全 文 ：海藻中溴酚化合物的蛋白酪氨酸磷脂酶
１Ｂ抑制活性研究
史大永１，许 凤２，李 敬１，郭书举１，苏 华１，韩丽君１
（１．中国科学院 海洋研究所，山东 青岛 ２６６０７１；
２．青岛大学 医学院 附属医院，山东 青岛 ２６６００３）
［摘要］ 目的：通过对海藻天然产物进行活性筛选，寻找蛋白酪氨酸磷脂酶１Ｂ（ＰＴＰ１Ｂ）抑制剂，为２型糖尿
病和肥胖症的治疗寻找新的治疗药物。方法：以 ＰＴＰ１Ｂ为靶点，采用分子克隆谷胱苷肽巯基转移酶（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎＳ
ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＧＳＴ）融合蛋白的方法，重组表达获得ＰＴＰ１Ｂ，通过高通量筛选模型对海藻中得到的单体化合物进行活
性筛选，采用ＬＯＧＩＴ法计算ＬＤ５０。结果：来源于松节藻和小黏膜藻的溴酚类化合物４二溴５（甲氧基甲基）１，２二
苯酚（１），２甲基３（２，３二溴４，５二羟基）苯丙醛（２），３（２，３二溴４，５二羟基苯）４溴５，６二羟基１，３二氢异
苯并呋喃 （３）表现出显著的ＰＴＰ１Ｂ抑制活性，ＩＣ５０分别为３４，４５，２８μｍｏｌ·Ｌ
－１。结论：首次对溴酚化合物作为
ＰＴＰ１Ｂ抑制剂进行研究，海藻中的３个溴酚类化合物表现出显著的ＰＴＰ１Ｂ抑制活性，有开发成新型抗糖尿病海洋
药物的潜力。
［关键词］ 海藻；蛋白酪氨酸磷脂酶１Ｂ；抑制剂；溴酚类化合物
［中图分类号］Ｒ２８５５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）１９２２３８０３
［收稿日期］ ２００７１１１０
［基金项目］ 国家高技术研究发展计划 （８６３）项目
（２００７ＡＡ０９Ｚ４１０，２００７ＡＡ０９１６０４）；中国科学院方向性创新项目
（ＫＺＣＸ２ＹＷ２０９）
［通讯作者］ 韩丽君，Ｔｅｌ：（０５３２）８２８９８７０２，Ｅｍａｉｌ：ｌｊｈａｎ＠
ｍｓ．ｑｄｉｏ．ａｃ．ｃｎ
蛋 白 酪 氨 酸 磷 酸 酶 １Ｂ（ｐｒｏｔｅｉｎｔｙｒｏｓｉｎｅ
ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ１Ｂ，ＰＴＰ１Ｂ）在胰岛素信号转导通路中起
着重要的负调控作用［１］。研究证实，在胰岛素敏感
细胞中应用 ＰＴＰ１Ｂ抑制剂可使胰岛素受体及其底
物磷酸化水平升高，促进葡萄糖转运子易位及增加
葡萄糖的摄取等，ＰＴＰ１Ｂ抑制剂起到了胰岛素类似
物和胰岛素增敏剂的作用［２］。敲除ＰＴＰ１Ｂ基因［３４］
或用反义核苷酸（ａｎｔｉｓｅｎｓｅｏｌｉｇｏｎｕｌｅｏｔｉｄｅｓ，ＡＳＯ）［５］
抑制体内ＰＴＰ１Ｂ蛋白及ｍＲＮＡ的表达，不仅可以显
著提高受试小鼠对胰岛素的敏感性，而且能够明显
降低肥胖症的患病几率，因此，寻找小分子 ＰＴＰ１Ｂ
抑制剂已成为治疗２型糖尿病及肥胖症的新靶点。
作者通过对几十种海洋生物进行化学成分研究，对
得到的近百种单体化合物进行高通量筛选，发现来
源于红藻松节藻 Ｒｈｏｄｏｍｅｌａｃｏｎｆｅｒｖｏｉｄｅｓ和褐藻小黏
膜藻Ｌｅａｔｈｅｓｉａｎａｎａ的３个溴酚化合物３，４二溴５
（甲氧基甲基）１，２二苯酚 （Ⅰ），２甲基３（２，３二溴
４，５二羟基）苯丙醛（Ⅱ），３（２，３二溴４，５二羟基
苯）４溴５，６二羟基１，３二氢异苯并呋喃 （Ⅲ）表现
出显著的ＰＴＰ１Ｂ抑制活性，具有良好的开发前景。
１ 材料
１．１ 海藻 松节藻 Ｒｈｏｄｏｍｅｌａｃｏｎｆｅｒｖｏｉｄｅｓ，属松节
藻科 Ｒｈｏｄｏｍｅｌａｃｅａｅ，仙菜目 Ｃｅｒａｍｉａｌｅｓ，红藻纲
Ｒｈｏｄｏｐｈｙｃｅａｅ，红藻门 Ｒｈｏｄｏｐｈｙｔａ，广泛分布于中
国、日本、朝鲜半岛及大西洋北岸［６］；海藻样品于
２００３年４月采于山东青岛海域，由中国科学院海洋
研究所范晓教授鉴定，标本现存于中国科学院海洋
研究所海藻化学研究室，标本号２００３０４８。
小 黏 膜 藻 Ｌｅａｔｈｅｓｉａ ｎａｎａ 属 黏 膜 藻 科
Ｌｅａｔｈｅｓｉａｃｅａｅ、索 藻 目 Ｃｈｏｒｄａｒｉａｌｅｓ、褐 藻 门
Ｐｈａｅｏｐｈｙｔａ，主要分布于我国黄海海域［６］；海藻样品
于２００２年５月采自山东威海海域，由中国科学院海
洋研究所范晓教授鉴定，标本现存于中国科学院海
洋研究所海藻化学研究室，标本号２００２０３８。
１．２ 试剂 谷胱甘肽 ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ购自 Ｐｈａｒｍａｃｉａ
公司，正钒酸钠和 ｐ硝基酚磷酸盐（ｐｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙｌ
ｐｈｏｓｐｈａｔｅ，ｐＮＰＰ）购自Ｓｉｇｍａ公司；其他试剂均为国
产分析纯试剂。
１．３ 仪器 Ｂｅｃｈｍａｒｋ酶标仪（ＢＩＯＲＡＤ公司）；
·８３２２·
第３３卷第１９期
２００８年１０月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １９
Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００８
Ａｌｅｇｒａ６４Ｒ高速冷冻离心机 （Ｂｅｃｋｍａｎ公司）；
ＢｉｏｍｅｋＦＸ智能双臂系统自动工作台（Ｂｅｃｋｍａｎ公
司）以及ＢｉｏｍｅｋＦＸ操作软件。
２ 方法
２．１ 化合物制备 松节藻 Ｒｈｏｄｏｍｅｌａｃｏｎｆｅｒｖｏｉｄｅｓ
样品１４４ｋｇ（干重）粉碎后用９５％乙醇提取，提取
液减压浓缩得乙醇提取物７２３ｇ，醋酸乙酯萃取，减
压浓缩，得醋酸乙酯相浸膏５９４６ｇ，对得到的浸膏
采用正相、反相硅胶柱色谱，ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ－２０色谱
以及ＨＰＬＣ等手段进行分离，得到化合物１２５ｍｇ、
化合物２１８ｍｇ，经波谱分析，分别为３，４二溴５（甲
氧基甲基）１，２二苯酚和２甲基３（２，３二溴４，５
二羟基）苯丙醛［７］。
小黏膜藻Ｌｅａｔｈｅｓｉａｎａｎａ样品８２５ｋｇ（干重）粉
碎后用９５％乙醇提取，提取液减压浓缩得乙醇提取
物７１０ｇ，醋酸乙酯萃取，减压浓缩，得醋酸乙酯相浸
膏１２５ｇ，对得到的浸膏采用正相、反相硅胶柱色谱，
ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ－２０色谱等手段进行分离，得到化合
物３１８ｍｇ，经波谱分析，化合物为３（２，３二溴４，５
二羟基苯）４溴５，６二羟基１，３二氢异苯并呋
喃［８］。
２．２ 蛋白酪氨酸磷脂酶１Ｂ抑制活性测定 采用
分子生物学方法，构建基因重组的 ｈＧＳＴＰＴＰ１Ｂ
ＢＬ２１Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ人类 ＰＴＰ１Ｂ工程菌，以 ＧＳＴ亲
和色谱柱纯化 ｈＧＳＴＰＴＰ１Ｂ蛋白质，利用含有磷酸
的多肽 ｐｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙｌｐｈｏｓｐｈａｔｅ（ｐＮＰＰ）被 ＰＴＰ１Ｂ酶
解掉１个磷酸后的产物 ｐＮＰ在波长４０５ｎｍ处有吸
收峰的原理，以 ＰＴＰ１Ｂ作用后生成 ｐＮＰ的量表示
ＰＴＰ１Ｂ酶活性变化以及化合物对酶活性的抑制情
况。
将待测样品化合物分别用 ＤＭＳＯ配制成不同
浓度的供试品溶液，取２μＬ供试品溶液分别加入到
标准的测活体系（５０ｍｍｏｌ·Ｌ－１ＴｒｉｓＨＣｌ，ｐＨ６５，２
ｍｍｏｌ·Ｌ－１ｐＮＰＰ，２％ＤＭＳＯ，３０ｎｍｏｌ·Ｌ－１ｈＧＳＴ
ＰＴＰ１Ｂ）。阴性对照：ＤＭＳＯ；阳性对照：正钒酸钠，反
应温度为３０℃，动态测定波长４０５ｎｍ处的吸光度
（Ａ），时间３ｍｉｎ，按如下公式计算化合物 ＰＴＰ１Ｂ酶
活力抑制率及ＩＣ５０（ＬＯＧＩＴ法）。
抑制率（％）＝（Ａ实验 －Ａ阴性）／（Ａ对照 －Ａ阴性）×１００％
３ 结果
采用比色法，利用 ｈＧＳＴＰＴＰ１Ｂ融合蛋白，对来
自红藻松节藻与褐藻小黏膜藻的３个溴酚类化合物
进行了ＰＴＰ１Ｂ活性测试，结果见表１。所有化合物
均呈现良好的量效关系，其中化合物Ⅱ，Ⅲ和正钒酸
钠的２００μｍｏｌ·Ｌ－１剂量组与０２μｍｏｌ·Ｌ－１剂量
组抑制率比较呈显著性差异（Ｐ＜００５）。
表１ ３种化合物不同浓度对蛋白质酪氨酸磷脂酶１Ｂ的抑制率（％）及ＩＣ５０
受试物
抑制率／％
２００μｍｏｌ·Ｌ－１ ２０μｍｏｌ·Ｌ－１ ２μｍｏｌ·Ｌ－１ ０２μｍｏｌ·Ｌ－１
ＩＣ５０
／μｍｏｌ·Ｌ－１
化合物１ ７８７ ５１２ ４２３ ３９２ ３４
化合物２ ８５１） ５２３ ４２４ ２６７ ４５
化合物３ ８６１） ６５２ ４８４ ２５７ ２８
正钒酸钠 ９４２１） ７５３ ５３３ ３４８ ２０
注：与０２μｍｏｌ·Ｌ－１剂量组比１）Ｐ＜００５
４ 讨论
胰岛素抵抗是２型糖尿病发病的关键因素，胰岛
素通过与受体胞外α亚基结合，激活受体胞内β亚基
内在的酪氨酸激酶活性，导致酪氨酸残基自身磷酸
化，从而完全激活胰岛素受体酪氨酸激酶，再通过磷
酸化胰岛素受体底物将信号传递下去。酪氨酸磷酸
化是胰岛素效应实现的一个重要环节，受作用相反的
一对酶即ＰＴＫ和ＰＴＰ所调节［９］。ＰＴＫ在胰岛素信号
传递中的作用很早即被人们所关注，但直到最近，人
们才逐渐认识到ＰＴＰ在糖尿病发病中的重要性。
Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎ研究表明，胰岛素抵抗患者的胰岛素
靶组织中 ＰＴＰ１Ｂ和 ＬＡＲＰＴＰ表达增加，这２种 ＰＴＰ
的表达增加能阻断胰岛素受体酪氨酸的激活和胰岛
素的信号转导［１０］。Ｅｌｃｈｅｂｌｙ等发现，ＰＴＰ１Ｂ基因剔
除鼠可提高胰岛素的敏感性，且这种增敏效应具有
组织特异性，它可增加骨骼肌对葡萄糖的摄取，但对
脂肪组织无明显影响［３］。Ｐ３８７Ｌ是 ＰＴＰ１Ｂ的一种
错义突变，Ｅｃｈｗａｌｄ等［１１］证实２型糖尿病患者中，该
基因突变频率为１４％，而正常对照组仅为０５％，
故认为这一变异与２型糖尿病有关。Ｇｕｍ等采用
ＰＴＰ１Ｂ反义寡核苷酸处理糖尿病型小鼠（ｏｂ／ｏｂ小
鼠），抑制其 ＰＴＰ１Ｂ表达，发现在肝、脂肪和骨骼肌
肉内ＰＴＰ１Ｂ的表达下调时，ｏｂ／ｏｂ小鼠血糖恢复正
常，与糖代谢有关的各项指标都趋于正常，胰岛素钳
·９３２２·
第３３卷第１９期
２００８年１０月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １９
Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００８
夹实验表明，糖尿病模型小鼠的肝和外周组织对胰
岛素敏感性增强［１２１３］。这些结果证实 ＰＴＰ１Ｂ在胰
岛素信号转导中的负调控作用，它的活性增高，可能
是发生胰岛素抵抗和胰岛素受体信号受损的一个致
病因素。因此，寻找ＰＴＰ１Ｂ的小分子抑制剂可能开
发出有效的治疗２型糖尿病和肥胖症的新药。
国际上对 ＰＴＰ１Ｂ抑制剂的研究不多，目前尚未
见溴酚类化合物作为ＰＴＰ１Ｂ抑制剂抗糖尿病方面的
研究报道。通过对上百种海洋天然产物进行活性筛
选，发现来源于海藻的３个溴酚类化合物表现出显著
的ＰＴＰ１Ｂ抑制活性，其 ＩＣ５０分别为 ３４，４５，２８
μｍｏｌ·Ｌ－１，有开发成新型抗糖尿病海洋药物的潜力。
［参考文献］
［１］ ＵｋｋｏｌａＯ，ＳａｎｔａｎｉｅｒｎｉＭ．Ｐｒｏｔｅｉｎｔｙｒｏｓｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ１Ｂ：ａ
ｎｅｗ ｔａｒｇｅｔｆｏｒｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｏｂｅｓｉｔｙａｎｄａｓｓｏｃｉａｔｅｄｃｏ
ｍｏｒｂｉｄｉｔｉｅｓ［Ｊ］．ＪＩｎｔＭｅｄ，２００２，２５１（６）：４６７．
［２］ ＸｉｅＬ，ＬｅｅＳＹ，ＡｎｄｅｒｓｅｎＪＮ，ｅｔａｌ．Ｃｅｌｕｌａｒｅｆｅｃｔｓｏｆｓｍａｌ
ｍｏｌｅｃｕｌｅ ＰＴＰ１Ｂ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｎ ｉｎｓｕｌｉｎ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ［Ｊ］．
Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００３，４２（４４）：１２７９２．
［３］ ＥｌｃｈｅｂｌｙＭ，ＰａｙｅｔｅＰ，ＭｉｃｈａｌｉｓｚｙｎＥ，ｅｔａｌ．Ｉｎｃｒｅａｓｅｄｉｎｓｕｌｉｎ
ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｎｄｏｂｅｓｉｔｙｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｉｎｍｉｃｅｌａｃｋｉｎｇｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎ
ｔｙｒｏｓｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ１Ｂｇｅｎｅ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９９，２８３：１５４４．
［４］ ＫｌａｍａｎＬＤ，ＢｏｓｓＯ，ＯｄｉｌｅＤ，ｅｔａｌ．Ｉｎｃｒｅａｓｅｄｅｎｅｒｇｙ
ｅｘｐｅｎｄｉｔｕｒｅ，ｄｅｃｒｅａｓｅｄａｄｉｐｏｓｉｔｙ，ａｎｄｔｉｓｓｕｅｓｐｅｃｉｆｉｃｉｎｓｕｌｉｎ
ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｉｎｐｒｏｔｅｉｎｔｙｒｏｓｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ１Ｂｄｅｆｉｃｉｅｎｔｍｉｃｅ［Ｊ］．
ＭｏｌＣｅｌＢｉｏｌ，２０００，２０（１５）：５４７９．
［５］ ＺｉｎｋｅｒＢＡ，ＲｏｎｄｉｎｏｎｅＣＭ，ＴｒｅｖｉｌｙａｎＪＭ，ｅｔａｌ．ＰＴＰ１Ｂ
ａｎｔｉｓｅｎｓｅｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｌｏｗｅｒｓＰＴＰ１Ｂｐｒｏｔｅｉｎ，ｎｏｒｍａｌｉｚｅｓｂｌｏｏｄ
ｇｌｕｃｏｓｅ，ａｎｄｉｍｐｒｏｖｅｓｉｎｓｕｌｉｎｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｉｎｄｉａｂｅｔｉｃｍｉｃｅ［Ｊ］．
ＰｒｏｃＮａｔＡｃａｄＳｃｉ，２００２，９９（１７）：１１３５７．
［６］ 黄宗国．中国海洋生物种类与分布［Ｍ］．北京：海洋出版社，
１９９４：２１７，２１５．
［７］ 徐年军．海藻抗肿瘤抗细菌生物活性物质的研究［Ｄ］．北京：
中国科学院研究生院，２００２．
［８］ 徐秀丽．小黏膜藻和苔海绵活性先导化合物研究［Ｄ］．北京：
中国科学院研究生院，２００４．
［９］ ＬｉｕＧ．Ｐｒｏｔｅｉｎｔｙｒｏｓｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ１Ｂｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ：ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ
ａｎｄｃｈａｌｅｎｇｅｓ［Ｊ］．ＣｕｒＭｅｄＣｈｅｍ，２００３，１０（５）：１４０７．
［１０］ ＧｏｌｄｓｔｅｉｎＢＪ，ＢｉｔｎｅｒＫｏｗａｌｃｚｙｋＡ，ＷｈｉｔｅＭＦ，ｅｔａｌ．Ｔｙｒｏｓｉｎｅ
ｄｅｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎａｎｄｄｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆｉｎｓｕｌｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒｓｕｂｓｔｒａｔｅ１
ｂｙｐｒｏｔｅｉｎｔｙｒｏｓｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ１Ｂ．Ｐｏｓｓｉｂｌｅｆａｃｉｌｉｔａｔｉｏｎｂｙｔｈｅ
ｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆａｔｅｒｎａｒｙｃｏｍｐｌｅｘｗｉｔｈｔｈｅＧｒｂ２ａｄａｐｔｏｒｐｒｏｔｅｉｎ［Ｊ］．
ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ，２０００，２７５：４２８３．
［１１］ ＥｃｈｗａｌｄＳＭ，ＢａｃｈＨ，ＶｅｓｔｅｒｇａａｒｄＨ，ｅｔａｌ．ＡＰ３８７Ｌ，ｖａｒｉａｎｔ
ｉｎｐｒｏｔｅｉｎｔｙｒｏｓｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ１Ｂ（ＰＴＰ１Ｂ）ｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈ
ｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｅｓａｎｄｉｍｐａｉｒｅｄｓｅｒｉｎｅｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎｏｆＰＴＰ１Ｂｉｎ
ｖｉｔｒｏ［Ｊ］．Ｄｉａｂｅｔｅｓ，２００２，５１：１．
［１２］ ＧｕｍＲＪ，ＧａｅｄｅＬＬ，ＫｏｔｅｒｓｋｉＳＬ，ｅｔａｌ．Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎｏｆｐｒｏｔｅｉｎ
ｔｙｒｏｓｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ１Ｂｉｎｃｒｅａｓｅｓｉｎｓｕｌｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｓｉｇｎａｌｉｎｇｉｎ
ｏｂ／ｏｂｍｉｃｅ［Ｊ］．Ｄｉａｂｅｔｅｓ，２００３，５２（１）：２１．
［１３］ ＺｉｎｋｅｒＢＡ，ＲｏｎｄｉｎｏｎｅＣＭ，ＴｒｅｖｉｌｙａｎＪＭ，ｅｔａｌ．ＰＴＰ１Ｂ
ａｎｔｉｓｅｎｓｅｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｌｏｗｅｒｓＰＴＰ１Ｂｐｒｏｔｅｉｎ，ｎｏｒｍａｌｉｚｅｓｂｌｏｏｄ
ｇｌｕｃｏｓｅ，ａｎｄｉｍｐｒｏｖｅｓｉｎｓｕｌｉｎｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｉｎｄｉａｂｅｔｉｃｍｉｃｅ［Ｊ］．
ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ，２００２，９９（１７）：１１３５７．
ＰＴＰ１Ｂｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｂｒｏｍｏｐｈｅｎｏｌｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓｆｒｏｍａｌｇａｅ
ＳＨＩＤａｙｏｎｇ１，ＸＵＦｅｎｇ２，ＬＩＪｉｎｇ１，ＧＵＯＳｈｕｊｕ１，ＳＵＨｕａ１，ＨＡＮＬｉｊｕｎ１
（１．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＯｃｅａｎｏｌｏｇｙ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｑｉｎｇｄａｏ２６６０７１，Ｃｈｉｎａ；
２．ＡｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｅｇｅ，ＱｉｎｇｄａｏＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｑｉｎｇｄａｏ２６６００３，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎｔｙｒｏｓｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ１Ｂ（ＰＴＰ１Ｂ）ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｎａｔｕｒａｌｐｒｏｄｕｃｔｓｆｒｏｍａｌｇａｅ
ａｉｍｉｎｇａｔｓｅａｒｃｈｉｎｇｆｏｒｎｅｗｗａｙｆｏｒｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｉｔｕｓ（Ｔ２ＤＭ）ａｎｄｏｂｅｓｉｔｙ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｂｒｏｍｏｐｈｅｎｏｌｓｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ
ｆｒｏｍａｌｇａｅｗｅｒｅｓｃｒｅｅｎｅｄａｇａｉｎｓｔｔｈｅＰＴＰ１ＢｂｙｔｈｅｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃａｓｓａｙｗｉｔｈＧＳＴ／ＰＴＰ１Ｂｆｕｓｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎ．ＴｈｅＭｅ２ＳＯｗａｓｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄａｓ
ｔｈｅｆｕｌｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｙ，ａｎｄＮａ３ＶＯ４（ＩＣ５０２μｍｏｌ·Ｌ
－１）ｗａｓｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄａｓｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌ．ＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎｒａｔｅｗａｓａｓｓａｙｅｄａｎｄＩＣ５０
ｗｅｒｅｃａｌｃｕｌａｔｅｄｂｙＬＯＧＩＴｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＴｈｒｅｅｂｒｏｍｏｐｈｅｎｏｌｓｆｒｏｍＲｈｏｄｏｍｅｌａｃｏｎｆｅｒｖｏｉｄｅｓａｎｄＬｅａｔｈｅｓｉａｎａｎａ，３，４ｄｉｂｒｏｍｏ５
（ｍｅｔｈｏｘｙｍｅｔｈｙｌ）１，２ｂｅｎｚｅｎｅｄｉｏｌ（１），２ｍｅｔｈｙｌ３（２，３ｄｉｂｒｏｍｏ４，５ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ）ｐｒｏｐｙｌａｌｄｅｈｙｄｅ（２）ａｎｄ３（２，３ｄｉｂｒｏｍｏ４，５
ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）４ｂｒｏｍｏ５，６ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ１，３ｄｉｈｙｄｒｏｉｓｏｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ（３）ｓｈｏｗｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙａｇａｉｎｓｔＰＴＰ１Ｂ．ＩＣ５０
ｖａｌｕｅｓｗｅｒｅ３４μｍｏｌ·Ｌ－１，４５μｍｏｌ·Ｌ－１ ａｎｄ２８μｍｏｌ·Ｌ－１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｐｒｏｖｅｔｈａｔｔｈｒｅｅ
ｂｒｏｍｏｐｈｅｎｏｌｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓｆｒｏｍａｌｇａｅｗｉｔｈｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙａｇａｉｎｓｔＰＴＰ１Ｂｗｅｒｅｐｏｔｅｎｔｉａｌａｎｄｅｆｅｃｔｉｖｅｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｇｅｎｔｓｆｏｒ
ｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆＴ２ＤＭａｎｄｏｂｅｓｉｔｙ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ａｌｇａｅ；ｐｒｏｔｅｉｎｔｙｒｏｓｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ１Ｂ（ＰＴＰ１Ｂ）；ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ；ｂｒｏｍｏｐｈｅｎｏｌ ［责任编辑 古云侠］
·０４２２·
第３３卷第１９期
２００８年１０月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １９
Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００８