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鸡内金不同炮制品对大鼠胃液及胃蛋白酶的影响



全 文 :综上所述,蒙药组方塔米尔可促进小鼠游泳运
动诱导产生的脂质过氧化产物 MDA的有效消除,
同时可增强小鼠脑组织和骨骼肌组织抗氧化酶活
力,从而对运动源性自由基的消除产生促进作用,使
机体组织细胞能够有效抵制自由基的氧化损伤,保
护脂质膜,维持组织细胞正常的生理功能。
[参考文献]
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天然产物研究与开发,2006,18:514.
[责任编辑 古云侠]
[收稿日期] 20080310
[基金项目] 湖南省教育厅科技处(07C055)
[通讯作者] 李飞艳,Tel:(0733)8519074,Email:lfy111@
hotmail.com
鸡内金不同炮制品对大鼠胃液及胃蛋白酶的影响
李飞艳,李卫先,李 达,彭学著,李 辉
(湖南中医药高等专科学校,湖南 株洲 412012)
  2005年版《中国药典》对鸡内金的炮制规定[1]
为:取鸡内金,照清炒法或烫法炒至鼓起。即将净砂
置热锅内,用武火加热至灵活状态时,投入大小一致
的鸡内金,不断翻动,烫至发泡卷曲,呈淡黄色时取
出,筛去砂,放凉;或将净鸡内金置热锅内,用中火加
热炒至焦黄色,取出,干燥。
实际工作中,由于鸡内金易于吸潮而引起药材
水分含量不均,含有油脂等杂质,许多中药炮制人员
对砂炒鸡内金或清炒鸡内金的方法掌握不够熟练,
导致鸡内金的炮制品颜色不一,发泡鼓起不完整、生
熟不均等现象,甚至部分焦化粘砂,从而影响整个炮
制品质量及临床疗效。因此,很多研究者[26]在不断
探讨寻求一种能够充分排除干扰,有效控制鸡内金
炮制品质量的工艺。在实践中作者发现按《中国药
典》方法炮制鸡内金时,成品很难达到药典所规定
的外观要求。作者采用一种改进的鸡内金炮制工
艺———火单法处理加砂烫法炮制可使产品外观达到
《中国药典》规定的要求[7]。
为了进一步探讨按新工艺炮制的鸡内金与传统
工艺炮制的鸡内金药理作用能否相符,作者比较了
2种炮制品水煎液对大鼠胃液及胃蛋白酶的影响。
1 材料
1.1 动物 SD大鼠,雌雄各半,体重(200±20)g,
购于长沙市开福区东创实验动物科技服务部,合格
证号 SCXK(湘)20060001。
1.2 药物与试剂 药典方法炮制的生品水煎液
(简称为药典生品);药典法炒鸡内金水煎液(简称
为药典炒品);新法炮制的生品水煎液(简称为新法
生品);新法炒鸡内金水煎液(简称为新法炒品);氢
氧化钠(天津市风船化学试剂科技有限公司,批号
20050913);盐酸(湖南省株洲市化学工业研究所,
批号20060923);甲基橙、酚酞(湖南湘中地质实验
研究所,批号20060915,20060712)。
1.3 仪器 TGL-16C高速离心机(上海安亭科学
仪器厂);LRH-1508培养箱(广东省医疗器械厂)。
2 方法
2.1 受试药物的制备 药典生品:选取生鸡内金,
拣去杂质,冷水洗净,捞出后低温(50℃)干燥,捣
碎,取500g于常温浸泡(25℃)30min,加蒸馏水2
L,煮沸后文火煎30min,过滤,药渣加蒸馏水再煎
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    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
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煮25min,合并两次滤液,浓缩至250mL,制成浓度
为2g·mL-1的药液;药典炒品:选取生鸡内金,捡
去杂质,大小分档,将净砂置热锅内,用武火加热至
灵活状态时,投入大小一致的鸡内金,不断翻动,烫
至发泡卷曲,呈淡黄色时取出,筛去砂,放凉,捣碎,
水煎液制备同药典生品;新法生品:选取生鸡内金,
捡去杂质,沸水烫软2min,捞出,01%冷碱水洗净,
再以清水反复漂净,低温(50℃)干燥后捣碎,水煎
液制备同药典生品;新法炒品:选取生鸡内金至低温
(50℃)干燥的操作同新法生品,随后大小分档,将
净砂置热锅内后的操作同药典炒品直至筛去砂,放
凉,捣碎,水煎液制备同药典生品。
2.2 鸡内金不同炮制品对大鼠胃液的影响 大鼠
分5组,每组10只,即空白组、药典生品组、药典炒
品组、新法生品组、新法炒品组。空白组以蒸馏水灌
胃,4个药物组分别以对应的水煎液灌胃,连续7d,
药液浓度均为2g·mL-1,按001mL·g-1的体积灌
胃,第7天给药后禁食18h,第8天乙醚麻醉,打开腹
腔,结扎幽门,再从十二指肠给药1次,缝合,5h后打
开腹腔,分离胃,沿胃大弯剪开,收集胃内容物,3000
r·min-1速度离心10min,得到澄清液,记录胃液量,
取1mL加入甲基橙和酚酞试剂,摇匀,用200mmoL
·L-1NaOH溶液滴定,边滴边摇,直到红色消失、橙
色开始出现时,此时用去的 NaOH量为游离酸终点
量。继续滴定直到红色出现(颜色不再加深)为止,
此时所用去NaOH量为总酸终点量。分别记录游离
酸及总酸终点量。计算出胃游离酸、胃总酸的浓度。
2.3 鸡内金不同炮制品对大鼠胃蛋白酶的影响 
动物分组及给药同22,麦特氏毛细玻管的制备见
文献方法[8]。第8天剪开胃之前的操作同22,剪
开胃后取胃内容物,离心,取胃液上清液1mL,放入
具塞量筒中,加005mol·L-1盐酸溶液15mL摇
匀,放入蛋白管两根,塞好瓶口,在37℃恒温箱中孵
育24h,取出蛋白管,用尺测量蛋白管两端透明部分
的长度(mm),以四端之值求其平均值。按文献方
法[8]计算胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量。
2.4 统计学方法 采用SPSS115统计软件,全部
数据以 珋x±s表示,组间比较用t检验。
3 结果
3.1 对大鼠胃液的影响 与空白组比较,各药物组
的胃液量均显著增加(P<005);在对游离酸的影
响方面,新法生品与新法炒品两组能使大鼠胃游离
酸浓度增加非常显著(P<001),药典生品与药典
炒品组无显著差异;对动物总酸浓度的影响,药典生
品与药典炒品组显著降低,新法生品与新法炒品组
无明显影响。与药典生品组比较,3个药物组均能
不同程度的增加大鼠胃液量,其中药典炒品与新法
生品组能显著增加大鼠胃液量;药典炒品组对游离
酸无明显影响,新法生品与新法炒品组均能非常显
著的增加大鼠胃游离酸浓度;3个药物组对总酸度
均无明显影响。与药典炒品组比较,新法生品与新
法炒品组使大鼠胃游离酸浓度增加非常显著,对胃
液总量及总酸度的影响无显著差异。见表1。
3.2 对大鼠胃蛋白酶的影响 与空白组比较,药典
表1 鸡内金的不同炮制品对大鼠胃液的影响(珋x±s,n=10)
组别 剂量/g·kg-1 胃液/mL 游离酸/mmol·L-1 总酸/mmol·L-1
空白   - 265±042 2218±456 10558±2638
药典生品 20 323±0331) 2403±649 7412±20951)
药典炒品 20 384±0571,3) 2089±286 7720±21401)
新法生品 20 478±0981,3) 3450±6662,4,6) 8638±2090
新法炒品 20 387±1061) 4267±7642,4,6) 9044±2533
  注:与空白组比较1)P<005,2)P<001;与药典生品组比较3)P<005,4)P<001;与药典炒品组比较5)P<005,6)P<001(表2同)
生品组对胃蛋白酶活性无明显影响,药典炒品、新法
生品、新法炒品组能显著增加大鼠胃蛋白酶活性
(P<005);各药物组均能显著增加大鼠胃蛋白酶
排出量,其中药典炒品、新法生品、新法炒品的影响
非常显著(P<001)。与药典生品组比较,药典炒
品、新法生品、新法炒品组对大鼠胃蛋白酶活性无明
显增加,对胃蛋白酶排出量增加均非常显著。与药典
炒品组比较,新法生品、新法炒品组对大鼠胃蛋白酶
活性与胃蛋白酶的排出量均无显著性差异。见表2。
表2 鸡内金的不同炮制品对大鼠胃蛋白酶的影响
(珋x±s,n=10)
组别
剂量
/g·kg-1
胃蛋白酶
U/mL
胃蛋白酶排出量
U/h
空白   - 30173±9498 14842±3315
药典生品 20 34200±10983 21529±46731)
药典炒品 20 45000±122321) 32067±60822,4)
新法生品 20 41150±62721) 37099±46412,4)
新法炒品 20 47801±144031) 34489±48782,4)
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4 讨论
鸡内金具有健胃消食,涩精止遗的功效。生鸡
内金长于攻积,通淋化石。炒鸡内金质地酥脆,便于
粉碎,并能增强健脾消积的作用,用于消化不良,食
积不化,脾虚泄泻,小儿疳积。鸡内金为临床常用的
健胃消食化积中药,多用于治疗小儿厌食、消化不良
等,姜春侠等[9]给患儿连续2周服用小儿复方鸡内
金散治疗厌食证效果明显。基于临床处方规定,一
般情况下每张处方剂量为3剂,对于慢性疾病不得
超过7日用量,而厌食或消化不良常为慢性疾病,因
此本研究中给大鼠连续用药7d后检测相应指标。
实验结果表明,鸡内金的不同炮制品对大鼠的
胃液量与胃蛋白酶活性都有一定影响,使各指标上
升,结果与鸡内金具有消食化积的传统功效相一致。
本研究旨在了解鸡内金不同炮制品对大鼠胃液
及胃蛋白酶的影响,得出新炮制方法是否可以进一
步推广使用。结果可知,新法对胃液的影响主要在
增加游离酸浓度方面,而且影响非常显著,同时新法
生品与新法炒品具有同样的效果;在对胃蛋白酶活
性及胃蛋白酶排出量的影响方面,新法炒品与药典
炒品不存在明显差异。
新法生品与新法炒品显著增加胃游离酸度的机
制,考虑是否因为鸡内金碱水洗净后没有漂洗干净,表
面残存有碱,导致大鼠服用含碱的药液后反馈性的引
起游离酸分泌增加,但在药物的制备过程中,对碱洗后
的鸡内金用大量清水进行了反复漂洗,不至于引起表
面残留碱液;是否碱液渗入了鸡内金内部,或者与大鼠
服药后其他机体因素相关,还有待进一步探讨。
[参考文献]
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[责任编辑 古云侠]
[收稿日期] 20080321
[通 讯 作 者]  张 振 秋,Tel:(0411)87586058,Email:
zhangzhenqiu@sina
黄连提取物中盐酸小檗碱在大鼠体内的药动学研究
王 静1,袁子民1,张 朔1,张振秋1,李可强2
(1.辽宁中医药大学 药学院,辽宁 大连 116600;2.辽宁省中药研究所,辽宁 沈阳 110161)
  黄连是临床常用的清热解毒类药物之一,其性
味苦寒,入心、肝、脾、胃、大肠诸经,具有较强的清
热,燥湿,泻火,解毒的功效。黄连的主要成分盐酸
小檗碱药动学研究大多采用兔子,这与人的药动学
有一定的差异,而且很少采用内标法,试验结果缺乏
准确性,其方法采用液相质谱联用技术较多,但不具
有应用广泛性。本研究以大鼠为药动学研究对象,
以盐酸两面针碱为内标,对血浆样品采用浓缩富集
的办法,建立高效液相色谱法研究黄连药材提取物
中盐酸小檗碱的药动学,为其药动学研究提供补充。
1 材料
1.1 动物
SD大鼠雌、雄兼用,体重250~300g,购自大连
医科大学实验动物中心,合格证号 SCXK(辽)2004
0017。
1.2 药物
盐酸小檗碱对照品(纯度 >985%,批号
110713200208),氯化两面针碱对照品(批号 848
9001),均购自中国药品生物制品检定所。黄连购
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