全 文 ：实用中西医结合临床 2016年 2月第 16卷第 2期
它批次蜂胶中总黄酮含量均＞20.0%，最终规定蜂
胶中总黄酮含量（以乔松素计）应不得少于 20.0%。
3 讨论
本文利用现代的薄层色谱技术，确定蜂胶以及
蜂胶提取物中的专属性薄层色谱，方法简便易行，为
真伪蜂胶的鉴别提供依据。通过多批次蜂胶的性状、
一般性检查等实验研究把合格蜂胶定义为：团块状
或不规则碎块，呈棕黄色、棕褐色、青绿色或灰褐色，
具光泽，10℃以下质脆，30 ℃以上逐渐变软，气芳
香，无异味，味微苦，略涩，有辛辣和微麻感。蜂胶干
燥失重不得过 4.0%、总灰分不得过 8.0%、酸不溶性
灰分不得过 6.0%、氧化时间不得过 22 s。蜂胶醇浸
出物含量≥40.0%，铅含量≤20 mg/kg，砷含量≤1.0
mg/kg，汞含量≤0.3 mg/kg，六六六、滴滴涕含量均
为≤0.05 mg/kg，蜂胶中总黄酮含量（以乔松素计）
应不得少于 20.0%。利用先进的分析手段对蜂胶进
行检测，建立了系统、全面、科学的质量控制技术，确
保蜂胶质量稳定可控，规范蜂胶的市场秩序。
参考文献
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（收稿日期：2015-12-28）
赣产南丹参药材含量测定研究 *
任正宇 1 王小青 2 李晶 2#
（1燕京理工学院 2012级化工与制药 河北三河 065201；2江西省中医药研究院 南昌 330046）
摘要：目的：建立南丹参药材的含量测定方法。 方法：色谱条件：色谱柱：Dikma Diamonsil C18（2）（250 mm×4.6 mm，5 μm）；
流动相：甲醇 -0.1%磷酸（18∶82）；流速：1.0 ml/min；检测波长：225 nm；柱温：30℃。 结果：丹参素钠在 6.2~775 μg/ml 范围内线性
关系良好；加样回收率为 101.82%；RSD分别为 1.97%。结论：高效液相色谱法（HPLC）操作简单，重现性好，可用于南丹参药材的质
量控制。
关键词：南丹参；丹参素钠；丹酚酸 B；高效液相色谱法
中图分类号：R284 文献标识码：B doi:10.13638/j.issn.1671-4040.2016.02.045
南丹参为唇形科植物南丹参 Salvia bowleyana
Dunn. 的干燥根及根茎，收载于江西省中药材标准
1996年版和 2014年版，历代本草中少见记载，本品
为地方性习惯用药；南丹参广泛分布于江西、福建、
浙江、湖南等省，均为野生品种，江西为主要分布产
区之一[1]。南丹参主要含有总丹参酮、丹参酮ⅡA、隐
丹参酮、丹酚酸 A、丹酚酸 B、丹酚酸 C、丹参素、原
儿茶醛、迷迭香酸、咖啡酸等化学成分[2~5]。其主要水
溶性成分丹参素具有多种药理作用，包括抗炎、抗肿
瘤、神经保护、心肌保护、提高免疫力等[6~7]。前期我
院仅对该植物中所含丹酚酸 B进行了报道[8]，本实
验对其所含丹参素进行含量测定研究，并同时进行
了丹酚酸 B的测定。现报道如下：
1 仪器与试药
Waters-1525高效液相色谱仪（美国Waters公
司），SimplicityTM个人型超纯水系统（Millipore 公
司），CQ-250超声波清洗仪（上海船舶电子设备研究
所），AG-135电子天平（梅特勒 -托利多），AL-204
电子天平（梅特勒 -托利多）。南丹参药材：分别来源
于江西南昌（2013051301、2013051302、2013061401、
2013061402、2013081501）；江西德安（2013051303、
2013052201）；江西婺源（2013051401、2013051402）；
江西于都（2013060201）。丹参素钠对照品（含量测定
用，批号：110855-200405，中国药品生物制品检定
所），丹酚酸 B对照品（批号：110562-200807，中国药
品生物制品检定所）。甲醇（色谱纯），乙腈（色谱纯），
其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 丹参素钠的含量测定
2.1.1 色谱条件及专属性的选择 色谱柱：Dikma
Diamonsil C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动
相：甲醇 -0.1%磷酸（18∶82），流速：1 ml/min；经光
*基金项目：江西省青年基金资助项目（编号：20142BAB215065）
#通讯作者：李晶，E-mail：savon@sina.com
83· ·
实用中西医结合临床 2016年 2月第 16卷第 2期
谱测定，丹参素钠在 225 nm处有最大吸收峰，故测
定波长设为 225 nm，柱温：30℃。在此条件下，对照
品、供试品在约 7min的相同时间有一色谱峰。见图 1。
图 1 丹参素钠测定光谱图及色谱图
2.1.2 线性关系的考察 精密称取丹参素钠对照
品 7.75 mg，置 10 ml容量瓶中，加 50%甲醇溶解并
稀释至刻度，摇匀（每 1 ml含丹参素钠 775 mg）。分
别稀释成以下浓度：775、387.5、155、77.5、46.5、31、
12.4、6.2 mg/ml按上述色谱条件测定，将峰面积对
浓度进行回归处理，得回归方程为：Y=8 173
609X+54 568.5，r=0.999 8（n=6），丹参素钠对照品在
6.2~775 mg/ml范围内峰面积与进样量呈良好的线
性关系。
2.1.3 精密度试验 精密吸取丹参素钠对照品溶
液 10 μl，按照精密度试验要求，连续进样 6次，测定
丹参素钠峰面积值，并经统计学处理，RSD 为
1.13%。
2.1.4 稳定性试验 按照上述测定条件，分别在 0、
1、2、5、8、12 h，精密吸取南丹参供试品溶液 10 μl，
注入高效液相色谱仪测定每次进样的与丹参素钠相
同保留时间的色谱峰峰面积值，经统计学处理，RSD
为 1.61%，结果表明：在 12 h内供试品溶液中与丹
参素钠相同保留时间的色谱峰峰面积值基本保持不
变。
2.1.5 重现性试验 取 6份南丹参药材粗粉约 2.0
g，精密称定，分别置具塞三角瓶中，精密加入 50%
甲醇50 ml，称重，加热回流 1 h，取出，放冷，再次称
重，以 50%甲醇补足减失的重量，混匀，滤过，取续
滤液过微孔滤膜（0.45 μm），即得供试品溶液。经测
定、计算和统计学处理，6 份从样品的 RSD 为
0.73%，符合重现性试验要求。
2.1.6 加样回收率试验 取 6 份已知含量的南丹
参药材粗粉约 1.0 g，精密称定，置具塞三角瓶中，精
密加入含丹参素钠对照品溶液（0.020 318 4 mg/ml）
50 ml，称重，加热回流 1 h，余后同重现性操作，制备
各供试品溶液。同法测定并计算回收率，结果见表
1，6份回收率测定数据经统计学处理，平均回收率
101.82%，RSD=1.97%。
表 1 回收率测定结果
2.1.7 样品测定 取不同产地的南丹参药材粗粉约
2.0 g，精密称定，按上述供试品溶液制备方法操作，
分别制备各供试品溶液；同上法测定、计算，结果见
表 2。
表 2 不同产地药材中丹参素钠的测定结果（n=2）
2.2 丹酚酸 B的含量测定[8]
2.2.1 色谱条件 色谱柱：Dikma Diamonsil C18柱
（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相∶甲醇∶乙腈∶
1.5%甲酸（17∶15∶68），流速：1 ml/min，检测波长
286 nm，柱温：30℃。在此条件下，对照品、供试品在
约 14 min的相同时间有一色谱峰。
2.2.2 对照品溶液制备 取丹酚酸 B对照品适量，
精密称定，加 50%甲醇制成每 1 ml含 0.14 mg的溶
液，即得。
2.2.3 样品测定 取不同产地的南丹参药材粗粉，
称取约 0.2 g，精密称定，分别置 50 ml量瓶中，加入
50%甲醇至近刻度，超声提取 30 min，取出，放冷，以
50%甲醇补足减失的重量，混匀，滤过，取续滤液过
微孔滤膜（0.45 μm），即得供试品溶液。同上法测定、
计算，结果见表 3。
表 3 不同产地药材中丹酚酸 B的测定结果（n=2）
（下转第 89页）
样号
样品中丹参
素钠量（mg）
丹参素钠
加入量（mg）
测得丹参
素钠量（mg） 回收率（%）
1
2
3
4
5
6
1.431 8
1.427 4
1.433 8
1.425 5
1.433 7
1.435 4
1.015 92
1.015 92
1.015 92
1.015 92
1.015 92
1.015 92
2.471 9
2.469 5
2.489 2
2.468 4
2.429 9
2.465 3
102.38
102.58
103.89
102.65
98.06
101.38
批号 含量（%）
2013051301
2013051302
2013051303
2013051401
2013051402
2013052201
2013060201
2013061401
2013061402
2013081501
1.135 3
0.144 2
0.098 1
0.133 0
0.137 4
0.117 3
0.092 7
0.180 6
0.199 4
0.146 9
批号 含量（%）
2013051301
2013051302
2013051303
2013051401
2013051402
2013052201
2013060201
2013061401
2013061402
2013081501
3.23
3.48
1.88
2.40
2.48
2.52
1.52
5.02
4.88
3.28
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实用中西医结合临床 2016年 2月第 16卷第 2期
（上接第 84页）
3 讨论
在丹参素的测定研究中，分别比较了超声与回
流，50%乙醇、乙醇、50%甲醇和甲醇为溶剂，25、50、
75 ml不同溶剂用量以及提取 1、2、3 h，结果表明，
南丹参中丹参素的提取以 50%甲醇 50 ml回流提取
1 h效果最佳。
根据不同产地南丹参药材中丹参素钠和丹酚酸
B的含量测定结果分析发现，该二种成分均以南昌
产地为最高，婺源产地次之，于都产地最低。此外，
我们分别比较了同一产地不同采收季节南丹参中两
成分的含量，结果显示 6月采集样本该两种成分含
量明显高于 5、8月采集样本的含量，并且 5、8月样
本含量无显著差异，分析可能由于 4~5月南丹参处
于花期，植株营养趋于地上部分，6~7月其地上部分
开始进入枯萎期，此时相应的营养进入地下根部，因
而成分集中且较高，而到 8月份地上又开始萌发新
芽，地下根部的养分再次转移到地上，从而使相应成
分的含量有所下降；这个结论与根茎类药材采收期
“多为秋季采挖”（地上部分枯萎前）相符。但是，由于
采样的局限性，此两种含量与采收季节相关性还有
待进一步研究。
参考文献
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（收稿日期：2016-01-09）
医药物治疗的费用昂贵、副作用较大，探讨中医药治
疗 AIH也不失为一种好的治疗方法，且也取得了不
少成果。无论中、西医治疗，目前的疗效主要是控制
患者的病情、减轻患者的痛苦为主，临床上想要彻底
治愈 AIH，特别是疑难患者，仍有待进一步研究探
讨。
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