免费文献传递   相关文献

Study of Liangjin mushroom polysaccharide inducing apoptosis of K562 cells

梁金菇多糖诱导K562细胞凋亡的研究



全 文 :3 讨论
熟地黄具有滋阴补血 o填精生髓之功用 o为临床
补血之要药 ∀现代药理已表明地黄在造血系统 !内
分泌系统 !免疫 !抗肿瘤及心血管系统等有着广泛的
生物活性≈w  ∀作者前期的实验结果已显示≈x  o熟地
多糖对血虚模型小鼠 • …≤ o• …≤ o‹…o°×的保护作
用优于熟地非多糖部分和熟地水煎液 ~对于临床再
生障碍性贫血患者 o熟地多糖的疗效也是肯定的≈y  ∀
在此基础上 o本研究观察了熟地多糖对不同血虚模
型小鼠的影响 o结果表明熟地多糖对小鼠化学性损
伤 !放射性损伤均有明显的保护作用 o并可促进小鼠
造血干细胞增殖 !分化 o从而显示其补血功效 ∀
≈参考文献 
≈t  陈 奇 1 中药药理研究方法学 1 北京 }人民卫生出版社 o
t||v1tsts1
≈u  唐佩弦 1 造血细胞培养技术 1 西安 }陕西科学技术出版社 o
t|{x1 x{1
≈v  徐淑云 o卞如濂 o陈 修 1 药理实验方法学 1 第 u版 1 北京 }人
民卫生出版社 ot||t1ttsy1
≈w  李兰青 1地黄药理研究进展 1 中成药 ot||w otyk|l }wz1
≈x  黄 霞 o庆 慧 o王慧森 o等 1 熟地水煎液及其提取物对小鼠外
周血象的比较研究 1 中成药 oussu ouwkul }ttt1
≈y  元阿萍 o刘 超 o黄 霞 1 熟地多糖联合康力龙治疗慢性再生
障碍性贫血 vw例 1中国中西医结合杂志 ot||{ ot{kyl }vxt1
Ινφλυενχε οφ Ρεηµαννια γλυτινοσα πολψσεσ ον µ οδελ µιχε οφ δεφιχιενχψ οφ βλοοδ
‹˜„‘Š ÷¬¤oŒ˜ ¬¨ oŒ˜ ‹∏¬2¬¬¤
( Ηεναν Αχαδεµψ οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Ζηενγζηου wxsssw , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ²¥¶¨µ√¨·«¨ ¬±©¯∏¨ ±¦¨ ²© • Š°k Ρεηµανινα γλυτινοσα ³²¯¼¶¨¶l ²±·«¨ ³¨µ¬³«¨µ¤¯ «¨ °²ªµ¤° o«¨ °²³²¬¨·¬¦¶·¨°
¦¨¯¯ o°¼¨ ²¯¬§®¤µ¼²¦¼·¨ ²© °²§¨¯ °¬¦¨1 Μετηοδ : ∞¤¦«ªµ²∏³²©·«¨ °¬¦¨ º µ¨¨ ©¨ §º¬·« • Š°©²µ{ ∗ | §¤¼¶1 ¬¦¨ °²§¨¯²©§¨©¬¦¬¨±¦¼ ¥¯²²§¬¶
¶¨·∏³¥¼¬±·¨µ¤³¨µ¬·²±¨ ¤¯ ¬±­¨¦·¬²± ²©≤≠ o¤±§·«¨ ³¨µ¬³«¨µ¤¯ «¨ °²ªµ¤° ¤±§°¼¨ ²¯¬§®¤µ¼²¦¼·¨ º µ¨¨ ²¥¶¨µ√ §¨¤±§¦²∏±·¨§²±·«¨ º«²¯¨¥¯²²§1
∞¤¦«ªµ²∏³²© °¬¦¨ º µ¨¨ ¬±­¨¦·¨§º¬·«·«¨ ¶∏¶³¨ ±¶¬²± ²© °¼¦¯²¬§¦¨¯¯ ²©«²°²¯²ª¼ §²±²µ°¬¦¨ o¤±§·«¨ ©²µ°¤·¬²± ²©¶³¯ ±¨¬¦¯ ¼°³«±²§∏¯ ¶¨º µ¨¨
²¥¶¨µ√ §¨1 ∞¤¦«ªµ²∏³²© °¬¦¨ º µ¨¨ µ¤§¬¤·¨§º¬·«µ¤§¬¤·¬²± §²¶¤ª¨ ²©z1uxŠ≠ o¤±§·«¨ µ¤§¬¤·¬²±2§¤°¤ª¨ °²§¨¯ º µ¨¨ ¶¨·∏³1 ׫¨ ©²µ°¤·¬²± ²©
¶³¯ ±¨¬¦ ¼¯°³«±²§∏¯ ¶¨º µ¨¨ ²¥¶¨µ√ §¨o¤±§·«¨ ³¨µ¬³«¨µ¤¯ «¨ °²ªµ¤° o°¼¨ ²¯¬§®¤µ¼²¦¼·¨ ¤µ¨ ²¥¶¨µ√ §¨¤±§¦²∏±·¨§1 Ρεσυλτ : ∞¤¦«§²¶¤ª¨ ªµ²∏³
²© • Š° «¤√¨¤±·¤ª²±¬¶° ²± ³¨µ¬³«¨µ¤¯ «¨ °²ªµ¤° ¤±§·«¨ °¼¨ ²¯¬§®¤µ¼²¦¼·¨ ²©·«¨ ≤≠ °¬¦¨ °²§¨¯²©§¨©¬¦¬¨±¦¼ ²©¥¯²²§o¦²°³¤µ¨§º¬·«¦²±·µ²¯
ªµ²∏³1 • Š° ¶«²º¶²¥√¬²∏¶©¤¦¬¯¬·¤·¬²± ¤±¬²2¤¦·¬²±©²µ·«¨ ©²µ°¤·¬²± ²©¶³¯ ±¨¬¦ ¼¯°³«±²§∏¯ ¶¨k Π s1sx o Π s1stl1 ‹¬ª«§²¶¤ª¨ Š• ° ¦¤±
¬±«¬¥¬·¬²±·«¨ §¨¦µ¨¤¶¨ ²© º«²¯¨¥¯²²§¦¨¯¯ ²¥√¬²∏¶¯¼k Π s1sxl1 ²º §²¶¤ª¨ ²© • Š° ¦¤±¬±¦µ¨¤¶¨ ·«¨ º«²¯¨¥¯²²§¦¨¯¯ ²© °²§¯¨ °¬¦¨ º¬·«²∏·
¶·¤·¬¶·¬¦¤¯ ° ¤¨±¬±ª1 Χονχλυσιον : • Š° «¤√¨¤±·¤ª²±¬¶° ²±·«¨ §¨¦µ¨¤¶¨ ²©³¨µ¬³¯ µ¨¤¯ «¨ °²ªµ¤° ¤±§°¼¨ ²¯¬§®¤µ¼²¦¼·¨ ²©§¬©©¨µ¨±·°²§¨¯ °¬¦¨
²©§¨©¬¦¬¨±¦¼ ²©¥¯²²§o¤±§«¤√¨¤±¬²2¤¦·¬²± ²± °∏¯·¬³¯¬¦¤·¬²± ¤±§§¬©©¨µ¨±·¬¤·¬²± ²©·«¨ °¬¦¨ «¨ °²³²¬¨·¬¦¶·¨° ¦¨¯¯k≤ƒ∏2≥l1
[ Κεψ ωορδσ] Ρεηµαννια γλυτινοσα ³²¯¼¶¨¶~ °²§¨¯ °¬¦¨ ²©¥¯²²§§¨©¬¦¬¨±¦¼~³«¤µ°¤¦²§¼±¤°¬¦¶
≈责任编辑 方文贤 
≈收稿日期  ussw2st2ut
≈基金项目  上海市高等学校科学技术发展基金ksu⁄Žs|l
≈通讯作者  3王月颖 oר¯ }ks|vtl{zy{ttx o∞2°¤¬¯}º¤±ª2¼¼zv ƒ ¼¤«²²1¦²°1¦±
梁金菇多糖诱导 Žxyu细胞凋亡的研究
王月颖t 3 o刘正国t o李兴玉u
kt1 兰州医学院 第一附属医院 o甘肃 兰州 zvssss ~
u1 上海师范大学 生命与环境科学学院 o上海 ustwt{l
≈摘要  目的 }探讨梁金菇多糖对 Žxyu细胞凋亡的影响及其机制 ∀方法 }应用集落形成实验观察梁金菇多糖
#sztt#
第 u|卷第 tu期
ussw年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1u| oŒ¶¶∏¨ tu
⁄¨ ¦¨ °¥¨µoussw
对 Žxyu细胞增殖的影响 o细胞形态学 !⁄‘„凝胶电泳等检测细胞凋亡 o逆转录2聚合酶链反应k• ×2°≤• l检测凋亡相
关基因 ƒ¤¶°• ‘„的表达 ∀结果 ~梁金菇多糖能明显抑制 Žxyu细胞的增殖 o促进细胞凋亡 o细胞凋亡率的增加呈剂
量依赖性 ∀ ƒ¤¶基因的表达与 Žxyu细胞凋亡呈正相关 ∀结论 }梁金菇多糖具有抑制 Žxyu细胞增殖 !诱导其凋亡的
作用 oƒ¤¶基因表达的上调可能是梁金菇多糖诱导细胞凋亡的机制之一 ∀
≈关键词  梁金菇多糖 ~凋亡 ~Žxyu细胞 ~ƒ¤¶基因
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswltu2ttzs2sw
梁金菇 ¬¤±ª­¬± °∏¶«µ²²°又名姬松茸 Αγαριχυσ
βλαζει o属于担子菌纲的一种菌类植物的地上菌丝
体 ∀研究发现其多糖成分具有促进造血 !抗肿瘤等
作用≈t ou  ∀为了进一步阐明其抗肿瘤机理 o作者观
察梁金菇多糖对人类慢性髓性白血病k≤l细胞株
Žxyu细胞诱导凋亡的作用 o为多糖类药物治疗肿瘤
提供理论依据 ∀
1 材料和方法
111 材料 梁金菇由福州华胜食品有限公司提供 ∀
根据文献 ≈v 采用水提醇沉法制得梁金菇多糖
k|y1x h l ow ε 保存 o使用时用双蒸水稀释至所需浓
度 ∀ Žxyu细胞购于上海细胞生物学研究所细胞库 o
总 • ‘„抽提试剂盒 !• ×2°≤• 试剂盒购于华美生物
工程公司 ∀
112 方法
11211 细胞培养 Žxyu细胞用含 ts h小牛血清的
• °Œtyws培养液 o置于 vz ε ox h ≤’u 饱和湿度细
胞培养箱中培养 ∀药物处理时取对数生长期细胞 o
细胞密度调整为 t ≅ tsy#pt ∀
11212 集落形成实验 梁金菇多糖终浓度分别为
s1s ª#ptk对照组l os1y os1{ ot1s ª#pt o加入含 t ≅
tsv个 Žxyu细胞和终浓度为 s1v h的琼脂半固体培
养体系 o充分混匀 o接种于 vs °°培养皿中 o置 vz
ε ox h ≤’u饱和湿度细胞培养箱中 o培养 x §后 o计
算 ∴xs个 Žxyu细胞组成的集落数 o计算集落抑制
率 ∀
集落抑制率k h l € kt p实验组集落均数r对照组集落均
数l ≅ tss h
11213 细胞形态学观察 梁金菇多糖浓度分组同
11212 o分别在药物作用后的第 v ow ox天将细胞涂
片 o• µ¬ª«·2Š¬¨°¶¤染色 o在 ‘¬®²± {ts{t{ 型倒置光显
微下观察细胞形态 o每组观察 w张玻片 o每张玻片观
察 uss个细胞 o计数凋亡细胞并计算细胞凋亡率 ∀
细胞凋亡率k h l € k每张玻片凋亡细胞数russl ≅ tss h
11214 ⁄‘„凝胶电泳 将梁金菇多糖加入 Žxyu细
胞中 o调整终浓度分别为 s1s os1y os1{ ot1s ª#pt o培
养 x §o收集各组细胞 o离心 o°…≥洗涤后加入 xs ˏ
细胞裂解液 o混匀至清亮 o以等体积苯酚2氯仿ktΒ
tl o苯酚2氯仿2异丙醇kuxΒuwΒtl各抽提 t次 o在抽提
液中加入 trts体积的 v °²¯#pt醋酸钠和 u倍体积
的冷乙醇 op us ε 沉淀过夜 o次日在 t1x h琼脂糖凝
胶中进行电泳 ∀
11215 逆转录2聚合酶链反应 依据 ≤‹„‘Š≈w 提供
的序列由上海生物工程有限公司合成 ƒ¤¶引物 ∀利
用 • ‘„抽提试剂盒抽提细胞总 • ‘„ o• ×2°≤• 试剂
盒对总 • ‘„中 ƒ¤¶°• ‘„扩增 ∀引物序列 }上游引
物为 oxχ2Š„× ׊≤ ×≤„ „≤„ „≤≤ „׊2vχ o下游引物
为 oxχ2××× ≤„≤ ×≤× „Š„ ≤≤„ „Š≤ ××× Š2vχ ∀扩增
条件 }vz ε 反转录 ys °¬±o|x ε x °¬±灭活逆转录
酶 o|x ε vs ¶oxx ε vs ¶ozu ε xs ¶o循环 vs次 o最
后 zu ε { °¬±链延伸 ∀°≤• 产物进行凝胶电泳 o恒
流 zx °„ t «∀电泳结果用 • ¤¨¯·¨¦⁄²¯³«¬±2√¬¨º型凝
胶成像分析系统观察 o并由 ¬¯ª«·ƒµ¤°¨ א ¶²©·º¤µ¨ 图
像分析软件分析各条带的表达强度 ∀
11216 统计方法 采用 τ检验 o结果用 cξ ? σ表示 ∀
2 结果
211 细胞集落的形成 实验结果k表 tl显示 s1y o
s1{ ot1s ª#pt的梁金菇多糖对 Žxyu细胞集落的形
成有抑制作用 o并且随梁金菇多糖浓度的增加 o集落
抑制率亦相应增加 o最高浓度组抑制率达 xt h ∀
表 t 药物对 Žxyu细胞集落形成的影响kcξ ? σ, ν € wl
药物浓度rª#pt 集落数rtsv 集落抑制率r h
s1s uus ? tv1sx s
s1y tvw ? x1xstl v|
s1{ tuy ? {1xstl wv
t1s ts{ ? |1vvtl xt
注 }与对照组比较tl Π s1st
212 细胞形态的观察 s1s os1y os1{ ot1s ª#pt的
梁金菇多糖作用 Žxyu细胞 v §后 o部分细胞发生了
典型的凋亡细胞的形态学改变 o包括 }细胞膜起泡 o
核染色质固缩 o周边聚集 o核碎裂成团状散布于胞
浆 o凋亡小体形成等 ∀随着剂量增加和作用时间的
#tztt#
第 u|卷第 tu期
ussw年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1u| oŒ¶¶∏¨ tu
⁄¨ ¦¨ °¥¨µoussw
延长 o发生凋亡形态的细胞数量亦相应增加 o凋亡率
呈现出时间2剂量依赖性k表 ul ∀
表 u 药物对 Žxyu细胞凋亡的影响kcξ ? σ, ν € wl
Χ
rª1pt
凋亡率r h
v § w § x §
s1s w1xs ? t1u| x1ux ? t1zt z1ss ? t1{v
s1y z1ux ? t1zttl tt1ss ? u1x{ul tv1ux ? u1xsul
s1{ tu1ss ? v1tyul tw1ux ? u1uuul t|1xs ? u1{|ul
t1s tz1xs ? v1vuul ut1ux ? v1xsul ux1zx ? v1zzul
注 }与对照组比较tl Π s1sx oul Π s1st
213 ⁄‘„凝胶电泳 细胞发生凋亡时 o内源性核酸
内切酶激活 o规律的将细胞 ⁄‘„ 于核小体间切断 o
⁄‘„凝胶电泳形成特征性的梯形图谱 ∀本实验用
s1s os1y os1{ ot1s ª#pt梁金菇多糖处理 Žxyu细胞 x
§后 os1{ ot1s ª#pt凝胶电泳显示梯形条带 o而 s1y
ª#pt和对照组则未见梯状降解条带k图 tl ∀
214 ƒ¤¶表达的检测 s1s os1y os1{ ot1s ª#pt梁金
菇多糖处理 Žxyu 细胞 x §后 o• ×2°≤• 结果通过
¬ª«·ƒµ¤°¨ א¶²©·º¤µ¨ 分析测得k Αl在 s1s os1y os1{ o
t1s ª#pt组分别是 y1zwv y ott1v|| ovx1yu{ o|s1twv ∀
t1s ª#pt组是对照组的 tv1vz倍k图 ul ∀
图 t 梁金菇多糖处理 Žxyu细胞 x §后凝胶电泳结果
1 标示物 ~t1 对照组 ~u ∗ w1分别为 s1y os1{ o
t1s ª#pt梁金菇多糖处理组k图 u同l
图 u 梁金菇多糖处理 Žxyu细胞 x §后
ƒ¤¶°• ‘„表达强度的变化
3 讨论
慢性髓性白血病k≤l是由 ³«染色体 o既·k| ~
uul易位导致融合基因 ¥¦µ2¤¥¯ 的形成所致 ∀该基因
产物 ³uts¥¦µ2¤¥¯蛋白具有比 ¦2¤¥¯ 癌蛋白强的酪氨酸
激酶活性 ∀有研究表明 o³uts¥¦µ2¤¥¯融合蛋白通过抑
制白血病细胞凋亡而延长其生存时间 o因此 o凋亡受
抑是 ≤发病的重要机制之一≈x  ∀
细胞的凋亡是一种不同于坏死 o且受基因调控
的主动性自我消亡的过程 oƒ¤¶是细胞凋亡的信号
受体之一 ∀ƒ¤¶属于肿瘤坏死因子受体kבƒ• l及神
经生长因子受体k‘Šƒ• l超家族成员 o是一种 Œ型细
胞膜蛋白 ∀其胞浆一段 ys ∗ zs氨基酸序列与 בƒ•
胞浆区高度同源 o介导细胞死亡 o称死亡结构域 ∀
ƒ¤¶主要以膜受体形式存在 o其与相应抗体或自然
配体 ƒ¤¶结合 o通常能诱发快速的细胞凋亡≈y  ∀研
究表明 ³uts¥¦µ2¤¥¯可能为 ƒ¤¶诱导凋亡信号途径下游
的调控因子≈z  o提示 ƒ¤¶2©¤¶系统具有调节 ≤细
胞生长的作用 ∀
本研究用梁金菇多糖作用 Žxyu细胞后 o出现了
典型的凋亡细胞形态学改变 o并且随剂量的增加和
作用时间的延长 o发生凋亡形态变化的细胞数量也
相应增加 ∀ ⁄‘„ 凝胶电泳在高浓度组可见梯形图
谱的存在 o在低浓度组及对照组均未出现 o与形态学
结果一致 ∀以上结果表明梁金菇多糖具有诱导
Žxyu细胞凋亡的作用 ∀ • ×2°≤• 进一步证明梁金菇
多糖增强了 Žxyu细胞 ƒ¤¶°• ‘„的表达 o提示其诱
导细胞凋亡的作用与 ƒ¤¶基因表达的上调有关 ∀但
是梁金菇多糖如何启动 ƒ¤¶信号途径的确切机制及
诱导细胞凋亡是否涉及其他分子机制仍有待进一步
研究 ∀
≈参考文献 
≈t  张秀文 o王 镜 o王菊勇 o等 1 姬松茸对马利兰诱导致骨髓衰竭
小鼠的治疗作用 1兰州医学院学报 ot||{ ouwkwl }tw1
≈u  张星星 o杨大雷 o李兴玉 o等 1 梁金菇多糖诱导白血病细胞株
‹2ys凋亡的研究 1 广东医学院学报 ousst ot|kxl }vuz1
≈v  李润秋 o张翼伸 1 人参多糖的成分分析 1 中草药 ot|{x otyk|l }
x1
≈w  ≤‹„‘Š ≠ ≤ o≠’‘Š ‹ ÷1 ∞¬³µ¨¶¶¬²±²©…¦¯2u¬±«¬¥¬·¨§ƒ¤¶2° §¨¬¤·¨§
¤³²³·²¶¬¶¬± «∏°¤± «¨ ³¤·²¦¨¯¯∏¯¤µ¦¤µ¦¬±²°¤…∞2zwsw ¦¨¯¯¶1 Χελλ Ρε2
σεαρχη ousss otskvl }uvv1
≈x  • ²º¯ ¼¨ ° × oŽ¨±ª° ≤ oŽ²¶¦¬²¯ ®¨ … „1 ׫¨ ©¨©¨¦·²©¥¦µ2¤¥¯ ¤±·¬¶¨±¶¨
²¯¬ª²±∏¦¯ ²¨·¬§¨ ²± ⁄‘„ ¶¼±·«¨¶¬¶ ¤±§ ¤³²³·²¶¬¶ ¬± Žxyu ¦«µ²±¬¦
°¼¨ ²¯¬§¯¨ ∏®¨ °¬¤¦¨¯¯¶1 Λευκ Ρεσot||y ouskyl }wzv1
≈y  郭亚军 o时玉舫 1 细胞生物学与肿瘤免疫学研究进展 1 军事医
学科学出版社 ousss1ts1
≈z  ≥¨¯¯¨µ¬≤ o≥¤·² × o⁄¨ ¯ ∂ ¦¨¦«¬²o ετ αλ1 Œ±√²¯√¨ ° ±¨·²©ƒ¤¶2° §¨¬¤·¨§
¤³²³·²¶¬¶¬±·«¨ ¬±«¬¥¬·²µ¼ ©¨©¨¦·¶²©¬±·¨µ©¨µ²±2¤¯³«¤¬± ¦«µ²±¬¦°¼¨ 2¯
#uztt#
第 u|卷第 tu期
ussw年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1u| oŒ¶¶∏¨ tu
⁄¨ ¦¨ °¥¨µoussw
²ª¨ ±²∏¶¯¨ ∏®¨ °¬¤1 Βλοοδ ot||z o{|kvl }|xz1
Στυδψ οφ Λιανγϕιν µ υσηροοµ πολψσαχχηαριδεινδυχινγ αποπτοσισ οφ Κxyu χελλσ
• „‘Š ≠∏¨2¼¬±ªt oŒ˜ «¨ ±ª2ª∏²t oŒ ÷¬±ª2¼∏u
(t1 Τηε tστ αφφιλιατεδ ηοσπιταλ οφ Λανζηου Μεδιχαλ Χολλεγε , Λανζηου zvssss , Χηινα ;
u1 Τηε ινστιτυδε οφ λιφε ανδ ενϖιρονµεντ σχιενχε οφ Σηανγηαι τεαχηερσ χολλεγε , Σηανγηαι ustw{w , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ¬¨³¯²µ¨ ·«¨ ©¨©¨¦·²© Λιανγϕιν µυσηροοµ ³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ²±·«¨ ¤³²³·²¶¬¶²©Žxyu ¦¨¯¯¶1 Μετηοδ : ׫¨ ³µ²¯¬©2
µ¨¤·¬²± ©¨©¨¦·²© Λιανγϕιν µυσηροοµ ³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ²± Žxyu ¦¨¯¯¶º¤¶²¥¶¨µ√ §¨¥¼ ¦¯²±¨ ©²µ°¤·¬±ª·¨¶·o „³²³·²¶¬¶º¤¶§¨·¨¦·¨§¥¼ ¦¼·²2°²µ2
³«²¯²ª¼ ¤±§⁄‘„ ¤ª¤µ²¶¨ ª¨¯ ¨¯ ¦¨·µ²³«²µ¨¶¬¶o ∞¬³µ¨¶¶¬²± ²©¤³²³·²¶¬¶2µ¨ ¤¯·¨§ ª¨ ±¨ ƒ¤¶ °• ‘„ º¤¶¦«¨¦®¨ §¥¼ • ×2°≤• 1 Ρεσυλτ : Λιανγϕιν
µυσηροοµ ³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ¦²∏¯§¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼¬±«¬¥¬·³µ²¯¬©¨µ¤·¬²± ¤±§³µ²°²·¨ ¤³²³·²¶¬¶²©Žxyu ¦¨¯¯¶1 ׫¨ ¤³²³·²¶¬¶µ¤·¨¬±¦µ¨¤¶¨§¬± ¤§²¶¨2
§¨ ³¨ ±§¨ ±·°¤±±¨ µ1 ׫¨ µ¨ º¤¶¤³²¶¬·¬√¨¦²µµ¨ ¤¯·¬²± ¥¨·º¨¨ ±·«¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²± ²© ƒ¤¶¤±§¤³²³·²¶¬¶²©Žxyu ¦¨¯¯¶1 Χονχλυσιον : Λιανγϕιν µυση2
ροοµ ³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ¦¤±¬±«¬¥¬·³µ²¯¬©¨µ¤·¬²± ¤±§¬±§∏¦¨ ¤³²³·²¶¬¶²©Žxyu ¦¨¯¯¶1 ׫¨ ∏³µ¨ª∏¯¤·¬²± ²© ¬¨³µ¨¶¶¬²± ²©ƒ¤¶ª¨ ±¨ °¤¼ ¥¨ ²±¨ ²©·«¨
¤³²³·²·¬¦° ¦¨«¤±¬¶°1
[ Κεψ ωορδσ] ¬¤±ª­¬± °∏¶«µ²²° ³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ~¤³²³·²¶¬¶~Žxyu ¦¨¯¯ ~ƒ¤¶ª¨ ±¨
≈责任编辑 方文贤 
≈收稿日期  ussw2sv2s|
≈通讯作者  3池岛乔 oר¯ }ksuwluv{wwwyv o∞2°¤¬¯}¬®¨­¬°¤·ƒ √¬³1¶¬±¤1¦²°
紫草素通过线粒体途径诱导 „vzx2≥u细胞凋亡
吴 振t ou o吴立军t o田代真一v o小野寺敏v o池岛乔u 3
kt1 沈阳药科大学 中药学院 o辽宁 沈阳 ttssty ~
u1 沈阳药科大学 中日医药研究所 o辽宁 沈阳 ttssty ~
v1 昭和药科大学 病态科学教研室 o日本东京 t|w2{xwvl
≈摘要  目的 }研究紫草素诱导人黑色素瘤 „vzx2≥u细胞凋亡的机制 ∀方法 }××法测定紫草素对 „vzx2≥u细
胞的生长抑制实验 o形态学观察分析细胞凋亡的形态学变化 o⁄‘„电泳研究细胞死亡的机制 o免疫印迹实验检测
相关蛋白的表达 ∀结果 }紫草素可明显地抑制 „vzx2≥u细胞的生长 o在 u1x ∗ ws Λ°²¯#pt之间呈明显的量效关系和
时效关系 ∀ts Λ°²¯#pt紫草素可诱导 „vzx2≥u细胞凋亡 o琼脂糖凝胶电泳可见典型的 ⁄‘„ /梯状0条道 ∀¦¤¶³¤¶¨2v
和 ¦¤¶³¤¶¨2|的抑制剂阻止紫草素诱导的凋亡 o紫草素可诱导 „vzx2≥u细胞¦¤¶³¤¶¨2|的活力增加 o免疫印迹结果显示
的上调的 …¤¬和下调的 …¦¯2÷表达证实了紫草素诱导的 „vzx2≥u细胞的凋亡是通过线粒体途径发挥作用的 ∀结
论 }ts Λ°²¯#pt紫草素可明显地诱导 „vzx2≥u细胞凋亡 o并经历了 ¦¤¶³¤¶¨2|激活的线粒体信号转导途径 ∀
≈关键词  紫草素 ~人黑色瘤 „vzx2≥u细胞 ~细胞凋亡 ~¦¤¶³¤¶¨
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswltt2ttzv2sx
紫草素¶«¬®²±¬±是从植物紫草 Λιτηοσπερµυµ ερψ2
τηρορηιζον ≥¬¨¥1 ·¨∏¦¦中提到的一个蒽醌类化合物 ∀
常用于治疗烫伤等疾病 ∀紫草素具有抗真菌 !抗炎
和抗肿瘤等作用≈t2v  ∀文献报道紫草素可诱导多种
肿瘤细胞凋亡≈w2y  o但有关诱导细胞凋亡的分子机制
仍不清楚 ∀作者选择人黑色素瘤 „vzx2≥u细胞 o研
究紫草素体外诱导 „vzx2≥u细胞凋亡的作用机制 ∀
1 材料与方法
#vztt#
第 u|卷第 tu期
ussw年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1u| oŒ¶¶∏¨ tu
⁄¨ ¦¨ °¥¨µoussw