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Study on stability of curcumine, demethoxycurcumin and
bisdemethoxycurcumin

姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素稳定性研究



全 文 :Studiesonpreparativetechnologyandquantitativedeterminationfor
extractsoftotalsaponininroofofPanaxjaponicus
HEYumin,LUKeming,YUANDing,ZHANGChangcheng
(MedicalScienceColegeofChinaThreeGorgesUniversity,Yichang443002,China)
[Abstract] Objective:ToexploretheoptimumextractionandpurificationconditionofthetotalsaponinsintherootofPanax
japonicus(RPJ),andestablishitsqualitycontrolmethods.Method:DesignedL16(4
5)orthogonaltestwiththeextractionrateoftotal
saponinsasindex,todeterminetherationalextractionprocess,andthetechniquesofwatersaturatednbutanolextractionandacetone
precipitationwereappliedtopurifythealcoholextractofRPJ.Totalsaponinsweredetectedbyspectrophotometryanditstriterpenoidal
sapogeninoleanolicaciddetectedbyHPLC.Result:TheoptimumconditionsoftotalsaponinsfromRPJwasasfolows:thematerial
waspulverized,dippedin60% ethanolaqueoussolutionasextractsolventat10timesofvolume,andrefluxed3timesfor3heach
time.Extractantofwatersaturatednbutanolwithextractiontimesof3andprecipitantofacetonewithprecipitationamountof45times
wereincludedinthepurificationprocess,whichwouldobtainthequalityproducts.Thecontentoftotalsaponinscouldreachto
8348%,andoleanolicacidto3830%.Conclusion:Theoptimizedpreparativetechnologyisstable,convenientandpractical.The
extractrateofRPJwashighandsteadywiththistechnology,whichprovidednewevidenceforindustrializingproductionoftheplantand
developingnewdrug.
[Keywords]  Panaxjaponicus;totalsaponins;oleanolicacid;preparativetechnology;contentdetermination
[责任编辑 鲍 雷]
[收稿日期] 20080610
[作者简介] 韩刚,教授,主要从事中药有效成分及药物新剂
型的研究,Tel:(0315)3726303,Email:tsyxhg@163.com
姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素
稳定性研究
韩 刚,崔静静,毕 瑞,赵琳琳,张卫国
(华北煤炭医学院 药学系 河北省煤矿卫生与安全重点实验室,河北 唐山 063000)
[摘要] 目的:研究姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素在不同 pH缓冲溶液中的稳定性。方法:以
一定pH的缓冲溶液为反应介质,将姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素定量加入到反应介质中,高效液相
色谱法测定姜黄素类化合物浓度的变化,采用动力学方法建立姜黄素类化合物降解速率方程。结果:在相同的条
件下姜黄素类化合物的稳定性依次为:双去甲氧基姜黄素≥去甲氧基姜黄素≥姜黄素。结论:去甲氧基姜黄素对
姜黄素产生稳定作用最强,为姜黄素的天然稳定剂。
[关键词] 姜黄素;去甲氧基姜黄素;双去甲氧基姜黄素;稳定性;HPLC
[中图分类号]R284.1 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2008)22261103
  姜黄素(curcumin,CurⅠ)、去甲氧基姜黄素
(demethoxycurcumin,CurⅡ)和双去甲氧基姜黄素
(bisdemethoxycurcumin,CurⅢ)为常用中药材姜黄
中的有效成分,统称为姜黄素类化合物[1]。这3种
成分结构相近,具有多种相似的药理活性,如抗炎、
抗氧化、降血脂和抗癌活性[2]。近年来研究发现去
甲氧基姜黄素降血脂的活性明显高于姜黄素;防止
细胞脂类过氧化物的形成,去二甲氧基姜黄效果优
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    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol.33,Issue 22
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于去甲氧基姜黄素[3]。对去甲氧基姜黄素和双去
甲氧基姜黄素药理活性的研究日益引起人们的重
视[4]。姜黄素类化合物不稳定,易氧化,在碱性溶
液中易降解[5]。作者研究姜黄素、去甲氧基姜黄
素、双去甲氧基姜黄素在不同 pH缓冲溶液中的稳
定性及其相互作用。
1 仪器与试剂
Agilent1100型高效液相色谱仪(四元梯度泵,
手动进样,Agilent工作站);DC-1015低温恒温槽
(宁波海曙赛福实验仪器厂);AE240电子天平(瑞
士Metler公司);PHS-3C数字酸度计 (上海鹏顺
科学仪器厂)。
姜黄素对照品(中国药品生物制品检定所,批
号082329802);去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄
素对照品(上海科翔生物科技有限公司,含量≥
98%);甲醇为色谱纯(Fisher公司);其余试剂均为
分析纯。
2 方法与结果
2.1 缓冲溶液的配制 磷酸二氢钠氢氧化钠,三
羟甲基氨基甲烷盐酸为缓冲体系(姜黄素不溶于
水,溶于一定浓度的乙醇溶液,故缓冲溶液中含有
40%的乙醇),配成总浓度为02mol·L-1,pH分别
为600,700,800,900的缓冲溶液,缓冲溶液用
酸度计进行校正。
2.2 色谱条件 色谱柱 DiamonsilC18(46mm×
250mm,5μm);甲醇异丙醇水冰醋酸(20∶27∶48∶
5)为流动相;流速 05mL·min-1,柱温为室温;进
样量20μL;检测波长 420nm[8],见图1。
2.3 标准曲线 精密称取 CurⅠ,CurⅡ,CurⅢ对
  
1.姜黄素;2.去甲氧基姜黄素;3.双去甲氧基姜黄素
图1 3种成分HPLC图
照品各约3mg,分别置于25mL量瓶中,用无水乙
醇溶解并定容即为对照品溶液。将上述3种对照品
溶液分别稀释成10,20,40,80,120,200mg·
L-1。取20μL进样测定。以溶液浓度对峰面积进
行线性回归,回归方程及线性范围分别为 CurⅠ:
Y=3431X-273,r=09992,10~200mg·
L-1;CurⅡ:Y=1429X-788,r=09991,10~
200mg· L-1;CurⅢ:Y=2012X -574,
r=09994,10~200mg·L-1。
2.4 缓冲溶液pH对黄素稳类化合物定性的影响 
精密量取CurⅠ,CurⅡ,CurⅢ对照品溶液各4mL,分别
置于3个50mL量瓶中,缓冲溶液定容,迅速混匀,置
于低温恒温水浴中,25℃恒温,每隔1h取样,20μL
进样,分别测定CurⅠ,CurⅡ,CurⅢ的浓度C。以lgC对
时间t作图为一直线,表明姜黄素类化合物降解为一
级动力学过程。求出25℃不同pH条件下姜黄素类
化合物的降解速率方程、降解速率常数k、半衰期t1/2。
结果表明随着缓冲溶液的pH升高,姜黄素类化合物
的降解速率明显加快,见表1。
表1 25℃不同pH对姜黄素类化合物稳定性影响
pH 成分 动力学方程 r k t1/2/h
6 CurⅠ lgC=0901-0000686t 09979 0001580 4387
  CurⅡ lgC=0767-0000370t 09991 0000860 8056
  CurⅢ lgC=0703-0000292t 09987 0000672 10311
7 CurⅠ lgC=0922-0005700t 09990 001310 528
  CurⅡ lgC=0995-0003050t 09992 0007020 987
  CurⅢ lgC=0696-0002020t 09989 0004650 1491
8 CurⅠ lgC=1248-0014500t 09992 003330 208
  CurⅡ lgC=1042-0007680t 09998 001770 392
  CurⅢ lgC=0983-0004570t 09998 001050 659
9 CurⅠ lgC=1227-0020300t 09998 004680 148
  CurⅡ lgC=1117-0010600t 09996 002430 285
  CurⅢ lgC=0997-0003840t 09978 0008850 783
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2.5 去甲氧基姜黄素对姜黄素稳定性的影响 以
pH9的缓冲溶液为反应介质,反应温度为25℃,考
察去甲氧基姜黄素对姜黄素稳定性的影响。准确吸
取3mL姜黄素对照品溶液于50mL量瓶中,分别加
入03,06,10,15mL去甲氧基姜黄素储备液后,
按2.4项操作测定在去甲氧基姜黄素存在的条件
下,姜黄素的降解动力学参数。表2显示随着去甲
氧基姜黄素加入量的增加,姜黄素的稳定性增强。
表2 去甲氧基姜黄素对姜黄素稳定性的影响(25℃)
加入量
/mL
动力学方程 r k
t1/2
/h
00 lgC=05314-00203t 09986 468×10-2 148
03 lgC=05256-00179t 09936 413×10-2 168
06 lgC=05277-00160t 09906 369×10-2 188
10 lgC=05160-00148t 09911 341×10-2 203
15 lgC=05081-00132t 09920 304×10-2 228
2.6 双去甲氧基姜黄素对姜黄素稳定性的影响 
准确吸取3mL姜黄素对照品溶液于50mL量瓶中,
分别加入03,06,10,15mL双去甲氧基姜黄素
储备液,按2.4项操作测定在双去甲氧基姜黄素存
在的条件下,姜黄素的降解动力学参数。表3显示
双去甲氧基姜黄素对姜黄素的稳定性影响较小。
表3 双去甲氧基姜黄素对姜黄素稳定性的影响(25℃)
加入量
/mL
动力学方程 r k
t1/2
/h
00 lgC=05314-00203t 09986 468×10-2 148
03 lgC=04913-00200t 09959 462×10-2 150
06 lgC=04920-00183t 09949 423×10-2 158
10 lgC=04811-00165t 09823 381×10-2 162
15 lgC=04647-00158t 09262 363×10-2 171
3 讨论
姜黄素类化合物随着溶液 pH升高,降解速率
明显加快,姜黄素类化合物降解反应为一级动力学
过程。在pH6~9的缓冲溶液中,姜黄素类化合物
的稳定性为双去甲氧基姜黄素≥去甲氧基姜黄素≥
姜黄素。这可能与姜黄素类物苯环上的OH和
OCH3都是给电子能力较强的基团,使苯环电子密
度增加,碳链上发生亲电反应的反应活性增加。当
苯环上失去OCH3后,给电子能力减弱,碳链的亲电
反应活性减弱。因此,姜黄素分子的化学活性最强,
最不稳定,而去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素分
子的化学活性低,稳定性高。
中药姜黄中主要活性成分为姜黄素类化合物,
包括姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素,
其中去甲氧基姜黄素对姜黄素的稳定作用最强,在
中药姜黄中为姜黄素的天然稳定剂,因此在开发姜
黄素制剂时,选用姜黄的乙醇提取物为原料,有利于
提高姜黄素制剂的稳定性。去甲氧基姜黄素增加姜
黄素的稳定性的原因,有待进一步研究。
[参考文献]
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Studyonstabilityofcurcumine,demethoxycurcuminand
bisdemethoxycurcumin
HANGang,CUIJingjing,BIRui,ZHAOLinlin,ZHANGWeiguo
(PharmaceuticalDepartment,NorthChinaCoalMedicalUniversity,Tangshan063000,China)
[Abstract] Objective:Toinvestigatethestabilityofcurcumin,demethoxycurcuminandbisdemethoxycurcuminindiferent
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bufersolution.Method:TodetermineconcentrationofcurcuminbyHPLCwhenaddedcurcumin,demethoxycurcuminandbisdeme
thoxycurcuminintothebufersolutiontheequationofdegradationwasestablished.Result:Thesequenceofstabilityarebisdemethoxy
curcumin≥demethoxycurcumin≥curcuminatthesamecondition.Conclusion:Thedemethoxycurcumincanstabilizecurcuminmore
strongthantheothers.Thedemethoxycurcuminisanaturestabilizingagentforcurcumin.
[Keywords] curcumin;demethoxycurcumin;bisdemethoxycurcumin;stability;HPLC
[责任编辑 鲍 雷]
[收稿日期] 20080318
[基金项目] 国家自然科学基金项目(30672585)
[通讯作者] 张玉杰,Tel:(010)84738618,Fax:(010)847386
11,Email:zhyj227@126.com
黄连吴茱萸药对配伍变化对黄连生物碱煎出
及其对大鼠小肠吸收的影响
孙万晶1,张玉杰1,姚 南2,姜 昊1,汪 祺1
(1.北京中医药大学 中药学院,北京 100102;
2.兰州大学 第一医院,甘肃 兰州 730000)
[摘要] 目的:研究吴茱萸对黄连生物碱成分煎出和的大鼠小肠吸收的影响,探讨黄连吴茱萸药对配伍的机
理。方法:以HPLC测定黄连生物碱成分含量,采用大鼠非翻转肠囊实验和翻转肠囊实验,考察吴茱萸对黄连生物
碱小肠吸收和转运的影响。结果:随吴茱萸配伍比例的增加黄连煎液中生物碱成分含量呈下降的趋势,黄连配伍
吴茱萸后可使小肠吸收黄连生物碱作用得到改善,当黄连与吴茱萸配比为6∶1时,黄连生物碱成分的小肠吸收最
为明显。结论:黄连吴茱萸配比为6∶1时,吴茱萸促进黄连生物碱的小肠吸收最强,小肠吸收是黄连吴茱萸配伍作
用的重要环节。
[关键词] 黄连吴茱萸药对配伍;小肠吸收;黄连生物碱
[中图分类号]R284.1 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2008)22261403
  黄连为常用中药,历代多以药对配伍形式入药。
黄连配伍吴茱萸以左金丸(6∶1)最为著名,二药一
主一辅,一寒一热,相反相成,以黄连为主,主要用于
去肝火,用治肝火盛之胁痛、呕吐吞酸诸症。现代研
究表明左金丸中生物碱是其发挥治疗作用的主要活
性部位[1],目前的研究多集中在配伍对黄连、吴茱
萸生物碱含量及药效的影响[24],尚未见到有关配伍
后体内相互作用方面的研究报道。已有研究表明黄
连中的小檗碱及其衍生物是肠道 P糖蛋白的底物,
其口服生物利用度低下的原因主要与肠道 P糖蛋
白外排作用有关[5]。因此,作者试图通过二者在肠
道内吸收可能存在的相互作用,探讨黄连与吴茱萸
配伍的机理。
1 材料
美国 Agilent1100高效液相色谱仪,包括四元
梯度洗脱系统,DAD检测器,Agilent色谱工作站;
ER-182A型精密电子天平(日本 A&D公司);T-
500型电子天平(常熟双杰测试仪器厂);CU420型
电热恒温水箱(上海一恒科学仪器有限公司)。黄
连、吴茱萸药材饮片为市售,经北京中医药大学中药
学院中药生药系张贵君教授鉴定分别为毛茛科植物
黄连CoptischinensisFranchL.的干燥根茎和芸香科
植物吴茱萸Evodiarutaecarpa(Juss.)Benth.的干燥
将近成熟果实;小檗碱、巴马丁对照品(中国药品生
物制品检定所,批号分别为1107132200218,110732
200406,供含量测定用)。乙腈为色谱纯,水为超纯
水,其他试剂均为分析纯。
SD大鼠,雄性,(250±20)g(北京维通利华实
验动物技术有限公司),动物饲养生产合格证号
SCXK(京)2002003。
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