含量 t °ª#ªpt ∀
其中黄芪甲苷含量较高的内蒙古固阳的 ty号 otz
号样品 o甘肃陇西的 tt号 ovw号样品 o陕西的 u|号
和 v{号样品由于黄芪甲苷的含量接近 o被聚为一
类 ~另外一组黄芪甲苷含量稍低一些的内蒙古巴盟
的 w号 oz号 otx号样品 o内蒙古固阳的 tt号样品 o
甘肃的 |号 ots号 ouw号样品及山西应县的 vt号和
山西浑源的 vz号 owz号 oxz号和 x|号样品被聚为
一类 ∀由于两组黄芪甲苷的含量比较接近 o因此它
们的聚类关系也比较相近 ∀
图 u 不同来源黄芪药材黄芪甲苷含量的聚类分析图
3 讨论
311 5中国药典6ussx年版中黄芪药材的制备方法
比较繁琐 o本研究简化了药材的前处理过程 o使得药
材的分析速度大大加快 ∀另外 o考虑到氨试液的加
入 o是为了使黄芪中的其他皂苷转化为黄芪甲苷≈y o
为了考察转化的完全与否 o通过加入不同量的氨试
液k测定溶液的 ³ o{ ∗ tvl和不同的静置时间ks ∗
wx °¬±l进行考察 o结果当 ³ ∴tt o静置时间为 vs
°¬±时 o药材中黄芪甲苷的含量最高 o故最终确定了
样品的制备方法 ∀
312 不同产地黄芪药材黄芪甲苷含量比较可见 o黄
芪药材中黄芪甲苷是以几个道地产地 o如山西浑源 !
内蒙古固阳 !甘肃陇西所产药材的含量为高 o并且质
量稳定 ∀
313 栽培品与野生品黄芪甲苷含量比较结果表明 o
栽培品黄芪甲苷的含量高于野生品及半野生品k直
播方式l ∀
314 不同生长年限黄芪药材黄芪甲苷含量比较发
现 }无论是人工栽培品 o还是半野生品均是随着栽培
年限的增长 o黄芪甲苷的含量会逐年下降 o这与胡芳
弟等≈x 对甘肃省黄芪药材进行测定的结果相似 ∀由
于栽培品实际上是播种 t年后移栽 o实际生长时间
仍是 u年 o所以不论是栽培品还是半野生品 o甲苷都
以二年生为高 ∀
315 不同等级黄芪药材黄芪甲苷含量比较 }t ∗ w
号药材为同一产地不同等级的药材 o其黄芪甲苷的
含量随着等级的升高逐渐降低 ∀这是因为商品黄芪
等级的划分主要是根据药材的外观如粗细 !长短 o其
外观越好 o等级越高 ∀而一些外观差的药材 o往往是
一些生长年限较短的药材 o其皮部所占的比例较大 o
而黄芪甲苷主要存在于根的形成层以外的部分 o因
此含量较高 ∀随着年限的增加 o皮部所占比例降低 o
因此黄芪甲苷的含量也就降低 ∀
≈参考文献
≈t 中国药典 1 一部 1ussx1utu1
≈u 肖培根 1 新编中药志 1 第 t 卷 1 北京 }化学工业出版社 o
#uv|#
第 vt卷第 tt期
ussy年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ tt
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ussu1{zy1
≈v 李 江 o李颖倩 1 黄芪甲甙分析方法研究概况 1 北京中医 o
usss okwl }xs1
≈w 赵灵芝 1°≤2∞≥⁄法测定黄芪中黄芪甲苷的含量 1 药物分析
杂志 ot||| ot|kyl }wsv1
≈x 胡芳弟 o封士兰 o赵健雄 o等 1°≤ 法测定黄芪中黄酮类成分
和黄芪甲苷的含量 1 分析测试技术与仪器 oussv o|kvl }tzv1
≈y 纪松岗 o李 翔 o朱东亮 o等 1 高效液相2蒸发光散色检测黄芪
药材中黄芪甲苷的含量 1 药学实践杂志 oussx ouvkxl }u|x1
≈责任编辑 张宁宁
≈收稿日期 ussx2s|2us
≈基金项目 广西区自然基金项目k桂科自 svv|svul
≈通讯作者 3李俊 oר¯ }kszzvlx{sv|sz o∞2°¤¬¯ }¯¬∏±|x|v tyv q
¦²°
满山香子化学成分研究
李 俊 3 o李 甫 o陆园园 o温桂清 o苏小建
k广西师范大学 资源与环境学系 o广西 桂林 xwtsswl
满山香子为五味子科 ≥¦«¬¶¤±§µ¤¦¨¤¨ 植物满山香
Σχηισανδρα προπινθυαk • ¤¯ l¯ ²²®1©1 ·¨×«²°¶1 的种子 ∀
满山香广泛分布于我国广西 !云南等省区≈t o它含大
量保肝降酶 !抗艾滋病毒 !抗癌和 °ƒ拮抗等活性成
分 o其研究日益受到重视≈u2y ∀作者从满山香子中分
离得到 x个化合物 o均为首次从该植物中分得 ∀
1 仪器与材料
熔点用 ÷ p y型显微熔点测定仪测定 o温度未
校正 ∀t2 和tv ≤2 谱用
µ∏®¨µp xss型核磁
共振仪测定 o×≥ 为内标 ∀质谱用 ƒ¬±±¬ª¤± ×µ¤¦¨
⁄≥± 四极杆质谱仪测定 ∀薄层色谱硅胶和柱色谱硅
胶均为青岛海洋化工厂生产 o葡聚糖凝胶 ≥¨ ³«¤§¨¬
2us为上海安玛西亚生物技术有限公司生产 o十
六碳酸标样购自北京舒伯伟化工仪器有限责任公
司 ∀溶剂均由广州化学试剂二厂生产 ∀满山香子于
ussu年 ts月采自广西桂林龙胜 o经中国科学院广西
桂林植物所黄定中副研究员鉴定 ∀
2 提取和分离
满山香子 u ®ªo粉碎 o用 zx h乙醇 ts 回流提
取 v次 o每次 u «o得粗提取物 uy{ ª∀用水混悬后依
次用石油醚 !氯仿 !醋酸乙酯和正丁醇各萃取 v次 o
回收溶剂后得醋酸乙酯萃取物 w{ ª∀将醋酸乙酯萃
取物经硅胶柱色谱 o以氯仿2甲醇ktssΒs ∗ xsΒxsl进
行梯度洗脱 ∀将氯仿洗脱物合并 o经硅胶柱色谱和
制备薄层色谱分离得化合物 1k{ °ªl ~将 |xΒx洗脱
部分合并 o经反复硅胶柱色谱 !≥¨ ³«¤§¨¬ 2us柱色
谱和制备薄层色谱分离得化合物 2 kv{ °ªl o3ktz
°ªl o4kut °ªl和 5kty °ªl ∀
3 结构鉴定
化合物 t 白色针状晶体 o°³tws ∗ twu ε ∀t2
谱和熔点数据与文献≈z 报道的 Β2谷甾醇数据
一致 o故鉴定化合物 1为 Β2谷甾醇 ∀
化合物 2 白色针状晶体 o°³tuw ∗ tux ε ∀t2
kxss ½o≤⁄v≤≤⁄vl ∆}z1zykt o§§oϑ z1zw o
s1|{ ½l oz1xykt o§§§oϑ {1wx oz1ut os1|{ ½l o
z1wvkt o§oϑ {1wx ½l oz1txkt o§§oϑ z1zw o
z1ut ½l ow1|skt o§oϑ z1u{ ½l ov1|tkt o§§oϑ
tu1s ou1s ½l ov1zukt o§§oϑ tu1s ox1{s ½l ov1{{
kv o¶o2≤vl ov1vs ∗ v1ysk多个 o°l ∀tv ≤2
ktux ½o≤⁄v≤≤⁄vl ∆}tut1uvk≤2tl otxz1xxk≤2ul o
tt{1szk≤2vl otvv1|yk≤2wl otuu1w{k≤2xl otvs1z|k≤2
yl otyy1zzk≤2zl oxt1z{k≤2{l otsv1u|k≤2tχl ozv1|u
k≤2uχl ozz1uu k ≤2vχl ozs1ts k ≤2wχl ozy1tz k ≤2xχl o
yt1xzk≤2yχl ∀以上数据与文献≈{ 报道的数据一致 o
故鉴定化合物 2为苯甲酸甲酯2u2 Ο2Β2 ∆2葡萄糖苷 ∀
化合物 3 无色针状晶体 o°³tx{ ∗ tys ε ∀t2
kxss ½o≤⁄v≤≤⁄vl ∆}z1{{kt o§§oϑ z1{| o
t1ut ½l oz1xukt o§§§oϑ z1{| oz1xv ot1ut ½l o
y1|wku o°l ∀tv ≤2 ktux ½o≤⁄v≤≤⁄vl ∆}
ttu1x|k≤2tl otyt1|uk≤2ul ottz1s{k≤2vl otvx1y|k≤2
wl ott|1sxk≤2xl otvs1vyk≤2yl otzt1{|k2≤l ∀以
上数据与文献≈| 报道的数据一致 o故鉴定化合物 3
为水杨酸 ∀
化合物 4 白色无定型粉末 ∀ ∞2≥ µ/ ζ }uxy
#vv|#
第 vt卷第 tt期
ussy年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ tt
∏±¨ oussy