全 文 ：市售样品 ∀其原因可能是配方中所用的白芍药材不
同所致 ∀
4 讨论
白芍为十全大补丸中主要药材 o有效成分为芍
药苷 ∀白芍不同产地和生长年限及环境因素均可造
成药材的质量有较大的差异 o加之饮片炮制工艺的
差异 o这些最终均可导致制剂中芍药苷含量的变异 o
本实验结果说明以芍药苷含量为定量指标可以灵敏
反映十全大补丸中药用物质基础的变化 ∀同时也说
明药材及饮片的加工是样品质量控制的重要环节 ∀
≈参考文献
≈t 中国药典 1 一部 1usss1vvs1
≈责任编辑 鲍 雷
≈收稿日期 ussx2s{2vs
≈通讯作者 3罗祖明 oר¯ }ksu{l{xwuuxw{
疏血通注射液对大鼠脑缺血耐受作用及神经
生长因子表达的影响
周俊英t o刘 柳u o罗祖明t 3
kt1 四川大学 华西医院 o四川 成都 ytsswt ~u1 川北医学院 附属医院 o四川 南充 yvzsssl
预先给予一次或多次的亚致死性短暂缺血性损
伤k缺血预处理 o¬¶¦«¨ °¬¦³µ¨¦²±§¬·¬²±¬±ªo°≤l o可以
增进脑组织对再次发生的更严重的缺血性损伤的抵
抗 o减轻脑损伤程度 o即脑缺血耐受k¬¶¦«¨ °¬¦·²¯ µ¨2
¤±¦¨ o×l ∀×的机制目前尚不完全清楚 o初步研究
表明神经生长因子k±¨ µ√¨ ªµ²º·«©¤¦·²µoƒl可能在
×中具有重要意义 ∀动物实验和临床研究均表明
疏血通注射液k≥«∏¬∏¨·²±ª¬±¨¦·¬²±o≥÷×l具有减轻缺
血性脑损伤作用 o但 ≥÷×对 ×的影响尚未见报道 ∀
本实验通过建立大鼠局灶性脑缺血耐受模型 o观察
≥÷×对脑缺血耐受及 ƒ表达的影响 ∀
1 材料和方法
111 动物分组及用药 健康雄性 ≥⁄大鼠 wx只 o体
重 uxs ∗ vss ªo由四川大学华西动物实验中心提供 ∀
疏血通注射液主要成分是地龙 !水蛭 o每支 u °o含
生药 t ªo由牡丹江友搏药业有限责任公司提供 o批
号 swswtv2t ∀随机将大鼠分为假手术组 !预缺血组 !
疏血通组 o每组 tx只 ∀疏血通组预缺血 ts °¬±后腹
腔注射疏血通注射液 ts °#®ªpt#§pt o连续给药 v
§ov §后给予 u «大脑中动脉缺血k≤l o再灌 uu
«后处死 ~预缺血组不给药 o腹腔注射等量生理盐
水 o余同疏血通组 ~假手术组以假手术代替预缺血 o
余同预缺血组 ∀
112 动物模型的制备 采用大脑中动脉 u次线栓
法≈t o结扎左颈外动脉远端 o将尼龙线从颈外动脉残
端插入 o进线约 t{ ∗ us °° o结扎颈外动脉近端 o
≤后 ts °¬±抽出栓线 o完成预缺血 ∀v §后再次
行 ≤ u «o再灌注 uu «后处死 ∀假手术仅暴露颈
总动脉解剖结构 ∀
113 神经功能评分 采用 ¤¨²±ª¤≈u 的评分标准 }
s分为无神经系统功能缺失 ~t分为不能完全伸展对
侧前爪 ~u分为爬行时向对侧转圈 ~v分为行走时向
对侧倾倒 ~w分为不能自发行走 o意识丧失 ∀
114 脑梗死体积测定 每组取 x只大鼠 o快速断
头取脑 o按 u °°厚度连续冠状切片 o浸于 u h ××≤
溶液中 ovz ε 避光染色 vs °¬±o取出固定后测出脑
梗死面积 o计算脑梗死体积k°°vl 各层梗死面积
之和 ≅层间隔 ∀
115 ∞和免疫组化染色 每组取 ts只大鼠 o取脑
组织固定 !脱水 !石蜡包埋 o按 w °°厚度连续切片 o
做 ∞染色和免疫组织化学染色 ∀免疫组化采用 ≥°
法 o一抗 ƒ多克隆抗体k工作浓度 tΒussl和 ≥°试
剂盒均购于北京中山生物公司 o按试剂盒要求进行
操作 ∀每张切片随机选取 ts个高倍视野进行图像
分析 o测量免疫组化染色的平均吸光度 Α∀
116 统计学分析 所有数据以 cξ ? σ表示 o组间比
较采用方差分析 ∀
2 结果
211 神经功能评分 各组均有神经功能缺损 o预
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第 vt卷第 tt期
ussy年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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∏±¨ oussy
缺血组评分较假手术组低k Π s1sxl o疏血通组较
预缺血组进一步降低k Π s1sxlk表 tl ∀
表 t 各组神经功能评分 !脑梗死体积及 ƒ
表达变化kcξ ? σ, ν txl
组别 神经功能评分r分 脑梗死体积r°°v ƒr Α
假手术 u qvt ? s qy{ t|{ qvu ? t| qxy yx qtx ? y qz{
预缺血 u qst ? s quttl twu qz| ? tz q{wtl z| qyt ? | qty¥
疏血通 t qzy ? s qvyt ovl tsv qzy ? tu qwyu ovl {z qzv ? z q{u¥¦
注 }与假手术组比较tl Π s1sx oul Π s1st ~与预缺血组比较
vl Π s1sx
212 脑梗死体积 梗死区脑组织为白色 o非梗死区
为红色 ∀预缺血组梗死体积较假手术组小k Π
s1sxl o疏血通组梗死体积缩小较预缺血组明显
k Π s1sxlk表 tl ∀
213 病理形态改变 光镜下各组均可见不同程度
梗死区 ∀假手术组有广泛梗死性改变 o梗死区神经
细胞坏死消失 o边缘区细胞核固缩 o伴有炎性细胞浸
润 ~预缺血组梗死区较假手术组小 o边缘区可见少量
残存的神经细胞及胶质细胞增生 ~疏血通组梗死区
明显缩小 o周围神经细胞结构尚清楚 o胶质细胞增生
明显 ∀
214 ƒ 的表达 各组均可见 ƒ 表达 o主要在
梗死区周围皮层和海马区 o阳性表达为细胞胞浆呈
棕黄色 ∀图像分析结果显示疏血通组表达较其余 u
组高 k Π s1sxl o预缺血组表达高于假手术组
k Π s1stlk表 tl ∀
3 讨论
短暂性脑缺血对再次缺血的作用因缺血间隔时
间的长短分为两种 }积累性损伤和保护性耐受 ∀本
研究采用局灶性脑缺血耐受模型 o发现 ts °¬±缺血
预处理可诱导 v §后脑缺血耐受 o减轻再次致死性
缺血损伤 ∀
脑缺血预处理诱导脑缺血耐受的机制尚不完全
清楚 o研究表明缺血预处理通过引发一系列基因的
转录和翻译 o抑制损伤蛋白的合成和促进保护性蛋
白的合成获得缺血耐受≈v ∀目前认为 ƒ 与脑缺
血耐受有关 ∀ ƒ是神经营养因子k±¨ ∏µ²·µ²³«¬¦©¤¦2
·²µo׃l家族的一员 o在维持神经元存活 !促进神经
元分化及轴突的生长中起关键作用 ∀实验≈w 表明
ƒ能防止培养的海马及皮层神经元代谢性或兴奋
毒性损伤 o通过外源性补充和基因敲除等方法证实
了 ƒ 的神经保护作用 ∀缺血预处理诱导脑内
∞¶k即早基因l的快速转录并合成 ƒ²¶和 ∏±蛋白
二聚体 o后者可与 °2t位点结合调节靶基因的转
录 o生成 ƒ o减轻再缺血引起的神经元损害≈x ∀
ƒ可能通过提高超氧化物歧化酶k≥⁄l清除自由
基的能力 !拮抗 ∞的神经毒性 !稳定细胞内 ≤¤u n
浓度发挥对神经元的保护作用 ∀
疏血通注射液由水蛭 !地龙等动物中药制成 o其
主要有效成分包括水蛭素样物质 !蚓激酶样物质 !氨
基酸 !微量元素等 ∀疏血通注射液具有活血化瘀 !通
经活络的作用 o其作用机制≈y 为 ≠ 抗凝 !抗血栓形
成 ~ 溶栓 ~≈ 降低血脂 !胆固醇 ~…细胞保护作用 ∀
动物实验和临床研究均表明疏血通注射液在缺血性
脑损伤中可减轻神经功能缺损 !缩小脑梗死体积 !减
少病残率 ∀
本实验结果证实短暂性预缺血诱导了脑缺血耐
受 o预缺血可能通过促进 ƒ蛋白的合成发挥其神
经保护作用 oƒ是脑缺血耐受机制之一 ~疏血通注
射液通过上调 ƒ 的表达 o减轻再缺血后脑损伤 o
与缺血预处理具有协同作用 ∀本研究提示疏血通注
射液可能对缺血性脑卒中二级预防有益 o但还需要
大量的临床研究证实其是否能增强 ×后机体的内
源性神经保护作用 ∀
≈参考文献
≈t 郝玉曼 o罗祖明 o周 东 q局灶预缺血诱导脑缺血耐受的动物
模型 q中风与神经疾病杂志 oussv ouskul }tu| q
≈u ²±ª¤ ∞ o • ¬¨±¶·¨¬± ° o≤¤µ¶²± ≥ o ετ αλ. ¶√¨ µ¶¬¥¯¨ °¬§§¯¨¦¨µ¨2
¥µ¤¯ ¤µ·¨µ¼ ²¦¦¯∏¶¬²± º¬·«²∏·¦µ¤¬±¬¨·²°¼¬±µ¤·¶q Στροκε ot|{| ousktl }
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©²¦¤¯ ¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤q ϑ Χερεβ Βλοοδ Φλοω Μεταβ , t||y oty }xyy q
≈w ¤·¶²± ° o²√¨ ¯¯ oƒ∏µ∏®¤º¤o ετ αλ. ϑ Νευροχηεµ , t||x o
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≈x • ¬¨« o°µ¤¶¶o ∏¶¦«¨µo ετ αλ. ¶¦«¨ °¬¤·²¯ µ¨¤±¦¨ ~°²§¨¯©²µ
µ¨¶¨¤µ¦«o«²³¨ ©²µ¦¯¬±¬¦¤¯ ³µ¤¦·¬¦¨ q Νερϖεναρζτ , usst ozukwl }uxx q
≈y 刘云海 o方淑贤 q疏血通注射液 q医药导报 oussu outkyl }vz{ q
≈责任编辑 刘
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第 vt卷第 tt期
ussy年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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