全 文 ：±¤± ª¯¼¦²¶¬§¨ ¶©µ¤¦·¬²± k„2…2tloº«¬¦« º¤¶©∏µ·«¨ µ¬¶²¯¤·¨§ ©µ²° „2…o ¶«²º §¨ ¶¬ª±¬©¬¦¤±·¤±·¬2¬±©¯¤°°¤·²µ¼ ¤¦·¬√¬·¼ ¤±§ ¬¨«¬¥¬·¨§
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[ Κεψ ωορδσ] Αλβιζια ϕυλιβρισσιν~ ¬¯ª±¤± ª¯¼¦²¶¬§¨ ¶~ ≤ 2 ≥2 ≥~ ¤±·¬2¬±©¯¤°°¤·¬²±
≈责任编辑 牛泽宇  
≈收稿日期   ussz2sw2u{
≈通讯作者   3 高秀丽 oר¯}ks{xtly|s{wy{
龙血竭高效液相色谱特征研究
高秀丽 3 o蒋 蒨 o王鹏娇 o张 敏
k贵阳医学院 药学院 o贵州 贵阳 xxssswl
≈摘要   目的 }用 ‹ °≤法对龙血竭指纹图谱进行研究 ∀方法 }采用色谱条件 ∞¦¯¬³¶¨ ÷ ⁄…2’⁄≥柱 kw1y °° ≅
txs °°ox Λ°l~流动相乙腈 2水 o梯度洗脱进行色谱分离 ~检测波长为 uzx ±°~流速为 t1s °# °¬±pt ~柱温为 ws
ε o以龙血素 …作为参照物 ∀结果 }初步建立了龙血竭的 ‹ °≤指纹图谱 o并进行相似度评价 ∀结论 }方法简单可
行 o能够有效地控制龙血竭的内在质量 ∀
≈关键词   龙血竭 ~指纹图谱 ~‹ °≤~相似度
≈中图分类号   • u{wqt ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlt|2usux2sv
龙血竭为百合科植物剑叶龙血树 ∆ραχαενα χο2
χηινχηινενσισk²∏µql≥q ‹ q ≤«¨ ±含脂木质部经提取
加工制成的树脂 o含多种黄酮类 k如龙血素 „!龙血
素 …!龙血素 ≤ l!皂苷类 !甾醇类等化合物 o具有活
血散瘀 !消炎止痛 !收敛止血 !生肌敛疮 !补血益气等
功效 ∀药理研究显示其具有抗细菌 !真菌和其他微
生物 !抗氧化作用 o止血 !活血 !降血糖等作用 ≈tou  ∀
t||s年广西药学工作者将国产血竭开发成我国的
中药一类新药 o命名为 /广西血竭 0 ∀ t|||年 /广西
血竭 0的新药试行标准转为正式标准 o定名为 /龙血
竭 0 ∀目前市场上 o龙血竭作为一种中药原料药已
有多个厂家生产 ∀龙血竭其质量控制手段主要有薄
层色谱法 ≈v 和采用高效液相色谱法对已知化合物
k如龙血素 …!龙血素 „和 …等 l进行含量测定 ≈w2z  ∀
由于受到天气 !气候 !产地等各种因素的影响 o有效
生物活性成分的含量会有较显著的差异 o从而影响
龙血竭的质量 ∀为了更好地控制龙血竭的质量 o本
文首次采用 ‹°≤法建立了龙血竭的指纹图谱 ∀
1 仪器与试药
美国安捷伦 ttss高效液相色谱仪 o∞¦¯¬³¶¨
÷⁄…2≤t{色谱柱 kw1y °° ≅ txs °°ox Λ°l! °«¨ 2
±²° ±¨ ¬¨2≤t{保护柱 kv °° ≅ w1y °°ox Λ°l∀龙血
素 „ 对照品 k中国药品生物制品检定所 o批号
tttyys2ussvstlo龙血素 …对照品 k中国药品生物制
品检定所 o批号 tttxx{2ussvsvl∀乙腈为色谱纯 o
其余试剂均为分析纯 ∀龙血竭原料药样品来源于不
同的厂家和不同批号 k市售购得 o表 tl∀
表 t 龙血竭测试样品
样品 批号 厂家 产地
≥t swsusv 云南省西双版纳制药厂 云南
≥u sxstsx 云南省西双版纳制药厂 云南
≥v sxsysw 云南省西双版纳制药厂 云南
≥w ussysysv 中国科学院版纳名盛制药厂 云南
≥x ussxs|uy 昆明大观制药厂 云南
≥y svs{{u 昆明大观制药厂 云南
≥z sxsvst 云南省西双版纳制药厂 云南
≥{ sysust 云南省西双版纳制药厂 云南
≥| sxs|sw 云南省西双版纳制药厂 云南
≥ts sxs|s{ 云南省西双版纳制药厂 云南
2 方法与结果
2q1 色谱条件
∞¦¯¬³¶¨ ÷⁄…2≤t{色谱柱 kv °° ≅ w1y °°ox
Λ°l! °«¨ ±²° ±¨ ¬¨2≤t{保护柱 kv °° ≅ w1y °°ox
#xusu#
第 vu卷第 t|期
ussz年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ t|
’¦·²¥¨ µo ussz
Λ°l~检测波长 uzx ±°~体积流量 t1s °# °¬±pt ~
进样体积 ts ˏ~柱温 ws ε ~流动相乙腈 2水梯度洗
脱 ks ∗ tx °¬±otΒv~tx ∗ vs °¬±ouΒv~vs ∗ xx °¬±o|Β
ttl∀
2q2 对照品溶液的制备
取龙血素 …对照品适量 o精密称定 o加甲醇溶
解 o制成 tu1st Λª# °pt的龙血素 …对照品溶液 ∀
取龙血素 „和 …对照品适量 o精密称定 o加甲醇制
成含 uy1sy Λª# °pt龙血素 „和 t{1st Λª# °pt
龙血素 …的对照品溶液 o见图 t∀
2q3 供试品溶液的制备
取样品约 s1t ªo精密称定 o至 ux °量瓶中 o加
甲醇 us °o溶解 o定容至刻度 o摇匀 o滤过 o即得 ∀
见图 t∀
图 t 龙血竭对照品及样品 ‹ °≤图
|q龙血素 „~ts≥q龙血素 …~
¤q龙血素 „和龙血素 …对照品溶液 ~¥q供试品溶液
2q4 重现性试验
取同一批号的龙血竭 o粉碎成细粉 o分别精密称
取 y份 o制备供试品溶液 o分别进样 o测得结果表明 o
各共有指纹峰的相对保留时间和相对峰面积的
• ≥⁄均小于 vh o表明样品重现性良好 ∀
2q5 精密度试验
取重现性试验中同一供试品溶液 o连续进样 x
次 o测得结果表明 o各共有指纹峰的相对保留时间和
相对峰面积的 • ≥⁄均小于 vh o表明精密度良好 ∀
2q6 稳定性试验
取同一批号的龙血竭 o粉碎成细粉 o精密称量 o
制备供试品溶液 o分别在 souowo{otyouw «进样 o测
得结果表明 o各共有指纹峰的相对保留时间和相对
峰面积的 • ≥⁄均小于 vh o表明供试品溶液在 uw «
内稳定 ∀
2q7 指纹图谱的建立
2q7q1 指纹图谱的测定 分别精密吸取对照品溶
液和供试品溶液各 ts ˏo注入高效液相色谱仪 o记
录 xx°¬±的色谱图 ∀
2q7q2 共有峰的确定 按照 5中药注射剂指纹图
谱研究的技术要求 k暂定 l6 ≈{ 规定 o测定 ts批不

图 u t ∗ ts龙血竭的 ‹ °≤图
相同厂家不同批次龙血竭的指纹图谱 o其中 tt个峰
为龙血竭的共有指纹峰 o样品中 |号峰为龙血素 „
的色谱峰 o样品中 ts号峰为龙血素 …的色谱峰 o其
响应值较高 o色谱峰较窄 o峰形好 ∀因此以 ts号峰
k龙血素 …l作为色谱指纹图谱的参比峰 o计算各共
有指纹峰相对于参比峰的相对保留时间和相对峰面
积的比值 ∀第 t ∗ tt共有峰的相对保留时间的平均
值分别为 s1tyv { k • ≥⁄ t1twh los1t{y { k • ≥⁄
s1xth los1v{x x k • ≥⁄ s1uyh lo s1wuz x k • ≥⁄
s1uth los1xvw w k • ≥⁄ s1t|h lo s1xx{ x k • ≥⁄
s1tth los1x{z { k • ≥⁄ s1tvh lo s1{{s v k • ≥⁄
s1s|h los1|x{ t k • ≥⁄ s1svh lo t1sss s k • ≥⁄
s1ssh lot1uuv wk• ≥⁄ s1szh l第 t ∗ tt共有峰的
相对峰面积的平均值分别为 s1xtt w k • ≥⁄
vs1v|h lot1stx x k• ≥⁄ zs1swh lot1xxv |k• ≥⁄
yu1|zh los1x|x { k• ≥⁄ uw1yzh los1z|v w k • ≥⁄
xs1ush los1x|u z k• ≥⁄ vx1txh los1zzx x k • ≥⁄
xy1z|h los1|{{ s k• ≥⁄ vv1vth lou1|uv t k • ≥⁄
xs1uth lot1sss s k • ≥⁄ s1ssh lot1xvz s k • ≥⁄
wu1zzh l∀
2q7q3 指纹图谱的相似度计算 指纹图谱相似度
可以评定各批次或各生产厂家产品指纹图谱间整体
相似性 o定量描述其各自化学组成的差异与波动 ∀
实验采用药典委员会推荐的中药色谱指纹图谱相似
度评价系统 k„版 lo对 ts批龙血竭进行相似度评
价 ∀将龙血竭指纹图谱导入相似度评价软件 o设定
匹配摸版 o进行谱峰自动匹配 o生成对照指纹图谱 o
进行相似度评价 o相似度分别为 s1{wyos1|zso
s1|s{os1{|uos1|vuos1{ysos1{xzos1|ysos1|wyo
s1|xt∀
3 讨论
由于龙血竭所含化学成分较多且结构相近 o采
用等度洗脱方式很难将其分开 o故本文采用梯度洗
脱以实现良好分离 ∀实验中考察了甲醇 2水 !乙腈 2
水 !甲醇 2s1th磷酸 !乙腈 2s1th磷酸等流动相系统
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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和梯度洗脱程序 ∀结果表明乙腈 2水系统最佳 o实验
中所确定的梯度程序使各色谱峰分离较好 o保留时
间适中 ∀
考察并比较了三氯甲烷 !醋酸乙酯 !甲醇 v种不
同溶剂的样品提取方法 o结果发现三氯甲烷作为溶
剂提取样品色谱峰出峰少 o龙血素 „和龙血素 …的
峰面积减小 ~醋酸乙酯作为溶剂提取样品色谱峰出
峰与甲醇作为溶剂提取样品色谱峰出峰的多少差不
多 o但个别峰的面积要较后者要小些 ∀故选用甲醇
为提取溶剂 ∀
采用高效液相色谱仪的二极管增列阵列检测器
对样品的吸收波长进行分析 ∀结果表明 o低波长处
基线漂移严重 o高波长处各组分的响应很小 o在 uzx
±°检测波长下 o基线较稳定 o色谱峰较多 o信息丰
富 o且龙血竭含多种黄酮类 k如龙血素 „!龙血素 …!
龙血素 ≤l化合物 o故选择 uzx ±°为最终检测波长 ∀
方法学的考察为考察分析方法的可靠性 o以龙
血竭 ≥tk样品 tl为代表 o对方法的稳定性 !精密度 !
重复性进行了考察 ∀结果显示 o该 ‹°≤法具有较
好的稳定性 !精密度 !重复性 ∀为龙血竭质量控制提
供了一定的科学依据 o也为龙血竭质量标准的提升
进行了有益的探索 ∀
从实验中不同生产厂家和不同批次的龙血竭原
料药指纹图谱中可以看出 ots批龙血竭指纹图谱中
主要色谱峰的整体图貌基本一致 ∀同时相似度评价
结果表明 o不同生产厂家 !同一生产厂的不同批次
间 o个别批次仍然存在一定的差异 k如样品 t!样品 y
和样品 zl∀因此 o为保证龙血竭中药原料药的质量
的稳定和一致性 o应固定药材原料的来源 !保证龙血
竭原料药提取工艺的稳定 ∀
≈参考文献  
≈t  陈定芳 o宋启示 q血竭资源开发的研究进展 ≈ q广州中医药大
学学报 ousswoutkyl}w{|q
≈u  蓝鸣生 q龙血竭研究进展 ≈ q医学文选 oussxouwkyl}tsxvq
≈v  王玉华 o穆生媛 o王 伟 o杭 盖 q薄层扫描法测定不同来源血
竭中血竭素含量 ≈ q时珍国医国药 ousssottktul}tszvq
≈w  李忠琼 o向 东 q‹°≤测定龙血竭中龙血素 „和龙血素 …的
含量 ≈ q华西药学杂志 oussxouskwl}vw{q
≈x  胡迎庆 o付 勇 o张庆云 q• °2‹°≤测定龙血竭胶囊中龙血素
„和 …的含量 ≈ q中国新药杂志 oussvotukul}ttuq
≈y  孙胜利 o宓鹤鸣 o娄子洋 o等 q影响国产血竭中龙血素 …含量测
定的干扰成分的分离鉴定 ≈ q解放军药学学报 oussuot{kul}
zwq
≈z  胡迎庆 o宗 宁 o刘岱琳 q反相高效液相色谱法测定龙血竭中
紫檀芪的含量 ≈ q药物分析杂志 oussuouukylowu{q
Ρ Π2ΗΠΛΧ χηαραχτεριστιχσ οφ δραγον. σβλοοδ
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(Σχηοολοφ Πηαρµ αχψ, Γυιψανγ ΜεδιχαλΧολλεγε, Γυιψανγ , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶·∏§¼ ·«¨ ©¬±ª¨ µ³µ¬±·²©§µ¤ª²±. ¶¥¯²²§µ¨¶¬±¤§µ¤¦²±¬¶¥¼ «¬ª« ³¨ µ©²µ°¤±¦¨ ¬¯´∏¬§¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¼q
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≈责任编辑 牛泽宇  
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