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Effect of acupoint injection by astragalus injection on local SIgA and pathomorphology changes in rats with chronic pelvic inflammatory disease

黄芪注射液穴位注射对慢性盆腔炎大鼠局部SIgA及病理形态学改变的影响



全 文 :黄芪注射液穴位注射对慢性盆腔炎大鼠局部 ≥Œª„
及病理形态学改变的影响
蔡雪芬t 3 o陈利芳u o王樟连u o顾颖尔t
kt1浙江大学 医学院 附属妇产科医院 o浙江 杭州 vtsssy ~
u1浙江中医药大学 附属第三医院 o浙江 杭州 vtssxvl
≈摘要  目的 }观察黄芪注射液穴位注射对慢性盆腔炎大鼠模型局部分泌型 Œª„k≥Œª„l及病理形态学改变的
影响 ∀方法 }xs只 •¬¶·¤µ大鼠随机分成 y组 o除正常组和假手术组外 o其余造成慢性盆腔炎模型 ~黄芪注射液穴注
组和生理盐水穴注组选用关元 !足三里进行穴位注射 ~阳性药对照组用妇科千金片灌胃 ~模型组 !正常组和假手术
组常规饲养 o不予处理 ∀观察各组大鼠子宫的组织形态学变化 o检测阴道冲洗液中 ≥Œª„的含量 ∀结果 }模型组病理
形态学检查显示慢性炎症改变 o黄芪组和妇科千金片组改变不明显 ~黄芪组局部 ≥Œª„含量显著高于其他 x组 o模型
组 ≥Œª„含量最低 ∀结论 }慢性盆腔炎反复发作与局部 ≥Œª„分泌不足 !局部免疫力下降有关 ~黄芪针穴位注射治疗
慢性盆腔炎可以刺激局部黏膜分泌 ≥Œª„ o提高黏膜的局部免疫功能 o防止炎症复发 ∀
≈关键词  慢性盆腔炎 ~黄芪注射液 ~穴位注射 ~≥Œª„ ~大鼠
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussylty2tvyt2sw
≈收稿日期  ussy2sv2uv
≈基金项目  浙江省中医药管理局科研基金 kussw2≤ttvl
≈通讯作者  3 蔡雪芬 oר¯ }ksxztl{zsytxst o∞2°¤¬¯}¦«¨ ±ª¦ƒ
½­∏1 §¨∏1¦±
黄芪含苷类 !多糖类 !黄酮类 !氨基酸 !微量元
素 !胆碱 !叶酸等多种化学成分 o具有明显的免疫调
节功能≈t  ∀慢性盆腔炎是妇科临床的多发病和难治
病 o目前尚无特效疗法 o多数患者由于病程长 !反复
发作 !过多的应用抗生素 o导致盆腔局部免疫功能紊
乱 !抵抗力下降 o是本病迁延难愈的关键 ∀本研究采
用黄芪注射液穴位注射的方法治疗慢性盆腔炎大
鼠 o观察其对大鼠局部免疫功能及病理形态学改变
的影响 ∀
1 材料
111 动物 •¬¶·¤µ雌性大鼠 o体重 t{s ∗ uss ªoxs
只 o购于中国医学科学院上海实验动物中心 o动物合
格证号¶¦¬®k沪lussv2sssv o饲养于浙江中医学院实
验动物中心 ∀
112 试剂和药物 黄芪注射液 o含生药 ts ª#°pt o
成都地奥九泓制药厂生产 o批号 sws{sxw ~妇科千金
片 o每片含生药量 v1w ªo湖南株洲千金药业有限公
司生产 o批号 |{tussw ∀us h苯酚糊剂 o用 t h ≤≤2
‘¤作溶剂 o使用时摇匀 ∀
2 方法
211 造模 采用目前最常用的苯酚胶浆法≈u  }v h
戊巴比妥钠腹腔注射麻醉大鼠 s1stx °#ªpt o待麻
醉生效后 o用橡皮筋牵拉四肢固定于操作台上 o无菌
条件下在大鼠下腹正中切口约 s1{ ∗ t ¦°o开腹后暴
露并固定子宫 ∀用 w号针头选取子宫左侧在其分叉
处小心进针 o向卵巢方向缓慢注入 us h 苯酚胶浆
s1t °o假手术组注入相同体积的无菌生理盐水 o注
毕 o分层关腹 o消毒术区 ∀
212 动物分组和处理 大鼠适应性饲养 t周后随
机抽取其中 {只作为正常组 o{只为假手术组 o其余
vw只造模 ∀造模 tx §后随机抽取其中 u只解剖 o大
体观察见子宫组织与盆腔其他组织有粘连 o宫腔部
分狭窄 !积液 o毛细血管扩张充血 ~取子宫组织做病
理切片 o光镜下观察见子宫内膜上皮及腺上皮细胞
增生 o大量淋巴细胞浆细胞浸润 o尚可见少量中性粒
细胞 o证明造模成功≈v  ∀将其余 vu只造模大鼠分成
模型组 o黄芪针穴注组 o妇科千金片组 o生理盐水穴
注组 ~正常组 o假手术组和模型组常规饲养 o不做任
何处理 ~黄芪针穴注组和生理盐水穴注组选取关元 !
足三里k双l≈w 进行穴位注射 o每穴 s1tu ∗ s1tv °
k动物实验常规用量 o按成人 ys ®ª体重每穴每日注
射 u °o容量相当于成人注射量的 us倍l o隔日 t
#tyvt#
第 vt卷第 ty期
ussy年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ ty
„∏ª∏¶·oussy
次 ~妇科千金片组灌胃给予妇科千金片悬液 o给药剂
量 t1x ª#®ªptk相当于成人用量的 us倍l o每日 t
次 ∀各组于治疗 !饲养 t个月后处死动物 o观察检测
指标 ∀
213 形态观察 肉眼观察大鼠子宫左侧的大体形
态变化 o并与子宫右侧进行对比 ∀
214 病理学观察 取大鼠子宫左侧置于 ts h福尔
马林溶液中固定 ow{ «后取出 o切取组织块 u °°左
右厚度 o按常规脱水 !透明 !包埋 !切片 !‹∞染色 o光
学显微镜下镜检 o摄取照片 ∀
215 分泌型 Œª„k≥Œª„l的检测 取大鼠阴道冲洗
液 o采用放射免疫法测定 o试剂盒购于北京原子高科
技技术应用股份有限公司 o仪器采用中国同位素公
司生产的 ×计数仪 o具体操作按试剂盒说明书进行 ∀
216 统计学方法 数据以 cξ ? σ表示 o采用 ≥°≥≥
tv1s软件进行方差分析 ∀
3 结果
311 形态观察 模型组肉眼观察可见盆腔下部充
血 o内有明显纤维组织粘连 o部分有肉芽肿 o子宫充
血 o宫腔狭窄 !积液 !炎性包块k见图 tl ~生理盐水穴
注组有轻微积液 o充血 ~黄芪针穴注组k见图 ul和千
金片对照组肉眼观察无明显改变 o子宫腔通畅 o部分
仅见子宫壁轻微充血 ∀
312 病理学观察 模型组 }子宫腔壁黏膜固有层腺
体结构消失 o腺上皮增生 o肌层与黏膜层结构紊乱 !
分层不清 o上皮细胞变性 !坏死 !脱落 o大量淋巴细胞
和浆细胞浸润 o内膜充血水肿k见图 vl ~正常组 }子
宫腔壁组织结构清晰 o宫腔通畅 o腺体结构清晰 o腺
上皮排列整齐k见图 wl ∀黄芪针穴注组 }子宫宫腔
通畅 o腺体结构清晰 o腺上皮轻微增生 o淋巴细胞和
浆细胞浸润少 o内膜充血水肿不明显k见图 xl ∀妇
科千金片组 }黏膜上皮轻微增生 o淋巴细胞和浆细胞
浸润较少 o内膜充血水肿不明显 ∀生理盐水穴注组 }
黏膜上皮有增生 o部分上皮有空泡 o子宫腺体大部分
已恢复正常 o轮廓基本清晰 o但少数子宫腺体闭塞形
成实体 o固有膜 !肌层均有中等量的炎性细胞浸润 o
并见有少量纤维组织增生 ∀假手术组 }与正常组基
本一致 ∀
根据每例子宫内膜 !宫壁及子宫周围组织的粘
连闭塞或扩张 o腔壁黏膜固有层腺体结构 o肌层与黏
膜层结构分层 !上皮细胞情况 !淋巴细胞和浆细胞浸
润 !内膜充血水肿等情况由轻到重评分为 s ot ou ov o
w分≈x  o累计每组动物子宫评分 o并计算出 cξ ? σo分
值越高提示慢性炎症程度越重k见表 tl ∀
图 t 模型组k积液 o炎性包块l
图 u 黄芪针穴注组k接近正常l
图 v 模型组k ≅ tss l
黏膜上皮细胞增生 o排列紊乱 o腺体结构部分消失 o腺上皮
细胞增生明显 o肌层与黏膜层分层不清 o中性粒细胞 o淋巴细胞
和浆细胞浸润
图 w 正常组k ≅ tssl
黏膜上皮细胞无增生 o排列整齐 o腺体结构清晰完整
313 ≥Œª„测定 黄芪穴注组 ≥Œª„量明显高于其他
#uyvt#
第 vt卷第 ty期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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图 x 黄芪针穴注组k ≅ tssl
黏膜上皮细胞增生不明显 o腺体结构较清晰 o腺上皮细胞轻
度增生 o少量淋巴细胞及浆细胞浸润
各组k Π s1sxl o在所有造模大鼠中模型组 ≥Œª„量
最低 o生理盐水穴注组次之 o妇科千金片组和黄芪穴
注组较高 o见表 t ∀
表 t 黄芪针穴位注射对慢性盆腔炎大鼠炎症评分
及血清 ≥Œª„的影响kcξ ? σ, ν € {l
组别 剂量rª#®ªpt 炎症评分 ≥Œª„r ±ª#°pt
正常 p s qxz ? s qtuu oxl s qzs ? s qsyxl
模型 p v quw ? s qt{w oxl s qws ? s qs{xl
假手术 p s qx{ ? s qt|t oxl s q{s ? s qttxl
黄芪针穴注 t qu t q{{ ? s qtut ovl t q{{ ? s qtvtl
生理盐水穴注 p u qsv ? s quxt ovl s q|s ? s qs|xl
妇科千金片 t qx t q|u ? s quvt ovl t qvs ? s qt{xl
注 }与模型组比tl Π  s1sx oul Π  s1st ~vl与正常组比较 Π 
s1sx owl Π s1st ~与黄芪针穴注组比较xl Π s1sx
4 讨论
≥Œª„是黏膜分泌的最重要的体液免疫分子 o占
黏膜免疫球蛋白量的 {s h ≈y  o其含量的多少与局部
免疫能力的大小直接相关≈z  ∀在女性的生殖道k阴
道 !宫颈阴道部 !宫颈组织l内含有许多可以合成
Œª„的 …细胞 o研究显示黏膜局部 ≥Œª„的减少与生
殖泌尿道炎症的易感性密切相关≈{ o|  o局部免疫功
能紊乱 !抵抗力低下是导致慢性盆腔炎反复发作的
主要原因 ∀因此 o提高盆腔的区域免疫功能 o从增强
女性生殖道黏膜免疫功能入手 o可以为本病的治疗
提供新的思路和方法 ∀
本研究显示慢性盆腔炎大鼠模型局部 ≥Œª„ 含
量明显较其他各组少 o而其炎症评分是最高的 o大体
形态观察见明显的宫腔积液和炎性包块 ~黄芪针穴
注组局部 ≥Œª„含量显著较其他各组高 o炎症评分较

低 o肉眼观察子宫腔仅见轻微充血 o光镜检查见有炎
症细胞浸润 o但上皮细胞增生较少 o腺体结构基本正
常 o证明慢性炎症正在趋向愈合 o通过比较不难看
出 }≥Œª„的产生可以促进大鼠慢性子宫炎症的修
复 o也显示出黄芪针穴注对提高慢性盆腔炎大鼠病
变局部的免疫力有一定的作用 ∀
黄芪注射液是从豆科植物黄芪中提取的一种具
有多种药理作用的化合物 o其主要活性成分k黄芪总
黄酮 !黄芪总皂苷l对多种自由基有良好的清除作
用 o可提高机体抗氧化能力 o调节免疫功能 o是一个
很有活力的生物调节剂≈ts  ∀穴位注射疗法结合了
对经穴的局部刺激和药物药效的双重作用 o可以在
低血药浓度的情况下产生药物药效的/高效性0和
/速效性0 o而且具有整体疗效的 / 增效减副0优
势≈tt  ∀本实验选用的药物黄芪和穴位足三里 !关元
穴均具有免疫调节作用 o两者相结合发挥了较好的
疗效 o跟同穴注射生理盐水相比 o具有明显的优势 ∀
≈参考文献 
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≈x  °¤·²± ⁄ o ¤±§¨µ¶ ⁄ ∂ o ≥·¨µ±©¬¨ §¯  ⁄o ·¨¤¯1 ∞¬³¨µ¬° ±¨·¤¯
≤«¯¤°¼§¬¤·µ¤¦«²°¤¬¶¶¤¯³¬±ª¬·¬¶¬± °¬¦¨ ¬±¬·¬¤¯ ¶·∏§¬¨¶²±·«¨ ¦«¤µ¤¦2
·¨µ¬½¤·¬²± ²©·«¨ ¯¨ ∏®²¦¼·¨ µ¨¶³²±¶¨ ·² ≤«¯¤°¼§¬¤¬±©¨¦·¬²±1Œ±©¨¦·⁄¬¶o
t||| otx| }ttsx ∀
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第 vt卷第 ty期
ussy年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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Εφφεχτ οφ αχυποιντ ινϕεχτιον βψ αστραγαλυσινϕεχτιον ον λοχαλ ΣΙγ Α
ανδ πατηοµ ορπηολογψ χηανγεσιν ρατσ ωιτη χηρονιχ πελϖιχ ινφλαµ µατορψ δισεασε
≤„Œ ÷∏¨2©¨ ±t o ≤‹∞‘¬2©¤±ªu o • „‘Š «¤±ª2¯¬¤±u oŠ˜ ≠¬±ª2 µ¨t
(t1 Οβστετριχσ ανδ Γψνεχολογψ Ηοσπιταλ, Χολλεγε οφ Μεδιχινε , Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ, Ηανγζηου vtsssy , Χηινα ;
u1 Ζηεϕιανγ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε Υνιϖερσιτψ, Ηανγζηου vtssxv , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ²¥¶¨µ√¨·«¨ ©¨©¨¦·²©¤¦∏³²¬±·¬±­¨¦·¬²± ¥¼ ¤¶·µ¤ª¤¯∏¶¬±­¨¦·¬²± ²± ²¯¦¤¯ ≥Œª„ ¤±§³¤·«²°²µ³«²¯²ª¬¤¯ ¦«¤±ª¨¶
¬±µ¤·¶º¬·«¦«µ²±¬¦³¨ √¯¬¦¬±©¯¤°°¤·²µ¼ §¬¶¨¤¶¨ k≤°Œ⁄l1 Μετηοδ : xs ©¨ °¤¯¨ •¬¶·¤µµ¤·¶º µ¨¨ µ¤±§²°¯ ¼ §¨√¬§¨§¬±·²y ªµ²∏³¶o¬± º«¬¦«≤°Œ⁄
°²§¨¯ º¤¶°¤§¨ ¬¨¦¨³··«¨ ±²µ°¤¯ ªµ²∏³¤±§¶«¤° ²³¨µ¤·¬²± ªµ²∏³1 ׫¨ ¤¶·µ¤ª¤¯∏¶¬±­¨¦·¬²± ªµ²∏³¤±§·«¨ s1| h ‘¤≤¯ ¬±­¨¦·¬²± ªµ²∏³ º µ¨¨
·µ¨¤·¨§¥¼ ¤¦∏³²¬±·¬±­¨¦·¬²±¬± Š∏¤±¼∏¤±k• ‘wl ¤±§∏¶¤±¯¬k≥×vyl1 ׫¨ ªµ²∏³º¤¶©¨ §±¬¤±­¬±³¬¤±¶²¯∏·¬²±¬±·²¶·²°¤¦«1 ׫¨ «¬¶·²³¤·«²¯²ª¬¦
¦«¤±ª¨¶²©µ¤·¶. ∏·¨µ∏¶²© ¤¨¦«ªµ²∏³º µ¨¨ ²¥¶¨µ√ §¨¤±§≥Œª„ ¬± √¤ª¬±¤©¯∏¶«¬±ªº¤¶§¨·¨¦·¨§1 Ρεσυλτ : ׫¨ °²§¨¯ªµ²∏³¶«²º §¨¬±©¯¤°°¤·²µ¼
¦«¤±ª¨¶o¤±§¤¶·µ¤ª¤¯∏¶¬±­¨¦·¬²± ªµ²∏³¤±§ ±¬¤±­¬±³¬¤± ªµ²∏³¶«²º §¨ ¬¯·¯¨«¬¶·²³¤·«²¯²ª¬¦¦«¤±ª¨¶q׫¨ ¯¨ √¨¯¶²©≥Œª„ ¬± ¤¶·µ¤ª¤¯∏¶¬±­¨¦·¬²±
ªµ²∏³º µ¨¨ ¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ «¬ª«¨µ·«¤±·«²¶¨ ¬± ²·«¨µªµ²∏³¶o¥∏··«¤·¬±·«¨ °²§¨¯ ªµ²∏³ º¤¶·«¨ ²¯º ¶¨·1 Χονχλυσιον : ׫¨ §¨©¬¦¬¨±¦¼ ²© ²¯¦¤¯
≥Œª„ ¯¨ ¤§·²µ¨³¨ ¤·¨§¯¼ ¤·¤¦®²©≤°Œ⁄q׫¨ ·µ¨¤·° ±¨·²©¤¦∏³²¬±·¬±­¨¦·¬²± ¥¼ ¤¶·µ¤ª¤¯∏¶¬±­¨¦·¬²±¦¤±¬°³µ²√¨·«¨ ¬¨¦µ¨·¬²± ²©≥Œª„ oµ¨¬±©²µ¦¨
·«¨ ²¯¦¤¯ ¬°°∏±¬·¼o¤±§³µ¨√ ±¨··«¨ µ¨³¨ ¤·¨§¯¼ ¤·¤¦®1
[ Κεψ ωορδσ] ¤¶·µ¤ª¤¯∏¶¬±­¨¦·¬²±~¤¦∏³²¬±·¬±­¨¦·¬²±~¦«µ²±¬¦³¨ √¯¬¦¬±©¯¤°°¤·²µ¼ §¬¶¨¤¶¨ ~≥Œª„ ~µ¤· ≈责任编辑 古云侠 
第一届/系统生物医学上海论坛0
) ) ) 代谢组学k ·¨¤¥²±²°¬¦¶l与中医药国际化研讨会
ussy年 y月 uu日 上海
具有几千年历史的祖国传统医学蕴藏着许多朴素的辩证分析思想及系统论的观念 o强调从整体和系统的角度认识和调
节人体生命活动规律 o积累了大量有效的治疗方法和药物 ~但尚缺乏在分子水平的物质基础和作用机理认识 o至今仍停留在
朴素的辩证哲学思辨层次 o难以与现代科学沟通 o不能被现代社会尤其是西方主流医学界所接受 ∀
随着/人类基因组计划0等重大科学项目的实施 o人类研究复杂生物系统的能力取得了突破性的发展 o人类医学研究进入
了系统生物学的时代 ∀ /代谢组学k ·¨¤¥²±²°¬¦¶l0是 us世纪 |s年代中期发展起来的一门新兴学科 o是系统生物学的重要组成
部分 ∀它是关于生物体系内源代谢物质种类 !数量及其变化规律的科学 o研究生物整体 !系统或器官的内源性代谢物质及其
与内在或外在因素的互作 ∀常用的方法是检测和量化一个生物整体代谢随时间变化的规律 o建立内在和外在因素影响下 o代
谢整体的变化轨迹 o反映某种病理k生理l过程中所发生的一系列生物事件 o从而达到从整体上把握人体的健康状态和治疗措
施的效果 ∀
代谢组学创始人 !英国帝国理工大学 ¨µ¨°¼ ‘¬¦«²¯¶²±教授认为人体应该作为一个完整的系统来研究 o应用代谢组学来理
解疾病过程 o与中医的整体观和辨/证0论治思维方式不谋而合 ∀代谢组学与有着几千年历史的中医学在许多方面有相近的
属性 o如果把它们有机的结合起来研究将可能有力地推动中医理论的现代化进程 ∀ /代谢组学0已成为运用系统生物学研究
中医药的重要手段 o还可能成为中医学走向国际化的通用语言 ∀
作为/系统生物医学上海论坛0的第一届会议 o/ 代谢组学k  ·¨¤¥²±²°¬¦¶l与中医药国际化研讨会0邀请代谢组学创始人
¨µ¨°¼ ‘¬¦«²¯¶²±教授做主题报告 o陈竺 !刘昌孝等院士做重要讲话和报告 ~我国中医药学科的著名学者和活跃在代谢组学 !系
统生物学等新兴学科的学者会聚一堂 o深入探讨中医药国际化和现代化的新方向与新思路 ∀如何综合运用代谢组学中多种
仪器分析和生物信息学的技术方法 o并结合蛋白质组学等组学研究 o对传统中医理论和治疗方法的一些关键问题开展研究并
取得突破 o从而使我国医药事业借重西方生命科学的前沿技术和东方传统医学的历史积淀进入自主创新的新时代等内容是
本次论坛的主要议题 ∀
此次会议由/上海系统生物医学研究中心0主办 o上海交通大学 /系统生物医学研究院0 !上海中医药大学 /中医方证系统
生物学研究中心0承办 ∀会议邀请了国家科技部 !卫生部 !国家自然基金委员会和上海市等有关部门领导光临指导 ∀
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第 vt卷第 ty期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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