全 文 :超声提取法测定
魔芋精粉葡甘露聚糖含量的实验研究
袁忠海t o吴道澄u o吴 红u o李晓晔u
kt q第四军医大学 吉林军医学院 o吉林 吉林 tvustt ~u q第四军医大学 o陕西 西安 ztssvul
≈摘要 目的 }探索超声波处理对提取魔芋精粉中葡甘露聚糖k®²±¤¦ª¯∏¦²°¤±±¤± o l的影响 ∀方法 }用超声
波清洗器除去魔芋精粉中的游离还原糖后超声水提 o分光光度法测定水解液中 含量 ∀结果 }固定超声波
频率 ws ®½o功率 tss • 时 o超声水提 vs ∗ wx °¬±o 含量与常规法相当 ~超声水提 t «o 含量明显高于常规
水提 w «k Π s qstl o提高率为 y qx h ∀本法标准葡萄糖量在 s qu ∗ t qy °ª线性关系良好kρ s q||| yl o加样平均回收
率为 |z q{ h o重现性为 t quz h ∀结论 }超声水提法省时 !可靠 o能提高魔芋精粉中 的提取效率 ∀
≈关键词 超声提取 ~魔芋精粉 ~魔芋葡甘露聚糖 ~含量测定
≈中图分类号 u{w qt ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussvlsvuw2sw
魔芋 Αµορπηοπηαλλυσ ρεριερι为单子叶植物纲 o
天南星科耐荫性多年生草本植物的块茎 ∀我国魔芋
资源丰富 o现已发现 uy种 o其中 tw种为我国特有 o
如白魔芋 o疏毛魔芋等 ∀魔芋精粉是由鲜魔芋块茎
经过干燥 !机械粉碎 !风选等工序得到的精细产品 ∀
它的主要有效成分为魔芋葡甘露聚糖k®²±¤¦ª¯∏¦²2
°¤±±¤±o o简称葡甘聚糖l ∀ 是由 ∆2葡萄
糖和 ∆2甘露糖残基通过 Β2t ow糖苷键聚合而成 o在
某些糖残基 ≤2v位上存在着由 Β2t ov糖苷键组成的
支链 ∀它具有多种独特的理化性质 o如流变性 !增稠
性 !胶凝性和成膜性 o在食品 !医药 !化工 !纺织 !石油
钻探等工业均有很好的应用价值 ∀
含量是评价魔芋精粉质量的一个关键指
标 ∀近年来 o国内外研究证实 o 是一种优良的
低热量 !低脂肪 !高纤维素的水溶性膳食纤维 o对营
养不平衡有重要调节作用≈t ou ∀目前 多采用
vx ε 水浴水浸提取法 o提取时间长 !提取率低 o制约
了 的规模生产和广泛应用 ∀因此 o有必要建
立一种提取率高 o简便易行的方法 ∀
超声波具有机械振动性能 !热学性能和强大的
空化效应 o在天然产物提取中已显示出巨大的优
≈收稿日期 ussu2sx2sw
≈基金项目 国家/十五0攻关项目kusst
vtssz2zl
≈通讯作者 吴道澄 ר¯ }ksu|lvvzwwzv2{ss ∞°¤¬¯}º∏§¤²¦
©°°∏q¨ ±§q¦±
势≈v ∀为此 o本文利用超声波清洗器在除去魔芋精
粉中的游离还原糖后 o超声提取了魔芋精粉中
并测定了其含量 o与常规水提法相比 o其提取
时间缩短 o效率提高 ∀
1 仪器与试药
⁄2yws 紫外可见分光光度计 k
¨ ¦®°¤±o
≥l ~∞ uys2≥ ⁄¨ ·¯¤ ¤±ª¨ 电子天平 k ∞×2
×∞ o≥º¬·½¨ µ¯¤±§l ~± ut{超声波清洗器k江苏省
昆山市超声仪器有限公司l ∀
v ox2二硝基水杨酸k中国医药k集团l上海化学
试剂公司l ~酒石酸钾钠 !浓 u≥w o¤ k西安化
学试剂厂l ~无水乙醇k沈阳化学试剂厂l ~葡萄糖k北
京化工厂 o批号 sttusyl ∀
⁄≥试剂 }v ox2二硝基水杨酸 t qs ª加 u qs °²¯
#pt ¤ us qs °o再加酒石酸钾钠 vs qs ª o充
分混匀溶解 o用双蒸水定容至 tss °o放置 u §o用
玻砂漏斗过滤 o棕色瓶中保存备用 ∀
魔芋 st osu号精粉k陕西省山阳县魔芋厂 o批号
sttuutl ∀ 纯品k为本室制备 o纯度经薄层层
析检测大于 |{ qz h l ∀
2 方法与结果
2 q1 常规法 测定≈w
按文献≈w 操作 o稍有变动 ∀
2 q1 q1 脱脂 精确称取 t{s qs °ª魔芋精粉于具塞
试管中 o加 u qs °石油醚 o振荡 x °¬±ov xss µ#
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第 u{卷第 w期
ussv年 w月
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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°¬±p t离心 x °¬±o弃去上清液 ∀重复 t次 o自然挥
发干燥 ∀
2 q1 q2 去除游离还原糖 将脱脂干燥的魔芋精粉
转入 txs °烧杯中 o用 xs °{x h的乙醇冲洗试
管 v次并入烧杯中 oxs ε 水浴 o电动搅拌 vs °¬±o过
滤 ∀重复 u次 o收集去除游离还原糖的魔芋精粉 o自
然挥发干燥 ∀
2 q1 q3 的提取 将处理过的魔芋精粉放入
txs °烧杯中 o加双蒸水 ys °ovx ε 恒温水浴 o
电动搅拌 o溶胀 w «o取出冷却 o用双蒸水定容至 tss
°ov xss µ#°¬±p t离心 ts °¬±o吸取上清液即为常
规法 提取液 ∀
2 q1 q4 制备 水解液 准确移取 t qs °常规
法 提取液于磨口试管中 o准确加入 u qx °²¯ #
pt u≥w s qx °o摇匀 o在沸水浴中用塞密封水解
u qx «o取出立即冷却 o准确加入 x qs °²¯#p t ¤
s qx °o摇匀 o即为常规法 水解液 ∀
2 q1 q5 测定 按标准葡萄糖工作曲线步骤
测定 2 q1 q4 中的 水解液吸光值 ∀将吸光值代
入回归方程 o计算出各吸光值对应的葡萄糖毫克数 ∀
用下式计算 ∀
含量r h Ε# 3 ≅ ussΩ ≅ tss h
式中 }Ε s q| o为葡萄糖和甘露糖在葡甘露聚糖
中的残基分子量与葡甘露聚糖水解后得到的葡萄糖
和甘露糖分子量之比≈x ~Τ为 水解液比色法
测定的吸光值代入标准回归方程 o计算得出的对应
葡萄糖毫克数 ~Ω为魔芋精粉的称取量k°ªl ∀
2 q2 超声法 测定
2 q2 q1 脱脂 同 2 q1 q1 ∀
2 q2 q2 去除游离还原糖 将脱脂干燥的魔芋精粉
转入 txs °烧杯中 o用 xs °{xs °#pt的乙醇
冲洗试管 v次并入烧杯中 o在 ± ut{超声波清洗
器kws ®½otss • l上超声 x °¬±o过滤 ∀重复 u次 o
收集去除游离还原糖的魔芋精粉 o自然挥发干燥 ∀
2 q2 q2 q1 游离还原糖的检验≈y 取一定量费林试
剂加入 2 q2 q2 中处理的魔芋精粉中 o加热至沸 o无红
色沉淀产生 ∀表明用 {x h乙醇 o在 ± ut{ 超声波
清洗器上经 v次k共 tx °¬±l超声浸提后 o可以完全
除去魔芋精粉中的游离还原糖 o与常规法处理 t qx «
效果相同 ∀
2 q2 q3 的提取 将去除游离还原糖的魔芋
精粉放入 txs °烧杯中 o加双蒸水 ys °o在 ±
ut{超声波清洗器上超声 ys °¬±o温度控制在 vx ∗
wx ε o再用双蒸水定容至 tss °ov xss µ#°¬±p t离
心 ts °¬±o吸取上清液即为超声水提法 提取
液 ∀
超声时间对提取 含量的影响 见图 t ∀
由图 t 可见 o超声时间越长 o 提出率越
高 o其含量也越高 o尤其是在 wx ∗ ys °¬±时
含量增加非常明显 oys °¬±以后 o 含量变化不
大 ∀因此 o本实验超声作用时间选用 ys °¬±∀
2 q2 q4 制备 水解液 同 2 q1 q4 ∀
2 q2 q5 测定 同 2 q1 q5 ∀
2 q3 不同超声时间与常规法 含量的比较
取 y只离心管 o分别精称魔芋精粉 t{s qs °ªot号管
按常规法操作 ou ∗ y号管按超声法操作 o超声时间
分别为 tx ovs owx oys ozx °¬±o测定各管 含量 o
结果见表 t ∀
图 t 超声时间对 含量的影响
表 t 不同超声时间与常规法 含量的比较
指 标
常规法
w «
超声法
tx °¬± vs °¬± wx °¬± ys °¬± zx °¬±
平均吸光值 s qwwt| s qwvsw s qwv|| s qwwxy s qwzv| s qw{t{
含量r h {s qwv z{ qxw {s qts {t qsv {x qy{tl {y q|zt oul
注 }tl与常规法相比 Π s qst o超声法提取的 含量提高 y qx h ul与 ys °¬±相比 Π s qsx
由表 t可见 o超声 tx °¬± 含量略低于常
规法 o而超声 vs ∗ wx °¬± 含量略高于常规法 o
但相差均不显著k Π s qsxl ∀超声 ys °¬± 含
量明显高于常规法k Π s qstl o且时间缩短了 v «o
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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大大提高了提取效率 ∀
2 q4 超声放大实验 我们将提取规模放大 x倍后
进行 含量测定 o见表 u ∀结果表明 o超声时间
延长 us °¬±可达到放大前效果 ∀
表 u 超声提取放大效果比较
²q 提取体积r°
质量
r°ª
实验条件
频率r®½ 功率r • 温度r ε 时间r°¬±
含量
r h
t ys qs t{s qs ws tss vx ∗ wx ys {x qxu
u vss qs |ss qs ws tss vx ∗ wx ys {s qz|tl
v vss qs |ss qs ws tss vx ∗ wx {s {x qwzul
注 }与 ys °时 含量相比 tl Π s qst ul Π s qsx
3 方法学考察
3 q1 精密度试验 对 纯品连续测定 x次 o其
平均含量为 |{ quu h o ≥⁄ s qwy h ∀表明精密度良
好 ∀
3 q2 线性关系考察
3 q2 q1 标准葡萄糖溶液的配制kt qs °ª# °p tl
准确称取预先在 tsx ε 下干燥至恒重的分析纯葡萄
糖 s qtss s ªo溶于双蒸水中定容至 tss °o即为 t q
s ª#pt标准葡萄糖溶液 ∀
3 q2 q2 标准葡萄糖溶液工作曲线的绘制 分别移
取标准葡萄糖溶液s qu os qw os qy os q{ ot qs ot qu o
t qw ot qy °于具塞磨口试管中 o分别加双蒸水至
u qs °o另取一磨口试管 o加双蒸水 u qs °作空白
对照 ~再分别加入 t qx °⁄≥试剂 o摇匀 o沸水浴
煮沸 x °¬±o取出立即冷却 o用双蒸水定容至 xs °
容量瓶中 ∀用 t ¦°比色杯 owzs ±°处比色 o以空白
对照管溶液调零点 o每管测两次吸光值 ∀以平均吸
光值为纵坐标 o平均吸光值对应的葡萄糖毫克数为
横坐标绘制工作曲线 o回归方程 Ψ s qys|x Ξ p
s qsw{ v oρ s q||| y ∀说明标准葡萄糖的量在 s qu
∗ t qy °ª与吸光值呈良好的线性关系 o且截距很
小 ∀
3 q3 重现性试验 按 2 q2 对同一批 st osu号魔芋
精粉各 x 份分别进行测定 ∀结果平均 含量
分别为z| qst h o{x qt{ h ~ ≥⁄分别为t qt| h o
t quz h o表明本法重现性良好 ∀
3 q4 回收率试验 精密称取已知 含量的魔
芋精粉 x份 o分别精确加入一定量的 纯品 o经
超声法处理制备 水解液后 o按标准曲线法分
别测定其 含量 o进行加样回收测试 o见表 v ∀
结果表明 o本法回收率较好 o方法可行 ∀
4 讨论
常规的 提取方法都是通过水溶胀 o酸性
水解后 o用分光光度法测定其含量 ∀其不足之处是
魔芋粉水溶胀后 o溶液较浑浊 o颗粒多且破碎不完
全 o导致 不能完全溶出 o 含量测定值偏
低 ∀
许多学者利用超声波研究了提取植物中的生物
碱≈z !苷类≈{ !多糖≈| ots 及其他有效成分≈tt otu o结果
均表明超声波可以明显降低提取温度 !缩短提取时
间 !提高提取产量 o便于产品纯化且对提取产物的结
构和理化性质无影响≈tv ∀
表 v 超声水提法回收率试验结果
样品称量
r°ª
加入量
r°ª
测定量
r°ª
回收率
r h
ξ
r h
≥⁄
r h
t{s qy us qt tyu qs |y qs
t{s qu us qy tyu qv |y qy
t{s qx us qw tyu q| || qx |z q{ u qs{
tz{ qv us qw tys qx |y qt
t{t qz us q| tyw qz tst qs
注 }样品中 含量为 z| qst h
本实验利用超声波的机械振动特性 !热学特性
和强大的空化效应 o采用超声波清洗器去除魔芋精
粉中游离还原糖 o用超声水提法提取检测了魔芋精
粉中 含量并与常规水提法进行了比较 ∀结果
表明 o去除游离还原糖的魔芋精粉呈现白色晶亮的
均匀细小颗粒 ∀超声水提后溶液较澄清 o几乎不见
颗粒 o说明颗粒破碎较完全 o其提取液中 含量
明显高于常规水提法k Π s qstl且提取时间缩短了
w «以上 ∀出现上述结果可能的原因是 }魔芋精粉颗
粒在水中溶胀后形成凝胶颗粒 o使溶液粘稠性变大 o
部分 贮存于凝胶颗粒的网格中 o用常规水提
法不易将网格打碎释放其中的 o致使 含
量较低 ∀超声波借助其强大的空化效应和许多次级
效应如机械振动 !击碎 !乳化 !扩散等可以打碎凝胶
颗粒网格 o充分释放 o提高 提取率 ∀
超声提取工艺的放大受许多因素的影响 o如超
声功率 !频率 !时间 !温度及超声仪器容积的大小 ∀
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随着超声功率的增大 o气泡闭合时产生的激波强度
越大 o空化作用越明显 o多糖提取率越高 ∀但当超声
功率超过一定限度时 o提取率的增加变得缓慢 ∀因
此 o实际操作过程需要根据具体条件选择超声强度 ∀
超声频率对提取率亦有影响 o但并非呈正相关系 o一
般采用频率为 us ∗ xs ®½~相同功率和频率的超声 o
随着时间的延长提取率逐渐增加 o但达到某一时间
后提取率的增加逐渐减缓 ~温度在一定范围内增高 o
对提高提取率有利 o但超过一定温度时 o可能会引起
提取物性质发生改变 o因此也需要以具体情况而定 ∀
本文采用的超声清洗器容积较小 o且功率 !频率是固
定不变的 o本文在 ws ®½otss • ovs ∗ wx ε 的条件
下进行了放大 x倍的实验 o结果表明 o适当延长超声
时间可得到与放大前相同的 提取率 ∀其他影
响超声提取工艺放大的因素有待于进一步研究 ∀
≈参考文献
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志 ot||| ouwktl }y q
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≈{ 郭孝武 q超声与常规法对部分中药甙类成分提取率的比较 q
中国医药工业杂志 ot||{ ou|kul }xt q
≈| 赵 兵 o王玉春 o孙学兵 o等 q循环气升式超声破碎鼠尾藻提取
海藻多糖 q中国海洋药物杂志 ot||| okwl }t| q
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¦¨¯¯∏¯²¶¨¶©µ²° º«¨ ¤·≥·µ¤º q ·¯µ¤¶²± ≥²±²¦«¨ ° oussu o|kul }
|x q
Στυδιεσ ον Υλτρασονιχ Ωαϖε Εξτραχτινγ Μετηοδ
∆ετερµινινγ Κονϕαχ Γλυχοµ αννανιν Κονϕαχ Ρεφινεδ Ποωδερ
≠ «²±ª2«¤¬t o • ⁄¤²2¦«¨ ±ªu o • ²±ªu o ÷¬¤²2¼ u¨
kt q¬¯¬± ¬¯¬·¤µ¼ §¨¬¦¤¯ ≤²¯¯¨ ª¨ o ƒ²∏µ·« ¬¯¬·¤µ¼ §¨¬¦¤¯ ±¬√ µ¨¶¬·¼ o¬¯¬± tvustt o¬¯¬± o≤«¬±¤~
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε:ײ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨ ·«¨ ©¨©¨ ¦·²© ∏¯·µ¤¶²±¬¦º¤√¨²± ¬¨·µ¤¦·¬±ª ²±¤¦¯ ∏¦²°¤±±¤±k l¬± ²±¤¦µ¨©¬±¨ §
³²º§¨µq Μετηοδ :ƒµ¨¨µ¨§∏¦¨§¶∏ª¤µ¬± ²±¤¦µ¨©¬±¨ §³²º§¨µº¤¶µ¨ °²√ §¨¤±§ ²±¤¦µ¨©¬±¨ §³²º§¨µ¬± ·«¨ ¤´ ∏¨ ²∏¶¶²¯∏·¬²± º¤¶
³µ²¦¨¶¶¨§¥¼ ∏¯·µ¤¶²±¬¦ º¤√¨¤±§ ¦²±·¨±·º¤¶ ° ¤¨¶∏µ¨§ ¥¼ ¶³¨¦·µ²³«²·²° ·¨µ¼ q Ρεσυλτ : ¦²±·¨±·¬± ·«¨ ²±¤¦µ¨©¬±¨ §
³²º§¨µ¤´ ∏¨ ²∏¶¶²¯∏·¬²± ¥¼ ∏¯·µ¤¶²±¬¦³µ²¦¨¶¶¤·©¬¬¨ §ws ®½otss • ovs2wx °¬± º¤¶¨´ ∏¤¯ ·²·«¤·¥¼µ²∏·¬±¨ ° ·¨«²§¤·w «~º«¨ µ¨2
¤¶o¥¼ t «²© ∏¯·µ¤¶²±¬¦³µ²¦¨¶¶o ¦²±·¨±·º¤¶¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ ±¨«¤±¦¨§·«¤± ·«¤·¥¼ w «²©µ²∏·¬±¨ ° ·¨«²§k Π s qstl o¨ ±«¤±¦¨2
° ±¨·µ¤·¨ º¤¶y qx h q¬±¨ ¤µ¬·¼ ²©¶·¤±§¤µ§ª¯∏¦²¶¨ º¤¶ª²²§kρ s q||| yl ¬±µ¤±ª¨ ²©s qu2t qy °ªq׫¨ ¤√ µ¨¤ª¨ µ¨¦²√ µ¨¼ º¤¶|z q
{ h o ≥⁄ ²©µ¨³¨ ¤·¤¥¬¯¬·¼ º¤¶t quz h qΧονχλυσιον : ·¯µ¤¶²±¬¦ ¬¨·µ¤¦·¬²±¬± ¤´ ∏¨ ²∏¶¶²¯∏·¬²±¬¶¤µ¨ ¬¯¤¥¯¨¤±§µ¤³¬§ ° ·¨«²§·«¤·¦¤±
±¨«¤±¦¨ ¬¨·µ¤¦·¬²± ©¨©¬¦¬¨±¦¼ ²© ¬± ²±¤¦µ¨©¬±¨ §³²º§¨µq
[ Κεψ ωορδσ] ∏¯·µ¤¶²±¬¦ ¬¨·µ¤¦·¬²±~®²±¤¦µ¨©¬±¨ §³²º§¨µ~®²±¤¦ª¯∏¦²°¤±±¤± ~¦²±·¨±·° ¤¨¶∏µ¨ ° ±¨·
≈责任编辑 刘
#zuv#
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