全 文 ：ＳｔｕｄｉｅｓｏｎＣｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｆｒｏｍｒｏｏｔｏｆＣｙｎａｎｃｈｕｍａｔｒａｔｕｍ
ＹＵＡＮＹｉｎｇ１，ＺＨＡＮＧＷｅｉｄｏｎｇ１，２，ＺＨＡＮＧＣｈｕａｎ２，ＬＩＵＲｕｎｈｕｉ２，ＳＵＪｕａｎ２，ＪＩＮＨｕｉｚｉ１
（１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＳｈａｎｇｈａｉＪｉａｏｔｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２００２４０，Ｃｈｉｎａ；
２．ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＳｅｃｏｎｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２００４３３，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｆｒｏｍｔｈｅｒｏｏｔｓａｎｄｒｈｉｚｏｍｅｏｆＣｙｎａｎｃｈｕｍａｔｒａｔｕｍ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅ
ｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄａｎｄｒｅｐｅａｔｅｄｌｙｐｕｒｉｆｉｅｄｂｙｓｉｌｉｃａｇｅｌｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙａｎｄｔｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｗｅｒｅｅｌｕｃｉｄａｔｅｄｂｙｔｈｅＮＭＲ
ｓｐｅｃｔｒａａｎｄｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｗｅｌｖｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄａｎｄｎｉｎｅｏｆｔｈｅｍｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｓ２，４ｄｉｈｙ
ｒｏｘｙａｃｅｔｏｐｈｅｎｏｎｅ（１），２，６ｄｉｈｙｒｏｘｙａｃｅｔｏｐｈｅｎｏｎｅ（２），４ｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｅｎｅｍｅｔｈａｎｏｌ（３），ｂｅｎｚｏｉｃａｃｉｄ（４），βａｍｙｒｉｎａｃｅｔａｔｅ（５），
ｐａｌｍｉｔｉｃａｃｉｄ（６），βｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ（７），βｄａｕｃｏｓｔｅｒｏｌ（８），ｇｌａｕｃｏｇｅｎｉｎＣ３ＯαＤｏｌｅａｎｄｒｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→４）βＤｄｉｇｉｔｏｘｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１
→４）αＤｏｌｅａｎｄｒｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ（９）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＳｅｖｅｎｃｏｍｐｏｕｎｄｓｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄｆｒｏｍＣ．ａｔｒａｔｕｍｆｏｒｔｈｅｆｉｒｓｔｔｉｍｅ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ａｓｃｌｅｐｉａｄａｃｅａｅ；Ｃｙｎａｎｃｈｕｍａｔｒａｔｕｍ；ｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ ［责任编辑 牛泽宇］
［收稿日期］ ２００６１２２９
［基金项目］ 吉林省科技厅重点项目（２００６０９０３）
［通讯作者］ 徐吉庆，Ｔｅｌ：（０４３１）８８４９９１３２，Ｅｍａｉｌ：ｊｉｎｙｒ＠
ｊｌｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
ＲＰＨＰＬＣ测定不同生长期狗枣猕猴桃叶中
狗枣猕猴桃黄酮 Ｃ的含量
金永日，桂明玉，陆 娟，李绪文，徐吉庆
（吉林大学 化学学院，吉林 长春 １３００２１）
［摘要］ 目的：通过测定不同生长期狗枣猕猴桃叶中狗枣猕猴桃黄酮Ｃ的含量，为确定狗枣猕猴桃的采收期
提供科学依据。方法：采用反相高效液相色谱法，使用ＺＯＲＢＡＸＥｘｔｅｎｄＣ１８柱（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），流动相甲
醇水（５１∶４９），流速１２ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测波长２６７ｎｍ，柱温２５℃。结果：不同生长期狗枣猕猴桃叶中狗枣猕猴桃
黄酮Ｃ的含量发生变化。该成分在６月中旬含量最高；６月末到７月中旬含量有所下降，但降幅不大，７月末至８月
中旬含量明显降低。结论：６月中旬为狗枣猕猴桃的最佳采收期。
［关键词］ 狗枣猕猴桃；狗枣猕猴桃黄酮Ｃ；ＲＰＨＰＬＣ；含量
［中图分类号］Ｒ２８４．１ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００７）１８１８９８０３
狗枣猕猴桃 Ａｃｔｉｎｉｄｉａｋｏｌｏｍｉｋｔａ（Ｒｕｐｒ．ｅｔｍａｘ
ｉｍ）ｐｌａｎｃｈ为猕猴桃科猕猴桃属多年生藤本植物，
俗称狗枣子。分布于我国东北、华北、华中、西北、西
南以及朝鲜、日本、俄罗斯等地［１］。药理研究表明，
其作用类似缬草，即其根有抑制中枢神经的活性，并
具有驱虫作用，其甲醇提取物对人血清中胆碱酯酶
的抑制率８０％以上［１］。作者从狗枣猕猴桃叶中分
离得到多个黄酮类化合物（另文发表），其中狗枣猕
猴桃黄酮 Ｃ［山柰甲黄素７Ｏ（４′Ｏ乙酰基αＬ鼠
李糖基）３Ｏ芸香糖苷］（结构式见图１）含量最高。
本研究采用ＲＰＨＰＬＣ测定不同生长期狗枣猕猴桃
中狗枣猕猴桃黄酮 Ｃ的含量，为确定狗枣猕猴桃的
采收期提供科学依据。
１ 仪器、样品与试剂
Ａｇｉｌｅｎｔ１１００高效液相色谱仪，Ａｇｉｌｅｎｔ１１００工
作站。实验所用的狗枣猕猴桃叶采自吉林省靖宇
县，经长春中医学院邓明鲁教授鉴定为狗枣猕猴桃
Ａｋｏｌｏｍｉｋｔａ叶。狗枣猕猴桃黄酮 Ｃ的对照品为自
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第３２卷第１８期
２００７年９月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ １８
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００７
图１ 狗枣猕猴桃黄酮Ｃ的化学结构式
制，是从狗枣猕猴桃叶提取物中分离得到，并经１
Ｈ，１３ＣＮＭＲ，ＭＳ，ＩＲ和ＵＶ等光谱鉴定其结构。
经面积归一化测得纯度为 ９９６％。甲醇为色
谱纯（天津四友精细化学品有限公司），水为重蒸
水，其他试剂均为分析纯。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件
ＺＯＲＢＡＸＥｘｔｅｎｔＣ１８柱（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５
μｍ），流动相甲醇水（５１∶４９），流速 １２ｍＬ·
ｍｉｎ－１，检测波长２６７ｎｍ，柱温为２５℃。对照品和
样品分离的色谱图见图２。
图２ 狗枣猕猴桃黄酮Ｃ对照品（Ａ）及样品（Ｂ）色谱图
２．２ 标准曲线的绘制
精密称定狗枣猕猴桃黄酮 Ｃ的对照品适量，分
别配制成质量浓度为 ００５，０１，０２，０４，０８，１０
ｍｇ·ｍＬ－１的对照品溶液，分别取上述对照品溶液
１０μＬ，注入液相色谱仪，结果表明在０５～１０μｇ，
狗枣猕猴桃黄酮Ｃ的进样量（Ｘ）与峰面积（Ｙ）均呈
现良好的线性关系。回归方程为：Ｙ＝１９８×１０４Ｘ－
４９７，ｒ＝０９９９９。
２．３ 精密度试验
取狗枣猕猴桃黄酮 Ｃ的对照品，配制成质量浓
度为００２５ｍｇ·ｍＬ－１对照品甲醇溶液，连续进样５
次，峰面积的ＲＳＤ０３４％。
２．４ 重复性试验
取干燥的狗枣猕猴桃叶均匀粉末６份，按“供
试品溶液制备”方法操作，制得６份供试品溶液，注
入色谱仪测定含量，测定结果显示，样品中狗枣猕猴
桃黄酮Ｃ含量的ＲＳＤ１５％（ｎ＝６）。
２．５ 加样回收率试验
取已知含量的干燥的狗枣猕猴桃叶均匀粉末６
份，每份０５ｇ，分别向其中加入对照品化合物７７
ｍｇ，按供试品溶液制备方法操作，制得６份加标溶
液。分别注入色谱仪测定含量，计算回收率。结果
狗枣猕猴桃黄酮 Ｃ平均回收率为 １００９％（ＲＳＤ
０５％）。
２．６ 稳定性试验
取供试品溶液，在０～１２ｈ每隔２ｈ进样１次，
进样量均为 １０μＬ，测定峰面积，计算含量，ＲＳＤ
０５９％。
２．７ 含量测定
２．７．１ 对照品溶液制备 取狗枣猕猴桃黄酮 Ｃ对
照品６ｍｇ，精密称定，置２５ｍＬ量瓶中，加甲醇溶解
并稀释至刻度，摇匀即得。
２．７．２ 供试品溶液制备 取干燥的狗枣猕猴桃叶
粉末样品，混合均匀，精密称取１０ｇ，用甲醇提取３
次，每次加甲醇２５ｍＬ，水浴（７２℃）回流，回流时间
分别为２，１５，１ｈ，合并提取液，蒸干溶剂后加甲醇
溶解并定容至５０ｍＬ，以０４５μｍ有机滤膜过滤，取
续滤液做为供试品溶液。
２．７．３ 样品的测定 分别取上述对照品溶液和供
试品溶液各１０μＬ，注入高效液相色谱仪，记录色谱
图，按外标法以峰面积计算样品中狗枣猕猴桃黄酮
Ｃ的含量。结果该成分含量在６月１，１６，３０日采集
的样品中分别为 １２３％，１５０％，１０３％；在 ７月
１５，３０日采集的样品中分别为１１４％，０９２％，在８
月１５日采集的样品中为０７９％。
３ 讨论
３．１ 测定波长的选择，紫外光谱图显示狗枣猕猴桃
黄酮Ｃ在２６７ｎｍ附近有最大吸收，故选定２６７ｎｍ
为测定波长。
３．２ 流动相选择，比较了甲醇水不同比例为流动
相，结果甲醇水（５１∶４９）作为流动相，狗枣猕猴桃黄
酮Ｃ有很好的分离效果。
３．３ 本研究考察了提取溶剂，比较了水、甲醇和无
水乙醇，结果以甲醇提取的效率最佳，３次回流时间
分别选择２，１５，１ｈ，这与大多数天然药物的方法相
近，首次提取考虑了狗枣猕猴桃叶需要溶剂浸润的
时间，故须延长，后２次提取时间依次递减。
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第３２卷第１８期
２００７年９月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ １８
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００７
３．４ 不同生长期狗枣猕猴桃叶中狗枣猕猴桃黄酮
Ｃ的含量发生变化，在６月中旬含量最高，６月末到
７月中旬含量有所下降，但降幅不大。７月末至８月
中旬含量明显降低，约降至 ６月中旬含量的一半。
因此，６月中旬为狗枣猕猴桃叶的最佳采收期。
［参考文献］
［１］ 严仲铠，李万林．中国长白山药用植物彩色图志［Ｍ］．北京：人
民卫生出版社，１９９６：２８５．
ＳｔｕｄｙｏｎｖａｒｉａｔｉｏｎｏｆａｃｔｉｎｏｓｉｄｅＣｉｎｌｅａｖｅｓｏｆＡｃｔｉｎｉｄｉａｋｏｌｏｍｉｋｔａ
ｗｉｔｈｄｉｆｅｒｅｎｔｇｒｏｗｔｈｐｅｒｉｏｄｓｂｙＲＰＨＰＬＣ
ＪＩＮＹｏｎｇｒｉ，ＧＵＩＭｉｎｇｙｕ，ＬＵＪｕａｎ，ＬＩＸｕｗｅｎ，ＸＵＪｉｑｉｎｇ
（ＣｈｅｍｉｓｔｒｙＣｏｌｅｇｅｏｆＪｉｌｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ１３００１２，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅａｃｔｉｎｏｓｉｄｅＣｉｎｔｈｅｌｅａｖｅｓｏｆＡｃｔｉｎｉｄｉａｋｏｌｏｍｉｋｔａｗｉｔｈｄｉｆｅｒｅｎｔｇｒｏｗｔｈｐｅｒｉｏｄｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：
Ｔｈｅｓｅｐａｒａｔｉｏｎｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄａｔ２５℃ ｏｎＺＯＲＢＡＸＥｘｔｅｎｄＣ１８ｃｏｌｕｍｎ（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），ｕｓｉｎｇａｍｉｘｔｕｒｅｏｆｍｅｔｈａｎｏｌａｎｄ
ｗａｔｅｒ（５１∶４９）ａｓａｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅ．Ｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓ１２ｍＬ·ｍｉｎ－１，ａｎｄｔｈｅｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｆｏｒｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｗａｓ２６７ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅ
ｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆａｃｔｉｎｏｓｉｄｅＣｉｎｔｈｅｌｅａｖｅｓｏｆＡ．ｋｏｌｏｍｉｋｔａｗｅｒｅｖａｒｉｅｔｙｉｎｄｉｆｅｒｅｎｔｇｒｏｗｔｈｐｅｒｉｏｄｓ．ＡｃｔｉｎｏｓｉｄｅＣ
ｃｏｕｌｄｒｅａｃｈｉｔｓｈｉｇｈｅｓｔｃｏｎｔｅｎｔｉｎｔｈｅｍｉｄｄｌｅｔｅｎｄａｙｓｏｆＪｕｎｅ，ｔｈｅｎｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｗｏｕｌｄｄｅｃｒｅａｓｅｉｎｔｈｅｍｉｄｄｌｅｔｅｎｄａｙｓｏｆＪｕｌｙｓｌｉｇｈｔｌｙ，
ｉｔｃｏｕｌｄｒｅａｃｈｔｈｅｉｒｌｏｗｅｓｔｃｏｎｔｅｎｔｉｎｔｈｅｍｉｄｄｌｅｔｅｎｄａｙｓｏｆＡｕｇｕｓｔ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＴｈｅｏｐｔｉｍａｌｃｏｌｅｃｔｉｖｅｄａｔｅｆｏｒＡ．ｋｏｌｏｍｉｋｔａａｒｅｉｎ
ｔｈｅｍｉｄｄｌｅｔｅｎｄａｙｓｏｆＪｕｎｅ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ａｃｔｉｎｉｄｉａｋｏｌｏｍｉｋｔａ；ａｃｔｉｎｏｓｉｄｅＣ；ＲＰＨＰＬＣ；ｃｏｎｔｅｎｔ
［责任编辑 牛泽宇］
［收稿日期］ ２００６１１２２
［通讯作者］ 毕开顺，Ｔｅｌ：（０２４）２３９８６２９６，Ｅｍａｉｌ：ｂｉｋａｉｓｈｕｎ
＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ
ＲＰＨＰＬＣ测定白土茯苓中甲基氧化偶氮甲醇
樱草糖苷的含量
乔 蕾，陈晓辉，毕开顺
（沈阳药科大学 药学院，辽宁 沈阳 １１００１６）
［摘要］ 目的：建立白土茯苓中甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷的 ＲＰＨＰＬＣ定量分析方法。方法：采用 Ｃｅｎｔｕｒｙ
Ｃ１８ＡＱ色谱柱（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），以甲醇水（４∶９６）为流动相，流速为１０ｍＬ·ｍｉｎ
－１，检测波长为２１５ｎｍ，
柱温３５℃。结果：甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷在１９１２～３８２４μｇ·ｍＬ－１线性关系良好（ｒ＝０９９９８），方法回收率
为９９５％，ＲＳＤ为２１％（ｎ＝９）。结论：该方法可用于白土茯苓的质量控制。
［关键词］ 白土茯苓；甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷；ＲＰＨＰＬＣ
［中图分类号］Ｒ２８４．１ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００７）１８１９０００３
白土茯苓ＲｈｉｚｏｍａＨｅｔｅｒｏｓｍｉｌａｃｉｓＪａｐｏｎｉｃａｅ为百
合科肖菝葜属植物肖菝葜 Ｈ．ｊａｐｏｎｉｃａＫｕｎｔｈ．、短柱
肖菝葜 Ｈ．ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓＧａｇｎｅｐ．、华肖菝葜 Ｈ．
ｃｈｉｎｅｎｓｉｓＷａｎｇ．的干燥块茎。春、秋二季采挖，除去
须根及泥沙，洗净，趁鲜切片，晒干。主要分布于陕
西、甘肃、安徽、浙江、江西、福建、台湾、湖南、广东、
四川、云南等地。收载于四川、贵州、湖南省中药材
·００９１·
第３２卷第１８期
２００７年９月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ １８
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００７