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Chemical constituents from Faeces bombycis

蚕沙化学成分研究



全 文 :蚕沙化学成分研究
崔锡强,李杏翠,王 磊,陈若芸
(中国医学科学院 北京协和医学院 药物研究所 中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室,
北京 100050)
[摘要] 目的:研究蚕沙中的化学成分。方法:应用色谱技术分离纯化,通过理化性质和波谱学方法鉴定化合
物的结构。结果:从95%乙醇提取物中分离得到15个化合物,分别鉴定为:3S,5Rdihydroxy6R,7megstigmadien9
one(1),3S,5Rdihydroxy6S,7megstigmadien9one(2),(6R,9R)3oxoαionolβDglucopyranoside(3),(6R,9S)3
oxoαionolβDglucopyranoside(4),blumenolCglucoside(5),byzantionosideB(6),alangionosideL(7),叶黄素(8),哌
可啉酸(9),甜菜碱(10),丙氨酸(11),谷氨酸(12),苯丙氨酸(13),亮氨酸(14),异亮氨酸(15)。结论:化合物1~
15均为首次从蚕沙中分离得到。
[关键词] 蚕沙;倍半萜类;氨基酸
[中图分类号]R284.1 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2008)21249304
[收稿日期] 20080403
[基金项目] 国家自然科学基金项目(30472142)
[通讯作者] 陈若芸,Tel:(010)83161622,Fax:(010)630177
57,Email:ruoyunchen@hotmail.com
  蚕沙Faecesbombycis为昆虫家蚕蛾 Bobyxmori
L.幼虫的干燥粪便。始载于《名医别录》,《本草纲
目》列于虫部第 39卷。蚕沙有祛风除湿、清热明
目、活血定痛的功能。主治风热目痛、风湿性心脏
病、关节炎、肢体麻木、风疹瘙痒、头痛头风等症,在
一些治疗糖尿病的复方中常使用蚕沙[1]。已有文
献[2]报道,蚕沙中除含有丰富的叶绿素外,还有大
量的类胡萝卜素、果胶、叶蛋白等成分。药理学试验
证实,蚕沙具有较高的营养作用,并有促进骨髓造
血,保肝,促进创伤愈合、抗溃疡和抗肿瘤等功能。
在对60%乙醇提取物化学成分研究[3]的基础
上,本研究进一步探索了蚕沙95%乙醇提取物中醋
酸乙酯部分、水部分的化学成分,从醋酸乙酯部分分
离得到一系列倍半萜及其苷类化合物1~7(图1),
从水部分分离得到水溶性成分化合物9~15。
1 仪器与试药
Agilent1100LCMSDTrapSL型质谱仪,Mercu
ry400型核磁共振仪,JASCO-712型旋光仪,Perkin
-Elmer241旋光仪,Boetius熔点测定仪(未校正);
岛津 LC-10ATvp高效液相色谱仪,紫外检测器,
ShimadzuLC-6AD系列泵系统,YMCPackODSA
图1 化合物1~7的结构式
色谱柱(20mm×250mm,10μm);Gilson302型中
压色谱仪。SephadexLH-20,RP-18(40~60μm)
购于Pharmacia公司,薄层色谱硅胶 GF254、柱色谱
硅胶(160~200目)均为青岛海洋化工厂生产,阳离
子交换树脂001×7(强酸性苯乙烯系阳离子交换树
脂)购于天津南开大学化工厂,阳离子交换树脂
(Dowex50×4400)、阴离子交换树脂 Dowex1×2
400购于百灵威化学试剂公司,凝胶阳离子交换树
脂CMSephadexC25购于 Parmacia公司。溶剂均
为分析纯,由北京化学试剂厂生产。
2 提取分离
蚕沙20kg(购于北京普生霖药业有限公司)用
95%乙醇提取,得浸膏789g。将浸膏分散于水中,
分别用醋酸乙酯、正丁醇萃取,分为3个部分。
醋酸乙酯部分进行硅胶柱色谱,经氯仿甲醇系
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ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
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统梯度洗脱,分为7个部分。第1部分经硅胶柱色
谱、反相柱色谱、MPLC,HPLC,分别得到化合物 1,
2;第5,6部分经正相硅胶柱色谱、反相柱色谱、凝胶
LH-20,MPLC,HPLC,得到化合物3~7。
水部分,经50%乙醇沉淀,上清液浓缩后,先经
阳离子交换树脂(001×7)柱色谱初步分离,用纯
水、05mol·L-1NH3(H2O,2mol·L
-1NH3(H2O
洗脱,分别得到MCC1,MCC2。然后对05mol·
L-1NH3(H2O洗脱部分(MCC2),运用阳离子交换
树脂 (Dowex50×4400)和阴离子交换树脂
(Dowex1×2400)进一步分离纯化,得到化合物
9~15。
3 结构鉴定
化合物1 白色粉末,mp134~136℃,[α]25D
-434°(c011,CHCl3),ESIMSm/z247[M+
Na]+;1HNMR(CDCl3,400MHz)δ:116(3H,s,Me
11),138(3H,s,Me12),143(3H,s,Me13),218
(3H,s,Me10);136(1H,dd,J=112,140Hz,H
2b),142(1H,dd,J=112,140Hz,H4b),198
(1H,ddd,J=20,40,112Hz,H2a),230(1H,
ddd,J=20,40,112Hz,H4a),433(1H,t,J=
40,140Hz,H3);585(1H,s,H8)。13CNMR
(CDCl3,100MHz)δ:361(C1),489(C2),639
(C3),487(C4),723(C5),1187(C6),1982
(C7),1008(C8),2096(C9),317(C10),263
(C11),291(C12),309(C13)。根据以上数据
参考文献[46],确定化合物1为3S,5Rdihydroxy
6R,7megstigmadien9one。
化合物2 白色粉末,mp150~152℃,[α]25D
-296°(c009,CHCl3),ESIMSm/z247[M+
Na]+;1HNMR(CDCl3,400MHz)δ:110(3H,s,
Me11),139(3H,s,Me12),141(3H,s,Me13),
225(3H,s,Me10);136,198(2H,m,H2),142,
230(2H,m,H4),432(1H,t,J=40,140Hz,H
3);597(1H,s,H8)。13CNMR(CDCl3,100MHz)δ:
360(C1),487(C2,4),639(C3),724(C5),
1188(C6),1992(C7),1006(C8),2094(C
9),319(C10),273(C11),291(C12),309(C
13)。化合物2与化合物1数据相似,比较明显的差
异在H8的化学位移值,与文献[67]对比,可确定
化合物2为3S,5Rdihydroxy6S,7megstigmadien9
one。
化合物 3 油状,[α]25D +686°(c023,
MeOH),ESIMSm/z393[M + Na]+;1HNMR
(CD3CD,400MHz)δ:127(3H,d,J=63Hz,Me
10),099(3H,s,Me11),100(3H,s,Me12),192
(3H,d,J=12Hz,Me13);569(1H,dd,J=152,
92Hz,H7),573(1H,dd,J=152,64Hz,H8),
580(1H,s,H4);201(1H,d,J=164Hz,H2a),
234(1H,d,J=164Hz,H2b),263(1H,d,J=92
Hz,H6),437(1H,m,H9);435(1H,d,J=80
Hz,H1′),310360(4H,m,H2′,3′,4′,5′),382
(1H,dd,J=120,24Hz,H6′),365(1H,dd,J=
120,56Hz,H6′);13CNMR(CD3CD,100MHz)δ:
365(C1),480(C2),1982(C3),1261(C4),
1620(C5),560(C6),1284(C7),1379(C8),
764(C9),213(C10),275(C11),280(C12),
234(C13),1024(C1′),750(C2′),780(C
3′),717(C4′),773(C5′),630(C6′)。以上数
据文献报道的(6R,9R)3oxoαionolβDglucopyr
anoside波谱数据相类似;另外,分子中存在2个手
性中心,需确定 C6,9的绝对构型。通过 CD谱分
析可确定C6的绝对构型,在242nm处显示正Cot
ton效应,CDΔε242+304(MeOH,064×10
-3mol·
L-1),表明 C6为 R构型[8];通过1HNMR中 Me
10,Me13数据与文献[8]比较,可确定 C9位绝对
构型为R。因此该化合物为(6R,9R)3oxoαionol
βDglucopyranoside。
化合物 4 油状,[α]25D -2252°(c019,
MeOH),ESIMSm/z393[M + Na]+;1HNMR
(CD3CD,400MHz)δ:137(3H,d,J=66Hz,Me
10),206(3H,d,J=16Hz,Me13),095(3H,s,
Me11),101(3H,s,Me12);585(1H,d,J=68
Hz,H7),569(1H,d,J=68Hz,H8),595(1H,
s,H4);210(1H,d,J=164Hz,H2a),250(1H,
d,J=164Hz,H2b),275(1H,d,J=90Hz,H
6),456(1H,m,H9);435(1H,d,J=80Hz,H
1′),310~360(4H,m,H2′,3′,4′,5′),382(1H,
dd,J=120,24Hz,H6′),365(1H,dd,J=120,
56Hz,H6′);13CNMR(CD3CD,100MHz)δ:366
(C1),482(C2),1981(C3),1261(C4),1622
(C5),561(C6),1284(C7),1381(C8),763
(C9),214(C10),274(C11),280(C12),236
(C13),1025(C1′),751(C2′),780(C3′),
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717(C4′),773(C5′),630(C6′)。化合物3,4
的波谱数据极为相似,推测它们可能为差向异构体。
通过CD谱分析可确定 C6的绝对构型,在243nm
处显示正 Coton效应,CDΔε243 +387(MeOH,
057×10-3mol·L-1),表明 C6为 R构型[8];通
过1HNMR中Me10,Me13数据与文献[8]比较,可
确定C9位绝对构型为 S。因此该化合物为(6R,
9S)3oxoαionolβDglucopyranoside。
化合物5 白色粉末,mp147~149℃,[α]25D +
02°(c041,MeOH);ESIMSm/z395[M+Na]+;
1HNMR(CD3CD,400MHz)δ:113(3H,d,J=64
Hz,Me10),199(3H,d,J=16Hz,Me13),097
(3H,s,Me11),105(3H,s,Me12);570(1H,s,H
4);195(1H,d,J=164Hz,H2a),234(1H,d,
J=164Hz,H2b),198(1H,m,H6),197(1H,
m,H7a),140(1H,m,H7b),160(2H,m,H8),
387(1H,q,J=60Hz,H9);432(1H,d,J=80
Hz,H1′),310~340(4H,m,H2′,3′,4′,5′),382
(1H,dd,J=120,24Hz,H6′a),365(1H,dd,J=
120,56Hz,H6′b);13CNMR(CD3CD,100MHz)
δ:373(C1),480(C2),2022(C3),1254(C
4),1697(C5),524(C6),266(C7),373(C
8),775(C9),219(C10),275(C11),290(C
12),250(C13),1039(C1′),752(C2′),781
(C3′),715(C4′),777(C5′),627(C6′)。CD
在 236nm处显示正 Coton效应,CDΔε236 +53
(MeOH,105×10-3mol·L-1),表明 C6为 R构
型[8]。而 C9位的绝对构型通过 NMR规律确
定[9],C9位 R构型的 blumenolCglucoside的化学
位移为 δC775(C9),而 C9位 S构型的 salviono
side的位化学位移为 δC746(C9),由于该化合物
的C9位化学位移为δC775,因此 C9位绝对构型
定为R。因此该化合物为文献[9]报道的 blumenol
Cglucoside。
化合物6 白色粉末,mp151~153℃,[α]25D
+480°(c153,MeOH);ESIMSm/z395[M+
Na]+;1HNMR(CD3CD,400MHz)δ:205(3H,d,
J=16Hz,Me13),109(3H,s,Me12),101(3H,
s,Me11),118(3H,d,J=64Hz,Me10);580
(1H,s,H4);197(1H,d,J=164Hz,H2a),246
(1H,d,J=164Hz,H2b),150(1H,m,H6),164
(2H,m,H7),196(2H,m,H8),387(1H,m,H
9);432(1H,d,J=80Hz,H1′),310~340(4H,
m,H2′,3′,4′,5′),387(1H,d,J=120Hz,H6′
a),366(1H,dd,J=120,52Hz,H6′b);13CNMR
(CD3CD,100MHz)δ:372(C1),480(C2),2023
(C3),1253(C4),1700(C5),523(C6),267
(C7),377(C8),750(C9),198(C10),275
(C11),290(C12),250(C13),1020(C1′),
754(C2′),780(C3′),717(C4′),777(C5′),
628(C6′)。通过CD谱分析可确定 C6的绝对构
型,在237nm处显示正 Coton效应,CDΔε237+48
(MeOH,089×10-3mol·L-1),表明 C6为 R构
型[8]。而 C9位的绝对构型通过 NMR规律确
定[9],C9位 R构型的 blumenolCglucoside的化学
位移为 δC775(C9),而 C9位 S构型的 salviono
side的位化学位移为 δC746(C9),由于化合物6
的C9位化学位移为δC750,因此 C9位绝对构型
定为S,与化合物5为差向异构体。因此该化合物
为文献[10]报道的byzantionosideB。
化合物7 白色粉末,mp143~145℃,[α]25D
-375°(c083,MeOH);ESIMSm/z395[M+
Na]+;1HNMR(CD3CD,400MHz)δ:083(3H,d,
J=60Hz,Me13),086(3H,s,Me12),094(3H,
s,Me11),226(3H,s,Me10);666(1H,dd,J=
100,160Hz,H7),608(1H,d,J=160Hz,H
8);121(1H,t,J=120Hz,H2a),189(1H,ddd,
J=20,40,120Hz,H2b),392(1H,t,J=40,
120Hz,H3),106(1H,q,J=120Hz,H4a),
216(1H,brd,J=120Hz,H4b),174(1H,m,H
5),158(1H,t,J=100Hz,H6);436(1H,d,J=
80Hz,H1′),310~340(4H,m,H2′,3′,4′,5′),
387(1H,brd,J=120Hz,H6′a),366(1H,dd,
J=120,52Hz,H6′b);13CNMR(CD3CD,100
MHz)δ:364(C1),477(C2),754(C3),435
(C4),320(C5),591(C6),1518(C7),1347
(C8),2008(C9),270(C10),218(C11),318
(C12),216(C13),1028(C1′),751(C2′),
781(C3′),718(C4′),779(C5′),629(C6′)。
与文献[11]报道的alangionosideL数据一致。
另外,在脂溶性部分还分离得到了化合物8叶
黄素[1213];从水部分分离得到了化合物 9哌可啉
酸[14],化合物10甜菜碱(CH3)3N
+CH2COO
-[15],化
合物11丙氨酸 CH3CH(NH2)COOH
[16],化合物12
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谷氨酸[16],化合物13苯丙氨酸[16],化合物14亮氨
酸[16],化合物15异亮氨酸[16]。
[参考文献]
[1]  杨仓良,齐英杰.动物本草[M].北京:中医古籍出版社,
2001.
[2]  郭宝星.蚕沙及其提取物在医学上的应用[J].四川中医,
2003,21(3):19.
[3]  崔锡强,王洪庆,刘 超,等.蚕沙化学成分的研究[J].中草
药,2007,38(4):501.
[4]  MeinwaldJ,EricksonK,HartshornM,etal.Defensivemecha
nismsofarthropods.XXII.Analenicsesquiterpenoidfromthe
grasshopperRomaleamicroptera[J].TetraLet,1968,25:2959.
[5]  ShiragaY,OkanoK,AkiraT,etal.Structuresofpotentantiul
cerogeniccompounsfromCinnamomumcasia[J].Tetrahedron,
1988,44(15):4703.
[6]  BjornlandT,EnglertG,BernhardK,etal.Claimed6R/6S
aleneisomerizationincarotenoidsisgeometrical9trans/9cis
isomerization[J].TetraLet,1989,30(19):2577.
[7]  GrecaMD,MarinoCD,ZareliA,etal.Isolationandphyto
toxicityofapocarotenoidsfromChenopodiumalbum[J].JNat
Prod,2004,67(9):1492.
[8]  PabstA,BaronD,SemonE,etal.Twodiastereomeric3oxoα
ionolβDglucosidesfromRaspberyfruit[J].Phytochemistry,
1992,31(5):1649.
[9]  BuskeA,SchmidtJ,ProzelA,etal.Alkaloidal,megastigmane
andlignanglucosidesfromAntidesmamembranaceum(Euphobi
aceae)[J].EurJOrgChem,2001:3537.
[10] TakedaY,ZhangH,MasudaT,etal.Megastigmeneglucosides
fromStachysbbyzantina[J].Phytochemistry,1997,44(7):
1335.
[11] OtsukaH,YaoM,KamadaK,etal.AlangionosidesGM:gly
cosidesofmegastigmanederivativesfromtheleavesofAlangium
premnifolium[J].ChemPharmBul,1995,43(5):754.
[12] GoodfelowD,MossGP,WeedonBC,etal.Theabsolutecon
figurationoflutein[J].ChemCommun,1970:1578.
[13] 孙 震,姚惠源.叶黄素的抗癌作用及其研究现状[J].生物
技术通讯,2005,16(1):84.
[14] WatanabeLA,HaranakaS,ToseB,etal.Aneficientaccess
tobothenantiomersofpipecolicacid[J].Tetrahedron:Asymme
try,2005(16):903.
[15] 刘新亚,马 龙,堵年生,等.从甜菜制糖废蜜中提取分离甜
菜碱[J].西北药学杂志,2004,19(2):63.
[16] 于德泉,杨峻山.分析化学手册.第7分册[M].2版.北京:化
学工业出版社,1999.
ChemicalconstituentsfromFaecesbombycis
CUIXiqiang,LIXingcui,WANGLei,CHENRuoyun
(InstituteofMateriaMedica,ChineseAcademyofMedicalScienceandPekingUnionofMedicalColege,Beijing100050,China)
[Abstract] Objective:TostudythechemicalconstituentsfromFaecesbombycis.Method:Isolationandpurificationwerecar
riedoutonsilicgel,SephadexLH-20andRP-18columnchromatography.Thechemicalstructuresoftheconstituentswereelucida
tedonthebasisofphysicochemicalpropertiesandspectraldata.Result:Fifteencompoundswereidentifiedas3S,5Rdihydroxy6R,
7megstigmadien9one(1),3S,5Rdihydroxy6S,7megstigmadien9one(2),(6R,9R)3oxoαionolβDglucopyranoside(3),
(6R,9S)3oxoαionolβDglucopyranoside(4),blumenolCglucoside(5),byzantionosideB(6),alangionosideL(7),lutein
(8),pipecolicacid(9),betaine(10),alanine(11),glutamicacid(12),phenylalanine(13),leucine(14),isoleucine(15).
Conclusion:AlthecompoundswereseparatedfromFaecesbombycisforthefirsttime.
[Keywords] Faecesbombycis;sesquiterpene;aminoacid.
[责任编辑 王亚君
櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗





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第33卷第21期
2008年11月
         
    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol.33,Issue 21
 November,2008