全 文 ：[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ²¥¶¨µ√¨·«¨ ³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨¦·²©¦²°³²∏±§¤¦¤±·«²³¤±¤¬ ¶¨±·¬¦²¶∏¶¬±­¨¦·¬²± k≤„≥Œl ²± °¼²¦¤µ§¬¤¯
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≈责任编辑 刘  
≈收稿日期   ussz2sw2ts
≈通讯作者   3 薛明 oר¯}kstsl{v|ttxusoo∞2°¤¬¯}¬∏¨ ° ƒ ¦¦2
°°1 §¨∏1¦±
丹芎方及其组分保肝作用的实验研究
李晓蓉 t o王丽娟 t o李宇航 t o徐艳霞 t o陈 怡 t o阮金秀 u o薛 明 t3
ktq首都医科大学 化学生物学与药学院 药理学系 o北京 tsssy|~
uq军事医学科学院 毒物药物研究所 o北京 tss{xsl
≈摘要   目的 }研究丹芎方复方及其主要组成成分对小鼠 ≤≤ w¯肝损伤模型的影响 ∀方法 }采用小鼠腹腔注射
四氯化碳制作肝脏损伤模型 o通过测定小鼠血清中 „×o„≥×o总蛋白 o白球蛋白比和肝脏组织中 ≥’⁄o ⁄„等指
标 o以及肝脏的组织病理学检查 o研究丹芎方复方以及主要组成成分对小鼠 ≤≤ w¯肝损伤模型的保护作用 ∀结果 }丹
芎方和各组分均可抑制 ≤≤ w¯损伤后血浆中 „×和 „≥×的异常增高 o提高血清和肝脏中 ≥’⁄活性 o减少  ⁄„形成 o
升高血浆中总蛋白 !白蛋白水平 o减轻肝脏疏松化及脂肪变性 ∀其中丹芎方 w组剂量小 !疗效佳 ∀结论 }丹芎方具
有明显的保护肝脏的作用 o且复方具有一定的药效学优化作用 ∀
≈关键词   丹芎方 ~丹参素 ~丹参酮 ~阿魏酸 ~四氯化碳 ~肝损伤
≈中图分类号   • u{xqx ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlus2utzz2sx
丹参系唇形科鼠尾草属的多年生草本植物丹参
Σαλϖια µ ιλτιορρηιζα …∏±ª¨的干燥根及茎 o其有效成分
为脂溶性二萜化合物和水溶性酚酸类化合物 o包括
丹参酮 ´ !隐丹参酮 !丹参酮 µ „ !丹参素等 o是目前
临床常用的活血化瘀中药之一 o有 /一味丹参 o功同
四物 0之称 o被广泛用于心脑血管疾病 ∀近年来 o大
量的临床和药理学研究表明 o丹参对肝脏具有抗脂
质过氧化 !促使肝细胞再生及修复 !抗肝纤维化 !抗
乙肝病毒 !防治肝癌等作用 o说明丹参在治疗肝脏疾
病方面具有很大潜力 ≈t2v   ∀川芎为伞形科植物 Λι2
γυστιχυµ χηυανξιονγ ‹²µ·的干燥根茎 ∀含有生物碱 !
酚类 !内酯类以及中性油等多种成分 ∀其有效成分
阿魏酸 k©¨µ∏¯¬¦¤¦¬§oƒ„l具有抑制血栓形成 o调节免
疫 o清除和抑制氧自由基等作用 ∀有研究表明阿魏
酸钠可明显降低 ≤≤ w¯引起的肝损伤模型小鼠血清
中 „×和 „≥×o明显升高肝组织匀浆中 ≥’⁄的活
性 ∀阿魏酸钠还可通过保护肝细胞膜 !抑制脂质过
氧化反应 !清除自由基 !降低利福平诱导的细胞色素
°wxs酶系统等作用对异烟肼和利福平的肝毒性具
有明显对抗作用 ≈w2{  ∀本研究将丹参中主要水溶性
组分 o主要脂溶性组分和阿魏酸组成复方 o观察复方
制剂的保肝作用是否能够得到优化 ∀
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1 材料与方法
1q1 动物 健康 Œ≤• 小鼠 o雌雄各半 o购自首都医
科大学实验动物中心 o批号 ≥≤÷Žk京 lussx2sssy∀
1q2 药品与试剂 丹参水溶性组分 k丹参素含量
ush lo阿魏酸 k含量 |sh lo丹参酮 k含量 |sh l购
自西安鸿生生物技术有限公司 o批号为 sxsttwo
svswstoswtus{∀四氯化碳 k国产分析纯 o北京现代
东方精细化学品有限公司 o批号 usswsutul∀联苯
双酯滴丸 k北京协和药厂 o批号 swsxsttyl∀谷丙转
氨酶 k„×l!谷草转氨酶 k„≥×l!总蛋白 !白蛋白测
定试剂盒购自北京首医临床医学科技中心 o批号分
别为 ussysvstoussyswt{oussysxtxoussxs|ty∀丙
二醛 k ⁄„l!超氧化物歧化酶 k≥’⁄l测定试剂盒购
自南京建成生物工程研究所 o批号为 ussxtstuo
ussxtstu∀
1q3 动物处理 小鼠 tss只 kt{ ∗ uu ªl分成 ts
组 o每组 ts只 ∀分组方法及给药剂量见表 to用生
理盐水将各个药物溶解或混悬后给小鼠灌胃 o正常
对照组和肝损伤模型组给予生理盐水 ∀连续给药 z
§ot次 r§∀ z §后 o除正常组外 o其余每个组均给予
≤≤ w¯诱导肝损伤 o小鼠腹腔注射 s1th ≤≤ w¯花生油
溶液 ts °# ®ªpt后 o禁食过夜 oty «后 o小鼠称重 !
断头取血 ov sss µ# °¬±pt离心 ts °¬±收集血浆 o应
用 … ¦¨®°¤±自动生化仪检测血清 „×o„≥×o血浆总
蛋白 !白蛋白 ∀剖取肝脏称重 o取一部分液氮冷冻低
温冰箱保存用于检测肝脏 ≥’⁄o ⁄„∀另取部分肝
组织用 tsh福尔马林固定后 o‹∞染色进行组织病
理学检测 ∀
表 t 丹芎方分组及给药剂量 °ª# ®ªpt
分组 剂量 阿魏酸 丹参素 丹参酮
正常 p p p p
模型 p p p p
联苯双酯滴丸 ux1y p p p
阿魏酸 p ty1tu p p
丹参素 p p us1z p
丹参酮 p p p tu1y
丹芎方 t uwz1t {s1y tsv1x yv
丹芎方 u w|1wu ty1tu us1z tu1y
丹芎方 v |1{{ v1uu w1tw u1xu
丹芎方 w t1|z s1yw s1{v s1xs
1q4 数据处理 数据用 cξ ? σ表示 o采用 ≥°≥≥ ts1s
统计软件包进行方差分析 ∀
2 结果
2q1 对小鼠血清中 „×o„≥×o总蛋白 o白蛋白 o球蛋
白 o白蛋白 r球蛋白的影响 结果见表 u∀给予 ≤≤ w¯
后小鼠的血清 „×o„≥×水平极显著升高 kΠ s1stlo
说明建模成功 ∀联苯双酯 !阿魏酸 !丹参素 !丹参酮丹
芎方 t ∗ w组的血清 „×和 „≥×的表达水平均极显
著降低 kΠ s1stl∀模型组的血清总蛋白 !白蛋白与
正常相比较无显著性差异 ∀模型组球蛋白较正常组
显著升高 kΠ  s1sxlo而各给药组动物的总蛋白 !白
蛋白与球蛋白均有明显升高 kΠ  s1sxl∀模型组的
白球蛋白比较正常组极显著降低 kΠ  s1stlo各给药
组白蛋白 r球蛋白也显著性降低 ∀
表 u 丹芎方及其组成成分对 ≤≤ w¯损伤小鼠血浆指标的影响 kcξ ? σ, ν € tsl
组别 „× r˜# pt „≥× r˜# pt 总蛋白 rª# pt 白蛋白 r˜# pt 球蛋白 r˜# pt 白蛋白 r球蛋白
正常 wu1us ? |1ywuwl tu|1{s ? t|1vvwl wz1ux ? u1|x vx1zz ? t1st tt1uw ? t1ztvl v1uy ? s1yswl
模型 vsx1yw ? tws1ywul uyw1ss ? {u1vxul wz1{s ? y1z{ vx1wt ? t1tu tw1ww ? x1vstl u1yx ? s1ywul
联苯双酯 xz1{s ? uv1vzwl t{{1ys ? zv1txuowl xv1|{ ? v1zvuowl vz1u ? s1|uuowl tx1{{ ? u1t|ul u1v{ ? s1vwul
阿魏酸 y{1ts ? us1v{wl tzu1t ? wu1|twl xx1yt ? w1stuowl v{1su ? s1zuuowl t|1x ? v1wsuowl u1su ? s1wsuowl
丹参素 wz1xs ? tv1vxwl tx{1{ ? uu1s{wl xz1zv ? w1vuuowl v{1uv ? s1|zuowl t{1zs ? u1yzuowl u1s{ ? s1u{uowl
丹参酮 yy1{s ? ux1twwl tzv1u ? vu1uuwl x{1{t ? z1utuowl vz1zx ? t1vvuowl us1x{ ? v1zzuowl t1|s ? s1v|uowl
丹芎方 t vx1ys ? tu1szwl txs1w ? wv1s{wl yu1ss ? w1uxuowl v|1u{ ? t1s{uowl uu1|{ ? w1vsuowl t1zy ? s1vuuowl
丹芎方 u xs1{s ? tu1s{wl tyw1zs ? ws1zxwl ys1|u ? y1x{uowl v{1ts ? t1vyuowl us1yw ? w1vzuowl t1|u ? s1vzuowl
丹芎方 v tsu1|s ? zs1{twl us|1us ? w|1stuowl yv1xz ? w1syuowl v{1zu ? t1svuowl uu1u{ ? x1syuowl t1{x ? s1xyuowl
丹芎方 w zs1xs ? vx1u{wl t|x1z ? xx1wytowl yu1tt ? v1{|uowl v{1|u ? t1ysuowl uu1sy ? v1xwuowl t1{s ? s1uxuowl
注 }与正常组比较 tl Π  s1sxoul Π  s1st~与模型组比较 vl Π  s1sxowl Π  s1stk表 u同 l
2q2 对小鼠肝脏 ≥’⁄o ⁄„和肝系数的影响 将步
骤 t给药 z §后的小鼠及其对照组小鼠处死 o取出
肝脏 o检测肝脏中 ≥’⁄o ⁄„和肝系数 o结果见表
v∀模型小鼠的肝脏中 ≥’⁄活性极显著降低 o ⁄„
水平极显著升高 ∀阿魏酸 !丹参酮 !丹芎方 w组能够
显著升高 ≥’⁄水平 o丹芎方 t可极显著升高 ≥’⁄水
平 ∀联苯双酯 !阿魏酸 !丹参素 !丹参酮 !丹芎方 vow
可极显著降低  ⁄„水平 o丹芎方 tou可显著降低
 ⁄„∀给予 ≤≤ w¯建模后的小鼠的肝系数没有显著
变化 o而给药各组的肝系数极显著升高 kΠ s1stl∀
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表 v 丹芎方及其组成成分对肝损伤小鼠肝脏中 ≥’⁄o ⁄„和肝系数的影响 kcξ ? σ, ν € tsl
组别 ≥’⁄r˜# °ªpt  ⁄„ r°²¯# °ªpt 肝系数 kª肝重 rts ª体重 l
正常 txy1wv ? tt1uvwl y1wv ? t1xtwl s1wvw ? s1ttx
模型 tv|1sx ? tx1xxul ts1vw ? u1utul s1wxu ? s1szs
联苯双酯 twv1tu ? z1|ztl z1yx ? t1stwl s1x|{ ? s1swyuowl
阿魏酸 tux1xx ? tv1tyuovl {1zu ? s1|wuowl s1xw{ ? s1svwuowl
丹参素 tv|1us ? {1||ul {1us ? s1zyuowl s1xzx ? s1svyuowl
丹参酮 txu1|y ? |1{zvl {1tv ? t1v{uowl s1x{z ? s1sxuuowl
丹芎方 t tyt1wu ? uy1w{wl |1su ? t1v{uovl s1x{v ? s1suvuowl
丹芎方 u twt1|t ? tx1{|tl {1|v ? s1|{uovl s1xw{ ? s1swvuowl
丹芎方 v twz1|w ? ts1yt {1xw ? t1zsuowl s1xvz ? s1suwuowl
丹芎方 w txw1su ? ty1zzvl z1yx ? t1tuwl s1xzt ? s1s{tuowl
2q3 丹芎方及其组成成分对肝损伤小鼠肝脏病理
改变的影响 将步骤 t给药 z §后的小鼠及其对照
组小鼠 o取肝脏进行组织病理学观察 ∀结果表明 o正
常组 o肝小叶结构正常 o肝细胞索 !肝窦 !中央静脉及
汇管区清晰可见 o结构正常 ∀肝损伤模型组可见肝
小叶结构紊乱 o肝细胞弥漫疏松化及重度脂肪变性 ∀
联苯双酯给药组可见局部肝细胞疏松化及轻度脂肪
变性 ∀阿魏酸给药组轻度疏松化及脂肪变性 ∀丹参
素给药组弥漫性疏松化及脂肪变性 ∀丹参酮组肝细
胞轻度脂肪变性和疏松化 ∀丹芎方 t组肝组织结构
正常 o肝小叶结构清晰 o汇管区少量炎细胞浸润 o偶
见凋亡小体 ou组偶见轻度疏松化及脂肪变性 ov组
轻 !中度疏松化及脂肪变性 ow组肝细胞轻至中度疏
松化 k图 tl∀
3 讨论
本文选择经典的 ≤≤ w¯化学性肝损伤的动物模
型来研究丹芎方以及方中各主要组成成分的肝脏保
护作用 o≤≤ w¯诱导的急性肝损伤动物模型是筛选保
肝药物和抗肝纤维化的较常用且稳妥的动物模型之
一 o其优点是给药途径多样 o模型建立方便 o重复性
好 o很具有代表性 ∀ ≤≤ w¯肝损伤机制研究较多 o存在
多种意见 o但一致公认 o主要与脂质过氧化物有关 o
脂质过氧化物使细胞膜流动性降低 o通透性增高 o线
粒体膜受损 o细胞产能障碍 o活性氧生成增多 o造成
细胞损伤 ≈|  ∀ ≤≤ w¯能够在肝内主要被微粒体细胞色
素氧化酶代谢 o生成 u个活性自由基 k≤≤ p¯#v和 ≤ p¯# l
及一系列氧活性产物 o通过脂质过氧化物的破坏 o使
细胞膜系统发生脂质过氧化反应 o膜磷脂大量降解 o
从而破坏生物膜结构的完整性 o引起膜通透性升高
影响细胞代谢功能和能量的生成 ≈ts  ∀ ≤≤ w¯的代谢
产物 o特别是自由基作用于 ⁄„‘时 o损伤核糖和碱
基 o使核酸直接被破坏 o引起 ⁄‘„或蛋白质的链间

图 t 丹芎方及其组成成分对肝损伤小鼠
肝脏病理改变的影响 k ≅ tssl
交联 o影响其信息传递功能以及转录和复制特性 o改
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变癌基因和抑癌基因的活性状况 o最后可引发细胞
增殖失控而导致癌变 ≈tt  ∀
肝细胞在上述自由基损伤作用下 o会释放出特
异的标志性的酶成分 ∀例如 „×存在于肝细胞浆
中 o肝内酶活性较血清约高 tss倍 o因此只要有 th
肝细胞坏死 o即可使血浆中的 „×上升一倍 o因此
它是检测肝细胞损伤最敏感的指标之一 ∀ „≥×在心
肌细胞中含量最高 o肝为第二位 o在肝损害时其漏出
量较 „×低 ∀在本次研究中给予 ≤≤ w¯后能够观察
到血浆种 „×和 „≥×水平显著升高 ∀阳性药 !各单
方和丹芎方均能够极显著降低 „×o„≥×o说明各药
物均能显著减轻 ≤≤ w¯造成的肝损伤 o具有保护肝细
胞的功能 ∀各单方与丹芎方 touovow组降低 „×
和 „≥×的程度相当 o而丹芎方 w组的剂量较其它用
药组小得多 o疗效很好 o说明丹芎方在此极低剂量下
就可获得非常好的保肝作用 ∀
≥’⁄是体内降解 !清除自由基的主要抗氧化
酶 ∀在自由基诱发的脂质过氧化过程中 o不饱和脂
肪酸氧化分解可释放  ⁄„等醛类物质 o因此可以
通过检测  ⁄„含量来反映机体脂质过氧化损伤的
程度 ≈tu  ∀本次研究中可以看出给予 ≤≤ w¯后 o≥’⁄极
显著降低 o ⁄„极显著升高 o阿魏酸 !丹参酮 !丹芎
方 w组能够显著升高 ≥’⁄水平 o丹芎方 t可极显著
升高 ≥’⁄水平 o其中丹芎方 w的作用也说明其在很
小剂量下能够增强肝脏的抗氧化能力 o效果与单方
阿魏酸和丹参酮相当 o而强于丹参素 o虽然疗效小于
丹芎方 to但是剂量仅是丹芎方 t的 trux∀阿魏酸 !
丹参素 !丹参酮 !丹芎方 vow可极显著降低  ⁄„水
平 o丹芎方 tou可显著降低  ⁄„∀此结果同样可以
说明丹芎方 w剂量小而抗氧化能力强 ∀这些结果说
明丹芎方及其组成成分可以通过增强机体抗脂质过
氧化的能力来减轻 ≤≤ w¯造成的肝损伤 o而丹芎方 w
作用非常突出 o剂量小而疗效佳 ∀说明丹芎方将各
组分合用后有一定的药效学优化作用 ∀
肝脏是合成转氨酶 !白蛋白 !球蛋白的主要场
所 o血清白蛋白代表肝脏的储备功能 o能反映肝脏的
病变程度 ∀本实验中模型组给予 ≤≤ w¯损伤后血浆
总蛋白 !白蛋白水平并没有变化 o球蛋白水平稍升
高 o白蛋白和球蛋白的比值降低 o可能是因为短时间
的急性损伤并未造成肝脏细胞的大范围损伤 o还不
至于影响血浆蛋白水平 o但是肝脏细胞损伤诱发炎
症反应 o引起球蛋白水平升高而造成上述结果 ∀各
药物组血浆总蛋白和白蛋白 !球蛋白水平均极显著
性升高 o而且这种变化趋势并非由 ≤≤ w¯损伤引起 o
说明经过 z §的给药周期 o各药物促进了白蛋白和
球蛋白合成 ∀而且促进蛋白合成的过程中促进球蛋
白合成作用更强 o造成在蛋白水平均升高的基础上 o
白球蛋白比降低 ∀血浆球蛋白由 Α2t球蛋白 !Α2u
球蛋白 !Β球蛋白和 Χ球蛋白组成 oΑ2t球蛋白由 Α2
抗胰蛋白酶 k由肺内产生 l和结合珠蛋白构成 oΑ2u
球蛋白是机体内对炎症 !损伤和疾病反应时所释放
的蛋白质 oΒ球蛋白由转铁蛋白和高密度脂蛋白组
成 ∀ Χ球蛋白是免疫球蛋白 o主要是抗体 o在自身免
疫性疾病 !某些感染 !变态反应和外源性物质侵犯机
体时被释放出来 ∀在本研究中没有进行蛋白分类研
究 o因此不能确定具体是哪种球蛋白升高 o对此现象
还需要进一步研究 o以确定丹芎方具体是影响哪种
球蛋白合成 o并且促进合成作用是否是保肝作用机
制之一 o还是另有其他作用 ∀
从病理结果可以看出 o≤≤ w¯可引起肝细胞排列
紊乱 o弥漫疏松化及重度脂肪变性 ∀各给药组均可
不同程度减轻肝脏的病理损伤 o将肝细胞弥漫性疏
松化局限 o减轻肝脏脂肪变性 ∀丹参 ≈tvotw 和阿魏
酸 ≈tx oty 均有非常好的降低血脂和改善血液流变特
性的作用 o笔者前期研究表明丹芎方也具有显著降
低血脂的作用 ∀因此丹芎方的降血脂作用可减少肝
脏的脂肪储积 o减轻肝脏的脂肪变性 ∀
综上所述 o丹芎方是一个能够通过增强肝脏抗
氧化能力 o以及降低血脂 o改善血液流变学特性来减
轻 ≤≤ w¯肝损伤的药物 o并且复方有一定的药效学优
化作用 ∀不过从实验结果中可以看出 o丹芎方保肝
疗效的量效关系并不简单 o在丹芎方 touovow几组
中 ot组和 w组在各项研究中都表现非常好 o此现象
并不符合一般的量效关系 o可能是因为中药复方成
分复杂 o相互作用更加复杂 o因此不像一般单体化合
物的药物剂量关系简单 o还需要作更深入地研究以
确定获得最佳疗效的剂量 ∀
≈参考文献  
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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≈|  ≥«¤« ‹ o ‹¤µ·°¤± ≥ °o • ¬¨±«²∏¶¨ ≥q ƒ²µ°¤·¬²± ²©¦¤µ¥²±¼¯
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≈tt  ≤¤¶·µ² Š ⁄o ⁄¬¤½ Š²° ½¨  Œo Š¤¶·µ²„q ⁄‘„ ¥¤¶¨¶¤·¤¦® ¥¼
µ¨¤¦·¬√¨ ° ·¨¤¥²¯¬·¨¶ ³µ²§∏¦¨§ §∏µ¬±ª ¦¤µ¥²± ·¨·µ¤¦«¯²µ¬§¨ ¥¬²2
·µ¤±¶©²µ°¤·¬²± ¤±§ ³µ²°²·¬²± ²© ¬¯√ µ¨°¬¦µ²¶²°¤¯ ¬¯³¬§ ³¨ µ²¬¬§¤2
·¬²±≈ q • ¶¨≤²°°∏±  ²¯ °¤·«²¯ °«¤µ°¤¦²¯o t||zo|x kvl}
uxvq
≈tu  魏 屏 o彭汉光 o黄 坤 o等 q加味四逆散对 ∆2氨基半乳糖所
致急性肝损伤大鼠体内脂质过氧化的影响及病理改变同步
观察 ≈ q同济医科大学学报 ousssou|kvl}uy{q
≈tv  唐忠志 o王早堂 q丹参注射液对原发性高血压患者血液流变
性及血脂的影响 ≈  q第三军医大学学报 ousswouy ktsl}
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≈tw  郁秀凤 q雷氏丹参片对冠心病合并高黏血症患者血液流变学
及血脂的影响 ≈ q中成药 oussyou{k{l}ttx{q
≈tx  王宇辉 o周超凡 q中药降脂研究进展 ≈  q中国中药杂志 o
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≈ty  梁德平 o黄剑云 q阿魏酸钠对原发性肾病综合症患者血脂和
血液流变特定的影响 ≈ q重庆医学 oussvovukwl}w||q
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≈责任编辑 刘  
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≈责任编辑 张宁宁  
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第 vu卷第 us期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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