全 文 ：高效液相色谱法测定不同泽兰中咖啡酸的含量
聂 波t o刘 勇t o徐 青u o石晋丽t o梁鑫淼u o肖培根v 3
kt1 北京中医药大学 中药学院 o北京 tsstsu ~u1 中国科学院 大连化学物理研究所 o辽宁 大连 ttysuv ~
v1 中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所 o北京 tsss|wl
≈摘要  目的 }建立泽兰中咖啡酸的高效液相色谱含量测定方法 o并对不同产地和采收时间的 tw个样品进行
了定量分析 ∀方法 }用 vs h乙醇超声提取样品 o采用 ‹¼³¨µ¶¬¯ ’⁄≥u kw1y °° ≅ uxs °° ox Λ°l分析柱 o乙腈2s1u h磷酸
溶液kttΒ{|l等度洗脱 o于 vux ±°波长下检测 ∀结果 }ts个产地中河北产泽兰咖啡酸含量最高 ~产于北京的 x个不
同采收时间的样品以 {月样品含量高 ∀结论 }该方法灵敏快速 o准确可靠 o可用于泽兰的质量控制 ∀
≈关键词  泽兰 ~咖啡酸 ~高效液相色谱法 ~产地 ~采收时间
≈中图分类号  • u{w1t ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussyltt2s{{u2sv
≈收稿日期  ussx2tu2tx
≈基金项目  国家自然科学基金重大项目kvsxv{{yl ~中国科学
院知识创新工程重要方向项目kŽŠ≤÷u2≥• 2utvl
≈通讯作者  3肖培根 o∞2°¤¬¯}¬¬¤²³ªƒ ³∏¥¯¬¦q¥·¤q±¨ ·q¦±
泽兰为唇形科植物毛叶地瓜儿苗 Λψχοπυσ λυ2
χιδυσ ×∏µ¦½1 √¤µ1 ηιρτυσ • ª¨¨ 1¯的干燥地上部分 o具有
活血化瘀 o消肿利水之功效≈t  ∀主要分布于东北 !华
北 !华东 !中南 !西南及陕西 !甘肃等地 o于夏秋二季
茎叶茂盛时 o采割晒干≈u  ∀但药典记载的质量标准
内容尚不完善 o仅有薄层定性鉴别 o缺乏定量检测方
法和指标≈t  ∀咖啡酸 !迷迭香酸等多种酚酸类成分
已从泽兰中分离得到≈v ow  o本研究以咖啡酸为含量
测定指标 o采用 • °2‹°≤ 对来自河北 !北京 !山东 !
江苏 !江西 !湖南 !湖北等主要产地的 ts个样品中的
咖啡酸进行了含量测定 o同时还测定了产于北京的
其他 w个不同采收时间样品中的咖啡酸含量 o为泽
兰的质量控制提供了科学依据 ∀
1 仪器 !药品与试剂
„ª¬¯¨ ±·ttss高效液相色谱仪 o含在线脱气机 !
四元梯度泵 !自动进样器 !智能柱温箱 !光电二极管
阵列检测器k⁄„⁄l !化学工作站 ∀
甲醇 !乙腈k∞• ≤Ž公司 o色谱纯l o甲酸k百灵
威公司 o色谱纯l o醋酸 !三氟乙酸 !磷酸k×∞⁄Œ„ 公
司 o色谱纯l o实验用水为 ¬¯¯¬2± 超纯水 o其他试剂
均为分析纯 ∀
咖啡酸ktts{{x2usstsu o中国药品生物制品检定
所l otw个产地的泽兰样品均由中国医学科学院药
用植物研究所冯毓秀教授鉴定为毛叶地瓜儿苗 Λ1
λυχιδυσ √¤µ1 ηιρτυσ的干燥地上全草 ∀
2 方法与结果
211 对照品溶液的制备 精密称取咖啡酸 ts °ªo
置棕色量瓶中 o加甲醇定容至 ux °o其咖啡酸含量
为 s1w °ª# °pt ∀再精密吸取咖啡酸对照品溶液
s1x °o加甲醇定容至 ts °棕色量瓶中 o其咖啡酸
含量为 s1su °ª#°pt ∀
212 供试品溶液的制备 取泽兰各样品粉末kws
ε 干燥 v «o粉碎过 xs目筛lt ªo分别精密称定 o置具
塞锥形瓶中 o加入 vs h乙醇 us °o称定重量 o浸泡
s1x «o超声提取 t «o放冷 o再称定重量 o用 vs h乙醇
补足减失的重量 o摇匀 o用 s1wx Λ°微孔滤膜滤过 o
取续滤液作为供试品溶液 ∀
213 色谱条件 ‹¼³¨µ¶¬¯ ’⁄≥u 分析柱kw1y °° ≅
uxs °° ox Λ°l ~流动相乙腈2s1u h 磷酸溶液kttΒ
{|l ~流速 t °#°¬±p t ~检测波长 vux ±° ~进样量 ts
ˏ~柱温 ux ε ∀理论塔板数以咖啡酸计不低于
{ sss o分离度大于 t1x ∀色谱图见图 t ∀
214 线性关系的考察 分别精密吸取 s1su °ª#
°pt的咖啡酸对照品溶液 t ou ow oy o{ ots otu ˏ注
入液相色谱仪 o测定峰面积 o以咖啡酸含量k Ξ)为横
坐标 ,其峰面积吸收度积分值( Ψ)为纵坐标 ,绘制标
准曲线 ,其回归方程为 : Ψ € v {wu Ξ n yy1{z , ρ €
s1||| y(ν € zl o线性范围为 s1su ∗ s1uw Λª∀
215 精密度试验 精密吸取 s1su °ª#°pt咖啡酸
对照品溶液 ts ˏo连续进样 x次 o测得峰面积积分
#u{{#
第 vt卷第 tt期
ussy年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ tt
∏±¨ oussy

图 t 咖啡酸对照品和泽兰样品的 ‹°≤图
„1 对照品 ~…1 样品 ~t1 咖啡酸
值 • ≥⁄为 t1w h ∀
216 重复性试验 精密称取同一样品粉末 t ªkx
份l o按供试品溶液的制备方法制备 o进样 ts ˏo测
得咖啡酸含量的 • ≥⁄为 t1v h ∀
217 稳定性试验 同一供试品溶液 o从制备完毕
开始放置 o分别于 s ou ow oy o{ ots «进样检测 o其峰
面积积分值 • ≥⁄为 u1{ h ∀表明供试品溶液在 ts «
内比较稳定 ∀
218 加样回收率试验 精密称取已知含量的同一
药材粉末 t1s ªo加入一定量的咖啡酸对照品液 o按
供试品制备测定方法操作 o计算咖啡酸的平均回收
率为 |{1v h o• ≥⁄为 t1v h k ν € xl ∀
219 样品测定 分别精密吸取各样品 ts ˏ进样
测定 o计算含量 o结果见表 t ∀
表 t 不同产地及采收时间泽兰样品的咖啡酸含量k ν € vl
产地 采收日期 咖啡酸r°ª#ªpt • ≥⁄r h
河北 ussw2s{ s qwwx s qux
山东 ussw2s{ s qtz{ t qt
江苏 ussw2s{ s qtu{ s qzs
江西 ussw2s{ s quvs t qt
广西 ussw2s{ s qsy{ s q{s
湖北 ussw2s{ s quuu t qu
湖南 ussw2s{ s quty s qzw
安徽 ussw2s{ s qtxy t qu
甘肃 ussw2s{ s qtuu s qyt
北京2t ussw2sy2us s qt{u s qzx
北京2u ussw2sz2us s qtz| t qs
北京2v ussw2s{2us s quy| s q{x
北京2w ussw2s|2us s qutv t qw
北京2x ussw2ts2us s qszw t qu
3 讨论与结论
311 提取条件的选择 考察了水 ovs h oxs h ozs h o

|x h乙醇以及超声 !回流及冷浸 v种提取方法对咖
啡酸提取率的影响 o以水回流提取效率高 ovs h乙醇
超声提取次之 o但考虑咖啡酸含有酚羟基 o性质活
泼 o易氧化 o有醇存在利于其稳定 o因此采用 vs h乙
醇超声提取 o该方法较为快速 !简便 o提取效果高 ∀
312 流动相的选择 由于咖啡酸为有机酸 o酸性
可抑制电离 o因此采用酸性流动相 o比较了乙腈2
s1x h醋酸水 !乙腈2t1s h 醋酸水 !乙腈2s1x h 甲酸
水 !乙腈2s1sv h三氟乙酸水 !乙腈2s1t h磷酸水 !乙
腈2s1u h磷酸水等度和梯度洗脱对于样品中咖啡酸
的分离效果 o结果发现乙腈2s1u h磷酸水kttΒ{|l分
析得到的咖啡酸峰形尖锐 !对称并达到基线分离 ∀
文献报道咖啡酸含量测定曾使用乙腈2s1w h磷酸水
kttΒ{|l≈x 和乙腈2s1x h磷酸水k|Β|tl≈y 均使其得到
了较好的分离 o但考虑到 ³‹过低损伤 ’⁄≥柱 o故最
终采用乙腈2s1u h磷酸水kttΒ{|l为流动相 ∀
313 样品分析 本研究首次采用 ‹°≤ 测定了不
同产地及产于北京不同采收时间泽兰中的咖啡酸含
量 o结果表明产地和采收时间对于泽兰中咖啡酸含
量影响较大 ∀比较 ts个产地以河北产泽兰含量最
高 ~比较北京 x个采收时间样品以 {月泽兰的含量
高 o咖啡酸的动态变化大致趋势为 y月到 {月逐渐
升高 o然后逐渐递减 ots月最低 ∀这为泽兰的道地
产区的确定及合理的开发利用提供了科学依据 ∀
药典中泽兰的质量标准尚不完善 o缺乏定量的
质控指标 o根据本试验的测定结果 o• °2‹°≤可以较
好地对咖啡酸进行有效分离 o方法简便 !准备 !灵敏 o
可作为泽兰质量控制的指标成分 ∀
≈参考文献 
≈t  中国药典 q一部 qussx qtxz q
≈u  郑虎占 q中药现代研究与应用 q北京 }学苑出版社 q t||{ q
vstw q
≈v  ≠²¶«¬¨ ׄŽ„‹„≥‹Œo ≥¨ ¬­¬‘„Š˜ ’ o ¤µ¬®² ‘’Š˜≤‹Œo ετ αλq
°«¨ ±²¯¬¦¦²±¶·¬·∏¨±·¶²© Λψχοπυσ λυχιδυσq Νατ Μεδ , t||| o xvkxl }
uzv q
≈w  孙连娜 o陈万生 o陶朝阳 o等 q泽兰化学成分的研究k µl q第
二军医大学学报 oussw okvl }tzu q
≈x  杨 刚 o杜守颖 o吴 清 o等 q ‹°≤ 法测定忍冬藤中绿原酸
及咖啡酸含量 q中国药品标准 oussw oxkwl }wz q
≈y  黄 雄 o李 萍 o张重义 o等 q ‹°≤ 同时分析金银花中绿原
酸和黄酮类成分的方法建立及其应用 q中国药学杂志 oussx o
wsktsl }z{s q
k下转第 {|t页l
#v{{#
第 vt卷第 tt期
ussy年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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∏±¨ oussy
Εξπεριµενταλστυδψ ον προχεσσινγ οφ Παεονια λαχτιφλορα
‹∞ ≠¤±t o‹„’ ‹∏¬2§²±ªt o ‹∞ …¨ ¬2¬¬¤±ªu oׄ‘Š ¬2¼¬±ªt o‹„‘Š ±¬2º ¬¨t o • „‘Š «∏2­∏t
(t1 Ινστιτυτε οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα , Χηινα Αχαδεµψ οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Βειϕινγ tsszss , Χηινα ;
u1 Σχηοολ οφ Μεδιχινε , Χηινα Μεδιχαλ Υνιϖερσιτψ, Σηενψανγ ttssst , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ³µ²√¬§¨ ¬¨³¨µ¬° ±¨·¤¯ §¤·¤ ©²µ·«¨ ∏´¤¯¬·¼ ¦²±·µ²¯ ²© ³µ²¦¨¶¶¨§ Παεονια λαχτιφλορα o ¤ ≤«¬±¨ ¶¨ «¨µ¥¤¯
° §¨¬¦¬±¨ q Μετηοδ : ×µ¤§¬·¬²±¤¯ ³µ²¦¨¶¶¬±ª²© Π. λαχτιφλορα º¤¶¶¬°∏¯¤·¨§o¦²±·¨±·²©³¤¨ ²±¬©¯²µ¬± ¤±§º¤·¨µ ¬¨·µ¤¦·¶¤°²±ª§¬©©¨µ¨±·³µ¨³¤µ¤2
·¬²±¶º µ¨¨ ¤¶¶¤¼¨ §¥¼ ‹°≤ ~׫¨ ∏´¤±·¬·¤·¬√¨¦²µµ¨ ¤¯·¬²±¶¤°²±ª§¬©©¨µ¨±·³µ²¦¨¶¶¬±ª¦²±§¬·¬²±¶º µ¨¨ ¤±¤¯¼½¨ §o·«¨ ©¨©¨¦·¶²©³µ²¦¨¶¶¬±ª³¤µ¤°2
·¨¨µ¶²±·«¨ ¦²±·¨±·¶²©³¤¨ ²±¬©¯²µ¬± ¤±§º¤·¨µ ¬¨·µ¤¦·¶º µ¨¨ ¤¶¶¤¼¨ §¤±§¤±¤¯¼¶¨§qΡεσυλτ ανδ Χονχλυσιον : ׫¨ ¦²±·µ²¯¯¨ §³µ²¦¨¶¶¬±ª³¤µ¤° 2¨
·¨µ¶º µ¨¨ ¦²µµ¨ ¤¯·¨§º¬·«¦²√¤µ¬¤¥¯ ¶¨º«¬¦«¶«²º §¨·«¤·³µ²¦¨¶¶¬±ª³µ²¦¨§∏µ¨¶º¤¶¦²±·µ²¯ ¤¯¥¯¨o¤±§·«¨ «¨ ¤·¬±ª·¨°³¨µ¤·∏µ¨ º¤¶¤©¤¦·²µ¬°2
³¤¦·¬±ª·«¨ ¦²±·¨±·²©³¤¨ ²±¬©¯²µ¬±q
[ Κεψ ωορδσ] Παεονιαλαχτιφλορα ~³¤¨ ²±¬©¯²µ¬±~·µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨ ³«¤µ°¤¦¨∏·¬¦¤¯ ³µ²¦¨¶¶¬±ª
≈责任编辑 鲍 雷 
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ΗΠΛΧ δετερµινατιον οφ χαφφειχ αχιδ ιν Ηερβα Λψχοπι
‘Œ∞ …²t oŒ˜ ≠²±ªt o ÷˜ ±¬±ªu o≥‹Œ¬±2¯¬t oŒ„‘Š ÷¬±2°¬¤²u o ÷Œ„’ °¨ ¬2ª¨ ±v
(t1 Σχηοολ οφ Χηινεσε Πηαρµαχψ, Βειϕινγ Υνιϖερσιτψ οφ Χηινεσε Μεδιχινε , Βειϕινγ tsstsu , Χηινα ;
u1 ∆αλιαν Ινστιτυε οφ Χηεµιχαλ Πηψσιχσ, Χηινεσε Αχαδεµψ οφ Σχιενχεσ , ∆αλιαν ttystu , Χηινα ;
v1 Ινστιτυτε οφ Μεδιχιναλ Πλαντ , Πεκινγ Υνιον Μεδιχαλ Χολλεγε , Χηινεσε Αχαδεµψ οφ Μεδιχαλ Σχιενχεσ , Βειϕινγ tsss|w , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ §¨ √¨¯²³¤ ±¨ º ° ·¨«²§©²µ§¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²©¦¤©©¨¬¦¤¦¬§¬± ‹ µ¨¥¤¼¦²³¬¥¼ ‹°≤ ¤±§¤±¤¯¼½¨ ·«¨ ¶¤°³¯ ¶¨
©µ²° §¬©©¨µ¨±·«¤¥¬·¤·¶¤±§¦²¯¯¨ ¦·¬±ª·¬°¨q Μετηοδ : ׫¨ ¶¤°³¯ ¶¨º µ¨¨ ¬¨·µ¤¦·¨§º¬·«vs h ·¨«¤±²¯ ¥¼ ∏¯·µ¤¶²±¬¦q≥ ³¨¤µ¤·¬²± º¤¶¦¤µµ¬¨§²∏·
²± ¤ ‹¼³¨µ¶¬¯ ’⁄≥u ¦²¯∏°± ∏¶¬±ª ≤‹v≤‘2s1u h ‹v°’wkttΒ{|l ¤·§¨·¨¦·¬²± º¤√¨¯ ±¨ª·«vux ±° q Ρεσυλτ : ׫¨ «¬ª«¨¶·¦²±·¨±·²©¦¤©©¨¬¦¤¦¬§
º¤¶§¨·¨¦·¨§¬± ‹ µ¨¥¤¼¦²³¬©µ²° ‹ ¥¨¨¬¤°²±ª·¨± «¤¥¬·¤·¶o¤±§·«¨ ¶¤°³¯¨¦²¯¯¨ ¦·¨§¬± „∏ª∏¶·©µ²° …¨ ¬­¬±ª¶«²º §¨·«¨ «¬ª«¨¶·¦²±·¨±·¤2
°²±ª©¬√¨¶¤°³¯¨¦²¯¯¨ ¦·¨§©µ²° ∏±¨ ·² ’¦·²¥¨µqΧονχλυσιον : ׫¨ ° ·¨«²§¬¶¶¨±¶¬·¬√¨¤±§¤¦¦∏µ¤·¨ º¬·«ª²²§µ¨³¨ ¤·¤¥¬¯¬·¼ ¤±§¶∏¬·¤¥¯¨©²µ·«¨
∏´¤¯¬·¼ ¦²±·µ²¯ ²© ‹ µ¨¥¤¼¦²³¬q
[ Κεψ ωορδσ] ‹ µ¨¥¤¼¦²³¬~¦¤©©¨¬¦¤¦¬§~ ‹°≤ ~«¤¥¬·¤·~¦²¯¯¨ ¦·¬±ª·¬°¨
≈责任编辑 张宁宁 
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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