免费文献传递   相关文献

Studies on bioassay-guided anti-inflammatory fraction in bark of Albizia julibrissin combined determination with LC-MS-MS

组合LC-MS-MS鉴定技术的生物活性导向研究合欢皮抗炎活性部位



全 文 :Θυαντιτατιϖε αναλψσισ οφ αδενοσινε ανδ χορδψχεπιν ιν
Χορδψχεπσσινενσισανδ ιτσσυβστιτυτεσωιτη ΛΧ2ΜΣ2ΜΣ
≠„‘Š «¤²o ≤‹ Œ≥«¤²2¼∏±o ‹ „‘Š ≤«∏±2«∏¬o • ˜ „¬¼¬±ª
(Θινγδαο Ινστιτυτε φορ∆ρυγ Χοντρολ, Θινγδαο uyyszt, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ §¨ √¨¯²³ ¤≤ 2 ≥2 ≥ ° ·¨«²§ ©²µ§¨ ·¨µ°¬±¤·¬²± ²©¤§¨ ±²¶¬±¨¤±§¦²µ§¼¦¨³¬± ¬± Χορδψχεπσ σινενσισ
¤±§¬·j¶¶∏¥¶·¬·∏·¨¶q Μετηοδ : ׫¨ ¶¤º³¯¨º¤¶ ¬¨·µ¤¦·¨§ º¬·«q |sh ° ·¨«¤±²¯q  ∏¯·¬2µ¨¤¦·¬²±¶°²±¬·²µ¬±ªk •  l ·¨¦«±¬´∏¨ º¤¶¤2
§²³·¨§q Ρ εσυλτ: ׫¨ µ¨ªµ¨¶¶¬²± ¨´ ∏¤·¬²±¶¤±§¦²¨ ©©¬¦¬¨±·¶º µ¨¨ Ψ € {|1swΞ n xsy1{x kρ€ s1||| zl ©²µ¤§¨ ±²¶¬± o¨ Ψ € ||1yyΞ n
t uxt1vwkρ€ s1||{ {l ©²µ¦²µ§¼¦¨³¬± µ¨¶³¨ ¦·¬√¨¯¼q ׫¨ ¬¯± ¤¨µµ¤±ª¨ º¤¶x1s2t sss1s Λª# pt ©²µ¤§¨ ±²¶¬±¨¤±§¦²µ§¼¦¨³¬±q ׫¨
¬¯°¬·¶²©§¨ ·¨¦·¬²± k’⁄l º µ¨¨ s1ww Λª# pt ©²µ¤§¨ ±²¶¬±¨¤±§s1vt Λª# pt ©²µ¦²µ§¼¦¨³¬±o µ¨¶³¨ ¦·¬√¨¯¼q ׫¨ ¤√ µ¨¤ª¨ µ¨¦²√ µ¨¬¨¶²©
¤§¨ ±²¶¬±¨¤±§¦²µ§¼¦¨³¬± º µ¨¨ |{1th ¤±§|z1|h o µ¨¶³¨ ¦·¬√¨¯¼q Χονχλυσιον: ׫¨ ° ·¨«²§º¤¶«¬ª«¯¼ ¶¨±¶¬·¬√ o¨ ¶¨¯¨ ¦·¬√¨¤±§©¤¶·o
º«¬¦«¦¤± ¥¨ ∏¶¨§©²µ·«¨ §¨ ·¨µ°¬±¤·¬²± ²©¤§¨ ±²¶¬±¨¤±§¦²µ§¼¦¨³¬± ¬± ≤q¶¬± ±¨¶¬¶¤±§¬·j¶¶∏¥¶·¬·∏·¨¶q ׫¬¶° ·¨«²§¦¤± ¤¯¶² ¥¨ ¤³³¯¬¨§
©²µ·«¨ ∏´¤¯¬·¼ ¦²±·µ²¯ ²©·«¨ ° §¨¬¦¬±¤¯ °¤·¨µ¬¤¯¶q
[ Κεψ ωορδσ] ≤ 2 ≥2 ≥~ Χορδψχεπσ σινενσισ~ ¤§¨ ±²¶¬± ~¨ ¦²µ§¼¦¨³¬±
≈责任编辑 牛泽宇  
≈收稿日期   ussz2st2st
≈通讯作者   3 乔善义 oר¯}kstslyy|vsyvwo∞2°¤¬¯}¦µ¥­yttusu
ƒ ¶¬±¤q¦²°
组合 ≤2 ≥2 ≥鉴定技术的生物活性导向研究
合欢皮抗炎活性部位
乔善义 t o蔚冬红 tou o郭继芬 t o赵毅民 t
ktq军事医学科学院 毒物药物研究所 o北京 tss{xs~
uq解放军防化指挥工程学院 o北京 tsuusxl
≈摘要   目的 }寻找合欢皮的抗炎活性部位 ∀方法 }以巴豆油引起小鼠耳肿胀模型做为抗炎筛选模型 o同时 o
在 ≤ 2 ≥2 ≥分析的导向下 o寻找合欢皮抗炎活性部位 ∀结果 }合欢皮乙醇提取物的正丁醇萃取部位 k„2…l是主
要活性部位 ∀该部位进一步分离后的木脂素苷类部位 k„2…2tl显示出明显的抗炎活性 o并在 x ∗ us °ª# ®ªpt时表
现出一定的剂量依赖关系 ∀结论 }≤ 2 ≥2 ≥导向与活性评价导向分离相结合 o有助于较快和更理性地进行中药活
性部位和成分的研究 ∀
≈关键词   合欢皮 ~木脂素苷 ~液相色谱 2串联质谱 ~抗炎
≈中图分类号   • u{wqt ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlt|2usut2sw
中药药理活性研究是沟通祖国传统医药学与现
代医药学的重要纽带 ∀在中药药理作用研究中 o针
对中药的粗提取物开展工作 o其研究结果可以基本
表达该中药的某一或几方面的药理活性 o逐渐积累 o
可以比较全面地阐明该中药的现代药理学作用 ∀近
十几年来 o国际和国内都在进行活性追踪导向分离
和药理作用研究 ≈tou  o该途径是以活性作为 /眼睛 0
指导化学分离 o追踪活性部位 o寻找活性成分 o但化
学分离工作往往会被动地跟随活性结果走 o缺乏一
定程度上的主动及互动 ∀而实际情况是 o常用传统
中药基本上都积累了大量的药理和化学研究数据 o
#tusu#
第 vu卷第 t|期
ussz年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ t|
’¦·²¥¨ µo ussz
有很好的参考和借鉴价值 ∀
液相色谱串联质谱 k≤ 2 ≥2 ≥l是 us世纪 |s
年代发展成熟的新的分离分析技术 o基于该技术可
以比较容易地根据被分离样品中各成分的色谱保留
时间 !相对分子质量和碎片离子信息综合分析其结
构 o与文献已报道的化合物信息相比较 o快速鉴定已
知化合物 o了解未知成分的结构特点或结构骨
架 ≈v2y  ∀因此 o作者提出将 ≤ 2 ≥2 ≥技术与活性研
究相结合 o作为中药活性追踪的另一只 /眼睛 0o同
时充分借鉴已报道的研究成果和数据 o快速 !准确 !
有理性地发现和分析中药和天然产物中的成分 o使
中药活性成分研究是在药理和成分分析两方面的两
只 /眼睛 0导向下进行 ∀该研究思路对于中药和天
然药物的研发应该具有重要的指导意义和应用价
值 ∀
中药合欢皮为合欢 Αλβιζια ϕυλιβρισσιν ⁄∏µ¤½½q的
树皮 o具解郁安神和活血消肿功能 o用于心神不安 !
忧郁失眠 !肺痈疮肿 !跌扑伤痛等 ∀邹坤等报道了合
欢皮粗提取部位的抗炎活性 ≈z  ∀本研究初步探讨
在 ≤ 2 ≥2 ≥导向下进行合欢皮抗炎活性成分的研
究 o验证作者以上的中药活性成分研究的思路 ∀
1 仪器与材料
质谱用 „°Œvsss型质谱仪 k美国 „…Œ公司 l测
定 ~薄层用硅胶为青岛海洋化工厂生产 o • ° p
t{ƒuxw为德国默克公司生产 o大孔树脂 ⁄¬¤¬²± ‹°
pus为日本三菱公司生产 ~⁄¬¤°²±¶¬¯ ≤t{色谱柱
kw1y °° ≅ uws °°ox Λ°l购自迪马公司 ~试剂均为
化学纯或分析纯 ~中药合欢皮购于北京同仁堂药店
k北京同仁堂饮片厂 lo并经本室马其云高级实验师
鉴定 ~雷公藤多苷片为湖南省株洲市制药三厂产品 ∀
2 提取分离与活性筛选
2q1 提取分离 药材 xs ®ª粉碎后用 {sh乙醇回
流提取 v次 o合并提取液 o减压回收溶剂 o得总提取
物 k„2×lu1|y ®ª∀取提取物 t ||y ª加水混悬 o依
次用不同极性溶剂萃取 o得到 w个部分 }氯仿部分
k„2≤lxsx ª!醋酸乙酯部分 k„2∞lzx ª!正丁醇部
分 k„2…lwyy ª和水部分 k„2• l|xs ªo对它们进行
活性初筛 ∀正丁醇部分经大孔树脂柱色谱 o乙醇 2水
梯度洗脱 o粗分离分为 w个组分 }水洗脱组分 !ush
乙醇洗脱组分 k„2…2tl!xsh乙醇洗脱组分 k„2…2
ul和 |xh乙醇洗脱组分 k„2…2vl∀各组分均计算
得率 o便于筛选时给药剂量的设计 ∀
2q2 活性筛选 采用巴豆油引起小鼠耳肿胀模
型 ≈{o| 对提取分离的各组分的抗炎活性进行初步筛
选 o选用雷公藤多苷片作为阳性对照药 ∀刺激剂组
成 }巴豆油 2乙醇 2水 2乙醚 kuΒusΒxΒzvl~样品制备 }
供试样品加水配制成水溶液或悬浊液 ~阳性对照药 }
雷公藤多苷片 ∀
实验方法昆明种雄性小鼠 o体重 t{ ∗ uu ªo每组
ts只 o每只小鼠右耳两面各涂布致炎剂 s1st °o左
耳不做处理 o致炎后立即灌胃给药一次 o{ouw «再
分别给药 t次 o末次给药后 { «将小鼠处死 o剪下双
耳 o敲下直径 z1x °°的耳片 o称重 o记录每只小鼠
两侧耳片重量差 ∀
活性指标 }肿胀抑制率 € k对照组平均肿胀度 p给药组
平均肿胀度 l rk对照组平均肿胀度 l ≅ tssh
3 初筛活性部位的 ≤ 2 ≥2 ≥的导向分离
初步提取分离得到的粗分离部分经活性筛选表
明 }正丁醇部分抗炎活性显著优于总提物 o表明该部
分集中了合欢皮中主要的抗炎活性成分 ∀对其直接
进行电喷雾 2串联质谱 k∞≥Œ2 ≥2 ≥l分析 o初步了解
了其中主要成分的类型和结构特点 o然后设计用大
孔树脂柱色谱再分离 o得到 w个组分 o其中 „2…2t
和 „2…2u为 u个主要组分 ∀显色反应表明 }„2…2u
主要为皂苷 o而 „2…2t中的主要成分尚不清楚 ∀用
≤ 2 ≥2 ≥技术作为 /眼睛 0o对 „2…2t进行分析
k‹°≤分离 }色谱柱同前 ~流动相为 tvh乙腈水溶
液 ~流速 s1z °# °¬±pt ~柱温为 vs ε ∀质谱分析 }
正离子检测 o电喷雾离子源 ~源电压 w sss ∂ ~⁄°电
压 ys ∂ ~ƒ°电压 u|s ∂ ~‘∞…{~≤˜• tt∀在反复试验
基础上 o选择了较好的 ‹°≤分离条件 o进行 ≤ 2 ≥
分析 ∀经正 !负离子预扫描 o选择正离子扫描方式对
各个分离峰进行检测 o得到 n ±t图谱 ∀结果见表
t∀
4 结果与讨论
对合欢皮进行初步提取分离 o得到的粗分离部
分进行活性筛选 ∀抗炎活性初筛结果显示 o合欢皮
中的抗炎活性成分集中在极性较大的正丁醇部份
k见表 ul∀在 ≤ 2 ≥2 ≥分析导向下 o用大孔树脂
柱色谱将正丁醇部分进一步分离为 w个组分 k水洗
脱组分 o„2…2touovlo其中水洗脱组分主要成分为
单糖 o不做抗炎活性评价 ∀其他 v个组分在活性评
价中均显示出抗炎活性 o其肿胀度与空白组比较差
异显著 o与阳性对照药作用相当 o其中 „2…2t和 „2
#uusu#
第 vu卷第 t|期
ussz年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ t|
’¦·²¥¨ µo ussz
表 t „2…2t正离子模式的电喷雾 2质谱数据
׌≤峰 kτr°¬±l n ±t µ / ζ 相对分子质量
tf kty1tu| ∗ tz1sszl xst1w≈ t n ‘¤  n o|z|1w≈u t n ‘¤  n ozxt1v≈ u n ‘¤  n ozyz1v≈ u n Ž  n wz{k°¤­²µlozu{k°¬±²µl
uf kus1yww ∗ ut1xuul ws|1u≈ n ‘¤  n owux1u≈ n Ž  n oz|x1x≈u n ‘¤  n v{y
vf kvx1x|w ∗ vz1vuxl v|z1s≈ n ‘¤  n owtv1t≈ n Ž  n vzw
wf kwu1xtz ∗ wv1ut|l xu|1v≈ n ‘¤  n ot svx1x≈u n ‘¤  n xsy
xf kwx1vst ∗ wy1vvsl zuv1w≈ n ‘¤  n zss
yf kw{1ytu ∗ w|1wyxl ysx1w≈ n ‘¤  n oyut1w≈ n Ž  n x{u
zf kxw1yx{ ∗ xx1{{zl yut1x≈ n ‘¤  n oyvz1w≈ n Ž  n x|{
{f kxz1uwt ∗ x{1s|wl zyx1w≈ n ‘¤  n oz{t1x≈ n Ž  n zwu
|f kx{1ywy ∗ x|1xuwl ysz1y≈ n ‘¤  n oyuv1y≈ n Ž  n x{w
ts ∗ ttf kyu1{vx ∗ yw1utwl w{z1w≈ t n ‘¤  n oxsv1v≈u t n ‘¤  n o{|z1w≈ u n ‘¤  n o|tv1w≈ u n Ž  n wywo{zw
tuf kyy1vuu ∗ yz1xuyl t su|1x≈ n ‘¤  n t ssy
tvf kz|1||u ∗ {s1{wxl w{z1x≈ n ‘¤  n oxsv1w≈ n Ž  n wyw
twf k{x1{{z ∗ {z1ttyl xwx1w≈ n ‘¤  n oxyt1u≈ n Ž  n ot syz1y≈u n ‘¤  n xuu
…2u抗炎作用优于阳性对照药雷公藤多苷 o但三者
之间无显著性差异 k见表 vl∀ „2…2u主要含皂苷类
成分 ~„2…2t经 ≤ 2 ≥2 ≥分析 o表明主要成分为木
脂素苷类化合物 ∀初步探讨了 „2…2t的量效关系 o
结果表明给药剂量在 x ∗ us °ª# ®ªpt时 o显示一定
的药效 2剂量依赖关系 k表 wl∀ „2≤o„2∞预筛选无
抗炎活性 o剔除 o表 w只列出了对 „2…和 „2• 筛
选的结果 ∀
对活性部分 „2…直接进行 k n l和 k p l∞≥Œ2
 ≥2 ≥分析 o结果表明 o该部分中主要含相对分
子质量为 zwu和 x{s的成分 ∀参照文献 ≈tsott o合
欢皮已知成分中与这 u个相对分子质量吻合的有 }
表 u 合欢皮总提物及各提取部分抗炎活性评价结果
kcξ ? σ, ν € tsl
组别
剂量
r°ª# ®ªpt
肿胀度
r°ª
肿胀抑制率
rh
空白 x1v ? s1x
雷公藤多苷 ts v1u ? s1vul ws
„2× xss v1y ? s1vul vu
„2… xs v1s ? s1vvowl ww
„2• xs v1| ? s1utl uy
注 }与空白组比较 tl Πi ·¯~s1sxoul Πi ·¯~s1stovl Πi ·¯~s1sst~与
„2×组比较 wl Πi ·¯~s1sx
表 v „2…抗炎活性评价结果 kcξ ? σ, ν € tsl
组别
剂量
r°ª# ®ªpt
肿胀度
r°ª
肿胀抑制率
rh
空白 x1u ? s1v
雷公藤多苷 ts v1v ? s1vul vz
„2…2t us v1s ? s1uul wu
„2…2u us v1s ? s1vul wv
„2…2v us v1{ ? s1wtl uz
注 }与空白组比较 tl Π  s1sx~ul Π  s1sst
表 w „2…2t组分不同剂量抗炎活性评价结果
kcξ ? σ, ν € tsl
组别
剂量
r°ª# ®ªpt
肿胀度
r°ª
肿胀抑制率
rh
空白 x1w ? s1y
雷公藤多苷 ts v1v ? s1wul v{
„2…2t2≠ x w1t ? s1x uw
„2…2t2 ts v1y ? s1xtl vv
„2…2t2≈ us v1w ? s1wul vz
„2…2t2… tss v1z ? s1wtl vu
注 }与空白组比较 tl Πi ·¯~s1sx~ul Πi ·¯~s1st
k p l2丁香树脂酚 2wowχ2双 2Ο2Β2∆2吡喃葡萄糖苷
kzwu1zulok p l2丁香树脂酚 2w2Ο2Β2∆2吡喃葡萄糖
苷 kx{s1x{l∀相对分子质量为 wvw的化合物未见
报道 ∀对 p ±t扫描中的 µ / ζ zwt1z进行了负离子
扫描 o得到二级质谱图 ∀图中清晰地显现脱 t分子
六碳糖 !脱 u分子六碳糖及六碳糖的碎片离子 o在已
知药材和文献数据比较充分的前提下 o可以基本确
定该成分为合欢皮中的 k p l2丁香树脂酚 2wowχ2双 2
Ο2Β2∆2吡喃葡萄糖苷 ∀
鉴于该部分的主要成分为苷类化合物 o作者设计
了用大孔树脂柱色谱法对初筛活性部分进行再分离 o
得到 w个组分 o„2…2t和 „2…2u是 u个主要组分 ∀
¬¨¥¨ µ°¤±±2¥∏µ¦«¤µ§显色反应表明 „2…2u主要为皂
苷 o而 „2…2t中主要成分的信息尚需阐明 ∀因此 o用
≤2 ≥2 ≥技术 o快速分离和分析了 „2…2t中的主要
成分 k结果见表 tl∀将总离子流色谱图中的谱峰编
号 tf ∗ twf ∀对其进行 n ±t扫描 o可得到有价值的碎
片峰 ∀参照文献 ≈ts o合欢皮已知成分中与表中相对
分子质量吻合的有 }vowox2·µ¬° ·¨«²¬¼³«¨ ±²¯ t2Ο2Β2∆2
¤³¬²©∏µ¤±²¶¼¯ 2ktψ ul2Β2∆2ª¯∏¦²³¼µ¤±²¶¬§¨ kwz{1wwl~
#vusu#
第 vu卷第 t|期
ussz年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ t|
’¦·²¥¨ µo ussz
xoxχ2§¬° ·¨«²¬¼2z2²¬²¯¤µ¬¦¬µ¨¶¬±²¯ wχ2Β2∆2¤³¬²©∏µ¤±²¶¼¯ 2
ktψ ul2Β2∆2ª¯∏¦²³¼µ¤±²¶¬§¨ kzu{1y|l~¶¼µ¬±ª¬¦¤¦¬§
° ·¨«¼¯ ¶¨·¨µw2Ο2Β2∆2¤³¬²©∏µ¤±²¶¼¯ 2ktψ ul2Β2∆2ª¯∏¦²2
³¼µ¤±²¶¬§¨ kxsy1wxl~k p l2¶¼µ¬±ª¤µ¨¶¬±²¯2wowχ2¥¬¶2Ο2Β2
∆2ª¯∏¦²³¼µ¤±²¶¬§¨ kzwu1zul~k p l2¶¼µ¬±ª¤µ¨¶¬±²¯2w2Ο2
Β2∆2¤³¬²©∏µ¤±²¶¼¯ 2k t ψ u l2Β2∆2ª¯∏¦²³¼µ¤±²¶¬§¨
k{zw1{vl~ k p l2¶¼µ¬±ª¤µ¨¶¬±²¯2wo wχ2¥¬¶2Ο2Β2∆2¤³¬²2
©∏µ¤±²¶¼¯ 2ktψ ul2Β2∆2ª¯∏¦²³¼µ¤±²¶¬§¨ ktssy1|xl~¬¦¤µ2
¬¶¬§¨ ∞x kxuul∀可以看出这些成分中主要为木脂素
苷类化合物 o该组分含量最高的成分是 ¬¦¤µ¬¶¬§¨ ∞x o
已知成分 vowox2·µ¬° ·¨«²¬¼³«¨ ±²¯ t2Ο2Β2∆2¤³¬²©∏µ¤±²2
¶¼¯ 2ktψ ul2Β2∆2ª¯∏¦²³¼µ¤±²¶¬§¨和 ¶¼µ¬±ª¬¦¤¦¬§° ·¨«¼¯
¶¨·¨µw2Ο2Β2∆2¤³¬²©∏µ¤±²¶¼¯ 2ktψ ul2Β2∆2ª¯∏¦²³¼µ¤±²2
¶¬§¨含量也较大 ∀
根据 ≤ 2 ≥2 ≥的分析结果 o设计了合理的分
离方法 o对初筛的活性部分进行了分离和进一步分
离 o了解了 „2…2t的主要成分 o对其下一步分离和
活性研究起到了 /眼睛 0的导向作用 ∀
∞≥Œ电离方式所产生的内能低 o对大多数天然
产物来说得到的离子往往是准分子离子 o用 ∞≥Œ2
 ≥2 ≥得到碳碳键断裂的碎片离子也较难 o因此仍
难以完全确定一个化合物结构 ∀但对于糖苷类化合
物 o∞≥Œ2 ≥2 ≥可以提供非常重要的分子量及碎片
信息 o特别是对于合欢皮这样前期工作已进行的比
较充分的中药 o可以对照文献报道的结构 o推测哪些
成分是已知成分 o哪些可能是尚未发现的新成分 o以
便进一步深入研究 ∀借助 ∞≥Œ2 ≥2 ≥可以监控植
化分离 o辅助结构鉴定 o与活性筛选结合 o共同指导
和导向活性成分研究 o可以大大提高工作效率 ∀
目前中药活性成分的主要研究手段之一是以生
物活性为导向的提取分离 o对于活性部位进行有效
的检测分析是对生物活性筛选的重要补充 ∀ ≤ 2
 ≥2 ≥是一种理想的快速分析手段 o可对感兴趣的
化合物进行靶分析 o通过分析对照已知化合物的质
谱及色谱 o可对提取物中的已知和未知结构的成分
进行快速定性分析 o是进行中药活性成分研究的另
一只 /眼睛 0 ∀这对中药和天然产物的活性成分研
究有一定的启示和指导意义 ∀
≈参考文献  
≈t  姚新生 o胡 柯 q中药复方的现代化研究 ≈  q化学进展 o
t|||ottkvl}t|uq
≈u  姚新生 q中药天然药物活性成分的研究方法 ≈ q药学服务与
研究 oussvovkwl}usxq
≈v   ¬®¨ ≥ ¨ o¨ ∞§º¤µ§‹ Ž¨µ±¶q ≤ r ≥ „³³¯¬¦¤·¬²± ¬± ⁄µ∏ª⁄ 2¨
√¨¯²³° ±¨·≈ q  ¤¶¶≥³¨ ¦·µ²° ·¨µ¼ • √¨¬¨º¶o t||ot{}t{zq
≈w  司端运 o钟大放 q液相色谱 2光谱联用技术在天然产物化学筛
选中的应用 ≈ q药学学报 oussuovzkyl}w{xq
≈x  乔善义 o郭继芬 o赵毅民 q ≥r ≥技术快速发现和分析繁缕中
的黄酮碳苷成分 ≈ q中国天然药物 oussvotkul}tusq
≈y  王子灿 o乔善义 o马安德 o等 q高效液相色谱 2质谱联用技术分析刺
五加抗疲劳化学成分 ≈ q第一军医大学学报 oussvouvkwl}vxxq
≈z  邹 坤 q合欢皮化学成分及生物活性研究 ≈⁄ q北京 }北京医
科大学 ot||{q
≈{  ‹ q Š µ¨«¤µ§∂ ²ª¨ o¯ • ²¯©ª¤±ª‹ ∂ ²ª¨ q¯药理学实验指南 ) ) ) 新
药发现和药理学评价 ≈  q杜冠华 o李学军 o张永祥 o等译 q北
京 }科学出版社 ousst}xu|oxvxq
≈|  徐叔云 o卞如濂 o陈 修 q药理学实验方法 ≈  q北京 }人民卫
生出版社 ot|{u}xvuq
≈ts  蔚冬红 o乔善义 o赵毅民 q中药合欢皮研究概况 ≈ q中国中药
杂志 ousswou|kzl}yt|q
≈tt  ∏± ¬¨Ž¬±­²o ‹¬µ²¼∏®¬‹¬ª∏¦«¬o Ž¤·¶∏µ¤ ƒ∏®∏¬o ·¨¤¯q ¬ª±²¬§¶
©µ²° „ ¥¯¬½½¬¤¨ ≤²µ·¨¬ µ q „ ¥¬²§¨ ªµ¤§¤·¬²± ³¤·«º¤¼ ²©¶¼µ¬±ª¤2
µ¨¶¬±²¯≈ o ≤ «¨ ° °«¤µ° …∏¯ o¯ t||tov|kttl}u|xuq
Στυδιεσ ον βιοασσαψ2γυιδεδ αντι2ινφλαµ µ ατορψ φραχτιον ιν βαρκ οφ
Αλβιζια ϕυλιβρισσιν χοµ βινεδ δετερµ ινατιον ωιτη ΛΧ2ΜΣ2ΜΣ
±Œ„’ ≥«¤±2¼¬t o ≠ ˜ ⁄²±ª2«²±ªtou o Š˜’ ¬2©¨±t o ‹ „’ ≠¬2°¬±t
(t1 Ινστιτυτε οφ Πηαρµ αχολογψ ανδ Τοξιχολογψ, Αχαδεµ ψ οφΜιλιταρψΜεδιχαλΣχιενχεσ, Βειϕινγ tss{xs, Χηινα;
u1 Ινστιτυτε οφ Χηεµ ιχαλ∆εφενσε, Βειϕινγ tsuusx, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶¨¤µ¦«·«¨ ¤±·¬2¬±©¯¤°°¤·²µ¼ ©µ¤¦·¬²± ²©Αλβιζια ϕυλιβρισσινq Μετηοδ : Œ±©¯¤°°¤·²µ¼ °²§¨ ¯²©Ž∏±°¬±ª
°¬¦¨ ¤¨µ §¨¨ °¤¬±§∏¦¨§¥¼ ¦µ²·²± ²¬¯ ¤±§ §¨ ·¨µ°¬±¤·¬²± ¦²°¥¬± §¨ º¬·«·«¨ ≤ 2 ≥2 ≥2ª∏¬§¨ § ©µ¤¦·¬²±¤·¬²± ¤±§¬¶²¯¤·¬²± º µ¨¨ ∏¶¨§q
Ρ εσυλτ: ׫¨ ±2¥∏·¤±²¯ ©µ¤¦·¬²± k„2…l ²¥·¤¬± §¨©µ²° ·«¨ ·¨«¤±²¯¬¦ ¬¨·µ¤¦·²©·«¨ Χορτεξ αλβιζιαε º¤¶·«¨ °¤­²µ¤¦·¬√¨©µ¤¦·¬²±q ׫¨ ¬¯ª2
#wusu#
第 vu卷第 t|期
ussz年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ t|
’¦·²¥¨ µo ussz
±¤± ª¯¼¦²¶¬§¨ ¶©µ¤¦·¬²± k„2…2tloº«¬¦« º¤¶©∏µ·«¨ µ¬¶²¯¤·¨§ ©µ²° „2…o ¶«²º §¨ ¶¬ª±¬©¬¦¤±·¤±·¬2¬±©¯¤°°¤·²µ¼ ¤¦·¬√¬·¼ ¤±§ ¬¨«¬¥¬·¨§
§²¶¨2§¨ ³¨ ±§¨ ±·µ¨ ¤¯·¬²±¶«¬³¬± ·«¨ §²¶¨ ²©x ·²us °ª# ®ªpt q Χονχλυσιον: ׫¨ ° ·¨«²§²©¥¬²¤¶¶¤¼2ª∏¬§¨ §©µ¤¦·¬²±¤·¬²± ¤±§¬¶²¯¤·¬²±
¦²°¥¬± §¨º¬·«·«¨ ≤ 2 ≥2 ≥ §¨ ·¨µ°¬±¤·¬²± °¤¼ ¥¨ ²©¥¨ ± ©¨¬··²·«¨ ²¯ª¬¦¤¯ ¶·∏§¬¨¶²± ·«¨ ¥¬²¤¦·¬√¨©µ¤¦·¬²±¶²µ¦²±¶·¬·∏¨ ±·¶²©·µ¤§¬2
·¬²±¤¯ ≤«¬± ¶¨¨ °¤·¨µ¬¤° §¨¬¦¤q
[ Κεψ ωορδσ] Αλβιζια ϕυλιβρισσιν~ ¬¯ª±¤± ª¯¼¦²¶¬§¨ ¶~ ≤ 2 ≥2 ≥~ ¤±·¬2¬±©¯¤°°¤·¬²±
≈责任编辑 牛泽宇  
≈收稿日期   ussz2sw2u{
≈通讯作者   3 高秀丽 oר¯}ks{xtly|s{wy{
龙血竭高效液相色谱特征研究
高秀丽 3 o蒋 蒨 o王鹏娇 o张 敏
k贵阳医学院 药学院 o贵州 贵阳 xxssswl
≈摘要   目的 }用 ‹ °≤法对龙血竭指纹图谱进行研究 ∀方法 }采用色谱条件 ∞¦¯¬³¶¨ ÷ ⁄…2’⁄≥柱 kw1y °° ≅
txs °°ox Λ°l~流动相乙腈 2水 o梯度洗脱进行色谱分离 ~检测波长为 uzx ±°~流速为 t1s °# °¬±pt ~柱温为 ws
ε o以龙血素 …作为参照物 ∀结果 }初步建立了龙血竭的 ‹ °≤指纹图谱 o并进行相似度评价 ∀结论 }方法简单可
行 o能够有效地控制龙血竭的内在质量 ∀
≈关键词   龙血竭 ~指纹图谱 ~‹ °≤~相似度
≈中图分类号   • u{wqt ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlt|2usux2sv
龙血竭为百合科植物剑叶龙血树 ∆ραχαενα χο2
χηινχηινενσισk²∏µql≥q ‹ q ≤«¨ ±含脂木质部经提取
加工制成的树脂 o含多种黄酮类 k如龙血素 „!龙血
素 …!龙血素 ≤ l!皂苷类 !甾醇类等化合物 o具有活
血散瘀 !消炎止痛 !收敛止血 !生肌敛疮 !补血益气等
功效 ∀药理研究显示其具有抗细菌 !真菌和其他微
生物 !抗氧化作用 o止血 !活血 !降血糖等作用 ≈tou  ∀
t||s年广西药学工作者将国产血竭开发成我国的
中药一类新药 o命名为 /广西血竭 0 ∀ t|||年 /广西
血竭 0的新药试行标准转为正式标准 o定名为 /龙血
竭 0 ∀目前市场上 o龙血竭作为一种中药原料药已
有多个厂家生产 ∀龙血竭其质量控制手段主要有薄
层色谱法 ≈v 和采用高效液相色谱法对已知化合物
k如龙血素 …!龙血素 „和 …等 l进行含量测定 ≈w2z  ∀
由于受到天气 !气候 !产地等各种因素的影响 o有效
生物活性成分的含量会有较显著的差异 o从而影响
龙血竭的质量 ∀为了更好地控制龙血竭的质量 o本
文首次采用 ‹°≤法建立了龙血竭的指纹图谱 ∀
1 仪器与试药
美国安捷伦 ttss高效液相色谱仪 o∞¦¯¬³¶¨
÷⁄…2≤t{色谱柱 kw1y °° ≅ txs °°ox Λ°l! °«¨ 2
±²° ±¨ ¬¨2≤t{保护柱 kv °° ≅ w1y °°ox Λ°l∀龙血
素 „ 对照品 k中国药品生物制品检定所 o批号
tttyys2ussvstlo龙血素 …对照品 k中国药品生物制
品检定所 o批号 tttxx{2ussvsvl∀乙腈为色谱纯 o
其余试剂均为分析纯 ∀龙血竭原料药样品来源于不
同的厂家和不同批号 k市售购得 o表 tl∀
表 t 龙血竭测试样品
样品 批号 厂家 产地
≥t swsusv 云南省西双版纳制药厂 云南
≥u sxstsx 云南省西双版纳制药厂 云南
≥v sxsysw 云南省西双版纳制药厂 云南
≥w ussysysv 中国科学院版纳名盛制药厂 云南
≥x ussxs|uy 昆明大观制药厂 云南
≥y svs{{u 昆明大观制药厂 云南
≥z sxsvst 云南省西双版纳制药厂 云南
≥{ sysust 云南省西双版纳制药厂 云南
≥| sxs|sw 云南省西双版纳制药厂 云南
≥ts sxs|s{ 云南省西双版纳制药厂 云南
2 方法与结果
2q1 色谱条件
∞¦¯¬³¶¨ ÷⁄…2≤t{色谱柱 kv °° ≅ w1y °°ox
Λ°l! °«¨ ±²° ±¨ ¬¨2≤t{保护柱 kv °° ≅ w1y °°ox
#xusu#
第 vu卷第 t|期
ussz年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ t|
’¦·²¥¨ µo ussz